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The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Bio-Rad Laboratories, Inc

2-Deoxyribonolactone (3) &#x662F;&#x5728; DNA &#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5404;&#x79CD; DNA &#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x4EE3;&#x7406;&#x4EBA;&#x4E0E;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7ECF;&#x5386; &beta;-&#x6D88;&#x9664;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7A33;&#x4EB2;&#x7535;&#x4EA7;&#x54C1; (4)&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x7279;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4F7F;&#x7528; photolabile &#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x524D;&#x4F53;&#x751F;&#x6210;&#x5305;&#x542B; 2-deoxyribonolactone (3) &#x548C; (4) &#x5176; &beta;-&#x6D88;&#x9664;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684; DNA&#x3002;2 Deoxyribonolactone &#x4E0D;&#x662F;&#x7531;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; 8 AP &#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x5207;&#x5272;&#x7684;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9176;&#x3001; &#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176; III&#xFF0C;&#x5230; 3 &#x548C;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x4EA4;&#x8054;&#x5F3A;&#x70C8;&#x6291;&#x5236;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x5178;&#x578B;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9176;&#xFF0C;&#x53F0;&#x5851;&#x548C; NEIL1 &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9; (1) &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x6D88;&#x9664;&#x7A97;&#x4F53;&#x4EA4;&#x8054;&#x4E01;&#x70EF;&#x9178;&#x5185;&#x916F;&#x75C5;&#x53D8; &#xFF08;4&#xFF09;&#x3002;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x9176;&#x548C;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x4E5F;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E95;&#x75C5;&#x53D8;&#x53BB;&#x9664;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; 3 &#x548C; 4 &#x53EF;&#x901A;&#x8FC7;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B; BER &#x901A;&#x8FC7;&#x4EA4;&#x8054;&#x6216;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; BER &#x9176;&#x4E0E;&#x7ADE;&#x4E89;&#x65BD;&#x52A0;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x6B63;&#x5E38; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x5E95;&#x75C5;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FEE;&#x590D;&#x3002;

&#x7531;&#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D;&#x9176;&#x4EA4;&#x8054;&#x7684; 2 deoxyribonolactone &#x548C;&#x5B83;&#x7684; &beta;-&#x6D88;&#x9664;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;

2-Deoxyribonolactone (3) is produced in DNA as a result of reaction with a variety of DNA damaging agents. The lesion undergoes beta-elimination to form a second metastable electrophilic product (4). In this study, DNA containing 2-deoxyribonolactone (3) and its beta-elimination product (4) are generated at specific sites using a photolabile nucleotide precursor. 2-Deoxyribonolactone is not incised by any of the 8 AP lyases tested. One enzyme, Escherichia coli endonuclease III, cross-links to 3, and the lesion strongly inhibits excision of typical abasic sites by this enzyme. Two of the enzymes, FPG and NEIL1 known to cleave normal abasic sites (1) by effecting beta,delta-elimination form cross-links to the butenolide lesion (4). The observed results are ascribable to characteristics of the enzymes and the lesions. These enzymes are also important for the removal of oxidative base lesions. These results suggest that high concentrations of 3 and 4 may exert significant effects on the repair of normal AP site and oxidative base lesions in cells by reducing the cellular activity of these BER enzymes either via cross-linking or competing with binding to the BER enzymes.

Cross-linking of 2-deoxyribonolactone and its beta-elimination product by base excision repair enzymes.

2-Deoxyribonolactone (3) est produit dans l&#39;ADN &agrave; la suite de r&eacute;action avec une vari&eacute;t&eacute; d&#39;agents nuisibles de l&#39;ADN. La l&eacute;sion subit une &eacute;limination b&ecirc;ta pour former un deuxi&egrave;me produit &eacute;lectrophile m&eacute;tastable (4). Dans cette &eacute;tude, l&#39;ADN contenant du 2-deoxyribonolactone (3) et son produit d&#39;&eacute;limination b&ecirc;ta (4) est g&eacute;n&eacute;r&eacute; &agrave; des sites sp&eacute;cifiques &agrave; l&#39;aide d&#39;un nucl&eacute;otide photosensibles. 2-Deoxyribonolactone n&#39;est pas incis&eacute; par tout les lyases AP 8 mis &agrave; l&#39;essai. Un enzyme, endonucl&eacute;ase de Escherichia coli III, liens crois&eacute;s &agrave; 3 et la l&eacute;sion inhibe fortement l&#39;excision des sites de base typiques de cette enzyme. Deux des enzymes, groupe des produits forestiers et NEIL1 qui coupent les sites normaux de base (1) en effectuant les b&ecirc;ta, forme delta-&eacute;limination des liens crois&eacute;s &agrave; la l&eacute;sion but&eacute;nolide (4). Les r&eacute;sultats observ&eacute;s sont attribuables aux caract&eacute;ristiques de ces enzymes et les l&eacute;sions. Ces enzymes sont &eacute;galement importants pour &eacute;liminer les l&eacute;sions oxydatives de base. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les fortes concentrations de 3 et 4 peuvent exercer des effets significatifs sur la r&eacute;paration du site AP normal et oxydatives base l&eacute;sions dans les cellules en r&eacute;duisant l&#39;activit&eacute; cellulaire de ces enzymes BER par r&eacute;ticulation ou en concurrence avec la liaison aux enzymes BER.

Mise en r&eacute;seau des 2-deoxyribonolactone et ses produits de b&ecirc;ta-&eacute;limination par les enzymes de r&eacute;paration de base de l&#39;excision.

Die Vernetzung von 2-Desoxyribonolacton und beta-Spaltprodukt von Basenexzisionsreparatur Enzyme.

2-Deoxyribonolactone (3) &egrave; prodotto in DNA in seguito a reazione con una variet&agrave; di agenti dannosi del DNA. La lesione subisce beta-eliminazione per formare un secondo prodotto metastabile elettrofilo (4). In questo studio, DNA contenente 2-deoxyribonolactone (3) e del suo prodotto di beta-eliminazione (4) &egrave; generato in siti specifici utilizzando un precursore del nucleotide di photolabile. 2-Deoxyribonolactone non &egrave; incisa da qualsiasi l&#39;8 AP liasi testati. Un enzima, endonucleasi di Escherichia coli III, legami incrociati a 3 e la lesione inibisce fortemente l&#39;escissione dei siti abasic tipici di questo enzima. Due degli enzimi, FPG e NEIL1 noto a fendere normale abasic siti (1) da effettuare beta, delta-eliminazione forma legami incrociati alla lesione butenolide (4). I risultati osservati sono imputabili alle caratteristiche di enzimi e le lesioni. Questi enzimi sono importanti per la rimozione delle lesioni base ossidativa. Questi risultati suggeriscono che alte concentrazioni di 3 e 4 possono esercitare effetti significativi sulla riparazione del normale sito AP e lesioni base ossidativi nelle cellule riducendo l&#39;attivit&agrave; cellulare di questi enzimi BER via cross-linking o in competizione con l&#39;associazione per gli enzimi BER.

Cross-linking di 2-deoxyribonolactone e del suo prodotto beta-eliminazione di enzimi di riparazione di base di escissione.

2-Deoxyribonolactone (3) DNA &#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A; DNA &#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x75C5;&#x5909;&#x306F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x6E96;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6C42;&#x7A4D; (4) &#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x9664;&#x53BB;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, 2-deoxyribonolactone &#xFF08;3&#xFF09; &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x9664;&#x53BB;&#x88FD;&#x54C1; (4) &#x3092;&#x542B;&#x3080; DNA photolabile &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 Deoxyribonolactone &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; 8 AP &#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5207;&#x958B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x5F37;&#x304F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; III&#x3001;3&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306F;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;FPG &#x3068;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30D6;&#x901A;&#x5E38;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#xFF08;1&#xFF09; &#x306B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306F;&#x3001;&#x5DEE;&#x62BC;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066; NEIL1 &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x67B6;&#x6A4B;&#x30D6;&#x30C6;&#x30CE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x75C5;&#x5909; (4) &#x306B;&#x3002;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3082;&#x9178;&#x5316;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E; 3 &#x3068; 4 &#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089; BER &#x9175;&#x7D20;&#x67B6;&#x6A4B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; BER &#x9175;&#x7D20;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x7AF6;&#x5408;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x901A;&#x5E38; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

2 Deoxyribonolactone &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x9664;&#x53BB;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3002;

2-Deoxyribonolactone (3) DNA&#xC5D0; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC900; electrophilic &#xC81C;&#xD488; (4) &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xACAA; &#xC2B5;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; DNA 2-deoxyribonolactone (3) &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC84;&#xC804; &#xC81C;&#xAC70; &#xC81C;&#xD488; (4)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; photolabile &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC804;&#xC870;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2 Deoxyribonolactone&#xB294; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; 8 AP lyases&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCA0;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0;. &#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C;, &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; endonuclease 3 &#xC138;, 3, &#xBC0F; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xB9C1;&#xD06C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC808;&#xB2E8;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;. 2 &#xD6A8;&#xC18C;, FPG &#xBC0F; NEIL1 &#xBCA0;&#xD0C0;, &#xCD08;&#xB798; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (1)&#xC744; &#xCABC;&#xAC1C; &#xB2E4; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xB378;&#xD0C0; &#xC81C;&#xAC70; &#xC591;&#xC2DD; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xB9C1;&#xD06C; butenolide &#xBCD1; &#xBCC0; (4)&#xC744;. &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC774;. &#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; 3&#xACFC; 4&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAD50;&#xCC28; &#xB610;&#xB294; BER &#xD6A8;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC73C;&#xB85C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; BER &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC904;&#xC5EC; &#xC77C;&#xBC18; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0B0;&#xD654; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xD718; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

2 Deoxyribonolactone &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC84;&#xC804; &#xC81C;&#xAC70; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD50;&#xCC28;.

2-Deoxyribonolactone (3) se produce en el ADN como resultado de la reacci&oacute;n con una variedad de agentes da&ntilde;inos de ADN. La lesi&oacute;n somete a beta-eliminaci&oacute;n para formar un segundo producto electrof&iacute;lico metaestable (4). En este estudio, ADN que contiene 2-deoxyribonolactone (3) y su producto de eliminaci&oacute;n beta (4) se genera en sitios espec&iacute;ficos, utilizando un precursor del nucle&oacute;tido de photolabile. 2-Deoxyribonolactone no es incidida por cualquiera de los 8 liasas AP probados. Una enzima, endonucleasa de Escherichia coli III, enlaces cruzados a 3 y la lesi&oacute;n inhibe fuertemente la supresi&oacute;n de sitios de un t&iacute;picos por esta enzima. Dos de las enzimas, FPG y NEIL1 sabido que hienden sitios normales de un (1) aplicando beta, delta-eliminaci&oacute;n forma enlaces cruzados a la lesi&oacute;n de butenolide (4). Los resultados observados son atribuibles a las caracter&iacute;sticas de las enzimas y las lesiones. Estas enzimas tambi&eacute;n son importantes para la eliminaci&oacute;n de lesiones oxidativas de base. Estos resultados sugieren que altas concentraciones de 3 y 4 pueden ejercer efectos significativos sobre la reparaci&oacute;n de sitio AP normal y las lesiones de base oxidativas en las c&eacute;lulas mediante la reducci&oacute;n de la actividad celular de estas enzimas BER ya sea a trav&eacute;s de cross-linking o compitiendo con atar a las enzimas BER.

Cross-linking de 2-deoxyribonolactone y su producto de eliminaci&oacute;n beta por las enzimas de reparaci&oacute;n de la base de la escisi&oacute;n.

DNA &#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x4EA7;&#x751F;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6B63;&#x5F0F;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x7CD6;&#x82F7;&#x503A;&#x5238;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6709;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6240;&#x5F15;&#x8D77;&#x3002;C4&#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9; (C4-AP) &#x7531;&#x51E0;&#x79CD; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x5242;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x53D8;&#x5360;&#x5927;&#x7EA6; 40%&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x3002;C4 &#x7684;&#x5F71;&#x54CD; &#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5728;&#x6A21;&#x677F;&#x4E2D;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7EB3;&#x5165;&#x4F1A;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76; Klenow &#x7247;&#x6BB5;&#x4E0E;&#x65E0; 3&#39;--&gt; 5&#39; &#x5916;&#x5207;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9176;&#x4F18;&#x5148;&#x7EB3;&#x5165; dA &gt; dG &gt; &#x76F4;&#x6D41;&#xFF0C;T &#x5BF9;&#x9762; C4-AP&#x3002;&#x65E2;&#x4E0D;&#x9176;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x5EF6;&#x957F;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x5E95;&#x6F06;&#x3002;&#x5426;&#x5219;&#x4E3A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9A;&#x671F; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; Klenow &#x4E0D;&#x533A;&#x5206;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;&#x6269;&#x5C55;&#x7531;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217; pol II&#x3001; pol II exo(-)&#x3001; pol &#x56DB; pol V &#x5F15;&#x7269;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;Pol II exo(-) &#x662F;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x3002;&#x5B9A;&#x6027; translesion &#x5408;&#x6210;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; pol II exo(-) &#x4F18;&#x5148;&#x7EB3;&#x5165;&#x4E86; T C4-AP&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x6309; dG&#x3001; dA &#x548C;&#x76F4;&#x6D41;&#x987A;&#x5E8F;&#x76F8;&#x53CD;&#x3002;&#x80F8;&#x82F7;&#x7EB3;&#x5165;&#x5BF9;&#x9762; C4&#39;-AP &#x662F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E; pol II &#x5916;&#x5207;&#x4E92;&#x52A8;&#x4E0E;&#x5E38;&#x89C4;&#x7684; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x5426;&#x5219;&#x4E3A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x65C1;&#x8DEF;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C; C4-AP &#x5236;&#x4F5C;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x5E76;&#x4E0D;&#x50CF;&#x5178;&#x578B;&#x7684; AP &#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;C4-AP &#x75C5;&#x53D8;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x6309;&#x7167;&quot;A &#x89C4;&#x5219;&quot;&#x3002;&#x7ED5;&#x8FC7;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C; C4-AP &#x75C5;&#x53D8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x9AD8;&#x5C42;&#x6B21;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20; T:A transversions--&gt; G:C&#x3002;

C4 &#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x4F5C;&#x7528; &#39;-DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x3002;

Oxidative damage to DNA produces abasic sites resulting from the formal hydrolysis of the nucleotides' glycosidic bonds, along with a variety of oxidized abasic sites. The C4'-oxidized abasic site (C4-AP) is produced by several DNA-damaging agents. This lesion accounts for approximately 40% of the DNA damage produced by bleomycin. The effect of a C4'-oxidized abasic site incorporated at a defined site in a template was examined on Klenow fragments with and without 3' --> 5' exonuclease activity. Both enzymes preferentially incorporated dA > dG > dC, T opposite C4-AP. Neither enzyme is able to extend the primer past the lesion. Experiments with regular AP sites in an otherwise identical template indicate that Klenow does not differentiate between these two disparate abasic sites. Extension of the primer by alternative polymerases pol II, pol II exo(-), pol IV, and pol V was examined. Pol II exo(-) was most efficient. Qualitative translesion synthesis experiments showed that pol II exo(-) preferentially incorporates T opposite C4-AP, followed in order by dG, dA, and dC. Thymidine incorporation opposite C4'-AP is distinct from the pol II exonuclease interaction with a regular AP site in an otherwise identical template. These in vitro experiments suggest that bypass polymerases may play a crucial role in survival of cells in which C4-AP is produced, and unlike a typical AP site, the C4-AP lesion may not follow the "A-rule". The interaction between bypass polymerases and a C4-AP lesion could explain the high levels of G:C --> T:A transversions in cells treated with bleomycin.

