שכפול דנ"א מתחיל באתרים המכילים רצפי דנ"א מוגדרים מראש הידועים כמקורות השכפול. DNA אינו נפגע באתרים אלה על ידי מנחת המסוקים לתחזוקת מיניכרומוזומים (MCM) וגורמים אחרים כגון Cdc45 וקומפלקס GINS הקשורים. הגדילים הבודדים שאינם פצועים מוגנים על ידי חלבון שכפול A (RPA) עד שה-DNA פולימראז מתחיל לסנתז DNA בקצה ה-5' של הגדיל באותו כיוון כמו מזלג השכפול. כדי למנוע ממזלג השכפול להתפרק, קומפלקס הגנת מזלג (FPC) נע עם המזלג הגדל. קומפלקס חלבונים משומר זה נמצא באיקריוטים והוא מורכב מחלבונים כמו טים, טיפין, ו-1 וקלספין (Claspin).
במעבדה, מזלגות שכפול יכול להיות מעוכב על ידי פעולה של hydroxyurea. Hydroxyurea מדלדל את המאגרים התאיים של dNTPs, אשר נחוצים על ידי DNA פולימראז עבור סינתזת DNA. כאשר dNTPs אינם זמינים, סינתזת הדנ"א מואטת ובסופו של דבר נעצרת לחלוטין. לפיכך, עיכוב מזלגות השכפול בתאים חיים קשור לחוסר הפעילות של DNA פולימראז.
FPC מקשר את הפעילות של פולימראז עם זה של helicase. כך שגם כאשר הפולימראז מפסיק, מנחת המסוקים ממשיך לשחרר את הדנ"א כדי לייצר עודף של דנ"א חד-גדילי (ssDNA) לפני שהוא נעצר. עודף ssDNA זה דומה לשלוחות שנותחו מתיקון שבר דו-גדילי. כדי לייצב את המבנה, חלבוני RPA נקשרים ל-ssDNA ומגייסים את חלבוני ה-ATR. קשירת ATR מפעילה את החלבון המווסת של מחזור התא Chk1 כדי לחסום את הירי של מקורות השכפול ולעכב את מחזור התא לתיקון DNA. לפיכך, ssDNA משמש כאות רב עוצמה המחבר בין נזק לדנ"א לתיקון.
From Chapter 8:
Now Playing
DNA Replication and Repair
5.7K Views
DNA Replication and Repair
64.3K Views
DNA Replication and Repair
13.6K Views
DNA Replication and Repair
12.0K Views
DNA Replication and Repair
5.9K Views
DNA Replication and Repair
5.8K Views
DNA Replication and Repair
22.9K Views
DNA Replication and Repair
12.1K Views
DNA Replication and Repair
4.9K Views
DNA Replication and Repair
7.4K Views
DNA Replication and Repair
3.5K Views
DNA Replication and Repair
3.4K Views
DNA Replication and Repair
4.6K Views
DNA Replication and Repair
3.0K Views
DNA Replication and Repair
4.3K Views
See More
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved