11.1 : Métodos Cromatográficos: Terminologia

A cromatografia é uma técnica analítica amplamente usada em áreas como química, biologia, ciência ambiental e farmacêutica para separar os componentes de uma mistura e identificar substâncias entre eles. O processo de cromatografia é baseado nas interações entre duas fases distintas: a fase estacionária e a fase móvel. A fase estacionária é fixada no lugar por um material de suporte, enquanto a fase móvel se move sobre ela, carregando os solutos. À medida que a fase móvel de desloca pela fase estácionária, os componentes da mistura interagem de forma diferente com cada fase baseado em suas propriedades químicas, levando à sua separação.

A cromatografia pode ser classificada em vários tipos com base na natureza das fases móvel e estacionária, como cromatografia gasosa (GC), cromatografia líquida (LC) e cromatografia em camada fina (TLC). Cada tipo é adequado para aplicações específicas, dependendo do estado físico das substâncias que estão sendo analisadas e da resolução desejada da separação.

O líquido que flui da coluna de cromatografia passa por um detector, que cria um sinal quando detecta o soluto sendo separado. Este sinal é então plotado em relação ao tempo de eluição ou ao volume de solução eluída, resultando em uma série de picos conhecidos como cromatograma.

Na cromatografia, vários termos-chave ajudam a descrever o processo e os resultados. O volume de retenção se refere à fase móvel necessária para transportar um analito do ponto de injeção até o pico máximo no cromatograma. Relacionado de perto com ele está o tempo de retenção, que o tempo que um analito leva para viajar pelo sistema. Isso é calculado dividindo o volume de retenção pela taxa de fluxo da fase móvel. Outro conceito importante é o fator de retenção (frequentemente chamado de fator de capacidade), que mede a proporção do tempo que o analito passa na fase estacionária em relação ao tempo que passa na fase móvel.

Além disso, o tempo de morto indica o tempo necessário para que solutos não retidos eluam do sistema. O volume morto correspondente é a quantidade de fase móvel necessária para eluir esses solutos não retidos. Ao discutir os picos em um cromatograma, a largura do pico, também conhecida como largura da linha de base, é definida como a largura do pico em sua linha de base, medida onde o pico começa a subir e onde ele retorna à linha de base. Finalmente, a resolução mede o grau de separação entre dois picos adjacentes, refletindo o quão bem os componentes de uma mistura podem ser distinguidos uns dos outros.