In vitro effects of a C4'-oxidized abasic site on DNA polymerases.

Dommages oxydatifs &agrave; l&#39;ADN produit des sites duprojet r&eacute;sultant de l&#39;hydrolyse formelle des liaisons glycosidiques des nucl&eacute;otides, ainsi qu&#39;une vari&eacute;t&eacute; de sites de base oxyd&eacute;s. La C4 &quot;-site duprojet oxyd&eacute; (C4-AP) est produit par plusieurs agents endommageant l&#39;ADN. Cette l&eacute;sion repr&eacute;sente environ 40 % des dommages d&#39;ADN produites par la bl&eacute;omycine. L&#39;effet d&#39;une C4 &quot;-oxyd&eacute; site fondamental int&eacute;gr&eacute; &agrave; un site d&eacute;fini dans un mod&egrave;le a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e sur des fragments de Klenow avec ou sans 3&#39;--&gt; l&#39;activit&eacute; exonucl&eacute;ase 5&#39;. Les deux enzymes incorpor&eacute; pr&eacute;f&eacute;rentiellement dA &amp;gt; dG &amp;gt; dC, T en face de la C4-AP. Aucune enzyme est capable d&#39;&eacute;tendre l&#39;amorce apr&egrave;s la l&eacute;sion. Exp&eacute;riences avec des sites de AP r&eacute;guli&egrave;res dans un mod&egrave;le par ailleurs identique indiquent que Klenow ne diff&eacute;rencie pas entre ces deux sites disparates duprojet. Extension de l&#39;amorce par pol autres polym&eacute;rases II exo(-) II pol, pol et IV pol V a &eacute;t&eacute; examin&eacute;e. Pol II exo(-) a &eacute;t&eacute; plus efficace. Des exp&eacute;riences de synth&egrave;se trans-l&eacute;sion qualitative a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que pol II exo(-) int&egrave;gre pr&eacute;f&eacute;rentiellement T en face de la C4-AP, suivi dans l&#39;ordre par le dG, dA et dC. L&#39;incorporation de thymidine en face de la C4&#39;-AP se distingue par l&#39;interaction d&#39;exonucl&eacute;ase pol II avec un site AP r&eacute;guli&egrave;rement dans un mod&egrave;le par ailleurs identique. Ces exp&eacute;riences in vitro sugg&egrave;rent que les polym&eacute;rases de contournement peuvent jouent un r&ocirc;le crucial dans la survie des cellules dans lesquelles est produit C4-AP, et contrairement &agrave; un site typique de l&#39;AP, la l&eacute;sion C4-AP peut ne pas suivre la &laquo; A-rule &raquo;. L&#39;interaction entre les polym&eacute;rases de d&eacute;rivation et une l&eacute;sion C4-AP pourrait expliquer les niveaux &eacute;lev&eacute;s de g: c--&gt; T:A transversions dans les cellules trait&eacute;es &agrave; la bl&eacute;omycine.

Les effets in vitro d&#39;une C4 &quot;-oxyd&eacute; site fondamental sur l&#39;ADN polym&eacute;rase.

In-vitro-Wirkungen eines C4&#x26;#39;-oxidierten abasischen Stelle auf der DNA-Polymerasen.

Danno ossidativo al DNA produce siti abasic risultante dall&#39;idrolisi formale dei legami glicosidici dei nucleotidi, insieme a una variet&agrave; di siti abasic ossidati. La C4&#39;-sito abasic ossidato (C4-AP) &egrave; prodotto da parecchi agenti dannosi del DNA. Questa lesione rappresenta circa il 40% dei danni del DNA prodotto da bleomicina. L&#39;effetto di una C4&#39;-ossidato sito abasic incorporato in un sito definito in un modello &egrave; stato esaminato su frammenti di Klenow con e senza 3&#39;--&gt; 5&#39; attivit&agrave; di exonuclease. Entrambi gli enzimi incorporati preferenzialmente dA &amp;gt; dG &amp;gt; dC, T fronte C4-AP. N&eacute; enzima &egrave; in grado di estendere il primer passato la lesione. Esperimenti con regolari siti AP in un modello identico altrimenti indicano che Klenow non distinguere tra questi due siti abasic disparati. Estensione del primer da pol alternativa polimerasi II, pol II exo(-), pol IV e pol V &egrave; stato esaminato. POL II exo(-) era pi&ugrave; efficiente. Gli esperimenti di sintesi di translesion qualitativa ha mostrato che pol II exo(-) incorpora preferenzialmente T fronte C4-AP, seguita nell&#39;ordine da dG, dA e dC. Incorporazione di timidina fronte C4&#39;-AP &egrave; distinto dall&#39;interazione exonuclease pol II con un normale sito di AP in un modello altrimenti identico. Questi esperimenti in vitro suggeriscono bypass polimerasi possono svolgere un ruolo cruciale nella sopravvivenza delle cellule in cui viene prodotta la C4-AP, che a differenza di un tipico sito di AP, la lesione C4-AP non pu&ograve; seguire la &quot;regola-A&quot;. L&#39;interazione tra bypassare le polimerasi e una lesione C4-AP potrebbe spiegare i livelli elevati di g--&gt; g:c transversioni nelle cellule trattate con bleomicina.

Effetti in vitro di un C4&#39;-ossidato abasic sito sul DNA polimerasi.

DNA &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x50B5;&#x5238;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x6B63;&#x5F0F;&#x306A;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C4&#39;-&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (C4-AP) &#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x7D04; 40 &#xFF05; &#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C4 &#x306E;&#x52B9;&#x679C; &#39;-Klenow &#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306A;&#x3057; 3&#39; 5&#39; exonuclease--&gt; &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x512A;&#x5148;&#x7684; dA &#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x76EE; dG &#x76EE; dC&#x3001;T C4 AP &#x306E;&#x5411;&#x304B;&#x3044;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Klenow &#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x6B63;&#x898F;&#x306E; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x4EE5;&#x5916;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30DD;&#x30EB; II &#x30DD;&#x30EB; II exo(-)&#x3001;pol IV&#x3001;pol V &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x5EF6;&#x9577;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DD;&#x30EB; II exo(-) &#x306F;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8CEA;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x4E57;&#x308A;&#x8D8A;&#x3048;&#x5408;&#x6210;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB; II exo(-) &#x512A;&#x5148;&#x7684; T &#x304C;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; C4-AP dG&#x3001;dA&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; dC &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x9806;&#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3002;&#x30C1;&#x30DF;&#x30B8;&#x30F3; C4 &#x53CD;&#x5BFE; &#39;-AP &#x306F;&#x30DD;&#x30EB; II &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EE5;&#x5916;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x5B9A;&#x671F;&#x7684;&#x306A; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; in vitro &#x5B9F;&#x9A13;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9; &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F; C4 AP &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3046;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;C4 AP &#x75C5;&#x5909;&quot;A rule&quot;&#x306B;&#x7D9A;&#x304B;&#x306A;&#x304F;&#x3066;&#x3082;&#x3088;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9; &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; C4 AP &#x75C5;&#x5909;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E; T:A transversions--&gt; G:C &#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

C4 &#x306E; in vitro &#x52B9;&#x679C; &#39;-&#x306E; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x6577;&#x5730;&#x3002;

DNA &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD568;&#xAED8; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; glycosidic &#xCC44;&#xAD8C;&#xC758; &#xACF5;&#xC2DD;&#xAC00; &#xC218; &#xBD84;&#xD574;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. C 4&#xAC00; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (C4-ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4;) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCD1; &#xBCC0; bleomycin&#xC744; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC57D; 40%&#xB97C; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C 4&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; 3&#39; 5&#39; exonuclease &#xD65C;&#xB3D9;--&gt; Klenow &#xD30C;&#xD3B8;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4; &#xD1B5;&#xD569; &amp;gt; dG &amp;gt; dC, T c 4 AP &#xBC18;&#xB300;. &#xB450; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xACFC;&#xAC70; &#xB1CC;&#xAD00;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC2E4;&#xD5D8; Klenow&#xC774; &#xB450; &#xC774;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xCCB4; &#xD3F4; &#xD3F4; II, pol II exo(-), pol IV &#xBC0F; pol V &#xB1CC;&#xAD00;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Pol II exo(-)&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778;. &#xC9C8;&#xC801; translesion &#xD569;&#xC131; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; pol II exo(-)&#xB294; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569; T c 4&#xAC00;-AP, dG, &#xAC80;&#xC0AC;, &#xBC0F; Dc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBC18;&#xB300;. &#xD2F0; &#xBBF8; &#xB518; &#xC815; &#xAD00; C4 &#xBC18;&#xB300; &#39;-AP&#xB294; pol II exonuclease &#xC0C1;&#xD638; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC720; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC81C;&#xC548; &#xBC14;&#xC774;&#xD328;&#xC2A4; &#xD3F4; C4 AP &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; c 4 AP &#xBCD1; &#xBCC0; &quot;A &#xADDC;&#xCE59;&quot;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD3F4; &#xBB34;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; c 4 AP &#xBCD1; &#xBCC0; G:C bleomycin&#xC744; &#xB2E4;&#xB8F0; &#xB54C;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; T:A transversions--&gt;&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

C 4&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xD6A8;&#xACFC; &#39;-DNA &#xD3F4;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;.

El da&ntilde;o oxidativo al ADN produce un sitios resultantes de la hidr&oacute;lisis formal de enlaces glucos&iacute;dicos de los nucle&oacute;tidos, junto con una variedad de sitios de un oxidado. El C4&#39;-sitio un oxidado (C4-AP) es producido por varios agentes da&ntilde;an el ADN. Esta lesi&oacute;n representa aproximadamente el 40% de los da&ntilde;os en el ADN producido por bleomicina. El efecto de un C4&#39;-oxidado un sitio incorporado en un sitio definido en una plantilla fue examinado en Klenow fragmentos con y sin 3&#39;--&gt; 5&#39; actividad exonucleasa. Ambas enzimas preferencial incorporan dA &gt; dG &gt; dC, T frente a C4-AP. Ni enzima es capaz de ampliar la cartilla m&aacute;s all&aacute; de la lesi&oacute;n. Experimentos con sitios regulares de AP en una plantilla id&eacute;ntico indican que Klenow no distingue entre estos dos sitios un dispares. Extensi&oacute;n de la cartilla por alternativa polimerasas pol II, pol II exo(-), pol IV y pol V fue examinado. Pol II exo(-) fue m&aacute;s eficiente. Translesion cualitativa s&iacute;ntesis experimentos demostraron que pol II exo(-) preferencial incorpora T frente a C4-AP, seguido en orden por dG, dA y dC. Incorporaci&oacute;n de timidina enfrente C4&#39;-AP es distinta de la interacci&oacute;n de exonucleasa pol II con un sitio regular de la AP en una plantilla id&eacute;ntico. Estos experimentos in vitro sugieren que la derivaci&oacute;n polimerasas pueden desempe&ntilde;ar un papel crucial en la supervivencia de las c&eacute;lulas donde se produce el C4-AP, y a diferencia de un t&iacute;pico sitio de AP, la lesi&oacute;n de C4-AP no puede seguir el &quot;A-rule&quot;. La interacci&oacute;n entre puente polimerasas y una lesi&oacute;n C4-AP podr&iacute;a explicar los altos niveles de G:C--&gt; T:A transversions en c&eacute;lulas tratadas con bleomicina.

Efectos in vitro de un C4&#39;-sitio un oxidado en DNA polimerasas.

&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x901A;&#x5E38;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A; noninstructive &#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;C1&#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9; (-2 deoxyribonolactone L) &#x7531;&#x51E0;&#x4E2A; DNA &#x7834;&#x574F;&#x4EE3;&#x7406;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; &gamma; &#x8F90;&#x548C; &#xFF08;NCS&#xFF09; neocarzinostatin &#x53D1;&#x8272;&#x56E2;&#x3002;C1 &#x7684;&#x5F71;&#x54CD; &#39;-SOS &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7CBE;&#x901A;&#x548C;-&#x4E0D;&#x8DB3;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7EB3;&#x5165;&#x5355;&#x7EDE;&#x8D28;&#x7C92;&#x4E2D;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E4B;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x5305;&#x542B;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9; (AP) &#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x80A9;&#x5E76;&#x80A9;&#x3002;&#x4E0E; AP &#x7684;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;dA &#x548C; dG &#x88AB;&#x7EB3;&#x5165;&#x6700;&#x5E38;&#x542B; L &#x8D28;&#x7C92;&#x590D;&#x5236;&#x65F6;&#x3002;DG:dA &#x5C06;&#x7EB3;&#x5165;&#x7684;&#x6BD4;&#x7387;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x672C;&#x5730;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x591A;&#x5143;&#x81F3; 2.2 0.9&#x3002;Translesion dA &#x7684;&#x6210;&#x7ACB;&#x4E3A;&#x6CD5;&#x56E2;&#x7684;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D; neocarzinostatin &#x53D1;&#x8272;&#x56E2;&#x7684; DNA &#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5927;&#x91CF;&#x7684; G.C--&gt; A.T &#x8F6C;&#x6362; [Povirk &#x548C; Goldberg (1986 &#x5E74;) &#x6838;&#x9178; res.14&#xFF0C;1417&#x5E74;] &#x7684;&#x610F;&#x89C1;&#x662F;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x5E76;&#x652F;&#x6301; L &#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x662F; 100%&#x81F4;&#x547D;&#x4E09;&#x91CD;&#x6316;&#x7A7A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F; pol II&#xFF0C;pol &#x56DB;&#x548C; pol translesion &#x4FEE;&#x590D;&#x7F3A;&#x9677;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5408;&#x6210;&#x4E94;.&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A; pol V &#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684; L &#x548C; AP.&#x91CD;&#x8981;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;-1 frameshifts 5&#39;-d(CL) &#x5E8F;&#x5217;&#x5B58;&#x5728; pol V &#x4E0B;&#x90FD;&#x6210;&#x7ACB;&#x4E86;&#x56DA;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x6CB9;&#x6599;&#x7684;&#x4E13;&#x5C5E;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7F3A;&#x9677; V &#x578B;&#x3002;&#x5728; 5&#39; &#x7AEF;&#x7684; L &#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x662F; dT &#x6216; dG &#x4E0D;&#x5F62;&#x6210;&#x7A81;&#x53D8;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;&#x5220;&#x9664; pol II &#x6216; pol &#x56DB;&#x4E86;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x5F71;&#x54CD; L &#x542B;&#x8D28;&#x7C92;&#x590D;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;-1 &#x7A81;&#x53D8;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x4ECE;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x80BA;&#x708E;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x5E76;&#x6392;&#x5426;&#x5219;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x542B; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x8BF4;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x65E2;&#x4E0D;&#x5E94;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x7684;&#x4E00;&#x6837; noninstructive &#x8FDB;&#x884C;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3002;

2 Deoxyribonolactone &#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x670D;&#x4ECE; A &#x89C4;&#x5219;&#x3002;

Abasic sites are often referred to as noninstructive lesions. The C1'-oxidized abasic site (2-deoxyribonolactone, L) is produced by several DNA damaging agents, including gamma-radiolysis and the neocarzinostatin chromophore (NCS). The effects of a C1'-oxidized abasic site incorporated at a defined site in single-stranded plasmid were examined in SOS polymerase-proficient and -deficient Escherichia coli. For comparison, experiments utilizing plasmids containing an abasic site (AP) were carried out side by side. In contrast to plasmid containing AP, dA and dG were incorporated most often when plasmid containing L was replicated. The ratio of dG:dA incorporation depended upon local sequence and varied from 0.9 to 2.2. High levels of translesion incorporation of dA are consistent with previous observations that treatment of DNA with the neocarzinostatin chromophore resulted in large amounts of G.C --> A.T transitions [Povirk and Goldberg (1986) Nucleic Acids Res. 14, 1417] and support the proposal that L is the source of these mutations. Both abasic lesions were 100% lethal in triple knockout cells lacking pol II, pol IV, and pol V. Analysis of translesion synthesis in repair-deficient cells revealed that pol V played a significant role in replication of L and AP. Significant levels of -1 frameshifts were formed in 5'-d(CL) sequences in the presence of pol V and were the exclusive product in pol V-deficient cells. Frameshift products were not formed when the nucleotide on the 5'-side of L was either dT or dG. Deleting pol II or pol IV had only modest effects on replication of L-containing plasmid but significantly decreased the amount of -1 frameshift product formed from an AP lesion. Experiments carried out side by side using otherwise identical plasmids containing an AP site illustrate the distinct properties of these two abasic lesions and that neither should be thought of as noninstructive.

Mutagenic effects of 2-deoxyribonolactone in Escherichia coli. An abasic lesion that disobeys the A-rule.

Sites de base sont souvent appel&eacute;es l&eacute;sions noninstructive. La C1 &quot;-site duprojet oxyd&eacute; (2-deoxyribonolactone, L) est produit par plusieurs ADN endommagent les agents, y compris la radiolyse gamma et le chromophore neocarzinostatin (NCS). Les effets d&#39;une C1&#39;-oxyd&eacute; site fondamental int&eacute;gr&eacute; &agrave; un site d&eacute;fini en simple brin plasmide ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;s chez SOS polym&eacute;rase comp&eacute;tents et - d&eacute;ficient de Escherichia coli. Pour comparaison, exp&eacute;riences utilisant des plasmides contenant un site de base (AP) ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;es en parall&egrave;le. Contrairement aux plasmides contenant des AP, dA et dG sont incorpor&eacute;s plus souvent lorsque le plasmide contenant L ont &eacute;t&eacute; r&eacute;pliqu&eacute;e. Le taux d&#39;incorporation de dG:dA d&eacute;pendait de la s&eacute;quence locale et variait de 0,9 &agrave; 2,2. Des niveaux &eacute;lev&eacute;s d&#39;incorporation trans-l&eacute;sion de dA sont en accord avec les observations ant&eacute;rieures que traitement d&#39;ADN avec le chromophore neocarzinostatin conduit &agrave; des quantit&eacute;s importantes de Gadou--&gt; abdel transitions [Povirk et acides nucl&eacute;iques Goldberg (1986) res. 14, 1417] et appuient la proposition que L est la source de ces mutations. Les deux l&eacute;sions duprojet atteignaient 100 % l&eacute;tale dans les cellules de knockout triple sans pol II, IV de pol, et pol V. analyse de synth&egrave;se trans-l&eacute;sion dans les cellules d&eacute;ficientes en r&eacute;paration a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que pol V a jou&eacute; un r&ocirc;le important dans la r&eacute;plication de L et AP. significatifs des niveaux des d&eacute;phasages-1 ont &eacute;t&eacute; form&eacute;s dans des s&eacute;quences de 5&#39;-d(CL) en pr&eacute;sence de pol V et sont le produit exclusif de pol cellules d&eacute;ficientes V. Produits de d&eacute;phasage n&#39;&eacute;taient pas form&eacute;es quand le nucl&eacute;otide sur 5&#39;-c&ocirc;t&eacute; de L &eacute;tait dT ou dG. Suppression de pol II et pol IV eu que des effets modestes sur la r&eacute;plication du plasmide contenant L mais significativement diminu&eacute; la quantit&eacute; de produit de changement de phase-1 form&eacute; d&#39;une l&eacute;sion de l&#39;AP. Exp&eacute;riences men&eacute;es c&ocirc;te &agrave; c&ocirc;te &agrave; l&#39;aide sinon identiques plasmides contenant un site AP illustrent les propri&eacute;t&eacute;s distinctes de ces deux l&eacute;sions duprojet et que ne doit &ecirc;tre consid&eacute;r&eacute;e comme noninstructive.

Effets mutag&egrave;nes du 2-deoxyribonolactone chez Escherichia coli. Une l&eacute;sion fondamental qui d&eacute;sob&eacute;it &agrave; l&#39;A-rule.

Mutagene Wirkungen von 2-Desoxyribonolacton in Escherichia coli. Ein abasischen L&#xE4;sion, die die A-Regel gehorcht.

Abasic siti sono spesso indicati come lesioni noninstructive. Il C1&#39;-sito abasic ossidato (2-deoxyribonolactone, L) &egrave; prodotta da diversi DNA dannosi agenti, ivi compresi i gamma-radiolisi e il neocarzinostatin cromoforo (NCS). Gli effetti di un C1&#39;-ossidato sito abasic incorporato in un sito definito in single-stranded plasmide sono state esaminate in SOS polimerasi-competente e - carenza Escherichia coli. Per confronto, esperimenti utilizzando plasmidi contenenti un sito abasic (AP) sono stati eseguiti fianco a fianco. A differenza del plasmide contenente AP, dA e dG furono incorporate pi&ugrave; spesso quando &egrave; stato replicato il plasmide contenente L. Il rapporto di dG:dA incorporazione dipendeva sequenza locale e varia da 0,9 a 2.2. Alti livelli di translesion incorporazione dA sono coerenti con le osservazioni precedenti che trattamento del DNA con il cromoforo neocarzinostatin ha portato a grandi quantit&agrave; di Galetta--&gt; A.T. transizioni [Povirk e Goldberg (1986) degli acidi nucleici res. 14, 1417] e sostengono la proposta che L &egrave; l&#39;origine di queste mutazioni. Entrambe le lesioni abasic erano letali in celle triple knockout difettare pol II, pol IV, al 100% e pol V. analisi della sintesi di translesion in riparazione-deficienti cellule ha rivelato che pol V ha giocato un ruolo significativo nella replica di L e AP significativi livelli di retromutazione-1 sono stati formati in sequenze 5&#39;-d(CL) in presenza di pol V e sono stati il prodotto esclusivo in pol cellule V-carenti. Frameshift prodotti non erano formate quando il nucleotide sulla 5&#39;-lato di L era dT o dG. L&#39;eliminazione di pol II o pol IV aveva solo modesti effetti sulla replicazione del plasmide contenente L ma significativamente diminuito la quantit&agrave; di prodotto-1 frameshift formata da una lesione AP. Le sperimentazioni condotte fianco altrimenti utilizzando identici plasmidi contenenti un sito AP illustrano le propriet&agrave; di queste due lesioni abasic distinte e che nessuno dovrebbe essere pensato come noninstructive.

Effetti mutageni di 2-deoxyribonolactone in Escherichia coli. Lesione abasic che disobbedisce A-regola.

&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070; noninstructive &#x75C5;&#x5909;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C1&#39;-&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (L 2 deoxyribonolactone&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E; &gamma; &#x7DDA;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3001;&#x30CD;&#x30AA;&#x30AB;&#x30EB;&#x30C1;&#x30CE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;&#x767A;&#x8272;&#x56E3; (NCS) &#x306A;&#x3069;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; DNA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C1 &#x306E;&#x52B9;&#x679C; &#39;-&#x5358;&#x4E00;&#x5EA7;&#x7901;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; SOS &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9054;&#x4EBA;&#x3068;&#x6B20;&#x640D;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (AP) &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x30D0;&#x30A4; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;AP &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684; L &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x8907;&#x88FD;&#x6642; dA &#x3068; dG &#x6700;&#x3082;&#x3088;&#x304F;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DG:dA &#x5B9A;&#x6B3E;&#x306E;&#x6BD4;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;0.9 &#x304B;&#x3089; 2.2 &#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DA &#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x4E57;&#x308A;&#x8D8A;&#x3048;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F; DNA &#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x30CD;&#x30AA;&#x30AB;&#x30EB;&#x30C1;&#x30CE;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30FB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A9;&#x30A2;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x7406;-9 A.T &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; [Povirk &#x30FB; &#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B0; (1986) &#x6838;&#x9178;&#x7814; 14, 1417&#x5E74;]--&gt; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x524D;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x3068;&#x6574;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;L &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x63D0;&#x6848;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x75C5;&#x5909; 100 &#xFF05; &#x30DD;&#x30EB; II&#x3001;pol IV &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB; &#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3068; pol V. &#x640D;&#x50B7;&#x4E57;&#x308A;&#x8D8A;&#x3048;&#x5408;&#x6210;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30DD;&#x30EB; V L &#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x691C;&#x6B7B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;-1 frameshifts &#x306E; 5&#39;-d(CL) &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; pol V &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;V &#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30DD;&#x30EB;&#x3067;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306A;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B; 5&#39; &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;-L &#x306E;&#x5074;&#x3060;&#x3063;&#x305F; dT &#x307E;&#x305F;&#x306F; dG&#x3002;&#x30DD;&#x30EB; II &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DD;&#x30EB; IV &#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B; L &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x307F;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x304C;&#x3001;AP &#x75C5;&#x5909;&#x304B;&#x3089;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;-1 &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5074;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x540C;&#x4E00; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x3068;&#x3057;&#x3066; noninstructive &#x306E;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

2-Deoxyribonolactone &#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x52B9;&#x679C;&#x3002;A &#x30EB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5F93;&#x308F;&#x306A;&#x3044;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x6027;&#x75C5;&#x5909;&#x3002;

Abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xC885;&#xC885; noninstructive &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. C1&#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (2-deoxyribonolactone, L) &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; DNA &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;, &#xAC10;&#xB9C8;-radiolysis &#xBC0F; neocarzinostatin &#xBC1C; (NCS)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. C 1&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#39;-&#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; SOS &#xD6A8;&#xC18C; &#xC2E4;&#xB825; &#xBC0F;-&#xACB0;&#xD54D; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xC704;&#xD574;, abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (AP)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xBCD1;&#xD589; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. L&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB420; &#xB54C;&#xC5D0; AP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xC640; dG &#xAC00;&#xC7A5; &#xC790;&#xC8FC; &#xD1B5;&#xD569; &#xD588;&#xB2E4;. DG:dA &#xC815; &#xBE44;&#xC728; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; 2.2 0.9&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591;. Translesion &#xBC95;&#xC778; &#xB2E4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xAD00;&#xCC30; &#xCE58;&#xB8CC; DNA&#xC758; neocarzinostatin &#xBC1C; A.T &#xC804;&#xD658; [Povirk&#xC640; &#xACE8;&#xB4DC; &#xBC84;&#xADF8; (1986) &#xD575; &#xC0B0; res. 14, 1417]--&gt; &#xB9CE;&#xC740; &#xC591;&#xC758; G.C&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xACFC; L&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC548;. &#xB450; abasic &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC744; 100% &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; pol II, pol IV, &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; 16 &#xAC15; &#xC140;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; pol &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; translesion &#xD569;&#xC131;&#xC758; V. &#xBD84;&#xC11D; &#xBC1C;&#xD45C; pol V L&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;-1 frameshifts AP. &#xC720;&#xD6A8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; pol V &#xC874;&#xC7AC; 5&#39;-d(CL) &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xACE0; &#xD588;&#xB2E4; &#xD22C;&#xD45C; &#xC18C;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xD488; V &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;. Frameshift &#xC81C;&#xD488; L&#xC758; 5&#39;-&#xC0AC;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xB294; dT &#xB610;&#xB294; dG &#xB54C; &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xC9C0; &#xB410;&#xB2E4;. Pol II &#xB610;&#xB294; pol IV&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; L&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xACB8;&#xC190; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD06C;&#xAC8C; AP &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;-1 frameshift &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB098;&#xB780;&#xD788; &#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC124;&#xBA85;&#xC774; &#xB450; abasic &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F;&#xB3C4; noninstructive&#xC758; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD55C;&#xB2E4; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

2-Deoxyribonolactone, &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xC601;&#xD5A5;. A &#xADDC;&#xCE59; disobeys&#xB294; abasic &#xBCD1; &#xBCC0;.

