Nous tenons à exprimer notre gratitude au personnel de l’Agence suédoise des défense (FOI) et le centre de Linköping pour la médecine des catastrophes et de traumatologie (KMC) pour leur aimable soutien.

L’étude décrite ici conformé aux directives d’éthique local et a été approuvé par le Conseil régional d’évaluation éthique à Linköping (permis no 2015/99-31).
1. consentement éclairé et dépistage
<ol><li>Obtenir le consentement éclairé du sujet.</li>
	<li>L’écran selon les critères d’inclusion/exclusion. NOTE : Critères d’Inclusion étaient : (i) sain adulte > 18 ans, (ii) capable de comprendre les informations écrites et orales et (iii) donne son consentement oral et écrit. Critères d’exclusion sont : (i) pas en mesure ou refuse de fournir un consentement éclairé, affections de la peau (ii) en cours, (iii) cardiovasculaire, (iv) les médicaments qui peuvent interférer avec la fonction vasculaire. Contraceptifs oraux sont autorisés. Si l’objet utilise des contraceptifs oraux, cela devrait être ne consignée au dossier de protocole du sujet, (v) cicatrice libre et non-meurtri de la peau du front, (vi) aucun apport de caféine ou tabac 2 h avant le début de l’épreuve et (vii) aucune activité physique intense au moins 2 h pr IOR au début de l’épreuve.</li>
</ol>2. acclimatation et installation de matériel
<ol><li>Laissez le sujet du test s’acclimater pendant au moins 20 min en position couchée avant le début de l’épreuve. NOTE : Bon positionnement du sujet et équipement est illustré à la figure supplémentaire 1.</li>
	<li>
Mettre en place la caméra enregistrement des tests de remplissage capillaire en utilisant le logiciel désigné et l’appareil photo numérique (voir Table des matières).
	<ol>
<li>Branchez le câble USB à l’appareil photo et l’ordinateur et ajuster les réglages de l’appareil en mode vidéo.</li>
		<li>Mettez l’appareil sous tension et s’assurer qu’il se connecte à l’ordinateur.</li>
		<li>Lancez le logiciel de caméra télécommandée (voir Table des matières).</li>
		<li>Activer la lumière ambiante et désactiver l’écran de l’ordinateur hors de la zone de mesure.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Acquisition de données
<ol><li>Cliquez sur la « vue de la vie » (Sic) bouton et appuyez sur « Start ».</li>
	<li>Basculer entre le mode « vidéo » et « TiVi » en cliquant sur les cases d’option (cela n’affectera pas l’enregistrement, seulement l’à l’écran présentation). Veiller à ce qu’un flux vidéo en direct du front du sujet est visible sur l’écran de la caméra et sur l’écran de l’ordinateur.</li>
	<li>Réglez l’appareil à une hauteur d’environ 15 cm directement au-dessus de front du sujet.</li>
	<li>Assurez-vous que le focus de la caméra est réglé sur « AF » (auto focus).</li>
	<li>Poser la question de garder sa tête encore pour la durée de l’essai et à s’abstenir de parler. Informer le sujet qu’il est OK pour garder ses yeux fermés pendant l’essai, en disant : « s’il vous plaît, placez votre tête sur cet oreiller et gardez votre tête encore pour la durée de l’essai. S’il vous plaît, ne pas parler pendant les 20 secondes qui le test durera. Vous pouvez garder les yeux fermés pendant tout le temps, si vous trouvez la lumière trop lumineux ».</li>
	<li>Ne déplacez pas l’appareil photo pendant l’enregistrement.</li>
	<li>Dans la fenêtre « vie view » trouvez et cliquez sur « Enregistrement HD » pour démarrer un enregistrement continu de 20 s. à noter que la durée de l’enregistrement (secondes), peut être vu sur l’écran de la caméra ; les 5 premiers s de l’enregistrement est d’acquérir la concentration normale du sang capillaire du front.</li>
	<li>À la fin du 5 s du niveau de référence d’enregistrement, s’appliquent à une entreprise de blanchiment pression vers la zone de mesure pour 5 s. Utilisez l’index avec une cuillère à café en plastique entre le doigt et le front pour l’isolation de péréquation et de la température pression.</li>
	<li>Relâchez la pression et retirer rapidement les doigt de l’examinateur et la cuillère à café en plastique de la zone de mesure.</li>
	<li>Continuer l’enregistrement pour un autre 10 s pour capturer la réponse hyperémique subséquente.</li>
	<li>Arrêter l’enregistrement en cliquant sur « Stop » dans la fenêtre « Affichage de la vie ».</li>
	<li>Une fois que l’enregistrement est terminé, une fenêtre s’ouvre pour enregistrer et donnez un nom au fichier (au format .mov) ; Choisissez un dossier et un nom pour la vidéo. Ne débranchez pas l’appareil de l’ordinateur pendant le téléchargement de la vidéo dans le dossier désigné sur l’ordinateur.</li>
</ol>4. analyse des données
<ol><li>Procéder à l’exécution d’image analyse et courbe de construction avec un logiciel d’analyse dédié (voir Table des matières).</li>
	<li>Démarrez le logiciel analyse en double-cliquant sur l’icône du bureau.</li>
	<li>Une fois que le logiciel a démarré, sur l’écran principal, sélectionnez « Page de film. »</li>
	<li>Dans la fenêtre « Film page », cliquez sur « Charger le film. » Attendez que le logiciel à télécharger et à analyser le film. Cela peut prendre quelques minutes selon la taille du fichier vidéo.</li>
	<li>Une fois le téléchargement et l’analyse du film est terminé, cliquez sur « Enregistrer sous forme d’images » et attendez que le logiciel pour l’analyse de la vidéo. Remarque : Cela créera automatiquement un nouveau dossier sur l’ordinateur contenant la séquence vidéo, divisée en images jpeg individuels.</li>
	<li>Une fois que la division de la vidéo en images jpeg individuels est terminée, recherchez et sélectionnez « Page d’images de Crop » dans la fenêtre de l’écran principal.</li>
	<li>Dans la page « récolte des images », cliquez sur « Première Photo » et naviguez jusqu’au dossier contenant les photos jpeg de la vidéo et sélectionner la première photo à analyser ; le logiciel sélectionne automatiquement les photos suivantes de ce lot.</li>
	<li>Cliquez sur le menu « Edition » et choisissez entre les marqueurs circulaires ou rectangulaires pour la région d’intérêt.</li>
	<li>Dans la fenêtre « Sélectionner des Photos », trouver la case « Photo réelles » et tapez le nom de la première photo dans le lot où le doigt de l’enquêteur est complètement rentré dans la zone de mesure. Pour trouver cette photo, regardez dans le dossier contenant les photos individuelles de la vidéo.</li>
	<li>Sélectionner une région d’intérêt en cliquant et en maintenant le bouton gauche de la souris et tracez un cercle ou un rectangle dans la fenêtre photo qui est à l’intérieur des rues blanchies. La région sélectionnée d’intérêt est appliquée automatiquement à toutes les photos du lot.</li>
	<li>Cliquez sur le menu « Fichier » et choisissez « Enregistrer le ROI » pour enregistrer l’emplacement de la zone sélectionnée de l’intérêt pour un usage ultérieur.</li>
	<li>Cliquez sur le bouton « Traqueur de courbe » et attendez que le logiciel analyser la région d’intérêt.</li>
	<li>Une fois que la fenêtre de traqueur de courbe ouverte, le changement dans la concentration de globules rouges pour la région sélectionnée d’intérêt pendant la durée du test est représenté par une courbe. L’à l’écran présentation peut être modifiée en cliquant sur les boutons radio différents. Cela n’affectera pas les données brutes.</li>
	<li>Cliquez sur « Exporter des données » et enregistrez la transcription de données brutes pour une analyse ultérieure.</li>
	<li>Dans la transcription des données brutes, accédez à la colonne nommée « Intensité moyenne TiVi valeurs. » Générer des trois nouvelles colonnes à côté de cette colonne pour « numéro d’image », « temps total » et « temps de remplissage capillaire » à partir de 1 s, 0 s et 0 s et avec une incrémentation de 1 s, 0,02 s et 0,02 s, respectivement. Remarque : « Temps de remplissage capillaire » correspond au moment de la réaction à la libération de la pression de blanchiment et commence à la valeur moyenne qui représente la première photo où le doigt de l’enquêteur est complètement rentré dans la zone de mesure.</li>
	<li>Supprimez les valeurs de référence et temps de remplissage capillaire, car celles-ci ne contiennent le bruit généré par l’index et la cuillère à café en plastique de l’enquêteur au cours de la manœuvre de blanchiment.</li>
	<li>Calculer une valeur moyenne pour la mesure de référence (première 5 s de l’enregistrement).</li>
	<li>Trouver la première valeur qui est égale ou dépasse la valeur de référence moyenne calculée et notez le temps dans la colonne « Temps de remplissage capillaire ». Ce point de temps représente le « temps de revenir à la base 1 ».</li>
	<li>Trouver le plus élevé signifie la valeur de l’intensité des valeurs générées après décompression et note de votre remarque de temps dans la colonne « Temps de remplissage capillaire ». Ce point de temps représente la « période de pointe ».</li>
	<li>Trouver la deuxième valeur qui est inférieure ou égale à la valeur moyenne calculée pour la mesure de référence et note le point dans le temps dans la colonne « Temps de remplissage capillaire ». Ce point de temps représente le « temps de revenir à la base 2. »</li>
</ol>

<ol>
	<li>Strehlow, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+identification+of+shock+in+critically+ill+patients.">Early identification of shock in critically ill patients.</a> Emerg Med Clin North Am. 28 (1), 57-66 (2010).</li><li>Advanced Life Support, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Acute Medical Emergencies. , 67-84 (2010).</li><li>Brasel, K. J., Guse, C., Gentilello, L. M., Nirula, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate:+is+it+truly+a+vital+sign?.">Heart rate: is it truly a vital sign?.</a> J Trauma. 62 (4), 812-817 (2007).</li><li>De Backer, D., Ortiz, J. A., Salgado, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coupling+microcirculation+to+systemic+hemodynamics.">Coupling microcirculation to systemic hemodynamics.</a> Curr Opin Crit Care. 16 (3), 250-254 (2010).</li><li>Mrgan, M., Rytter, D., Brabrand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+is+a+predictor+of+short-term+mortality+for+adult+patients+admitted+to+a+medical+department:+an+observational+cohort+study.">Capillary refill time is a predictor of short-term mortality for adult patients admitted to a medical department: an observational cohort study.</a> Emerg Med J. 31 (12), 954-958 (2014).</li><li>Advanced Life Support, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Acute Medical Emergencies. , 55-65 (2010).</li><li>Lewin, J., Maconochie, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+in+adults.">Capillary refill time in adults.</a> Emerg Med J. 25 (6), 325-326 (2008).</li><li>Lobos, A. T., Menon, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multidisciplinary+survey+on+capillary+refill+time:+Inconsistent+performance+and+interpretation+of+a+common+clinical+test.">A multidisciplinary survey on capillary refill time: Inconsistent performance and interpretation of a common clinical test.</a> Pediatr Crit Care Med. 9 (4), 386-391 (2008).</li><li>Otieno, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+bedside+features+of+shock+reproducible+between+different+observers?.">Are bedside features of shock reproducible between different observers?.</a> Arch Dis Child. 89 (10), 977-979 (2004).</li><li>Raju, N. V., Maisels, M. J., Kring, E., Schwarz-Warner, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+in+the+hands+and+feet+of+normal+newborn+infants.">Capillary refill time in the hands and feet of normal newborn infants.</a> Clin Pediatr (Phila). 38 (3), 139-144 (1999).</li><li>Klupp, N. L., Keenan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+the+reliability+and+validity+of+capillary+refill+time+test.">An evaluation of the reliability and validity of capillary refill time test.</a> The Foot. 17, 15-20 (2007).</li><li>Gorelick, M. H., Shaw, K. N., Baker, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ambient+temperature+on+capillary+refill+in+healthy+children.">Effect of ambient temperature on capillary refill in healthy children.</a> Pediatrics. 92 (5), 699-702 (1993).</li><li>Schriger, D. L., Baraff, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+normal+capillary+refill:+variation+with+age,+sex,+and+temperature.">Defining normal capillary refill: variation with age, sex, and temperature.</a> Ann Emerg Med. 17 (9), 932-935 (1988).</li><li>Pandey, A., John, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time.+Is+it+time+to+fill+the+gaps?.">Capillary refill time. Is it time to fill the gaps?.</a> Med J Armed Forces India. 69 (1), 97-98 (2013).</li><li>Strozik, K. S., Pieper, C. H., Roller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refilling+time+in+newborn+babies:+normal+values.">Capillary refilling time in newborn babies: normal values.</a> Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 76 (3), F193-F196 (1997).</li><li>Doherty, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sub-epidermal+imaging+using+polarized+light+spectroscopy+for+assessment+of+skin+microcirculation.">Sub-epidermal imaging using polarized light spectroscopy for assessment of skin microcirculation.</a> Skin Res Technol. 13 (4), 472-484 (2007).</li><li>Noguchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+caffeine+contained+in+a+cup+of+coffee+on+microvascular+function+in+healthy+subjects.">Effect of caffeine contained in a cup of coffee on microvascular function in healthy subjects.</a> J Pharmacol Sci. 127 (2), 217-222 (2015).</li><li>Reus, W. F., Robson, M. C., Zachary, L., Heggers, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+effects+of+tobacco+smoking+on+blood+flow+in+the+cutaneous+micro-circulation.">Acute effects of tobacco smoking on blood flow in the cutaneous micro-circulation.</a> Br J Plast Surg. 37 (2), 213-215 (1984).</li><li>Lenasi, H., Strucl, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+regular+physical+training+on+cutaneous+microvascular+reactivity.">Effect of regular physical training on cutaneous microvascular reactivity.</a> Med Sci Sports Exerc. 36 (4), 606-612 (2004).</li><li>Anderson, B., Kelly, A. M., Kerr, D., Clooney, M., Jolley, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+patient+and+environmental+factors+on+capillary+refill+time+in+adults.">Impact of patient and environmental factors on capillary refill time in adults.</a> Am J Emerg Med. 26 (1), 62-65 (2008).</li><li>John, R. T., Henricson, J., Nilsson, G. E., Wilhelms, D., Anderson, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflectance+spectroscopy:+to+shed+new+light+on+the+capillary+refill+test.">Reflectance spectroscopy: to shed new light on the capillary refill test.</a> J Biophotonics. , (2017).</li><li>Blaxter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+quasi-continuous+capillary+refill+timing+device.">An automated quasi-continuous capillary refill timing device.</a> Physiological measurement. 37, 83-99 (2016).</li><li>Bordoley, A., Irwin, R., Kalyani, V., MacDonald, C., Standish, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> D1GIT: Automated, temperature-calibrated measurement of capillary refill time. , (2012).</li><li>Kviesis-Kipge, E., Curkste, E., Spigulis, J., Eihvalde, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+analysis+of+skin+capillary-refill+processes+using+blue+LED.">Real-time analysis of skin capillary-refill processes using blue LED.</a> Proc. of SPIE. 771523, (2010).</li><li>Shavit, I., Brant, R., Nijssen-Jordan, C., Galbraith, R., Johnson, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+imaging+technique+to+measure+capillary-refill+time:+improving+diagnostic+accuracy+for+dehydration+in+young+children+with+gastroenteritis.">A novel imaging technique to measure capillary-refill time: improving diagnostic accuracy for dehydration in young children with gastroenteritis.</a> Pediatrics. 118 (6), 2402-2408 (2006).</li><li>Cohen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitor+to+Measure+Dermal+Blood+Flow+in+Critically+Ill+Patients:+Study.">Monitor to Measure Dermal Blood Flow in Critically Ill Patients: Study.</a> International Scholarly Research Notices. 578316, e578316 (2013).</li></ol>

Aucun soutien financier de WheelsBridge AB n’a participé à la réalisation de l’étude. L’auteur JH est employé par le Conseil le comté d’Östergötland, mais a une entente de redevance avec WheelsBridge AB. L’auteur principal de l’ADC a un poste universitaire à temps plein mais aussi participation limitée à WheelsBridge AB.

Afin d’obtenir les meilleurs résultats avec le système, variabilité causée par des facteurs environnementaux doit être contrôlée. Toute lumière ambiante doit être désactivée. L’appareil doit être placé dans l’alignement vertical de la zone de mesure. Afin d’assurer une zone de mesure constante, les sujets ne devraient pas bouger ou parler pendant la mesure. Pour la même raison, la caméra est préférence montée sur un pied pour éviter les mouvement et pour maintenir une distance constante de la z...

Évaluation et triage des centres de patients gravement malades en l’artérielle classique des signes vitaux (BP), fréquence cardiaque (FC), fréquence respiratoire (RR), saturation en oxygène et température de corps1. Variations de ces paramètres apparaissent tardivement au cours de la détérioration circulatoire. Par exemple, hémorragie, une diminution de BP produira pas jusqu'à ce que la perte de sang devient modérée à sévère2et HR augmentation peut également être un marqueur peu sensible et non spécifique3.
Le test de remplissage capillaire (test de CR) peut-être offrir une indication antérieure de collapsus naissante, que le temps de recharge est censé changer avant les signes vitaux ainsi que l’aspect clinique de la peau froide et moite tacheté1,4 , 5. le test de remplissage capillaire est généralement effectué par application et puis relâchez d’un blanchiment ferme pression sur la peau avec un timing (en secondes) du retour du sang vers la zone blanchie. Conformément aux lignes directrices, recharge devrait avoir lieu dans les 2 secondes après la sortie de 5 secondes d’une pression ferme (p. ex., par le doigt du médecin) dans le patient en décubitus dorsal sain normal6. La raison d’être pour le test, c’est qu’un temps de recharge plus lent qui indiquerait la perfusion pauvre peau, possible due à l’une d’un certain nombre d’évènements critiques tels que la septicémie, la perte sanguine, insuffisance cardiaque aiguë ou hypothermie.
À l’heure actuelle, il n’y a pas de consensus sur une méthode de pointe permettant d’effectuer le test de CR6,7,8,9,10. Questions litigieuses incluent le manque de normalisation de la manœuvre de blanchiment réelle et la dépendance subjective (c.-à-d., il nu) évaluations du point de terminaison recharge7,9,11. En outre, il y a des indications que le sexe influence CR temps12,13. La température ambiante et la peau, est connue pour affecter le temps de remplissage capillaire, mais dans quelle mesure n’est pas claire. Enfin, l’utilisation des sites de mesure différents, périphériques ou centrales, est probablement une autre cause de la variabilité dans les résultats avec peu d’études dans ce domaine14,15.
Dans le présent travail, nous avons utilisé un système de bio-ingénierie optique d’enregistrer le parcours du retour du sang et la réponse hyperémique subséquente vu pendant l’essai de CR. Le système utilise la spectroscopie de polarisation diffuses afin de quantifier et de décrire, dans plus de détails que possible avec l’oeil nu, le temps et le cours de la remplissage capillaire. Le système comprend un appareil photo numérique standard, équipé d’un anneau de lumière externe avec 92 LEDs blanches et des logiciels spécialement développés. La lentille et les filtres de deux polarisation, attachés orthogonalement devant les LEDs, bloquent la lumière qui a été directement réfléchie par la surface de la peau permettant à la seule lumière qui a devenu dépolarisée dans les tissus pour atteindre la caméra. Cela génère une image « sous-épidermiques » du tissu à une profondeur d’environ 0,5 mm. L’image est divisée en ses plans de couleur et la teneur en rouge et verte pour chaque pixel est calculée, générant une valeur qui correspond à la concentration tissulaire de globules rouges,16. En mode vidéo, la résolution temporelle du système est de 0,02 s.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>TiVi701 Camera</td>
			<td>WheelsBridge AB</td>
			<td>TiVi701 Camera, version 1.5.1</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiVi700</td>
			<td>WheelsBridge AB</td>
			<td>TiVi700 Analysis, version 1.2.9</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Canon EOS 700D</td>
			<td>Canon U.S.A., inc.</td>
			<td>Canon EOS 700D</td>
			<td>Digital SLR Camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera stand</td>
			<td>Manfrotto</td>
			<td>681B</td>
			<td>Modified camera stand to hold the digital camera in position</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera stand</td>
			<td>Disa Denmark</td>
			<td>9020B</td>
			<td>Modified camera stand to hold the digital camera in position</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diffuse reflectance spectroscopy: getting the capillary refill test under one's thumb

Le test de remplissage capillaire a été introduit en 1947 pour aider à estimer l’état circulatoire chez les patients gravement malades. Lignes directrices stipulent généralement que recharge doit avoir lieu dans les 2 s après la sortie de 5 s d’une pression ferme (p. ex., par le doigt du médecin) chez le patient en décubitus dorsal sain normal. Un temps de recharge plus lent indique la perfusion pauvre peau, qui peut être causée par les conditions, y compris la septicémie, la perte de sang, hypoperfusion et hypothermie. Depuis son introduction, l’utilité clinique du test a été débattue. Les défenseurs soulignent sa faisabilité et sa simplicité et prétendent qu’il peut indiquer les changements d’État vasculaire plus tôt que les changements de signes vitaux comme la fréquence cardiaque. Les critiques, en revanche, soulignent que l’absence de normalisation dans la façon dont le test est effectué et le caractère très subjectif de l’évaluation de le œil nu, ainsi que la sensibilité du test aux facteurs d’ambiance, nettement réduit la valeur clinique. Le but du présent travail est de décrire en détail le parcours de l’épreuve de remplissage et de suggérer des potentiellement plus objective et valeurs de point de terminaison exacte pour le capillaire de rechange test en utilisant la spectroscopie de polarisation diffus.

Tournage au cours de la zone de remplissage capillaire génère des grandes quantités de données, pas possibles d’obtenir par l’évaluation de le œil nu. Nous suggérons ici de nouveaux points de terminaison afin d’améliorer la facilité d’utilisation du test CR comme un indicateur précoce de la détérioration de l’état circulatoire. Nous appelons ces points de terminaison : « Bas du texte », « Sang zéro » (ou « BZ »), « temps de revenir à la base 1"(ou ?...

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Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

Ce protocole décrit comment l’utilisation de la spectroscopie de polarisation diffuse peut améliorer l’utilité clinique de l’essai de remplissage capillaire. Nous proposons une analyse plus détaillée du déroulement de la remplissage capillaire chez des volontaires sains, à l’aide de vidéos de spectroscopie de réflectance diffuse et de nouveaux points de terminaison informatiques.

Spectroscopie de réflectance diffuse : Faire le Test de remplissage capillaire sous son pouce

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

diffuse-reflectance-spectroscopy-getting-capillary-refill-test-under

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An Overview of the Cardiovascular System: Anatomy, Physiology, Assessment, and Abnormalities

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9.0K vues.  Region Östergötland. Ce protocole décrit comment l’utilisation de la spectroscopie de polarisation diffuse peut améliorer l’utilité clinique de l’essai de remplissage capillaire. Nous proposons une analyse plus détaillée du déroulement de la remplissage capillaire chez des volontaires sains, à l’aide de vidéos de spectroscopie de réflectance diffuse et de nouveaux points de terminaison informatiques.

Vidéo: Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

Imaging Odor-Evoked Activities in the Mouse Olfactory Bulb using Optical Reflectance and Autofluorescence Signals

In the brain, sensory stimulation activates distributed populations of neurons among functional modules which participate to the coding of the stimulus. Functional optical imaging techniques are advantageous to visualize the activation of these modules in sensory cortices with high spatial resolution. In this context, endogenous optical signals that arise from molecular mechanisms linked to neuroenergetics are valuable sources of contrast to record spatial maps of sensory stimuli over wide fields in the rodent brain.
Here, we present two techniques based on changes of endogenous optical properties of the brain tissue during activation. First the intrinsic optical signals (IOS) are produced by a local alteration in red light reflectance due to: (i) absorption by changes in blood oxygenation level and blood volume (ii) photon scattering. The use of in vivo IOS to record spatial maps started in the mid 1980's with the observation of optical maps of whisker barrels in the rat and the orientation columns in the cat visual cortex1. IOS imaging of the surface of the rodent main olfactory bulb (OB) in response to odorants was later demonstrated by Larry Katz's group2. The second approach relies on flavoprotein autofluorescence signals (FAS) due to changes in the redox state of these mitochondrial metabolic intermediates. More precisely, the technique is based on the green fluorescence due to oxidized state of flavoproteins when the tissue is excited with blue light. Although such signals were probably among the first fluorescent molecules recorded for the study of brain activity by the pioneer studies of Britton Chances and colleagues3, it was not until recently that they have been used for mapping of brain activation in vivo. FAS imaging was first applied to the somatosensory cortex in rodents in response to hindpaw stimulation by Katsuei Shibuki's group4.
The olfactory system is of central importance for the survival of the vast majority of living species because it allows efficient detection and identification of chemical substances in the environment (food, predators). The OB is the first relay of olfactory information processing in the brain. It receives afferent projections from the olfactory primary sensory neurons that detect volatile odorant molecules. Each sensory neuron expresses only one type of odorant receptor and neurons carrying the same type of receptor send their nerve processes to the same well-defined microregions of &tilde;100&mu;m3 constituted of discrete neuropil, the olfactory glomerulus (Fig. 1). In the last decade, IOS imaging has fostered the functional exploration of the OB5, 6, 7 which has become one of the most studied sensory structures. The mapping of OB activity with FAS imaging has not been performed yet.
Here, we show the successive steps of an efficient protocol for IOS and FAS imaging to map odor-evoked activities in the mouse OB.

This article presents the protocols of intrinsic optical signals and flavoproteins autofluorescence signals imaging to map odor-evoked activities at the surface of the olfactory bulb in mice.

Activités d&#39;imagerie Odeur évoqués dans le bulbe olfactif de la souris en utilisant la réflectance optique et Signaux Autofluorescence

In the brain, sensory stimulation activates distributed populations of neurons among functional modules which participate to the coding of the stimulus. ...

Recherche

Neurosciences

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

Le test de natation forcée souris

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Tail Suspension Test

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that are expected to affect depression related behaviors. Mice are suspended by their tails with tape, in such a position that it cannot escape or hold on to nearby surfaces. During this test, typically six minutes in duration, the resulting escape oriented behaviors are quantified. The tail-suspension test is a valuable tool in drug discovery for high-throughput screening of prospective antidepressant compounds. Here, we describe the details required for implementation of this test with additional emphasis on potential problems that may occur and how to avoid them. We also offer a solution to the tail climbing behavior, a common problem that renders this test useless in some mouse strains, such as the widely used C57BL/6. Specifically, we prevent tail climbing behaviors by passing mouse tails through a small plastic cylinder prior to suspension. Finally, we detail how to manually score the behaviors that are manifested in this test.

The tail-suspension test is validated as an experimental procedure to assess antidepressant efficacy of drug treatments in mice. Mice are suspended by their tails for six minutes and escape-related behaviors are assessed. We describe procedures used in conducting the tail suspension test.

Le test de suspension caudale

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to understand the mechanism that promotes neuronal regeneration, an in-depth analysis of the neuronal types that can remodel after injury is needed. Several studies showed that damaged climbing fibers are capable of regrowing also in adult animals1,2. The investigation of the time-lapse dynamics of degeneration and regeneration of these axons within their complex environment can be performed by time-lapse two-photon fluorescence (TPF) imaging in vivo3,4. This technique is here combined with laser surgery, which proved to be a highly selective tool to disrupt fluorescent structures in the intact mouse cortex5-9.
This protocol describes how to perform TPF time-lapse imaging and laser nanosurgery of single axonal branches in the cerebellum in vivo. Olivocerebellar neurons are labeled by anterograde tracing with a dextran-conjugated dye and then monitored by TPF imaging through a cranial window. The terminal portion of their axons are then dissected by irradiation with a Ti:Sapphire laser at high power. The degeneration and potential regrowth of the damaged neuron are monitored by TPF in vivo imaging during the days following the injury.

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Two-photon imaging, coupled to laser nanodissection, are useful tools to study degenerative and regenerative processes in the central nervous system with subcellular resolution. This protocol shows how to label, image, and dissect single climbing fibers in the cerebellar cortex in vivo.

Laser nanochirurgie de cervelet axones<em&gt; In Vivo</em

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Capillaire Feeder Assay mesures prise alimentaire dans<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Simultaneous Evaluation of Cerebral Hemodynamics and Light Scattering Properties of the In Vivo Rat Brain Using Multispectral Diffuse Reflectance Imaging

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional multispectral diffuse reflectance imaging system. This system is constructed from a broadband white light source, a motorized filter wheel with a set of narrowband interference filters, a light guide, a collecting lens, a video zoom lens, and a monochromatic charged-coupled device (CCD) camera. An ellipsoidal cranial window is made in the skull bone of a rat under isoflurane anesthesia to capture in vivo multispectral diffuse reflectance images of the cortical surface. Regulation of the fraction of inspired oxygen using a gas mixture device enables the induction of different respiratory states such as normoxia, hyperoxia, and anoxia. A Monte Carlo simulation-based multiple regression analysis for the measured multispectral diffuse reflectance images at nine wavelengths (500, 520, 540, 560, 570, 580, 600, 730, and 760 nm) is then performed to visualize the two-dimensional maps of hemodynamics and the light scattering properties of the in vivo rat brain.

Simultaneous Evaluation of Cerebral Hemodynamics and Light Scattering Properties of the In Vivo Rat Brain Using Multispectral Diffuse Reflectance Imaging

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional multispectral diffuse reflectance imaging system.

L&#39;évaluation simultanée de l&#39;hémodynamique cérébrale et Light Scattering Propriétés du<em&gt; In Vivo</em&gt; Cerveau de rat en utilisant multispectral Imaging Diffuse Réflectance

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional ...

Functional Magnetic Resonance Spectroscopy at 7 T in the Rat Barrel Cortex During Whisker Activation

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy offers the opportunity to measure cerebral metabolite contents in vivo and noninvasively. Thanks to technological developments over the last decade and the increase in magnetic field strength, it is now possible to obtain good resolution spectra in vivo in the rat brain. Neuroenergetics (i.e., the study of brain metabolism) and, especially, metabolic interactions between the different cell types have attracted more and more interest in recent years. Among these metabolic interactions, the existence of a lactate shuttle between neurons and astrocytes is still debated. It is, thus, of great interest to perform functional proton magnetic resonance spectroscopy (1H-MRS) in a rat model of brain activation and monitor lactate. However, the methyl lactate peak overlaps lipid resonance peaks and is difficult to quantify. The protocol described below allows metabolic and lactate fluctuations to be monitored in an activated brain area. Cerebral activation is obtained by whisker stimulation and 1H-MRS is performed in the corresponding activated barrel cortex, whose area is detected using blood-oxygen-level-dependent functional magnetic resonance imaging (BOLD fMRI). All steps are fully described: the choice of anesthetics, coils, and sequences, achieving efficient whisker stimulation directly in the magnet, and data processing.

After checking by blood-oxygen-level-dependent functional magnetic resonance imaging (BOLD fMRI) that the corresponding somatosensory barrel field cortex area (called S1BF) is correctly activated, the main goal of this study is to quantify lactate content fluctuations in the activated rat brains by localized proton magnetic resonance spectroscopy (1H-MRS) at 7 T.

La spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle à 7 T dans le Cortex de baril de Rat pendant l’Activation de Whisker

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy offers the opportunity to measure cerebral metabolite contents in vivo and noninvasively. Thanks to ...

Ex Vivo Pressurized Hippocampal Capillary-Parenchymal Arteriole Preparation for Functional Study

From subtle behavioral alterations to late-stage dementia, vascular cognitive impairment typically develops following cerebral ischemia. Stroke and cardiac arrest are remarkably sexually dimorphic diseases, and both induce cerebral ischemia. However, progress in understanding the vascular cognitive impairment, and then developing sex-specific treatments, has been partly limited by challenges in investigating the brain microcirculation from mouse models in functional studies. Here, we present an approach to examine the capillary-to-arteriole signaling in an ex vivo hippocampal capillary-parenchymal arteriole (HiCaPA) preparation from mouse brain. We describe how to isolate, cannulate, and pressurize the microcirculation to measure arteriolar diameter in response to capillary stimulation. We show which appropriate functional controls can be used to validate the HiCaPA preparation integrity and display typical results, including testing potassium as a neurovascular coupling agent and the effect of the recently characterized inhibitor of the Kir2 inward rectifying potassium channel family, ML133. Further, we compare the responses in preparations obtained from male and female mice. While these data reflect functional investigations, our approach can also be used in molecular biology, immunochemistry, and electrophysiology studies.

The present manuscript details how to isolate hippocampal arterioles and capillaries from the mouse brain and how to pressurize them for pressure myography, immunofluorescence, biochemistry, and molecular studies.

Ex Vivo Pressurized Hippocampal Capillary-Parenchymal Arteriole Préparation pour l'étude fonctionnelle

From subtle behavioral alterations to late-stage dementia, vascular cognitive impairment typically develops following cerebral ischemia. Stroke and ...

Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large percentage of TBI patients requiring hospitalization. DAI involves widespread axonal damage from shaking, rotation or blast injury, leading to rapid axonal stretch injury and secondary axonal changes that are associated with a long-lasting impact on functional recovery. Historically, experimental models of DAI without focal injury have been difficult to design. Here we validate a simple, reproducible and reliable rodent model of DAI that causes widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

This protocol validates a reliable, easy-to-perform and reproducible rodent model of brain diffuse axonal injury (DAI) that induces widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

Induction de lésion diffuse du cerveau axonal chez les rats basés sur l’accélération rotationnelle

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large ...

Culture of Brain Capillary Pericytes for Cytosolic Calcium Measurements and Calcium Imaging Studies

Pericytes are associated with endothelial cells and astrocytic endfeet in a structure known as the neurovascular unit (NVU). Brain capillary pericyte function is not fully known. Pericytes have been suggested to be involved in capillary development, regulation of endothelial barrier tightness and trancytosis activity, regulation of capillary tone and to play crucial roles in certain brain pathologies.
Pericytes are challenging to investigate in the intact brain due to the difficulties in visualizing processes in the brain parenchyma, as well as the close proximity to the other cells of the NVU. The present protocol describes a method for isolation and culture of primary bovine brain capillary pericytes and their following usage in calcium imaging studies, where effects of agonists involved in brain signaling and pathologies can be investigated. Cortical capillary fragments are allowed to attach to the bottom of culture flasks and, after 6 days, endothelial cells and pericytes have grown out from the capillary fragments. The endothelial cells are removed by gentle trypsinization and pericytes are cultured for 5 additional days before passaging.
Isolated pericytes are seeded in 96-well culture plates and loaded with the calcium indicator dye (Fura-2 acetoxymethyl (AM)) to allow for measurements of intracellular calcium levels in a plate reader setup. Alternatively, pericytes are seeded on coverslips and mounted in cell chambers. Following loading with the calcium indicator (Cal-520 AM), calcium live-imaging can be performed using confocal microscopy at an excitation wavelength of 488 nm and emission wavelength of 510-520 nm.
The method described here has been used to obtain the first intracellular calcium measurements from primary brain capillary pericytes, demonstrating that pericytes are stimulated via ATP and are able to contract in vitro.

Brain capillary pericytes are essential players in the regulation of blood-brain barrier properties and blood flow. This protocol describes how brain capillary pericytes can be isolated, cultured, characterized with respect to cell type and applied for investigations of intracellular calcium signaling with fluorescent probes.

Culture des péricytes capillaires cérébraux pour les mesures cytosoliques du calcium et les études d’imagerie calcique

Pericytes are associated with endothelial cells and astrocytic endfeet in a structure known as the neurovascular unit (NVU). Brain capillary pericyte ...