Pour commencer, préparez les nanocomposites d’oxyde de graphène/cuivre. Le premier jour, inoculez une colonie de bactéries de la plaque de gélose dans 10 millilitres de bouillon à l’aide d’une boucle. Incuber le bouillon à 37 degrés Celsius à l’aide d’un incubateur à agitation réglé à 200 tr/min pendant 24 heures.
Le deuxième jour, diluer le mélange nanocomposite à l’aide de DPBS pour obtenir trois concentrations différentes et préparer les solutions de contrôle pour l’expérience. Ensuite, distribuez 100 microlitres de la suspension nanocomposite et des solutions de contrôle dans des plaques à 96 puits. Sur la base des UFC, diluer la suspension bactérienne à une fois 10 à la puissance six UFC par millilitre dans du bouillon de soja tryptique.
Inocuculez 100 microlitres de suspension bactérienne diluée dans les puits d’échantillon de la plaque de 96 puits et incubez la plaque à 37 degrés Celsius dans un incubateur agitateur réglé à 200 tr/min pendant 24 heures. Le troisième jour, mélangez vigoureusement l’échantillon et les suspensions bactériennes à l’aide d’une micropipette de 200 microlitres avant de diluer en série le mélange de bactéries de l’échantillon avec de l’eau distillée stérile. Ensuite, étalez 100 microlitres de la suspension bactérienne diluée sur une plaque de gélose avec un épandeur et incubez la plaque à 37 degrés Celsius pendant 24 heures.
Le quatrième jour, comptez les colonies bactériennes et déterminez les valeurs UFC pour confirmer l’activité antibactérienne des nanocomposites à l’aide de l’équation. Les nanocomposites ont démontré une efficacité antibactérienne significative contre le Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline et le Pseudomonas aeruginosa, éradiquant respectivement 99,8 % et 84,7 % de ces bactéries à une concentration de 500 microgrammes par millilitre.