Un sitios se denominan a menudo lesiones noninstructive. El C1&#39;-sitio un oxidado (2-deoxyribonolactone, L) es producido por varios ADN da&ntilde;ando agentes, incluyendo gamma-radiolysis y el neocarzinostatin crom&oacute;foro (NCS). Los efectos de un C1&#39;-oxidado un sitio incorporado en un sitio definido en pl&aacute;smido monocatenario fueron examinados en SOS dominio polimerasa y - deficiente Escherichia coli. Para la comparaci&oacute;n, utilizando pl&aacute;smidos que conten&iacute;a un un sitio (AP) realizaron experimentos al lado. En contraste con el pl&aacute;smido que contiene AP, dA y dG se incorporaron m&aacute;s a menudo cuando se replic&oacute; el pl&aacute;smido que contiene L. La relaci&oacute;n de incorporaci&oacute;n dG:dA depend&iacute;a de secuencia local y vari&oacute; de 0.9 a 2.2. Altos niveles de translesion incorporaci&oacute;n de dA son consistentes con las observaciones anteriores que tratamiento de ADN con el crom&oacute;foro de neocarzinostatin dio lugar a grandes cantidades de G.C--&gt; A.T transiciones [Povirk y Goldberg (1986) los &aacute;cidos Nucleic res. 14, 1417] y apoyan la propuesta que L es la fuente de estas mutaciones. Ambas lesiones un 100% letal en c&eacute;lulas de triple nocaut falta pol II, IV de pol, y pol V. An&aacute;lisis de la s&iacute;ntesis de translesion en c&eacute;lulas deficientes de reparaci&oacute;n revel&oacute; que pol V jug&oacute; un papel importante en la replicaci&oacute;n de L y AP. significativos niveles de-1 mut&aacute;geno &#39; frameshift &#39; se formaron en secuencias de 5&#39;-d(CL) en presencia de pol V y fueron el producto exclusivo de pol c&eacute;lulas V-deficientes. Frameshift productos no se formaron cuando el nucle&oacute;tido en el lado 5&#39; de L era dT o dG. Eliminar IV II o pol pol ten&iacute;a s&oacute;lo efectos modestos en la replicaci&oacute;n del pl&aacute;smido que contiene L pero disminuy&oacute; significativamente la cantidad de producto-1 frameshift formado a partir de una lesi&oacute;n de AP. Experimentos llevados a cabo al lado de otra manera utilizando id&eacute;ntico de pl&aacute;smidos que contienen un sitio AP ilustran las distintas propiedades de estas dos lesiones una y que tampoco debe considerarse como noninstructive.

Efectos mutag&eacute;nicos de 2-deoxyribonolactone en Escherichia coli. Una lesi&oacute;n una que desobedece a la una de la regla.

Apurinic/apyrimidinic (AP) &#x7AD9;&#x70B9;&#x662F;&#x78B1;&#x80A0;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5F53;&#x9047;&#x5230;&#x5728; DNA &#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x963B;&#x6B62;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x6216;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; 2 &#x5C5E;&#x8C01;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x75C5;&#x53D8; (AP) &#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5316;&#x5B66;&#x4E0A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x56DB;&#x6C22;&#x544B;&#x5583;&#x6A21;&#x62DF; (F) &#x901A;&#x5E38;&#x7528;&#x4F5C;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x663E;&#x793A;&#x6A21;&#x578B;&#x75C5;&#x53D8;&#x548C; 2 &#x5C5E;&#x8C01;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x7EFC;&#x5408;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790; F &#x548C; AP &#x4E0D;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x80A9;&#x5E76;&#x80A9;&#x7684;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5; F &#x548C;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684; AP &#x6765;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6548;&#x5E94;&#x548C; SOS &#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x75C5;&#x53D8;&#x90FD;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; SOS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x548C;&#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540C;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B; F &#x6216; AP &#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x5355;&#x4E2A;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC; SOS&#xFF0C;F &#x548C; AP &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x6548;&#x5E94;&#x662F;&#x4E00;&#x6837;&#x7684;&#x3002;

&#x8FC7;&#x53BB; 2 &#x5C5E;&#x8C01;&#x7684;&#x8131;&#x6C27;&#x548C;&#x5176;&#x56DB;&#x6C22;&#x544B;&#x5583;&#x6A21;&#x62DF;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

Apurinic/apyrimidinic (AP) sites are alkali labile lesions that, when encountered during DNA replication, can block polymerases or potentially result in mutagenic events. Owing to the instability of 2-deoxyribose lesions (AP), a chemically stable tetrahydrofuran analog (F) is often used as a model of abasic sites. A comparison of the two lesions in Saccharomyces cerevisiae revealed that the model lesion and 2-deoxyribose have distinct in vivo effects. Comprehensive comparative analyses of F and AP have not been carried out in Escherichia coli. We conducted a side-by-side investigation of F and AP in E.coli to compare their biological effects and interactions with SOS polymerases. Both lesions were examined in SOS-induced and uninduced cells. Our studies reveal that in uninduced E.coli the effects of individual polymerases in the replication of plasmids containing F or AP are distinct. However, when cells are SOS-induced, the biological effects of F and AP are similar.

A comprehensive comparison of DNA replication past 2-deoxyribose and its tetrahydrofuran analog in Escherichia coli.

Sites apurinic/apyrimidinic (AP) sont des l&eacute;sions labiles alcalins qui, lorsque rencontr&eacute;e lors de la r&eacute;plication de l&#39;ADN, peut bloquer les polym&eacute;rases ou peut-&ecirc;tre cr&eacute;er des &eacute;v&eacute;nements mutag&egrave;nes. En raison de l&#39;instabilit&eacute; des l&eacute;sions 2-d&eacute;soxyribose (AP), un analogue de t&eacute;trahydrofuranne chimiquement stable (F) est souvent utilis&eacute; comme un mod&egrave;le de sites duprojet. Une comparaison des deux l&eacute;sions chez Saccharomyces cerevisiae a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la l&eacute;sion de mod&egrave;le et de 2-d&eacute;soxyribose ont diff&eacute;rents effets in vivo. Une analyse comparative globale des F et AP n&#39;ont pas &eacute;t&eacute; men&eacute;e chez Escherichia coli. Nous avons men&eacute; une enqu&ecirc;te de side-by-side de F et AP dans e. coli pour comparer leurs effets biologiques et les interactions avec les polym&eacute;rases de SOS. Les l&eacute;sions ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;es dans les cellules de SOS-induits et non induits. Nos &eacute;tudes r&eacute;v&egrave;lent que, dans e. coli non induits, les effets des polym&eacute;rases individuels dans la r&eacute;plication des plasmides contenant F ou AP sont distinctes. Toutefois, lorsque les cellules sont le fait de SOS, les effets biologiques des F et AP sont similaires.

Une comparaison d&eacute;taill&eacute;e de la r&eacute;plication de l&#39;ADN ancien 2-d&eacute;soxyribose et ses t&eacute;trahydrofuranne analogique chez Escherichia coli.

Ein umfassender Vergleich der DNA-Replikation vergangenen 2-Desoxyribose und seine Tetrahydrofuran analog in Escherichia coli.

Apurinic/apyrimidinic (AP) siti sono alcali labili lesioni che, quando vengono rilevati durante la replicazione del DNA, possono bloccare le polimerasi o potenzialmente causare eventi mutageni. A causa dell&#39;instabilit&agrave; delle lesioni di 2-deossiribosio (AP), un analogo chimicamente stabile tetraidrofurano (F) &egrave; spesso usato come modello di abasic siti. Un confronto tra le due lesioni in Saccharomyces cerevisiae ha rivelato che la lesione modello e 2-desossiribosio sono distinti effetti in vivo. Complete analisi comparative di F e AP non effettuati in Escherichia coli. Abbiamo condotto un&#39;indagine-by-side di F e AP in e. coli per confrontare i loro effetti biologici e le interazioni con le polimerasi di SOS. Entrambe le lesioni sono state esaminate in cellule indotta da SOS e uninduced. I nostri studi rivelano che in e. coli uninduced gli effetti dei singoli polimerasi nella replicazione dei plasmidi contenenti F o AP sono distinti. Tuttavia, quando le cellule sono SOS-indotta, gli effetti biologici di F e AP sono simili.

Un confronto completo della replica del DNA del passato 2-desossiribosio e sua tetraidrofurano analogico in Escherichia coli.

Apurinic/apyrimidinic (AP) &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x3001;DNA &#x8907;&#x88FD;&#x4E2D;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B; &#x3002;2-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x30FC;&#x30B9;&#x75C5;&#x5909; (AP) &#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED; &#x30D5;&#x30E9;&#x30F3; &#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; &#xFF08;F&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x75C5;&#x5909;&#x3068; 2-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x30FC;&#x30B9;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30DC;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;F &#x3068; AP &#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;.&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;F &#x3068; AP &#x30A8;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EA;&#x30D2;&#x30A2;&#x5C5E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x52B9;&#x679C;&#x3084; SOS &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9; &#x30D0;&#x30A4; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x75C5;&#x5909; SOS &#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x672A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x672A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; F &#x307E;&#x305F;&#x306F; AP &#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;SOS &#x8A98;&#x5C0E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;F &#x3068; AP &#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

DNA &#x8907;&#x88FD;&#x904E;&#x53BB; 2-&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED; &#x30D5;&#x30E9;&#x30F3;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;

Apurinic/apyrimidinic (AP) &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC815;&#xD55C; &#xBCD1; &#xBCC0;, DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD3F4; &#xCC28;&#xB2E8;&#xD560; &#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xC0DD;. 2 Deoxyribose &#xBCD1; &#xBCC0; (AP)&#xC758; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; tetrahydrofuran &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; (F) &#xC885;&#xC885; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xB450; &#xBCC0;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBAA8;&#xB378; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBC0F; 2 deoxyribose &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; in vivo &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. F&#xC640; ap &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC758; &#xC885;&#xD569; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xB418;&#xC9C0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; SOS &#xD3F4; &#xC0C1;&#xD638; &#xBE44;&#xAD50; F &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; AP&#xC758; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC2E4;&#xC2DC;. &#xB450; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC870; &#xB09C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; uninduced &#xC140;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; uninduced &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; F &#xB610;&#xB294; AP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xD3F4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACE0;&#xC720;&#xAC00; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC870; &#xB09C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C;, F&#xC640; AP&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACFC;&#xAC70; 2 deoxyribose &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; tetrahydrofuran &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xBE44;&#xAD50;.

Sitios apurinic/apyrimidinic (AP) son lesiones l&aacute;bil de &aacute;lcali que, cuando durante la replicaci&oacute;n del ADN, puede bloquear polimerasas o resultar potencialmente en eventos mutag&eacute;nicos. Debido a la inestabilidad de las lesiones 2-desoxirribosa (AP), un an&aacute;logo de tetrahidrofurano qu&iacute;micamente estable (F) se utiliza a menudo como un modelo de un sitios. Una comparaci&oacute;n de las dos lesiones en Saccharomyces cerevisiae revel&oacute; que la lesi&oacute;n de modelo y 2-desoxirribosa tienen distintos efectos en vivo. An&aacute;lisis comparativos exhaustivo de F y AP no se han llevado a en Escherichia coli. Llevamos a cabo una investigaci&oacute;n de la side-by-side de F y AP en e. coli para comparar sus efectos biol&oacute;gicos y las interacciones con polimerasas de SOS. Ambas lesiones fueron examinadas en c&eacute;lulas uninduced y SOS-inducida. Nuestros estudios revelan que en e. coli uninduced los efectos de polimerasas individuales en la replicaci&oacute;n de pl&aacute;smidos que contienen F o AP son distintos. Sin embargo, cuando las c&eacute;lulas son SOS-inducida, los efectos biol&oacute;gicos de F y AP son similares.

Una comparaci&oacute;n completa de replicaci&oacute;n del ADN m&aacute;s all&aacute; de la 2-desoxirribosa y su an&aacute;logo en Escherichia coli de tetrahidrofurano.

C4&#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9; (C4-AP) &#x4EA7;&#x751F;&#x5728; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x5360;&#x7EA6; 40%&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x5BF9;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x590D;&#x5236;&#x7684; C4-AP &#x5F71;&#x54CD;&#x51B3;&#x5FC3;&#x4F7F;&#x7528;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x5185;&#x5207;&#x9176;&#x548C; postlabeling (REAP&#xFF09; &#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8D28;&#x7C92;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728; SOS &#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x542B;&#x6709; C4-AP &#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x4EA7;&#x54C1;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x590D;&#x5236;&#x4E09;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;&#x5168;&#x957F;&#x4EA7;&#x54C1;&#x662F;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x672C;&#x5730;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x975E; SOS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&quot;A &#x89C4;&#x5219;&quot;&#x4E4B;&#x540E;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;C4-AP &#x662F;&#x4EA7;&#x751F;&#x663E;&#x8457;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E09;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7F3A;&#x5931;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#x3002;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7279;&#x5B9A;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x534F;&#x8C03;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA; pol II &#x548C;&#x6CB9;&#x6599;&#x56DB;&#x4E09;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B; SOS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x8BE6;&#x5217;&#x75C5;&#x53D8;&#x51A0;&#x72B6;&#x52A8;&#x8109;&#x65C1;&#x8DEF;&#x642D;&#x6865;&#x672F;&#x97F3;&#x4E50;&#x4F1A;&#x5728;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x793A;&#x4F8B;&#x3002;&#x4E09;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x5176;&#x4ED6;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x671F;&#x95F4;&#x4E0D;&#x9075;&#x5B88;&#x548C;&#x5F88;&#x5C11;&#x7531;&#x7B28;&#x91CD;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x5BF9; DNA &#x590D;&#x5236;&#x7684; C4-&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x80BA;&#x708E;&#x5F71;&#x54CD;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;C4-AP &#x75C5;&#x53D8;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x8FD8;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5305;&#x542B;&#x5C55;&#x793A;&#x6539;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

C4 &#x7684;&#x5F71;&#x54CD; &#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E0A;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x5F02;&#x5E38;&#x5927;&#x7684;&#x5220;&#x9664;&#x662F;&#x5C0F;&#x75C5;&#x53D8;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;

The C4'-oxidized abasic site (C4-AP) is produced in DNA as a result of oxidative stress by a variety of agents. For instance, the lesion accounts for approximately 40% of the DNA damage produced by the antitumor antibiotic bleomycin. The effect of C4-AP on DNA replication in Escherichia coli was determined using the restriction endonuclease and postlabeling (REAP) method. Three-nucleotide deletion products are the sole products observed following replication of plasmids containing C4-AP under SOS conditions in wild-type cells. Full-length products are formed in varying amounts depending upon the local sequence in wild-type cells under non-SOS-induced conditions. The "A-rule" is followed for the formation of substitution products. C4-AP is the first example of a DNA lesion that produces significant levels of three-nucleotide deletions in a variety of sequence contexts. Experiments carried out in cells lacking specific polymerases reveal that formation of three-nucleotide deletion products results from a coordinated effort involving pol II and pol IV. This is the first example in which these SOS inducible polymerases are shown to work in concert during lesion bypass. Three-nucleotide deletions are not observed during the replication of other abasic lesions, and are rarely produced by bulky adducts. The effect of C4-AP on DNA replication suggests a significant role for this lesion in the cytotoxicity of bleomycin. Formation of the C4-AP lesion may also be responsible for the formation of mutant proteins containing single-amino acid deletions that exhibit altered phenotypes.

Effects of the C4'-oxidized abasic site on replication in Escherichia coli. An unusually large deletion is induced by a small lesion.

La C4 &quot;-site duprojet oxyd&eacute; (C4-AP) est produit dans l&#39;ADN &agrave; la suite de stress oxydatif par divers agents. Par exemple, la l&eacute;sion repr&eacute;sente environ 40 % des dommages d&#39;ADN produites par la bl&eacute;omycine antibiotique antitumorale. L&#39;effet de la C4-PT sur la r&eacute;plication de l&#39;ADN chez Escherichia coli a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e &agrave; l&#39;aide de l&#39;endonucl&eacute;ase de restriction et de la m&eacute;thode post-marquage (REAP). Produits de suppression de trois nucl&eacute;otides sont la r&eacute;plication suivante observ&eacute;s seuls produits des plasmides contenant C4-AP dans des conditions de SOS dans les cellules de type sauvage. Produits sur toute la longueur sont forment en quantit&eacute;s variables selon l&#39;ordre local dans les cellules de type sauvage dans des conditions non-SOS induite. Le &laquo; A-rule &raquo; s&#39;applique &agrave; la formation de produits de substitution : C4-AP est le premier exemple d&#39;une l&eacute;sion de l&#39;ADN qui produit des niveaux &eacute;lev&eacute;s de suppressions de trois nucl&eacute;otides dans divers contextes de la s&eacute;quence. Exp&eacute;riences men&eacute;es dans les cellules sans les polym&eacute;rases sp&eacute;cifiques r&eacute;v&egrave;lent que la formation de la suppression de trois nucl&eacute;otides produits r&eacute;sultats de pol II et pol IV d&#39;un effort coordonn&eacute;. C&#39;est le premier exemple dans lequel ces polym&eacute;rases inductibles de SOS sont pr&eacute;sent&eacute;es pour travailler de concert au cours de la d&eacute;rivation de la l&eacute;sion. Suppressions de trois nucl&eacute;otides ne sont pas observ&eacute;es au cours de la r&eacute;plication d&#39;autres l&eacute;sions duprojet et sont rarement produites par encombrants adduits. L&#39;effet de la C4-PT sur la r&eacute;plication de l&#39;ADN sugg&egrave;re un r&ocirc;le important pour cette l&eacute;sion dans la cytotoxicit&eacute; de la bl&eacute;omycine. Formation de la l&eacute;sion C4-AP peut &eacute;galement &ecirc;tre responsable de la formation de prot&eacute;ines mutantes contenant des destructions acides amin&eacute;es unique pr&eacute;sentant des ph&eacute;notypes modifi&eacute;s.

Effets de la C4 &quot;-oxyd&eacute; site fondamental sur la r&eacute;plication dans Escherichia coli. Une exceptionnellement grande d&eacute;l&eacute;tion est induite par une petite l&eacute;sion.

Auswirkungen der C4&#x26;#39;-oxidiert Basenl&#xFC;cke auf die Replikation in Escherichia coli. Eine ungew&#xF6;hnlich gro&#xDF;e L&#xF6;schung wird von einer kleinen L&#xE4;sion induziert.

La C4&#39;-sito abasic ossidato (C4-AP) &egrave; prodotto nel DNA in seguito a stress ossidativo da una variet&agrave; di agenti. Per esempio, la lesione rappresenta circa il 40% dei danni del DNA prodotto dalla bleomicina antibiotico antitumorale. L&#39;effetto di AP-C4 sulla replicazione del DNA in Escherichia coli &egrave; stata determinata utilizzando l&#39;endonucleasi di restrizione e il metodo postlabeling (REAP). Delezione di tre nucleotidi prodotti &egrave; la replica di seguenti prodotti unico osservati dei plasmidi contenenti C4-AP in condizioni di SOS in cellule wild-type. Full-length prodotti si formano in quantit&agrave; variabili a seconda della sequenza locale nel selvaggio-tipo celle in condizioni di non-SOS-indotta. La &quot;regola-A&quot; &egrave; seguita per la formazione di prodotti di sostituzione. C4-AP &egrave; il primo esempio di una lesione del DNA che produce livelli significativi di tre-nucleotide eliminazioni in una variet&agrave; di contesti di sequenza. Esperimenti condotti in cellule privo di specifiche polimerasi rivelano quello formazione dei risultati prodotti delezione di tre nucleotidi da uno sforzo di coordinamento che coinvolgono IV II e pol pol. Questo &egrave; il primo esempio in cui queste polimerasi inducibile SOS sono dimostrate di funzionare in concerto durante la lesione tangenziale. Tre-nucleotide delezioni non sono osservati durante la replica di altre lesioni abasic e raramente sono prodotte da ingombranti addotti. L&#39;effetto di AP-C4 sulla replicazione del DNA suggerisce un ruolo significativo per questa lesione nella citotossicit&agrave; di bleomicina. Formazione della lesione C4-AP pu&ograve; anche essere responsabile della formazione delle proteine mutanti contenenti singolo-amino acidi delezioni che presentano fenotipi alterati.

Gli effetti della C4&#39;-sito abasic ossidato sulla replica in Escherichia coli. Un insolitamente ampia delezione &egrave; indotta da una piccola lesione.

C4&#39;-&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (C4-AP) &#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x751F;&#x7523; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x7D04; 40 &#xFF05; &#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E; DNA &#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; C4 AP &#x306F;&#x5236;&#x9650;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; postlabeling (REAP &#x306E;) &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;3 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x88FD;&#x54C1; C4 AP SOS &#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5E95;&#x88FD;&#x54C1;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6B21;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE; SOS &#x8A98;&#x8D77;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x91CF;&#x3067;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&quot;A rule&quot;&#x7F6E;&#x63DB;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x7D9A;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C4 AP 3 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x305D;&#x306E; 3 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x88FD;&#x54C1;&#x7D50;&#x679C;&#x30DD;&#x30EB; II &#x3068; pol IV &#x306E;&#x5354;&#x50CD;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x75C5;&#x5909;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; SOS &#x8A98;&#x5C0E;&#x578B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;3 &#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x304C;&#x307F;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3081;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x304B;&#x3055;&#x3070;&#x308B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x7523;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7269;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DNA &#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; C4 AP &#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C4 AP &#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3082;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5358;&#x4E00;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x9178;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5909;&#x7570;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

C4 &#x306E;&#x52B9;&#x679C; &#39;-&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x6577;&#x5730;&#x3002;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x524A;&#x9664;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

C 4&#xAC00; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (C4-ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4;) &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; DNA&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xBCD1; &#xBCC0; antitumor &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; bleomycin&#xC744; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC57D; 40%&#xB97C; &#xCC28;&#xC9C0;. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; C4 AP &#xD6A8;&#xACFC; &#xAE08;&#xC9C0; endonuclease (REAP) postlabeling &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. 3-&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC81C;&#xD488;&#xC740; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBCF5;&#xC81C; SOS &#xC870;&#xAC74; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140; c 4&#xAC00; AP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC81C;&#xD488;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xC81C;&#xD488; SOS &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140;&#xC5D0; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE08;&#xC561;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB300;&#xCCB4; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &quot;A &#xADDC;&#xCE59;&quot; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC5D0;. C4-AP &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC0AD;&#xC81C; 3 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; DNA &#xBCC0;&#xC758; &#xCCAB; &#xC608;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD3F4; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8; &#xD615;&#xC131; pol II &#xBC0F; pol IV &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; 3 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC81C;&#xD488; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC608;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; SOS &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD3F4; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC6B0;&#xD68C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCF58;&#xC11C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3-&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB2E4;&#xB978; abasic &#xBCD1; &#xBCC0;, &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xAC70;&#xC758; &#xBD80;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;. DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; C4 AP&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; bleomycin &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. C4-AP &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC9C0;&#xC9C0; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C 4&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#39;-&#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;. &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El C4&#39;-sitio un oxidado (C4-AP) se produce en el ADN como resultado de estr&eacute;s oxidativo por una variedad de agentes. Por ejemplo, la lesi&oacute;n representa aproximadamente el 40% de los da&ntilde;os en el ADN producido por la bleomicina antibi&oacute;tica antitumoral. El efecto de C4-AP en la replicaci&oacute;n del ADN en Escherichia coli se determin&oacute; usando el m&eacute;todo postlabeling (REAP) y endonucleasa de restricci&oacute;n. Productos de la eliminaci&oacute;n de tres nucle&oacute;tidos son la replicaci&oacute;n siguientes observada de productos &uacute;nica de pl&aacute;smidos que contienen C4-AP bajo condiciones de SOS en c&eacute;lulas de tipo salvaje. Productos de larga duraci&oacute;n se forman en cantidades variables dependiendo de la secuencia local en c&eacute;lulas de tipo salvaje en condiciones no-SOS-inducida. El &quot;A-rule&quot; es seguido por la formaci&oacute;n de productos de sustituci&oacute;n. C4-AP es el primer ejemplo de una lesi&oacute;n de ADN que produce niveles significativos de eliminaciones de tres nucle&oacute;tidos en una variedad de contextos de secuencia. Experimentos realizados en las c&eacute;lulas que carec&iacute;an de polimerasas espec&iacute;ficas revelan que la formaci&oacute;n de los resultados de productos de deleci&oacute;n de tres nucle&oacute;tidos de un trabajo coordinado de pol II y pol IV. Este es el primer ejemplo en que aparecen estas polimerasas inducibles de SOS para trabajar en conjunto durante el puente de la lesi&oacute;n. Eliminaciones de tres nucle&oacute;tidos no se hayan observado durante la replicaci&oacute;n de otras lesiones un y raramente son producidos por voluminosos aductores. El efecto de C4-AP en la replicaci&oacute;n del ADN sugiere un papel importante para esta lesi&oacute;n en la citotoxicidad de la bleomicina. La formaci&oacute;n de la lesi&oacute;n de C4-AP tambi&eacute;n puede ser responsable de la formaci&oacute;n de prote&iacute;nas mutantes que contiene solo-amino&aacute;cidos &aacute;cidos eliminaciones que exhiben fenotipos alterados.

Efectos del C4&#39;-oxidado a un sitio de replicaci&oacute;n en Escherichia coli. Una canceladura inusualmente grande es inducida por una peque&ntilde;a lesi&oacute;n.

&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5411;&#x7A97;&#x4F53;&#x6C83;&#x68EE;-&#x514B;&#x91CC;&#x514B;&#x6C22;&#x952E;&#x4E0E;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5982;&#x6B64;&#xFF0C;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x3001; &#x4FEE;&#x590D;&#x9176;&#x533A;&#x5206;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5404;&#x79CD;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4ECE; nonoxidized &#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9; (AP)&#x3002;&#x5F53; DNA &#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; &gamma; &#x8F90;&#x89E3;&#x4EA7;&#x751F; C2-AP &#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x5176;&#x5BF9;&#x5F02;&#x6027;&#x7B80;&#x5217;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x9176;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5305;&#x542B; C2-AP &#x4E0A;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6700;&#x8FD1;&#x62A5;&#x9053;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5B66;&#x4E60;&#x4E0A;&#x5305;&#x542B;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x6A21;&#x677F; Klenow exo(-) &#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;C2-AP &#x75C5;&#x53D8;&#x5DF2;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5F71;&#x54CD; Klenow exo(-) AP &#x548C; C4-AP &#x7F51;&#x7AD9;&#x4E00;&#x6837;&#x3002;&#x8131;&#x6C27;&#x817A;&#x82F7;&#x662F;&#x4F18;&#x5148;&#x7EB3;&#x5165;&#x5BF9;&#x9762; C2-AP&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E95;&#x6F06;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x6781;&#x529B;&#x963B;&#x6B62;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x3002;C2-AP &#x662F;&#x7531;&#x5916;&#x5207;&#x4E09;&#x548C;&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176;&#x56DB;&#x4E0D;&#x80FD;&#x9AD8;&#x6548;&#x523B;&#x75D5;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5316;&#x5B66;&#x56F0;&#x78B1; C2 AP &#x548C;&#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176; III &#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x919B;&#x7684; 3&#39;-&#x78F7;&#x9178; alpha &#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62; &beta;-&#x6D88;&#x9664;&#x76F8;&#x5173;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E0E;&#x57FA;&#x7840;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D;&#x9176;&#x3002;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; C2&#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E0E; Klenow &#x9176; exo(-) &#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x5C06;&#x8BF1;&#x53D8;&#x548C;&#x5B83;&#x5C06;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x4F4D;&#x79FB;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x76AE;&#x74E3;&#x5207;&#x52A0;&#x5DE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x957F;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4FEE;&#x590D;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x4F53;&#x5916;&#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D; DNA &#x542B; C2&#39;-&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;

Abasic lesions are unable to form Watson-Crick hydrogen bonds with nucleotides. Nonetheless, polymerase and repair enzymes distinguish between various oxidized abasic lesions, as well as from nonoxidized abasic sites (AP). The C2-AP lesion is produced when DNA is exposed to gamma-radiolysis. Its effects on polymerases and repair enzymes are unknown. A recently reported method for the chemical synthesis of oligonucleotides containing C2-AP at a defined site was utilized for studying the activity of Klenow exo(-) and repair enzymes on templates containing the lesion. The C2-AP lesion has a similar effect on Klenow exo(-) as do AP and C4-AP sites. Deoxyadenosine is preferentially incorporated opposite C2-AP, but extension of the primer past the lesion is strongly blocked. C2-AP is incised less efficiently by exonuclease III and endonuclease IV than are other abasic lesions. Furthermore, although a Schiff base between C2-AP and endonuclease III can be chemically trapped, the location of the 3'-phosphate alpha with respect to the aldehyde prevents beta-elimination associated with the lyase activity of type I base excision repair enzymes. The interactions of the C2'-oxidized abasic site with Klenow exo(-) and repair enzymes suggest that the lesion will be mutagenic and that it will be removed by strand displacement synthesis and flap endonuclease processing via a long patch repair mechanism.

In vitro replication and repair of DNA containing a C2'-oxidized abasic site.

L&eacute;sions duprojet ne parviennent pas &agrave; former Watson-Crick des liaisons hydrog&egrave;ne avec les nucl&eacute;otides. N&eacute;anmoins, les enzymes polym&eacute;rase et r&eacute;paration distinguent entre diverses l&eacute;sions duprojet oxyd&eacute;es, ainsi que des sites duprojet d&eacute;sagr&egrave;gent (AP). La l&eacute;sion de C2-AP est produite lorsque l&#39;ADN est expos&eacute;e &agrave; la radiolyse gamma. Ses effets sur les enzymes de r&eacute;paration et de polym&eacute;rases sont inconnus. Une m&eacute;thode r&eacute;cemment signal&eacute;e pour la synth&egrave;se chimique d&#39;oligonucl&eacute;otides contenant C2-AP &agrave; un site d&eacute;fini a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour &eacute;tudier l&#39;activit&eacute; des enzymes de exo(-) et r&eacute;paration de Klenow sur mod&egrave;les contenant la l&eacute;sion. La l&eacute;sion de C2-AP a un effet similaire sur Klenow exo(-) comme le font les sites AP et C4-AP. D&eacute;soxyad&eacute;nosine est pr&eacute;f&eacute;rentiellement incorpor&eacute; en face de C2-AP, mais l&#39;extension du primaire depuis que la l&eacute;sion est fortement bloqu&eacute;e. C2-AP est incis&eacute;e moins efficacement par l&#39;exonucl&eacute;ase III et endonucl&eacute;ase IV que les autres l&eacute;sions duprojet. En outre, bien qu&#39;une base de Schiff entre C2-AP et endonucl&eacute;ase III peut &ecirc;tre pi&eacute;g&eacute;e chimiquement, l&#39;emplacement de la 3&#39;-alpha de phosphate &agrave; l&#39;&eacute;gard de l&#39;ald&eacute;hyde emp&ecirc;che l&#39;&eacute;limination b&ecirc;ta associ&eacute;e avec l&#39;activit&eacute; de la lyase de type je fonde des enzymes de r&eacute;paration de l&#39;excision. Les interactions du C2&#39;-oxyd&eacute; site fondamental avec Klenow exo(-) et r&eacute;paration des enzymes sugg&egrave;rent que la l&eacute;sion soit mutag&egrave;ne et qu&#39;elle sera supprim&eacute;e de traitement via un m&eacute;canisme de r&eacute;paration longue patch l&#39;endonucl&eacute;ase de synth&egrave;se et le volet d&eacute;placement strand.

R&eacute;plication in vitro et la r&eacute;paration de l&#39;ADN contenant une C2 &quot;-site duprojet oxyd&eacute;.

In-vitro-Replikation und Reparatur von DNA, die eine C2&#x26;#39;-oxidierten abasischen Stelle.

Abasic lesioni non sono in grado di formare legami di idrogeno di Watson-Crick con nucleotidi. Tuttavia, gli enzimi della polimerasi e riparazione distinguono tra varie lesioni abasic ossidate, nonch&eacute; da siti abasic nonoxidized (AP). La lesione C2-AP &egrave; prodotta quando il DNA &egrave; esposto a gamma-radiolisi. I suoi effetti sulla polimerasi ed enzimi di riparazione sono sconosciuti. Un metodo per la sintesi chimica di oligonucleotidi contenenti C2-AP presso un sito definito recentemente segnalato &egrave; stato utilizzato per studiare l&#39;attivit&agrave; degli enzimi exo(-) e riparazione di Klenow su modelli contenente la lesione. La lesione C2-AP ha un effetto simile su Klenow exo(-) come fanno siti AP e AP-C4. Deossiadenosina &egrave; preferenzialmente incorporato fronte AP-C2, ma l&#39;estensione del primer passato che la lesione &egrave; fortemente bloccata. C2-AP &egrave; incisa in modo meno efficiente da esonucleasi III ed endonucleasi IV rispetto sono altre lesioni abasic. Inoltre, anche se una base di Schiff tra C2-AP ed endonucleasi III pu&ograve; essere intrappolata chimicamente, la posizione di 3&#39;-alfa fosfato rispetto l&#39;aldeide impedisce beta-eliminazione associate con l&#39;attivit&agrave; liasi del tipo base di enzimi di riparazione di escissione. Le interazioni di C2&#39;-sito abasic ossidato con Klenow enzimi di riparazione ed exo(-) suggeriscono che la lesione sar&agrave; mutagenica e che verr&agrave; rimosso da strand cilindrata sintesi e flap endonucleasi elaborazione tramite un meccanismo di riparazione lunga patch.

Replica in vitro e riparazione del DNA contenente un C2&#39;-sito abasic ossidato.

&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x75C5;&#x5909;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#x30EF;&#x30C8;&#x30BD;&#x30F3;-&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x9175;&#x7D20; nonoxidized &#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (AP) &#x304B;&#x3089;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C2 AP &#x75C5;&#x5909;&#x306F; DNA &#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;-&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x4FEE;&#x7406;&#x9175;&#x7D20;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F; C2-ap &#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x5408;&#x6210;&#x6CD5;&#x306B;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E; Klenow exo(-) &#x3068;&#x4FEE;&#x7406;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;AP &#x3068; C4 AP &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x884C;&#x3046; C2 AP &#x75C5;&#x5909; Klenow exo(-) &#x3067;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x512A;&#x5148;&#x7684; C2 AP &#x304C;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x306E;&#x53CD;&#x5BFE;&#x5074;&#x306B;&#x3082;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x2172; &#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; IV &#x3067; C2 AP &#x3092;&#x5207;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;, &#x30B7;&#x30C3;&#x30D5;&#x5869;&#x57FA; C2 AP &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; III &#x306E;&#x9593;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5834;&#x6240;&#x306E; 3&#39;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x9632;&#x304E;&#x307E;&#x3059;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x578B;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x79C1;&#x306F;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;C2 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; &#39;-&#x9178;&#x5316;&#x90E8;&#x4F4D; Klenow &#x306E; exo(-) &#x3068;&#x4FEE;&#x7406;&#x9175;&#x7D20;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x4FEE;&#x7406;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x51E6;&#x7406;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x5909;&#x4F4D;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vitro &#x3067;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x3001;C2 &#x3092;&#x542B;&#x3080; DNA &#x306E;&#x4FEE;&#x7406; &#39;-&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3002;

Abasic &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC740; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC640; &#xC591;&#xC2DD; &#xC653;&#xC2A8; &#xD06C;&#xB9AD; &#xC218;&#xC18C; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC744; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC218;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; nonoxidized abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4;) &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC0AC;&#xC774; &#xAD6C;&#xBD84;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. C2-AP &#xBCD1; &#xBCC0; DNA &#xAC10;&#xB9C8;-radiolysis&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB420; &#xB54C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3F4;&#xACFC; &#xC218;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Oligonucleotides C2-AP &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD654;&#xD559; &#xD569;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; Klenow exo(-) &#xBC0F; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC774;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. C2-AP &#xBCD1; &#xBCC0; &#xCC98;&#xB7FC; c 4&#xAC00; AP&#xC640; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; Klenow exo(-)&#xC5D0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. Deoxyadenosine c 2 AP&#xAC00; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC740; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; &#xACFC;&#xAC70; &#xB1CC;&#xAD00;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xBC18;&#xB300; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. C2-AP&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; abasic &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBCF4;&#xB2E4; exonuclease III&#xACFC; endonuclease 4 &#xC5EC; &#xB35C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCA0;. &#xB610;&#xD55C;, C2-AP endonuclease III &#xC0AC;&#xC774; Schiff &#xC790;&#xB8CC;&#xB294; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC07;&#xD600; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294;, &#xBE44;&#xB85D; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC81C;&#xAC70; &#xAD00;&#xB828;&#xB294; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC; 3&#39;-&#xC778;&#xC0B0; &#xC54C;&#xD30C;&#xC758; &#xC704;&#xCE58; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; lyase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAE30;&#xC9C0;. C 2&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; Klenow exo(-) &#xC218;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC81C;&#xC548; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBCC0;&#xC704; &#xD569;&#xC131;&#xACFC; &#xD50C;&#xB7A9; endonuclease &#xAE34; &#xD328;&#xCE58; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xAC70; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; c 2&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; DNA&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;.

Una lesiones son incapaces de formar enlaces de hidr&oacute;geno de Watson-Crick con nucle&oacute;tidos. Sin embargo, las enzimas de reparaci&oacute;n y la polimerasa distinguen entre varias lesiones una oxidado, as&iacute; como de sitios de un nonoxidized (AP). La lesi&oacute;n de C2-AP se produce cuando el ADN est&aacute; expuesto a gamma-radiolysis. Se desconocen sus efectos sobre las polimerasas y las enzimas de reparaci&oacute;n. Se utiliz&oacute; un m&eacute;todo reciente para la s&iacute;ntesis qu&iacute;mica de oligonucle&oacute;tidos que contiene C2-AP en un sitio definido para el estudio de la actividad de enzimas de exo(-) y reparaci&oacute;n de Klenow en plantillas que contienen la lesi&oacute;n. La lesi&oacute;n de C2-AP tiene un efecto similar en exo(-) Klenow como AP y C4-AP sitios. Desoxiadenosina se incorpora preferencial frente a C2-AP, pero la extensi&oacute;n de la cartilla &uacute;ltima que fuertemente se bloquea la lesi&oacute;n. C2-AP es incidida menos eficientemente por exonucleasa III y endonucleasa IV que son otras lesiones un. Adem&aacute;s, aunque una base de Schiff entre C2-AP y endonucleasa III puede quedar atrapada qu&iacute;micamente, la ubicaci&oacute;n de la alfa 3&#39;-fosfato con respecto a la aldeh&iacute;do evita eliminaci&oacute;n beta asociado con la actividad de liasa de tipo base de las enzimas de reparaci&oacute;n de la supresi&oacute;n. Las interacciones de la C2&#39;-oxidado un sitio con Klenow enzimas exo(-) y reparaci&oacute;n sugieren que la lesi&oacute;n sea mutag&eacute;nica y que se quitar&aacute; por endonucleasa de s&iacute;ntesis y la aleta de la dislocaci&oacute;n de filamento procesamiento mediante un mecanismo de reparaci&oacute;n del parche largo.

In vitro replicaci&oacute;n y reparaci&oacute;n del ADN que contiene un C2&#39;-sitio un oxidado.

&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9; &#xFF08;AP&#xFF09; &#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x75C5;&#x53D8;&#x901A;&#x5E38;&#x79F0;&#x4E3A; noninstructive &#x75C5;&#x53D8;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6C83;&#x68EE;-&#x514B;&#x91CC;&#x514B;&#x57FA;&#x914D;&#x5BF9;&#x3002;&#x8BCD;&#x6C47;&#x7528;&#x6765;&#x5F62;&#x5BB9; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x590D;&#x5236; noninstructive &#x9002;&#x5DF2;&#x53D7;&#x5230;&#x8D28;&#x7591;&#x7684;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x7EDE;&#x7A7F;&#x68AD;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x5305;&#x542B; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x6216;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x75C5;&#x53D8;&#x9020;&#x6210;&#x7684; C1&#39;-(L) &#x548C; C4&#39;-&#x6C27;&#x5316; (C4-AP) &#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x975E;&#x6C83;&#x68EE;-&#x514B;&#x91CC;&#x514B;&#x6C22;&#x952E;&#x7ED3;&#x6784;&#x7279;&#x70B9;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x590D;&#x5236;&#x3002;&#x56E0;&#x6B63;&#x5F0F; C2 &#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x63CF;&#x8FF0; &#39;-&#x6C27;&#x5316; (C2-AP) &#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x3002;&#x5168;&#x957F;&#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5F97;&#x5230;&#x9075;&#x5B88;&#x65F6;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x6A21;&#x677F;&#x5305;&#x542B; C2-AP&#x3002;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5220;&#x9664;&#x5F62;&#x6210;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; pol II &#x548C; IV&#xFF0C;pol &#x534F;&#x8C03;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#xFF0C;&#x800C; pol V &#x6291;&#x5236;&#x7A81;&#x53D8;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;Pol V &#x5229;&#x7528; A &#x89C4;&#x5219;&#x65F6;&#x7ED5;&#x8FC7; C2-AP&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;pol II &#x548C; pol IV &#x5229;&#x7528; dNTP &#x7A33;&#x5B9A;&#x5931;&#x8C03;&#x673A;&#x5236;&#x7ED5;&#x8FC7; C2-AP &#x65F6;&#x8BFB;&#x53D6;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x548C;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x9996;&#x4F8B;&#x4E2D; 3&#39;-&#x76F8;&#x90BB;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x8BFB;&#x53D6;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x5C31;&#x662F;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x662F;&#x5426; noninstructive &#x75C5;&#x53D8;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x95EE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7F51;&#x7AD9;&#x65C1;&#x8DEF;&#x53D7;&#x5F53;&#x5730;&#x751F;&#x7269;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7ED3;&#x6784;&#x9664;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684; dNTP &#x7A33;&#x5B9A;&#x5931;&#x8C03;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x6C27;&#x5316;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9;&#x590D;&#x5236;&#xFF0C;&#x8BFB;&#x53D6;&#x4E0A;&#x6E38;&#x548C;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;

Abasic sites (AP) and oxidized abasic lesions are often referred to as noninstructive lesions because they cannot participate in Watson-Crick base pairing. The aptness of the term noninstructive for describing AP site replication has been called into question by recent investigations in E. coli using single-stranded shuttle vectors. These studies revealed that the replication of templates containing AP sites or the oxidized abasic lesions resulting from C1'- (L) and C4'-oxidation (C4-AP) are distinct from one another, suggesting that structural features other than Watson-Crick hydrogen bonds contribute to controlling replication. The first description of the replication of the abasic site resulting from formal C2'-oxidation (C2-AP) is presented here. Full-length and single-nucleotide deletion products are observed when templates containing C2-AP are replicated in E. coli. Single nucleotide deletion formation is largely dependent upon the concerted effort of pol II and pol IV, whereas pol V suppresses frameshift product formation. Pol V utilizes the A-rule when bypassing C2-AP. In contrast, pol II and pol IV utilize a dNTP-stabilized misalignment mechanism to read the upstream and downstream nucleotides when bypassing C2-AP. This is the first example in which the identity of the 3'-adjacent nucleotide is read during the replication of a DNA lesion. The results raise further questions as to whether abasic lesions are noninstructive lesions. We suggest that abasic site bypass is affected by the local biopolymer structure in addition to the structure of the lesion.

Replication of an oxidized abasic site in Escherichia coli by a dNTP-stabilized misalignment mechanism that reads upstream and downstream nucleotides.

Sites duprojet (AP) et des l&eacute;sions abasiques oxyd&eacute;es sont souvent appel&eacute;es l&eacute;sions noninstructive parce qu&#39;ils ne peuvent participer en base d&#39;appariement Watson-Crick. La justesse de l&#39;expression noninstructive pour d&eacute;crire la r&eacute;plication de site AP a &eacute;t&eacute; remise en question par r&eacute;centes enqu&ecirc;tes chez e. coli &agrave; l&#39;aide de vecteurs navettes simple brin. Ces &eacute;tudes ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la r&eacute;plication des mod&egrave;les contenant des sites de l&#39;AP ou les l&eacute;sions abasiques oxyd&eacute;es r&eacute;sultant de C1&#39;-(L) et C4&#39;-oxydation (C4-AP) sont distincts l&#39;un de l&#39;autre, ce qui sugg&egrave;re que les caract&eacute;ristiques structurales, autres que les liaisons hydrog&egrave;nes Watson-Crick contribuent &agrave; contr&ocirc;ler la r&eacute;plication. La premi&egrave;re description de la r&eacute;plication du site ABASIQUE r&eacute;sultant de C2 formelle &#39;-oxydation (C2-AP) est pr&eacute;sent&eacute; ici. Produits de suppression de pleine longueur et mononucl&eacute;otidiques sont observ&eacute;es quand les mod&egrave;les contenant C2-AP sont r&eacute;pliqu&eacute;es dans e. coli. Formation de suppression de nucl&eacute;otide d&eacute;pend en grande partie l&#39;effort concert&eacute; de la pol II et pol IV, tandis que pol V supprime la formation de produits de d&eacute;phasage. Pol V utilise le A-rule lorsque contournant C2-AP. En revanche, pol II et pol IV utilisent un m&eacute;canisme de d&eacute;salignement dNTP stabilis&eacute; pour lire les nucl&eacute;otides en amont et en aval, lorsque contournant C2-AP. C&#39;est le premier exemple dans lequel l&#39;identit&eacute; du nucl&eacute;otide 3&#39; adjacente est lu au cours de la r&eacute;plication d&#39;une l&eacute;sion de l&#39;ADN. Les r&eacute;sultats soul&egrave;vent d&#39;autres questions quant &agrave; savoir si les l&eacute;sions abasiques sont des l&eacute;sions noninstructive. Nous vous sugg&eacute;rons ce site ABASIQUE de d&eacute;rivation est affect&eacute;e par la structure locale de biopolym&egrave;re en plus de la structure de la l&eacute;sion.

R&eacute;plication d&#39;un site ABASIQUE oxyd&eacute; chez Escherichia coli, par un m&eacute;canisme de d&eacute;salignement dNTP stabilis&eacute; qui lit les nucl&eacute;otides en amont et en aval.

ABasiC Sites (AP) und oxidierte abasic L&auml;sionen sind oft als noninstructive L&auml;sionen bezeichnet, da sie nicht an die Watson-Crick base Paarung teilnehmen k&ouml;nnen. Die Eignung der noninstructive Begriff zur Beschreibung von AP-Standort-Replikation hat durch den letzten Untersuchungen in E. Coli mit einzeln-angeschwemmte Shuttle-Vektoren in Frage gestellt. Diese Untersuchungen ergaben, dass die Replikation von Vorlagen mit AP-Websites oder die oxidierten abasic L&auml;sionen infolge C1&#39;-(L) und C4&#39;-Oxydation (C4-AP) unterscheiden sich von einander, was darauf hindeutet, dass die strukturellen Merkmale als Watson-Crick-Wasserstoffbr&uuml;cken tragen zur Steuerung der Replikation. Die erste Beschreibung der Replikation der abasic Site aus formalen C2&#39;-Oxydation (C2-AP) ist hier dargestellt. In und Einzel-Nukleotid-L&ouml;schung-Produkte werden beobachtet, wenn Vorlagen mit C2-AP in E. Coli repliziert werden. Einzel-Nukleotid-L&ouml;schung-Bildung ist weitgehend abh&auml;ngig von der gemeinsamen Anstrengungen der Pol II und IV, Pol, w&auml;hrend Pol V Frameshift Produkt Bildung unterdr&uuml;ckt. Pol V nutzt die A-Rule, wenn C2-AP zu umgehen. Im Gegensatz dazu nutzen, Pol II und Pol IV dNTP-stabilisierte Schiefstellungen Mechanismus um die vor- und nachgelagerten Nukleotide zu lesen, wenn C2-AP zu umgehen. Dies ist das erste Beispiel, in dem die Identit&auml;t der 3&#39;-angrenzenden Nukleotids w&auml;hrend der Replikation einer DNA-L&auml;sion ausgelesen wird. Die Ergebnisse werfen weitere Fragen, ob abasic L&auml;sionen noninstructive L&auml;sionen sind. Wir schlagen vor, dass abasic Website umgehen durch die lokalen Biopolymer-Struktur zus&auml;tzlich zur Struktur der L&auml;sion betroffen ist.

Replikation einer oxidierten abasic Site in Escherichia coli durch einen Mechanismus dNTP-stabilisierte Schiefstellungen liest, die vor- und nachgelagerten Nukleotide.

Abasic siti (AP) e lesioni abasic ossidate sono spesso indicate come lesioni noninstructive perch&eacute; essi non possono partecipare a base pairing di Watson-Crick. La pertinenza del termine noninstructive per descrivere la replica sito AP &egrave; stato chiamato in causa da recenti indagini in e. coli utilizzando vettori navetta single-stranded. Questi studi hanno rivelato che la replica di modelli contenenti siti AP o ossidate abasic lesioni derivanti da C1&#39;-(L) e C4&#39;-ossidazione (C4-AP) sono distinte l&#39;uno da altro, suggerendo che caratteristiche strutturali diversi dai legami dell&#39;idrogeno di Watson-Crick contribuiscono al controllo della replica. La prima descrizione della replica del sito abasic derivanti da formale C2&#39;-ossidazione (C2-AP) &egrave; presentato qui. Prodotti full-length e singolo nucleotide eliminazione sono osservati quando modelli contenenti C2-AP sono replicati in e. coli. Formazione di cancellazione singolo nucleotide dipende in gran parte lo sforzo concertato di pol II e IV, pol considerando che pol V sopprime la formazione prodotto frameshift. POL V utilizza la regola A quando bypassando C2-AP. Al contrario, pol II e IV pol utilizzano un meccanismo di disallineamento dNTP-stabilizzato per leggere i nucleotidi a monte e a valle quando bypassando C2-AP. Questo &egrave; il primo esempio in cui l&#39;identit&agrave; di 3&#39;-nucleotide adiacente viene letto durante la replica di una lesione del DNA. I risultati sollevare ulteriori domande se abasic lesioni sono lesioni noninstructive. Consigliamo di quel sito abasic bypass &egrave; influenzata dalla struttura biopolimero locali oltre che la struttura della lesione.

Replica di un sito di abasic ossidato in Escherichia coli da un meccanismo di disallineamento dNTP stabilizzato che legge i nucleotidi a monte e a valle.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30EF;&#x30C8;&#x30BD;&#x30F3;-&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x57FA;&#x672C;&#x306B;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; (AP) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x75C5;&#x5909;&#x983B;&#x7E41;&#x306B; noninstructive &#x75C5;&#x5909;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;noninstructive &#x306E;&#x7528;&#x8A9E;&#x306E;&#x624B;&#x8155;&#x306B;&#x7591;&#x554F;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3067;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F; C1 &#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#39;-(L) &#x3068; C4&#39;-&#x9178;&#x5316; (C4-AP) &#x306F;&#x5225;&#x304B;&#x3089;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7279;&#x5FB4;&#x30EF;&#x30C8;&#x30BD;&#x30F3;-&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B63;&#x5F0F;&#x306A; C2 &#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E; &#39;-&#x9178;&#x5316; (C2-AP&#xFF09; &#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x30A8;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EA;&#x30D2;&#x30A2;&#x5C5E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E; C2 AP &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C8;&#x304C;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pol V &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x88FD;&#x54C1;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x5358;&#x4E00;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x524A;&#x9664;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x30DD;&#x30EB; II &#x3068; IV &#x306F;&#x3001;pol &#x306E;&#x5354;&#x8ABF;&#x52AA;&#x529B;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x5DE6;&#x53F3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pol V A rule C2 AP &#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x6642;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EB; II &#x3068; pol IV C2 AP &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x4E0A;&#x6D41;&#x3068;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x8AAD;&#x3080;&#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; dNTP &#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E; 3&#39;-&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092; DNA &#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E2D;&#x306B;&#x8AAD;&#x3080;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C; noninstructive &#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3054;&#x8CEA;&#x554F;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x3001;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x751F;&#x4F53;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; dNTP &#x5B89;&#x5B9A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x578B;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x3068;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAD;&#x307F;&#x53D6;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (AP)&#xC640; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC740; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; noninstructive &#xBCD1; &#xBCC0; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC653;&#xC2A8; &#xD06C;&#xB9AD; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC6A9;&#xC5B4;&#xB294; noninstructive&#xC758; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xC154;&#xD2C0; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD88;&#xB824; &#xC654;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xACF5;&#xAC1C; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB610;&#xB294; c 1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798;&#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xBCF5;&#xC81C; &#39;-(L)&#xC640; c 4&#xAC00; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; (C4-ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4;)&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC653;&#xC2A8; &#xD06C;&#xB9AD; &#xC218;&#xC18C; &#xCC44;&#xAD8C; &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xACF5;&#xC2DD;&#xC801;&#xC778; c 2&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC124;&#xBA85; &#39;-&#xC0B0;&#xD654; (C2-ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4;) &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC81C;&#xD488; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; C2 AP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC744; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB54C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD615;&#xC131;&#xC740; pol V frameshift &#xC81C;&#xD488; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xD06C;&#xAC8C; pol II &#xBC0F; IV, pol&#xC758; &#xACF5;&#xB3D9;&#xB41C; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pol V c 2 AP&#xB97C; &#xBB34;&#xC2DC;&#xD560; &#xB54C; A &#xADDC;&#xCE59;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, pol II &#xBC0F; pol IV c 2 AP&#xB97C; &#xBB34;&#xC2DC;&#xD560; &#xB54C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC77D;&#xC744; dNTP &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC624;&#xCC28; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC608;&#xC81C; 3&#39;-&#xC778;&#xC811; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xC2E0;&#xC6D0;&#xC744; DNA &#xBCC0;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC77D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; abasic &#xBCD1; &#xBCC0; noninstructive &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB85C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xC62C;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. Abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC6B0;&#xD68C;&#xB294; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB85C;&#xCEEC; biopolymer &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

DNTP &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC624;&#xCC28; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xD654; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC77D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un sitios (AP) y las lesiones de una oxidado se refieren a menudo como lesiones noninstructive porque ellos no pueden participar en Watson-Crick base que se aparea. La pertinencia del t&eacute;rmino noninstructive para describir la replicaci&oacute;n de sitios de AP ha ha puesto en entredicho por investigaciones recientes en e. coli usando vectores de transporte monocatenario. Estos estudios revelaron que la replicaci&oacute;n de plantillas que contienen sitios de AP o las lesiones de una oxidado resultantes C1&#39;-(L) y C4&#39;-oxidaci&oacute;n (C4-AP) son distintas entre s&iacute;, sugiriendo que las caracter&iacute;sticas estructurales distintos enlaces del hidr&oacute;geno de Watson-Crick contribuyan al control de la replicaci&oacute;n. La primera descripci&oacute;n de la replicaci&oacute;n del sitio un resultantes formal C2&#39;-oxidaci&oacute;n (C2-AP) se presenta aqu&iacute;. Productos de eliminaci&oacute;n de larga duraci&oacute;n y nucle&oacute;tido se observan cuando se replican plantillas que contienen C2-AP en e. coli. Formaci&oacute;n de borrado de un solo nucle&oacute;tido es en gran parte depende de un esfuerzo concertado de pol II y pol IV, mientras que pol V suprime frameshift formaci&oacute;n de producto. Pol V utiliza el A-rule cuando salt&aacute;ndose C2-AP. Por el contrario, pol II y pol IV utilizan un mecanismo de desalineamiento dNTP estabilizado para leer los nucle&oacute;tidos upstream y downstream cuando salt&aacute;ndose C2-AP. Este es el primer ejemplo en el que se lee la identidad de los nucle&oacute;tidos 3&#39;-adyacentes durante la replicaci&oacute;n de una lesi&oacute;n del ADN. Los resultados m&aacute;s cuestionamientos sobre si una lesiones son las lesiones noninstructive. Sugerimos derivaci&oacute;n de un sitio es afectado por la estructura de biopol&iacute;mero local adem&aacute;s de la estructura de la lesi&oacute;n.

Replicaci&oacute;n de un sitio de un oxidado en Escherichia coli por un mecanismo de dNTP estabilizado desalineamiento Lee nucle&oacute;tidos upstream y downstream.

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 4 &#x548C; IL-13 &#x4E2D;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x53CA;&#x8FC7;&#x654F;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x55DC;&#x78B1;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x6E90;&#x548C;&#x4EA7;&#x751F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x548C; IL-13 &#x65F6;&#x523A;&#x6FC0;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-18&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x767D;&#x4ECB;&#x7D20;-1 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-1 &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-1 &#x5BB6;&#x65CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x55DC;&#x78B1;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 4 &#x548C; IL-13 &#x751F;&#x4EA7;&#x5C1A;&#x672A;&#x6267;&#x884C;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4ECE;&#x55DC;&#x78B1; FcepsilonRI &#x72EC;&#x7ACB; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x4ECD;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x5B9A;&#x4E49;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x86CB;&#x767D;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x9F20;&#x6807;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x55DC;&#x78B1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; IL-4 &#x548C; IL-13 &#x54CD;&#x5E94; IL-18 &#x6216; IL-33 &#x523A;&#x6FC0;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-18 &#x6216; IL-33-&#x4ECB;&#x5BFC; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; MyD88 &#x548C; p38alpha &#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x55DC;&#x78B1;&#x751F;&#x5B58;&#x7531;&#x4E8E;&#x589E;&#x52A0; Akt &#x6D3B;&#x5316;&#x589E;&#x52A0;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; 18 &#x6216; IL-33&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4ECE;&#x9F20;&#x6807;&#x55DC;&#x78B1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x91CA;&#x653E;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-18 &#x4E0E;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-33 &#x7684;&#x6548;&#x80FD;&#x3002;

&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-18 &#x4E0E; IL-33 &#x5F81;&#x6C42;&#x4ECE;&#x901A;&#x8FC7; MyD88 &#x548C; p38alpha &#x4F9D;&#x8D56;&#x9014;&#x5F84;&#x55DC;&#x78B1; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

IL-4 and IL-13 are instrumental in the development and progression of allergy and atopic disease. Basophils represent a key source of these cytokines and produce IL-4 and IL-13 when stimulated with IL-18, a member of the IL-1 family of cytokines. Comparative analyses of the effects of caspase-1-dependent IL-1 family cytokines on basophil IL-4 and IL-13 production have not been performed, and the signaling pathway proteins required for FcepsilonRI-independent Th2 cytokine production from basophils remain incompletely defined. Using mouse bone marrow-derived cultured basophils, we found that IL-4 and IL-13 are produced in response to IL-18 or IL-33 stimulation. IL-18- or IL-33-mediated Th2 cytokine production is dependent on MyD88 and p38alpha signaling proteins. In addition, basophil survival increased in the presence of IL-18 or IL-33 as a result of increased Akt activation. Studies in vivo confirmed the potency of IL-18 and IL-33 in activating cytokine release from mouse basophils.

IL-18 and IL-33 elicit Th2 cytokines from basophils via a MyD88- and p38alpha-dependent pathway.

IL-4 et IL-13 jouent un r&ocirc;le essentiel dans le d&eacute;veloppement et la progression des allergies et des maladies atopiques. Basophiles repr&eacute;sentent une source essentielle de ces cytokines et produisent l&#39;IL-4 et IL-13 quand ils sont stimul&eacute;s avec IL-18, un membre de la famille IL-1 des cytokines. Analyses comparatives des effets de la caspase-1-dependent IL-1 famille cytokines sur la production d&#39;IL-4 et IL-13 basophile n&#39;ont pas &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es et les prot&eacute;ines de signalisation voie n&eacute;cessaires &agrave; la production de cytokines Th2 FcepsilonRI ind&eacute;pendant de basophiles restent incompl&egrave;tement. &Agrave; l&#39;aide de basophiles cultiv&eacute;es d&eacute;riv&eacute;es de la moelle osseuse de souris, nous avons constat&eacute; que l&#39;IL-4 et IL-13 sont produites en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;IL-18 ou de stimulation de l&#39;IL-33. IL-18 ou IL-33-induite par la production de cytokines Th2 d&eacute;pend de MyD88 et p38alpha prot&eacute;ines de signalisation. En outre, la survie de basophiles augmente en pr&eacute;sence de IL-18 ou IL-33 en raison de l&#39;augmentation de l&#39;activation Akt. Des &eacute;tudes in vivo ont confirm&eacute; la puissance de l&#39;IL-18 et 33-IL dans l&#39;activation des cytokines des cellules basophiles souris.

IL-18 et 33-IL obtenir des cytokines Th2 de basophiles via une voie d&eacute;pendante MyD88 et p38alpha.

IL-4 und IL-13 sind ma&szlig;geblich an der Entstehung und Progression von Allergie und atopische Erkrankung. Basophile stellen eine zentrale Quelle f&uuml;r diese Zytokine und IL-4 und IL-13 Wenn mit IL-18, ein Mitglied der IL-1 Familie von Cytokines angeregt zu produzieren. Vergleichende Analysen der Auswirkungen der Caspase-1-abh&auml;ngigen IL-1-Familie, die Zytokine IL-4 und IL-13-Produktion basophiles nicht durchgef&uuml;hrt wurden, und die Signalisierung Weg-Proteine ben&ouml;tigt, f&uuml;r FcepsilonRI-unabh&auml;ngige Th2-Zytokin-Produktion von basophile bleiben unvollst&auml;ndig definierten. Mit Maus Knochenmark abgeleitete kultivierten basophile, fanden wir, dass IL-4 und IL-13, als Reaktion auf die IL-18 oder IL-33 Stimulation produziert werden. IL-18 - oder IL-33-vermittelter Th2 Cytokine Produktion h&auml;ngt MyD88 und p38alpha Proteine zu signalisieren. Dar&uuml;ber hinaus verl&auml;ngerte basophiles &Uuml;berleben in Gegenwart von IL-18 oder IL-33 aufgrund erh&ouml;hter Akt-Aktivierung. In-vivo Studien best&auml;tigt die Wirksamkeit von IL-18 und IL-33 in Aktivierung Cytokine Freigabe von Maus basophile.

IL-18 und IL-33 entlocken Th2 Zytokinen aus basophile &uuml;ber MyD88 - und p38alpha-abh&auml;ngigen Weg.

IL-4 e IL-13 sono strumentali nello sviluppo e nella progressione della malattia atopica e allergia. Basofili rappresentano una fonte chiave di queste citochine e producono IL-4 e IL-13 quando stimolato con IL-18, un membro della famiglia IL-1 di citochine. Analisi comparative degli effetti della caspasi-1-dipendente IL-1 famiglia citochine sulla produzione di IL-4 e IL-13 dei basofili non sono state eseguite e le proteine pathway segnalazione necessarie per la produzione di citochine Th2 FcepsilonRI indipendente da basofili restano non completamente definita. Utilizzando basofili colta derivate dal midollo osseo di topo, abbiamo trovato che IL-4 e IL-13 sono prodotte in risposta a IL-18 o stimolazione di IL-33. Produzione di citochine Th2 IL-18 o IL-33-mediata &egrave; dipendente da MyD88 e p38alpha proteine di segnalazione. Inoltre, sopravvivenza dei basofili aumentati in presenza di IL-18 o IL-33 in seguito aumentata attivazione di Akt. Studi in vivo hanno confermato la potenza di IL-18 e 33 IL nell&#39;attivazione di rilascio di citochine dalle cellule basofile del mouse.

IL 18 e IL 33 suscitare citochine Th2 da basofili via via MyD88 - e p38alpha-dipendente.

IL-4 &#x3068; IL-13 &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3068;&#x30A2;&#x30C8;&#x30D4;&#x30FC;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A5;&#x30EB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30BF;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3001;IL-4 &#x3068; IL-13 &#x304C; IL 18&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; IL-1 &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x7684; IL-1 &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x306E; IL-4 &#x304A;&#x3088;&#x3073; IL 13 &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x304C;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068; FcepsilonRI &#x72EC;&#x7ACB; Th2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5FC5;&#x9808;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x57F9;&#x990A;&#x5869;&#x57FA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; IL-4 &#x3068; IL-13 IL 18 &#x307E;&#x305F;&#x306F; IL 33 &#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x7523;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Th2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F; IL 18 &#x307E;&#x305F;&#x306F; IL 33 &#x5A92;&#x4ECB;&#x3067;&#x3059; MyD88 &#x3068; p38alpha &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x306E;&#x751F;&#x5B58; IL 18 &#x307E;&#x305F;&#x306F; IL 33 &#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x306E; Akt &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;In vivo &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x304B;&#x3089;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3078;&#x306E; IL-18 &#x3068; IL-33 &#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

IL 18 &#x304A;&#x3088;&#x3073; IL 33 Th2 &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; MyD88-p38alpha &#x4F9D;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x304B;&#x3089;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

IL-4, IL-13 &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC640; &#xC544; &#xD1A0; &#xD53C; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Basophils &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; cytokines&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-4, IL-13 IL-18, cytokines &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774; &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. Caspase 1 &#xC885;&#xC18D; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774; cytokines basophil IL-4, IL-13 &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD55C; &#xAC00;&#xC871;&#xACFC; FcepsilonRI &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; Th2 cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; basophils&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;. &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; basophils &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; IL-4, IL-13 18 IL &#xB610;&#xB294; IL-33 &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. Th2 cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; 18 IL &#xB610;&#xB294; IL-33-&#xC911;&#xC7AC;&#xB294; Myd88&#xC640; p38alpha&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2E0;&#xD638;. &#xB610;&#xD55C;, basophil &#xC0DD;&#xC874; &#xC99D;&#xAC00; Akt &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; 18 IL &#xB610;&#xB294; IL-33 &#xBA74; &#xC804;&#xC5D0; &#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C; in vivo &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; basophils&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; cytokine &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; IL-18 &#xBC0F; IL-33&#xC758; &#xD798;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;.

IL-18 &#xBC0F; IL-33 MyD88 &#xBC0F; p38alpha &#xC885;&#xC18D; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; basophils&#xC5D0;&#xC11C; Th2 cytokines&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;.

IL-4 y IL-13 est&aacute;n instrumental en el desarrollo y progresi&oacute;n de la alergia y las enfermedades at&oacute;picas. Los bas&oacute;filos representan una fuente clave de estas citoquinas y producen IL-4 y IL-13 cuando estimuladas con IL-18, un miembro de la familia IL-1 de citoquinas. Analisis comparativo de los efectos de la caspasa-1-dependiente de la IL-1 familia citoquinas en la producci&oacute;n de IL-4 y IL-13 bas&oacute;filo no se han realizado y las prote&iacute;nas se&ntilde;alizaci&oacute;n del camino requeridas para la producci&oacute;n de citoquinas Th2 FcepsilonRI independiente de bas&oacute;filos siguen incompletamente definidos. Usando bas&oacute;filos cultivadas derivadas de la m&eacute;dula &oacute;sea de rat&oacute;n, encontramos que la IL-4 y IL-13 se producen en respuesta a la IL-18 o estimulaci&oacute;n de IL-33. Producci&oacute;n de citoquinas IL-18 - o IL-33-mediada Th2 depende de MyD88 y p38alpha prote&iacute;nas de se&ntilde;alizaci&oacute;n. Adem&aacute;s, supervivencia bas&oacute;filo aumentado en presencia de IL-18 o IL-33 como resultado de la mayor activaci&oacute;n de Akt. Estudios in vivo confirman la potencia de la IL-18 y IL-33 en la activaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de citoquinas de bas&oacute;filos de rat&oacute;n.

Kelly Kroeger

Gene Expression Division

Bio-Rad Laboratories, Inc

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation