Method Article
צנתור כרונית של כלי הדם עכברוש נדרשת לעתים קרובות מתן חומרים, יש לקבל דגימת דם על פני תקופה של זמן או ישירה מדידות לחץ דם בהכרה. צנתור עורקי הירך של מדידות חולדה המקביל לחץ דם החיה מודע יהיה הפגינו.
בתחומים שונים של מחקר, גישה למערכת הדם במעבדה מחקרים הכרחי. מחקרים בחולדות תרופתי באמצעות צנתרים מושתל כרוניים היתר חוקר ביעילות אנושי לנהל חומרים, לבצע דגימה דם חוזרות ונשנות ומסייע מדידות ישירות מודע של לחץ דם וקצב הלב. לאחר קטטר הוא מושתל לטווח ארוך הדגימה אפשרי. חיים patency ו קטטר תלויה בגורמים רבים, כולל פתרון הנעילה בשימוש, משטר הסמקה חומר קטטר. סרט הווידאו הזה יהיה להדגים את המתודולוגיה של צנתור עורק הירך ואת ורידי של החולדה. בנוסף הווידאו תדגים את השימוש ורידי הירך צנתרים עורקי עבור דגימה דם, והתרופות ושימוש קטטר עורקי לקחת מדידות של לחץ הדם וקצב הלב מודעת עכברוש נעים בחופשיות. לקשור ולרתום מחוברת למערכת המסתובב יאפשר החיה להיות הובשימוש, יש דגימות שנלקחו על ידי החוקר, עם הפרעה מזערית החיה. כדי לשמור patency של הקטטר, תחזוקה יומי קפדני של קטטר נדרש פתרון באמצעות מנעול (100 U / ml heparinized מלוחים), מכונת הקרקע מזרק בוטה מחטים קצה ושימוש במסנני מזרק כדי למזער אפשרות של זיהום. זהיר עם טכניקות ניתוחיות aseptic, חומרים קטטר תקין וזהיר תחזוקה טכניקות קטטר, ניתן לקיים צנתרים פטנט ובעלי חיים בריא לאורך זמן (מספר שבועות).
1. טרם החל הליך כירורגי
הערה: לפני תחילת הליכים חיה לוודא שקיבלת את ההרשאה המתאימה דרך המוסד / ארגון. כמו עם כל הניתוחים הישרדות, לוודא כי הניתוח מבוצע בתנאים סטריליים ועל משככי כאבים ואנטיביוטיקה המתאים הדרוש משמשים לתוצאה מוצלחת.
2. הכנת תחומי כירורגי עבור מיקום צנתר
3. תיעול צנתר
4. החדרת צנתרים לווריד עורק הירך ו (איור 3)
5. כירורגי שיחת סיכום
- עבור תחזוקה לטווח ארוך הפתרון להחליף קטטר מלוחים עם הפרין U / ml 20 / מלוחים.
6. תחזוקה של צנתר (כפפות ועיקור יש ללבוש במהלך ההליך)
7. דגימת דם (כפפות ועיקור יש ללבוש במהלך ההליך)
הצמד את הקטטר עם מלקחיים מרופד.
8. עירוי תרופות
10. נציג תוצאות
למדוד נציג בלחץ הדם נלקח בעל חיים נע בחופשיות מודעת מוצג באיור 4. Phenylephrine (3 UG / kg, ד), 1 קולטן אלפא אגוניסט adrenergic, היה מנוהל לתוך עורק הירך לקו כדי להעלות את לחץ הדם, תוך מדידת לחץ דם מקו עורקי הירך. Phentolamine (4 מ"ג / ק"ג, ד),אנטגוניסט nonselective אלפא adrenergic, שנוהלה אז להוריד את לחץ הדם.
באיור 1. דיסקציה בלאנט של רקמת גוף. עם העכברוש על גבו, יהיה לך עשה כ ½ אינץ' (12 מ"מ) חתך על הזווית של הרגל האחורית באמצעות מספריים קהים או hemostats תוכלו בוטה לנתח את רקמת החיבור לחשוף את עורק וריד הירך ו.
באיור 2. ההפרדה של העורק הפמורלי ווריד מן הרקמה החיבורית.
באיור 3. ההשמה צנתר. שימוש Vanna מיקרו לנתח מספריים במקום חתך קטן של כ ¼ הדרך באמצעות כלי בזווית של 45 מעלות (למעלה) ואת המקום קנס שקצהו מלקחיים לתוך החתך דואר ושימוש עוד זוג מלקחיים להאכיל את הקטטר אל כלי השיט (באמצע). לבסוף, עם השלמת ההשמה של הקטטר תפר את הקטטר במקום (התחתון).
איור 4. למדוד לחץ דם נציג שנלקחו חיה נע בחופשיות מודע.
צנתור עורקי וריד יש היסטורית שימשו הן בחריפות ו כרוניים לפקח על לחץ הדם, דם מדגם ולספק חומרים המודל הניסיוני חולדה חיה 1-4. היתרון העיקרי של אלה instrumentations כירורגית הוא שהיא מאפשרת נהלי ניטור, כולל דגימה הממשל דם סמים, לחץ דם ניטור, להתנהל עם הפרעות מינימליות ו / או סטרס לבעל החיים 1. חוקרים רבים כתבו פרוטוקולים יש מתודולוגיות ספציפי שבו המעבדה שלהם מבצעת את הליך כירורגי 5-8. וידאו ואיורים להדגים מה במעבדה שלנו יש למצוא כדי להצליח לגבי העורקים הירך ואת הליך צנתור ורידי.
חולדות משמשות עבור מספר רב של מחקרים מדעיים עקב גודלם הזעיר ונוחות בטיפול במעבדה. ישנם כמה מקומות שבהם כרוניתקטטר יכול להיות ממוקם בתוך חיה, כולל וריד הצוואר, אבי העורקים בבטן, העורק הראשי ואת עורק הירך, עד כמה שם. המיקום עכברוש הירך לתוצאות צנתור כרונית באורך מוגברת של patency קטטר והיה ההתאוששות המהירה של משקל טרום ניתוחית חיה לעומת מקומות אחרים קטטר 9.
חוקרים רבים השתמשו שכינת צנתרים לדגימה דם אקוטי כמו גם כרוניות 1-5,11-13. במחקרים רבים דם מרובים שואבת נדרשים של חיה ו cannulation צנתור חיצוני / הוא אחד מתודולוגיה כי יש יתרון בשל אופיו הלא טראומטי; יתר על כן אפשר לעשות את זה בעוד החיה מודע, ובכך אינה מוגבלת על ידי ההשפעה של חומרי הרדמה גם בעלי חיים ניתן לנוע בחופשיות 1,10. השיטה הטובה ביותר שבאמצעותו ניתן להשיג דגימות דם כדי למדוד את הורמוני הלחץ במכרסמים כבר התווכחו ארוכות 6,13. באשר Studi פרמוקוקינטייםes, צינתור של החיה מחקר אישורים ובדיקות דם חוזרות ונשנות באיפוק מינימלי כאשר באמצעות מערכת צנתר מושתל כרוני. בנוסף, מחקרים הראו ריכוזי הבסיס מופחת של אדרנלין, נוראדרנלין ודופאמין בפלסמה של חולדות נע בחופשיות (קטטר הצוואר) לעומת בעלי חיים טופלו (30 שניות) ו - או מאופק (5 דקות) 14. דרך נוספת שבאמצעותה להבחין עליית הלחץ הוא על ידי מדידת רמות פלזמה corticosterone. בעבר הוצע כי גם לאחר שלושה עד ארבעה ימים של התאוששות כירורגית פעמים כי רמות פלזמה corticosterone היו גבוהות ב החולדה cannulated כרוני 15. עם זאת, השיפורים האחרונים ב מתודולוגיה קבעו כי אין הבדלים ברמות הבסיס פלזמה corticosterone של חולדות וריד cannulated לעומת חולדות uncannulated 16. בנוסף, המתודולוגיה HPLC לניתוח corticosterone גם גילה כי corticosterone רמות גבוהות של מתח איפוק, אך יציב לאחר צנתור הצוואר 16.
שימוש נוסף של צנתור כרונית היא מדידת לחץ הדם וקצב הלב במכרסמים. ישנן שיטות רבות, שבהם מנוצלים כדי למדוד את לחץ הדם ואת קצב הלב בחולדה, אלה כוללים את פולשני השרוול זנב מתודולוגיות, נהלים radiotelemetry צנתרים שכינת ישיר. לכל שיטה יש את היתרונות והחסרונות שלה, אשר מתוארים בפירוט בפרסומים אחרים. שכינת מלאות נוזל צנתרים יכול להיות מושתלים לתוך העורקים מרובים בתוך החולדה. עורק הירך היא רק אחת העורק כי ניתן להשתמש באמצעי זה. במשך לחץ / לב אמצעים דם קצב, סוף דיסטלי של הקטטר מחוברת מתמר לחץ מכויל. קטטר ניתן שוכנו באביב מגן המחובר המסתובב על מנת לאפשר תנועה חופשית של בעלי חיים, או המצורפת surgi כפתורמושתל ומלקק את החיה. צנתרים שכינת יש את היתרון של מזעור הלחץ לטווח ארוך על החיה 17,18. בנוסף החומרים הם זולים, כיול קל אמצעים לחץ מתמשך לטווח ארוך אמצעים ניתן להשיג בתנאים של לחץ נמוך יחסית במשך שבועות רבים 19. היינו רשלנות אם לא היינו מזכירים כי ישנם חסרונות בשיטה זו, ובכלל, היא טכניקה כירורגית פולשנית, תחזוקה של הקטטר נדרש לשמור, patency פגיעה בעורק עקב השתלת קטטר לבין פוטנציאל הזיהום עד כמה שם.
עבור אמצעים כרוני של לחץ דם הקלטות ישירות צנתרים עורקים כרונית, מושתל יותר מאתגר מבחינה טכנית אך הם מדויקים יותר ניתן לעשות זאת באופן רציף מבלי לפגוע בבעלי חיים. זנב השרוול מדידות מדויקות פחות, אולם הם אינם דורשים ניתוח ניתן לחזור עלed. זנב השרוול מתודולוגיות דורשים טיפול, כמו גם חימום של בעל החיים כדי להרחיב את כלי הזנב כדי להקל על זיהוי של דופק 20. טיפול ואת עומס החום הוסיף יכול להשפיע על מדידות לחץ הדם, ולכן לא מספק אמצעים מדויק באמת. יתר על כן, הלא ישיר זנב השרוול השיטה אינה מתירה את דם קל הדגימה סימולטני או והתרופות.
דרך נוספת שבאמצעותה מודדים ישירה יכולה להיות מושגת היא באמצעות המתודולוגיה telemetric. טלמטריה מאפשר הקלטות באיכות גבוהה של לחץ דם (ואמצעים אחרים) ברציפות במשך תקופות זמן ארוכות בחיות נע בחופשיות המודע ללא ריסון או הרדמה 18. עם זאת, מכשירים טלמטריה בזמן אידיאלי הם יקרים מאוד. כאשר לעומת טלמטריה, הטבות צנתור כוללים: ירידה "ההתקנה" ואת עלויות התפעול, את היכולת לנהל בקלות סמים בקלות לקחת דגימות דם אצל בעלי חיים באופן חופשי לנוע מודע. Administratיון של תרופות וחומרים, וכן דגימות דם מן החי להשיג את המחקר ניתן לעשות זאת בזמן מינימלי מטריד את החיה, ובכך ממזערת את הלחץ על בעלי חיים ועל המאפשר למדוד מדויק יותר.
הפקה וגישה חופשית של המאמר-video זה בחסות ADInstruments.
המחברים מבקשים להודות ד"ר אנדרו קינג, PhD וקטרינה המלך על תרומתו של האיורים. מענק NIH: R00HL087927.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
שם | סוג | חברה | מספר קטלוג |
העורקים צנתר | מתכלים | SAI עירוי | RFA-01 |
צנתר ורידי | מתכלים | מצרכים מדעיים, Inc | BB518-20-V & BB31785 / 2 |
27g 1 / 2 "מחט בלאנט | ציוד | משולב חלוקה Solutions, Inc | 9991113 |
23g 1 / 2 "מחט בלאנט | ציוד | משולב חלוקה Solutions, Inc | 9991109 |
PowerLab/8SP | ציוד | ADInstruments | w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / "target =" _blank "> ML765 |
Quad גשר | ציוד | ADInstruments | ML118 |
LabChart 7.2 | תוכנה | ADInstruments | |
BP מתמר עם שסתום & כבל | ציוד | ADInstruments | MLT844 |
ערוץ יחיד סיבוב | ציוד | Instech | 375/22PS |
מאזן יחיד הציר מונה הר סיבוב | ציוד | Instech | CM375BP |
Covance רתום עירוי | ציוד | Instech | CIH105 |
למעלה טבלה יחידה Isoflurane הרדמה | ציוד | Protech International, Inc | 61020 |
הרדמה מכרסמים מסכת | ציוד | Protech International, Inc | RAM-02 |
אינדוקציה מכרסמים הקאמרית | ציוד | Protech International, Inc | RIC-01 |
מסנן גז הרדמה מיכל | ציוד | Protech הבינלאומיאל, Inc | 80120 |
זרימה למינרית Tabletop הוד | ציוד | Sentry Air Systems, Inc | SS-200-WSL |
אוסטר הזהב A5 | ציוד | אוסטר מוצרים מקצועיים | 78005-140 |
אור סיבים אופטיים עם מדריך מתכווננת כפול | ציוד | LW מדעיים, Inc | חולה 1502-DGG1 |
Deltaphase מקורר באופן איזוטרמי Pad | ציוד | Braintree Scientific | 39DP |
כותנה שקצהו Applicators | מתכלים | סולון ייצור החברה | 36200 |
גזה ספוגים 2 "x2" | מתכלים | קנדל Curity | 2146 |
5-0 ניילון תפר | מתכלים | Ethicon | 661G |
משי 4-0 תפר | מתכלים | Deknatel | 8-S, 136075-0208 |
דבק רקמות | מתכלים | 3M | 1469SB |
Splinter & קיבוע מלקחיים | ציוד | ג'ורג' Tiemann & Company | 160-55 |
רקמות סטודנטים מלקחיים | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 91121-12 |
מיקרו מלקחיים / שרך מלקחיים | ציוד | ג'ורג' Tiemann & Company | 10-1942 |
אקסטרה גרפה מלקחיים פיין | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 11152-10 |
אולסן-Hegar מחט מחזיק | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 12002-12 |
סטודנט הלסטד-יתוש Hemostat | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 91308-12 |
רוצ'סטר פאן חילp | ציוד | Biomedical Research מכשירים, Inc | 31-1640 |
סטודנט מספריים כירורגי | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 91402-12 |
דומון מלקחיים | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 11251-35 |
מספריים הביתור Micro | ציוד | ג'ורג' Tiemann & Company | 160-210 |
פזילה מספריים | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 14075-11 |
הרטמן Hemostat | ציוד | פיין המדע כלים, Inc | 13003-10 |
רקמות מספריים | ציוד | ג'ורג' Tiemann & Company | 160-150 |
מפשק | ציוד | Custom Made |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved