Les études axées sur les modèles de maladies cardiovasculaires, les cibles thérapeutiques cardiovasculaires ou les agents pharmaceutiques nécessitent l’évaluation de la pression artérielle systémique et des changements du rythme cardiaque. La cannulation de l’artère fémorale est une méthode économique d’enregistrement des formes d’onde de pression intra-artérielle qui peuvent être exécutées avec l’équipement standard dans une installation animale. Hsin-Ting Lin, technicien de mon laboratoire, démontrera la procédure.
Avant de commencer l’expérience, placez le rat anesthésié dans une position de supination sur un tableau chirurgical et confirmez l’absence de réponse au pincement des pieds. Fixez les jambes avec des élastiques pour immobiliser le corps, et installez les instruments de pression artérielle et d’électrocardiogramme pour l’enregistrement, y compris une unité d’entrée analogique pour acquérir les signaux, un transducteur de pression avec un moyeu compatible, trois fils bipolaires d’électrocardiogramme à pointe aiguille, et un ordinateur avec un logiciel approprié. Avant le début de l’enregistrement de la pression artérielle, retirez le brassard de pression d’un sphygmomanomètre standard et connectez le robinet d’arrêt à trois sur le tube d’inflation au transducteur de pression du système d’acquisition de données.
Vissez la vanne de dégagement d’air dans le sens des aiguilles d’une montre, en gardant un œil sur la jauge tout en pompant l’ampoule d’inflation. Lorsque la jauge montre 100 millimètres de mercure, ouvrez le robinet d’arrêt à trois sens pour vous connecter au transducteur de pression. Le facteur de conversion pour le calcul de la pression artérielle sera déterminé automatiquement.
Pour relâcher la pression, vissez la valve de dégagement d’air dans le sens inverse des aiguilles d’une montre jusqu’à ce que la pression du sphygmomanomètre soit revenue à zéro. Répétez l’étalonnage avec 200 millimètres de pression au mercure, puis détachez le transducteur de pression du sphygmomanomètre au mercure. Connectez le transducteur de pression au robinet d’arrêt à trois sens du cathéter PE et vérifiez les jonctions de raccordement du robinet d’arrêt à trois sens.
Pour l’identification de repère de surface, localisez le pli inguinal à la jonction entre l’abdomen et la cuisse et soulevez la couche complète de peau au centre du pli. Utilisez des ciseaux pour couper la peau levée à une orientation approximativement parallèle à la cuisse ipsilateral. Le nerf fémoral et les vaisseaux sont situés sous le tissu sous-cutané exposé.
À l’aide de forceps à pointe fine, disséquer le tissu couche par couche, arrêtant la dissection au niveau des vaisseaux fémoraux. Dégagez soigneusement le tissu mou le long du nerf fémoral et des vaisseaux pour obtenir une bonne vue du nerf fibreux. La veine est pourpre foncé et l’artère est pulsatile.
Lorsque la dissection tissulaire atteint les vaisseaux fémoraux, changer et aller changer de forceps pour prévenir les vaisseaux endommagés. Utilisez ensuite des forceps avec des pointes inclinées pour prolonger la longueur exposée de l’artère fémorale et de la veine. Pour cannuler l’artère fémorale, utilisez les forceps pour séparer la veine fémorale de l’artère et appliquer une pince de bouledogue à l’artère fémorale aussi cranially que possible.
Faites une cravate lâche des deux cordes de soie, l’une juste en dessous de la pince de bouledogue et l’autre au terminal caudal de l’artère fémorale exposée. Utilisez des microscisseurs pour faire un petit trou sur le côté ventral de l’artère fémorale et insérer la pointe d’un cathéter en polyéthylène ou PE à travers le petit trou. Avancez le cathéter cranially.
Une bouffée de sang dans le cathéter après avoir enlevé la pince indique que la pointe du cathéter a atteint le lumen de l’artère fémorale. Serrer la soie supérieure pour fixer la position du cathéter et serrer la soie inférieure pour empêcher le saignement du côté caudal de l’artère fémorale. Pour confirmer le succès de la cannulation, utilisez une seringue d’un millilitre pour injecter de 0,1 à 0,2 millilitres de solution saline héparinée dans l’artère fémorale.
Ensuite, vérifiez s’il suinte autour du site de cannulation et couvrez le site avec une boule de coton humide. Pour effectuer un enregistrement de la pression artérielle, fixez le cathéter PE et le robinet d’arrêt à trois voies au robinet d’arrêt transducteur de pression et assurez-vous qu’il n’y a pas de bulles d’air dans le système de cannulation. Vérifiez ensuite les jonctions de connexion du robinet d’arrêt à trois sens.
Lorsque l’équipement est prêt, démarrer le système d’acquisition de données avec une fréquence d’échantillonnage de 1000 hertz. Des ondes artérielles de pression seront affichées. Laissez l’ensemble de la mise en place se stabiliser pendant au moins trois à cinq minutes, en vérifiant périodiquement le site de cannulation pour confirmer qu’il n’y a pas de saignement.
Pour effectuer un électrocardiogramme de surface, vérifiez d’abord les trois pistes de l’ECG bipolaire pour vous assurer que les électrodes de platine positives, négatives et de référence sont intactes, et insérez les fils sous-cutanéement à l’avant-jambe gauche, à l’avant-jambe droite et à la jambe arrière droite. Attachez ensuite les concentrateurs d’électrodes à un amplificateur ECG sur mesure avec une fréquence d’échantillonnage de 1000 hertz et une fréquence de filtre de trois à 500 hertz. La tension artérielle simultanée et les enregistrements d’ECG dans six rats normotensifs et hypertensifs de 47 semaines ont indiqué une tension artérielle systolique et moyenne sensiblement plus élevée chez les animaux spontanément hypertensifs comparés aux rats normaux.
L’onde P, les intervalles de relations publiques, la largeur QRS et les paramètres d’intervalle QT mesurés à partir des enregistrements ECG n’ont démontré aucune différence entre les deux groupes. Vous pouvez effectuer l’étalonnage du système de pression et configurer le transducteur de pression et le système d’acquisition de données avant d’anesthésier les animaux. Les données acquises sur la forme d’onde artérielle brute et l’électrocardiogramme peuvent être analysées sur le logiciel.
La radiotélémétrie est considérée comme une technique d’étalon-or pour la surveillance de BP et de la fréquence cardiaque, mais la technique est coûteuse. La cannulation intraartérale avec ECG simultané est une alternative économique. L’anesthésie par inhalation d’isoflurane est facile à effectuer, mais peut être dangereuse en cas de fuite importante.
Par conséquent, vérifiez toujours l’équipement et le tube avant utilisation.
