הכנה, נהלים והערכת הזרקת הפלסמה טסיות דם עשיר בטיפול של דלקת מפרקים ניוונית בברך

Summary

דלקת מפרקים ניוונית בברך נתפסת לעתים קרובות במחלקה אורתופדית. אנחנו מציגים בפרוטרוט תהליך הטיפול דלקת מפרקים ניוונית בברך כולו עם הזרקת טסיות דם עשיר פלזמה, כולל הכנה, תהליכי הערכה.

Abstract

דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה) היא אחת המחלות הנפוצות ביותר המערכת נתקלה במחלקה אורתופדית. טיפול ניתוחי קיימת השפעה מוגבלת על התיקון של סחוס ועל התחדשות העצם. טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) הוא חומר ביו עצמיים שניתן לתקן סחוס פציעה או להאיץ ביעילות התחדשות העצם. אולם, דיווח מהפרוטוקולים הכנה PRP במחקרים קליניים הוא מאוד לא עקבי, עם רוב המחקרים מתן מידע מספיק כדי לאפשר את פרוטוקול כדי להיות מועתק. אנו מתארים שיטה הדיר של הכנת PRP באופן חזותי, הטיפול של KOA באמצעות הזרקה תוך-מפרקיות PRP, ושיטות להערכת התוצאה. PRP הוכן בעזרת צנטריפוגה זוגי ידנית. השכבה PRP היה שחולצו מן הדם ההיקפיים, משמש הזרקה משותפת חלל הברך. הערכות כללו הערכות של טסיות דם ריכוזים, התוצאות הקליניות. הכנת PRP על ידי צנטריפוגה ידנית דורשת פחות מכשירים, והוא פחות יקר מאשר סינון פלזמה או באמצעות ציוד צנטריפוגה. הפעם צנטריפוגה בשיטה שלנו צנטריפוגה כפול 6, 5 דקות עבור centrifugations בהתאמה כוחות של g x 800 ל- 1400, בהתאמה, כדי לאפשר הכנת עקבי סטנדרטית PRP. עם זאת, שיטה ידנית היא חשופה אופרטור השגיאה ולאחר הכנה אצווה PRP אינה זמינה. הזרקה תוך-מפרקיות של PRP הוכיחה להיות טיפול יעיל עבור דלקת מפרקים ניוונית בברך. ההליך כולו טיפול לקח פחות מ-30 דקות, יכול להיות מוגדר טסיות דם ריכוז PRP, הטיפול הוכח להיות יעיל כאשר הערכה על ידי מעקב.

Introduction

דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה) היא אחת המחלות השכיחות ביותר במחלקה אורתופדית; 30% - 50% מהאנשים מעל גיל 65 שנה ניסיון זו המחלה¹. בזמן הנוכחי, ניהול שמרני של KOA כולל בעיקר אוראלי הניהול של תרופות אנטי דלקתיות לא סטרואידיות וסמים התזונתי של הסחוס, הזרקה תוך-מפרקיות של נתרן היאלורונית, פיזיותרפיה. עם זאת, שיטות אלה לא יכול לעצור את התהליך של ניוון מפרקים בברך². פגמים הסחוס במפרק יכולים לגרום ללבוש משטח מפרקיות, יציבות משותפת, שינויים מטבוליים, אשר מהווים חלק בפתוגנזה של קואה³. עם זאת, בשל העדרם של כלי דם, עצבים ורקמות הלימפה של הסחוס במפרק, שחזור לאחר נזק קשה. שיטה יעילה של תיקון הסחוס חשוב במיוחד לטיפול של KOA. הטיפול של osteoclasia הוא גם מוקד מרכזי בטיפול קואה.

טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) הוא חומר ביו עצמיים, היישום של PRP עצם ובעיות מפרק הוא נחקר יותר ויותר. הרציונל ביולוגי לשימוש קליני של PRP כוללת השפעתו על המסירה המקומי של גורמי גדילה ושינוי של תגובת דלקתית, השפעות חיוביות על התפשטות ובידול תא⁴. לאחר ההפעלה לאחר הזרקה תוך-מפרקיות, PRP משחרר α-גרגר דרך degranulation, מפריש גורמי גדילה שונים, כולל את גורם גידול נגזר טסית דם, את הפיכת גורם גידול-β, הגורם גדילה דמויי אינסולין, גורם הגדילה באפידרמיס של צמיחה אנדותל כלי הדם, הגורם הצמיחה פיברובלסט. אלה לקדם את הפצת אוסטאובלסט ו- chondrocyte, לעכב התנוונות הסחוס, לחזק את יציבותו של עצם subchondral סחוס, לווסת את החומר המדכא רקמות של ביטוי גנים של מטאלו-פרוטאינאז ולתחזק את האיזון של סינתזה, השפלה של^5,proteoglycans⁶. לכן, PRP יכול לתקן סחוס פציעה ולהאיץ התחדשות העצם.

התוצאה של הזרקת PRP מושפע על ידי גורמים שונים, לרבות את האתר של הדגימה⁷, סוג צנטריפוגה הכנה שיטה⁸השימוש של תרופות נגד קרישת דם⁹ ומפעילים¹⁰. ישנן שיטות צנטריפוגלי בערך 3 סוגים כדי להכין PRP. צנטריפוגה ידנית, המבוסס על ציוד צנטריפוגה או טכניקות סינון פלזמה זמינים, למרות שיטות ידנית, מבוסס על ציוד נמצאים בשימוש הנפוץ ביותר. השיטה הידנית דורשת ציוד לפחות, נוח, עלות נמוכה, הוא פשוט לביצוע (איור 1). PRP מוכן על ידי ביצוע ידני צנטריפוגה פעמיים. מעורב דם היקפיים, נוגד קרישה הם centrifuged כדי להפריד בין hemocytes לבין פלזמה, טסיות דם. לאחר השמטת כדוריות דם אדומות על השכבה התחתונה, הנוזל supernatant הוא centrifuged להפרדה מחדש, חלוקתו supernatant טסיות-עניים פלזמה PRP האמצעית, subnatant משקעי כדוריות דם אדומות. השכבה האמצעית משמש הזרקה משותפת חלל הברך (אם הכמות אינה מספיקה, חלק תגובת שיקוע ניתן להסיק). הערכות של השיטה כוללים הערכות של טסיות דם ריכוז לבין התוצאות הקליניות.

תפוקתב מהפרוטוקולים הכנה PRP במחקרים קליניים הוא מאוד לא עקבי, הרוב המכריע של המחקרים אינם מספקים מידע מספיק כדי לאפשר את הפרוטוקול יהיה לשכפל¹¹. כאן, אנו מתארים שיטה ישימה הכנת PRP וטיפול של KOA עם PRP הזרקה תוך-מפרקיות, עם הערכה של התוצאה. קריטריוני ההכללה היו חולים עם דלקת מפרקים ניוונית בברך שיש הקלה בכאב המסכן תרופות להרגעה פשוטים (כגון פרצטמול), טיפול שמרני. לקבלת פטור כללו חולים עם הפרעה ניקוז ורידי החזרה או הלימפה; חולים עם דלקות מפרקים ברך; חולים עם dermatosis או זיהום באזור ההזרקה; חולים עם חום; חולים עם קרישה תפקוד סטייה; בחולים עם מחלת לב וכלי דם רציני. ההליך כולו טיפול לוקח פחות מ-30 דקות, טסיות דם ריכוז PRP מוכח להגיע מדידה מתוקננת. יעילותו מומחש הערכת התוצאות במהלך מעקב הדוק.

Protocol

בשיטות המתוארות אושרו על ידי ועדת האתיקה של החולים הכללי גואנג-דונג.

1. לקבל PRP על ידי צנטריפוגה ידנית

1. להכין את החולה במצב פרקדן בחדר ההפעלה סטרילי זרימה שכבתית עם טמפרטורת החדר נוח, לחות: טמפרטורת החדר היא 22 ° C והוא חדר לחות 60%.
2. השתמש מזרק 1-mL כדי לצייר 0.2 מ"ל של הפארין נתרן (2 מ ל = 12,500 U), ולאחר מכן להרטיב מזרק 50-mL.
   הערה: 3 מ"ל של סודיום ציטרט הוא גם אופייני בשלב זה כדי להחליף את הנתרן הפארין.
3. מעטה חוסם עורקים, לעקר את המרפק 2 - 3 פעמים ולהשתמש המזרק 50-מ לחה כדי לצייר 30 מ של דם היקפיים מן הווריד של המרפק.
4. לבצע את צנטריפוגה הראשון.
   1. לחלק דם היקפיים במידה שווה שני צינורות סטרילי צנטריפוגה 50 מ.
   2. לשים שני צינורות הרוטורים אופקי ואחר בצנטריפוגה, בתנאים אספטי.
   3. צנטריפוגה במשך 6 דקות ב 800 x g.
   4. לקחת את הרוטורים אופקי החוצה, ללבוש כפפות סטריליות, להוציא את צינורות צנטריפוגה.
   5. לבחון את ושרידים כדי לוודא כי הדם ההיקפיים היא מרובדת לתוך שתי שכבות.
   6. משתמשים מזרק נקי 10-mL לאיסוף הנוזל supernatant משפופרות צנטריפוגה שני אלה לתוך שפופרת צנטרפוגה נקי.
5. לבצע את צנטריפוגה השני.
   1. השתמש מזרק נקי 10-mL כדי להוסיף כמות שווה של מים סטרילי או תמיסת מלח לתוך צינור נקי צנטריפוגה אחר לאיזון. הכניסו את הצינורות הרוטורים אופקי. לסמן זה עם הנוזל שכבה supernatant-ידי טיח דבק.
   2. צנטריפוגה למשך 5 דקות ב 1400 x g.
   3. לקחת את הרוטורים אופקי החוצה ובדוק על ידי התבוננות ושרידים הנוזל של הצינור מסומן מחולק שלוש שכבות.
   4. השתמש מזרק 10-mL כדי לצייר 4 מ של נוזל מן השכבה האמצעית תאים גרעיניים (ליקוציט עשיר, PRP שכבה) השכבה התחתונה של תגובת שיקוע. אם הכמות שכבה אמצעית מספיקה, רק לצייר 4 מ"ל מזה.
   5. לשים 0.4 מ של הנוזל בצינור ובקופת סטרילי (K₂EDTA, 3.6 מ"ג) להערכה, עוזב 3.6 מ של נוזל הנותר במזרק.
      הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן.

2. תוך-מפרקיות מינהל PRP

1. תנו לשקר חולה פרקדן על שולחן הניתוחים, לכופף את הברך עד 90 מעלות.
2. אתר החדירה בקצה תחום נחות של צלחית ו- 1 ס מ לרוחב רצועה ברך. השתמש עט מרקר כדי לסמן את האתר.
3. לבצע עיקור העור על החדירה שלוש פעמים עם anerdian III, לבש כפפות סטרילי, ולכסות עם חור-המגבת אספטי.
4. מקם את המזרק מקביל השוקה, ולאחר מכן לבצע הניקוב בזווית של 45 מעלות. לחלוטין את המחט לתוך העור.
5. להזריק את מ 3.6 ל PRP מן המזרק לתוך חלל משותף הברך.
6. מכסה את המיקום לנקב עם גזה סטרילית, לתקן אותו עם טיח דבק.
7. הפעילו לחץ על הפצע למשך 10 דקות. להתבונן על כל תגובה שלילית חמורה במשך 30 דקות.
8. לנהל סך של שלוש זריקות במרווחי זמן חודשי.
   הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן.

3. לאחר הניתוח הערכה של הזרקת PRP

1. להעריך את הריכוז של טסיות דם ב- PRP.
   1. השתמש mL 0.4 של PRP מהצינור קרישה (K₂EDTA, 3.6 מ"ג).
   2. לנתח את ריכוז PRP באמצעות מנתח אוטומטית תאי הדם של טסיות דם.
2. להעריך את התוצאה לאחר הניתוח של הזריקה PRP.
   1. עם התייעצות יום אחד לפני אחד של שלושה טיפולים, התנהלות נוספת מעקב אחר מטופלים 1 יום לאחר כל טיפול, 3 ימים לאחר כל טיפול, שבוע 1 לאחר כל טיפול, חודש לאחר הטיפול השלישי, 3 חודשים לאחר הטיפול השלישי, ל- 6 חודשים לאחר הטיפול השלישי.
   2. השתמש סולם אנלוגי חזותי (באס), מערב אונטריו, מדד אוסטיאוארתריטיס אוניברסיטאות מקמאסטר (WOMAC), ציון החברה הברך (KSS) ו Lysholm הברך מידה תפקודית כדי להעריך את ההשפעה לאחר הניתוח.

תוצאות

כתוצאה מכך, טסיות רוזן PRP להגיע ריכוז סטנדרטי ברמה של 1121 x 10³/µL. ערכנו את הסקרים להמשך טיפול 15 שמתואר הפרוטוקול למטופל זכר בת 55 עם קואה מוקדם. זה היה ברור שהתוצאה הקלינית המוקדמות כי היה משביע רצון לאחר מתן תוך-מפרקיות של PRP (איור 2). אך יעילותם לטווח בינו...

Discussion

הריכוז של טסיות דם בדם אנושי נורמלי הוא בין 150,000/µL ל- 350,000/µL, הוא נרחב האמין כי טסיות דם ריכוז PRP צריך להגיע 1,000,000/µL, אשר הוא 3 עד 5 פעמים ריכוזים נורמלים⁹. על-פי מערכת היררכית כפת, הוא האמין כי PRP יש השפעה ברורה כאשר הריכוז טסיות דם הוא פחות מ 3 פעמים ריכוז רגיל, בעוד PRP יש אפקט מעכבים ?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Centrifuge	Eppendorf	5702
Centrifuge tube	CORNING	430828
Horizontal rotor	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	310173	Disinfect the skin
1ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.4*13 RWLB
10ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	1.2*38 TWSB
50ml Syringe	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.7*32 TWLB
Medical Tourniquet	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Single-use sterile rubber surgical gloves	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Disposable Draw Blood Needle	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.55*20 L(II) RWLB
Heparin Sodium Injection	SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD	1706101	2ml:12500U
Jifro Hand Antiseptic Rinse Free Gel	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	311793
Medical Cotton Swab	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Disinfect the skin
10ml Normal Saline	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Automatic Blood Cell Analyzer	Beckman Coulter	LH-750
Hole-towe			Sterile
Anticoagulation Tube(Blood Collection Tubes, K2E 3.6mg)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Store in a cool dry place within 4 to 25 degrees Celcius
Tweezers	RWD LIFE SCIENCE	F12006-10
Sterile Gauze	Guangdong Ze Chang Trade Co., LTD	170915
Adhesive Plaster	3M Transpore	1527C-0
Skin Marker Pen	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., LTD	10110