Pour commencer, préparez la réaction du master mix CRISPR-Cas13a à l’aide des composants présentés ici. Après avoir bien mélangé le contenu, faites tourner le tube de mélange principal. Aliquote 17 microlitres du mélange principal dans dix tubes de 1,5 millilitre placés sur de la glace.
Placez les tubes dans une grille, immergés dans de l’azote liquide, et laissez-les rester immergés pendant cinq minutes. Au niveau du lyophilisateur, vérifiez la température du collecteur et des étagères, puis placez les tubes dans le lyophilisateur. Sélectionnez le programme et appuyez sur démarrer.
Après 30 minutes de l’étape de séchage secondaire, arrêtez le programme. Pour relâcher la pression, ouvrez la soupape de décharge du vide et retirez le rack de l’étagère. Boucher les tubes immédiatement avant de stocker les réactions lyophilisées à moins 20 degrés Celsius.
