11.1 : שיטות כרומטוגרפיות: מינוח

כרומטוגרפיה היא טכניקה אנליטית נפוצה המשמשת בתחומים כמו כימיה, ביולוגיה, מדעי הסביבה ורוקחות, לצורך הפרדת מרכיבי תערובת וזיהוי חומרים בתוכה. תהליך הכרומטוגרפיה מבוסס על האינטראקציות בין שתי פאזות נפרדות: הפאזה הנייחת והפאזה הניידת. הפאזה הנייחת קבועה במקומה באמצעות חומר תומך, בעוד הפאזה הניידת נעה מעליה ונושאת את המומסים. כאשר הפאזה הניידת נעה דרך הפאזה הנייחת, רכיבי התערובת מתקשרים באופן שונה עם כל פאזה בהתאם לתכונותיהם הכימיות, מה שמוביל להפרדתם.

ניתן לסווג כרומטוגרפיה לסוגים שונים בהתבסס על אופי הפאזות הניידת והנייחת, כמו כרומטוגרפיה בגזים (GC), כרומטוגרפיה בנוזלים (LC) וכרומטוגרפיה בשכבה דקה (TLC). כל סוג מתאים ליישומים מסוימים בהתאם למצב הפיזי של החומרים הנבדקים ולרזולוציית ההפרדה הרצויה.

הנוזל הזורם מתוך עמודת הכרומטוגרפיה עובר דרך גלאי, שיוצר אות כשהוא מזהה את המומס המופרד. אות זה מוצג בגרף כנגד זמן האלוציה או נפח התמיסה המופרדת, ויוצר סדרת פיקים המכונה כרומטוגרמה.

בכרומטוגרפיה קיימים מונחים מרכזיים המסייעים לתאר את התהליך ואת תוצאותיו. נפח הריטנציה מתייחס לנפח הפאזה הניידת הנדרש לנשיאת האנליט מנקודת ההזרקה לשיא הפיק בכרומטוגרמה. קשור לכך הוא זמן הריטנציה, המייצג את משך הזמן הנדרש לאנליט לנוע דרך המערכת. זמן זה מחושב על ידי חלוקת נפח הריטנציה בקצב הזרימה של הפאזה הניידת. מקדם הריטנציה (או גורם הקיבול) מודד את היחס בין הזמן שבו האנליט שוהה בפאזה הנייחת לבין הזמן שבו הוא שוהה בפאזה הניידת.

בנוסף, זמן החלל הריק מציין את הזמן הנדרש לממסים שאינם מתעכבים לצאת מהמערכת. הנפח המתאים לכך הוא נפח החלל הריק, המייצג את כמות הפאזה הניידת הנדרשת להוצאת מומסים שאינם מתעכבים. בהתייחסות לפיקים בכרומטוגרמה, רוחב הפיק (המכונה גם רוחב הקו הבסיסי) מוגדר כרוחב הפיק בקו הבסיס, ונמדד מהנקודה שבה הפיק מתחיל לעלות ועד לנקודה שבה הוא חוזר לקו הבסיס. לבסוף, רזולוציה מודדת את רמת ההפרדה בין שני פיקים סמוכים ומשקפת עד כמה מרכיבי התערובת מובדלים זה מזה.