הערכת הפרודוקטיביות של מושבות של הצרעה החברתית (וספיסיאה) ומבוא אל שיטת הצרעה היפנית המסורתית.

Summary

זה נייר מתודולוגי מעריך את הפרודוקטיביות של מושבת הצרעה החברתית על ידי בחינת מספר התאים של החברה ל100 מסרק, כדי להעריך את המספר הכולל של מבוגרים הצרעות המיוצרים. הסרטון המקושר מתאר כיצד לחפש קינים של צרעה, שיטה שפותחה על ידי רודפי צרעות חובבים.

Abstract

עבור צרעות ושדרה, פרודוקטיביות המושבה מוערכת בדרך כלל על ידי ספירת מספר תאי הזחל. נייר זה מציג שיטה משופרת המאפשרת לחוקרים להעריך באופן מדויק יותר את מספר המבוגרים המיוצרים, לספור את מספר של meconia (שרפרפים שמאל בתאים על ידי הזחלים הצרעה כאשר התגלמות לתוך מבוגרים, לכל 100 תאים) בכל מסרק. ניתן להחיל שיטה זו לפני או אחרי קריסת המושבה (כלומר, בקינים פעילים או לא פעילים). העיתון מתאר גם כיצד לאתר את מושבות הצרעה הפרועה באמצעות "סימון הצרעה" , ולרדוף אחר הצרעה האוספת אותם, תוך שימוש בשיטה שבוצעה באופן מסורתי על ידי אנשים מקומיים ביפן המרכזית (כפי שמודגם בסרטון המקושר). לשיטת הרדיפה הערבית שתוארה יש מספר יתרונות: קל ליזום מחדש את המרדף מנקודה שבה המטרה המעופפת חזרה לקן אבדה, וקל לאתר את מיקום הקן כצרעות מסומנות לעתים קרובות מאבדים את הדגל שלהם בקן כניסה. שיטות אלה להערכת פרודוקטיביות המושבה ואיסוף קנים יכולים להיות יקרי ערך עבור חוקרים הלומדים צרעות חברתיות.

Introduction

כל המינים מחושבים לפתח אסטרטגיה אופטימלית להישרדות ורבייה בקרב מגוון רחב של אסטרטגיות אפשריות. בבחירה טבעית, אנשים עם תכונות כי למקסם את ההצלחה הרבייה של האדם ישאיר יותר צאצאים (וגנים) לדור הבא. לכן, מספר הצאצאים המיוצרים על ידי אדם יכול לשמש כאינדיקטור לכושר האבולוציוני היחסי של האדם. בהקשר אקולוגי נתון, השוואת מספר הצאצאים המיוצרים ביחס לאסטרטגיות התנהגותיות חלופיות יכול לעזור לחוקרים לחזות את האסטרטגיה הטובה ביותר עבור אופטימיזציה כושר¹.

לדבוראים החברתית (כגון צרעות, דבורים ונמלים) יש מערכת של שלושה מסלולים שונים, שהם עובדים (נקבות סטריליות), מלכות (גיאנס) וזכרים¹. רק מלכות חדשות (gynes) וזכרים נחשבים לקראת הכושר בדבוראים חברתי. הפקת העובדים אינה תורמת באופן ישיר לכושר מאז שהעובד עקר. מצד שני, מלכה שיכולה לייצר פרודוקטיביות מושבה גבוהה יותר (כגון מספר גבוה יותר של תאים מוחלטים או קן כבד יותר) נחשבת לכושר גבוה יותר בדבוראים החברתית, ללא קשר למספר מלכות וזכרים חדשים שיוצרו למעשה (ראו , לדוגמה,טיבבטס וריב² ומטיולה וסילי³). באופן כללי, קשה לספור בדיוק את מספר הצאצאים המיוצרים על ידי מושבה של דבוראים חברתית. למעשה, מלכות של חרקים חברתיים רבים חיים במשך יותר משנה אחת (למשל, מלכות נמלים נמלה יכול לחיות > 20 שנים⁴ ו מלכות הונאיבי יכול לחיות 8 שנים⁵). בנוסף, מלכה אחת עשויה לייצר אלפי צאצאים של הרבייה במהלך מספר שבועות או חודשים, גם במינים שנתיים של וספה כללי ואספולה^6,7,8. יתרה מזאת, תוחלת החיים של העובדים קצרה יותר מזו של מלכת אמם, והעובדים מתים לעתים קרובות מהקנים שלהם. מכאן, גם אם אפשר לספור במדויק את כל המבוגרים בקן בכל נקודה נתונה בזמן, הרוזן לא היה מתאר במדויק את מספר הצאצאים המיוצרים. לפיכך, מספר הצאצאים שיוצרו מוערך במידה רבה מגודל הקן, מספר העובדים בקן, או המשקל של הקן בנקודה נתונה בזמן^3,9,10. מספר תאי הזחל עלול לגרום להערכת יתר של ייצור הצאצאים כאשר תאים ריקים. אותה שיטה יכולה גם לגרום להערכה פוטנציאלית של הפקת הצאצאים מכיוון שמסרקים של תאים קטנים המכילים את העובדים, יכולים לייצר שניים או שלושה גדודים של זחלים^6,7,11.

המטרה הראשונה של עבודה זו היא לספק שיטה משופרת להערכת פרודוקטיביות הצרעה העמוד השדרה במונחים של מספר מבוגרים המיוצרים. Yamane ו Yamane הציעו כי הדרך הטובה ביותר להעריך את מספר הצאצאים המיוצרים על ידי המושבה היא לספור את המקוניה בקן¹². המקוניה היא הגלולה הצואה המורכבת מקוטיקולה, בטן, ותוכן בטן שזחל עוזב בתא שלו בעת הצגת (איור 1A). המספר הכולל של meconia המיוצר לכל מסרק מחושב על ידי הכפלת המספר הכולל של תאים הנמצאים במספר הממוצע של meconia לכל תא. יש לעתים קרובות שכבות מרובות של meconia בתא, וכל meconia מציין כי אדם בהצלחה התגלמות תא^6,11 (איור 1b). בעת הערכת המספר הממוצע של meconia לכל תא, אם מספר התאים שנבדקו קטן (גודל מדגם קטן), השגיאה הסטנדרטית (SE) מגדילה, וכתוצאה מכך, השגיאה עבור המספר הכולל של meconia לכל מסרק הופכת לגבוהה יותר מאשר אם גודל המדגם היה גדול יותר. ה-SE של הממוצע (SEM) הוא מדד של הפיזור של אמצעים לדוגמה סביב ממוצע האוכלוסיה. לכן, במחקר זה, אני מתמקד SEM של מספר של meconia לכל תא כדי להעריך את האוכלוסייה (מספר מבוגרים המיוצרים) מן הממוצע לדוגמה (המספר הממוצע של meconia לכל תא). מחקר זה מנסה לקבוע כמה דגימות נדרשות כדי לקבל שיעור SE של פחות מ 0.05 לכל תא. כדי לעשות זאת, סימולציה מספרית מבוצעת עם נתונים אמיתיים על מספר של meconia למסרק, כדי לקבוע את גודל המדגם המינימלי (עבור העובד והמלכה קומבס) צריך להעריך את הערך הזה במדויק בתוך SE המוגדר של 0.05.

שדרה מושבות צרעה לחיות ב קינים נסתרים (תת קרקעי או אווירי) מורכב מסרקים אופקיים מרובים, נבנה בסדרה מלמעלה למטה^6,7,11. הגודל הממוצע של התאים גדל מן הראשון (למעלה) למסרק האחרון (למטה). בתוך מסרקים התחתון, משמרת פתאומית בגודל התא הממוצע ניתן לראות. תאים רחבים אלה בנויים לפיתוח מלכות חדשות. מכאן, הערכה מדויקת יותר של פרודוקטיביות המושבה (כלומר, מספר האנשים המיוצרים) ניתן להשיג כאשר המספר הכולל של meconia בתאי העובד (תאים קטנים) והמלכה תאים (תאים גדולים) נחשבים. על מנת להעריך את הכושר ברמת המושבה, החוקרים יכולים להעריך את מספר מלכות המיוצר ולהתמקד המקוניה בתאי המלכה בלבד. באשר לזכרים הרבייה, הם מוגברים בתאי הפועלים או המלכה, תלוי במין. כך, ייתכן שיהיה קשה להעריך את הייצור הגברי של מושבה, למעט במינים שבהם לזכרים יש מידה שלישית, תא מיוחד¹³ (למשל, דוליכותיםולה אראריה).

המטרה השנייה של עבודה זו היא להציג טכניקה שימושית לאיתור מושבות צרעה בר השדרה בשדה ושתילת אותם לתוך תיבות מעבדה קן. למרות שחלק מהחוקרים משיגים קיני צרעות משיחות בקרת הדברה (כלומר, אנשים שמדווחים עליהם כמזיקים^14,15), שיטה זו אינה תמיד אפשרית או רצויה. החוקרים אולי יצטרכו לאסוף קנים באזורים פראי ומיושב שבו בקרי מזיקים לא פועלים, או לנהל את המחקר שלהם על ידי השגת באופן גמיש יותר קנים בזמנים ספציפיים. מעניין, אנשים המתגוררים באזורים ההרריים של מרכז יפן באופן מסורתי לאסוף והצרעות האחוריים (האספולהשיצ, אספולה פליוואז ואספולה דלקתית) למזון. לכן, האיסוף וטכניקות הגידול המלאכותי לצרעות אלה מפותחות היטב באותם אזורים¹⁷.

המאמר מסכם גם את השיטות המועסקות לגבי צרעות מאחורי האספולה . האורגניזם הניסיוני למחקר זה היה V. shidai, הצרעה החברתית, מקננת הקרקע להיות במערב אסיה ויפן. V. shidai בעל גודל המושבה הגדול ביותר בין כל הצרעות היפניות בעמוד השדרה, עם סך של 8,000 עד 12,000 תאים לכל הקן, עם מקסימום של 33,400 תאים^14,18. העובדים של V. shidai יש משקל רטוב ממוצע של 67.62 ± 9.56 mg. הזכרים בדרך כלל גדלו בתאי העובד; לעומת זאת, מלכות חדשות גדלו בנוי במיוחד, מלכה רחבה תאים¹⁴.

איור 1: Meconium בתא זחל. (א) חתך רוחב של מסרק של אספולה שידאי. Meconia מצוין על ידי חיצים אדומים. (ב) שתי מיווניה משכבות. כל חץ כחול מצביע על אחד המקוניום. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

1. הערכת פרודוקטיביות במושבה

1. הערכה של מספר התאים בכל מסרק
   1. . תפריד את הקומבס אחד אחרי השני לטאטא את כל הצרעות המבוגרים מן המסרק ולהוציא את כל הזחלים והגלמים מן התאים עם פינצטה.
   2. למדוד את המידות הכיכר של 10 תאים שנבחרו באקראי למסרק, באמצעות תוכנת דימות (g., תמונה J גירסה 1.48, ראה http://imagej.nih.gov/ij/).
      1. צלם תמונה עם ההפניה לקנה המידה כך שכל התאים בתמונה מימין למעלה.
      2. בהתבסס על אורך בפועל של הקנה מידה, המר את כל האורכים הנמדדים לפיקסלים.
      3. למדוד את האזורים של 10 תאים בפיקסלים ולהמיר אותם לאזורים בפועל.
      4. לחשב את האזור הממוצע של העובד תאים המלכה.
   3. העריכו את מספר תאי העובד והמלכה על ידי חלוקת האזור של כל מסרק על ידי אזור התא הממוצע לכל מסרק.
2. ספירת מספר המקוניה להערכת פרודוקטיביות המושבה
   1. לספור את מספר של meconia לכל 100 תאים עבור כל מסרק על ידי שבירת בזהירות את המסרק ובחינת meconia.
      הערה: מספר זה של תאים נקבע כאן כדי להיות מספיק (ה-SE של מספר של meconia לכל תא הוא בתוך 0.05, עיין בסעיף תוצאות הנציג). Meconia אולי התחזק לשתי שכבות או יותר בתא (איור 1).
   2. לחשב את המספר הממוצע של meconia לכל תא עבור אלה 100 תאים.
   3. לחשב את המספר הכולל של meconia עבור כל מסרק (כלומר, מספר האנשים המיוצרים, הפרודוקטיביות המושבה), שופר מהמספר המשוער של תאים ואת המספר הממוצע של meconia לכל תא עבור מסרק זה.

2. מציאת האספולה קיני

1. תגרה
   1. לתלות חתיכות דיונון, דגי מים מתוקים, או לב עוף (כ 10 גרם בסך הכל) על ענף עץ בגובה כי ניתן להגיע בקלות ביד (איור 2).
   2. מניחים את הפיתיונות האלה לאורך הכביש (למשל, לאורך כביש החוצה יער או לאורך נהר) בשעה 50 עד 100 תחנות, עם לפחות 5 מ ' בין כל תחנה.

איור 2: מתן צרעות עם פיתיון בשר מסומן בדגל. (א) מפתה צרעות עם בשר המחובר לקצה מקל. (ב) פיסת הבשר קשורה בחוט לדגל פלסטיק. (ג) הצרעה אוחזת בבשר הקשור לדגל. "כגון" מסומן "בדגל", יגביר את הניראות של החגר המעופף. התמונות בלוחות B ו- C צולמו על ידי מיכל. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

2. מתן צרעות עם פיתיון "מסומן"
   1. בנייה והצמדה של דגלים
      1. לחתוך פלסטיק (פוליאתילן) שקיות לרצועות של 3-5 מ"מ רוחב ו 15 ס מ אורך באמצעות חותך תיבת.
      2. הכינו 1.5 מ"מ³ של לב עוף או דיונון על שיפוד במבוק או ענף דק (קוטרו של פיתיון הבשר יכול להיות 1-2 מ"מ, פחות מ 15 מ"ג לעובד V. shidai ; איור 2).
      3. לקשור פתיל הדגל (רצועת פלסטיק, פחות מ 10 מ ג) ולאחר מכן לפיתיון בשר, הצמדת אותו בתוך 3 מ"מ מן הדגל (זה נקרא" הדגל "המסומן). לחתוך את החוט רופף מעל הקשר.
         הערה: השתמש חוט פוליאסטר בסדר מאוד בשימוש בדרך כלל עם מכונות תפירה.
   2. הצגת פתיון הבשר לצרעה
      הערה: הקן נמצא באופן היעיל ביותר על-ידי ביצוע הצרעות שחוזרות שוב ושוב בתוך 4 דקות מלעזוב. זה בגלל צרעות כי לקחת את הפיתיון ולחזור במהירות יש קן בקרבת מקום.
      1. צבעו סימן ייחודי על כל בית חזה כדי לזהות את הצרעות בנפרד כאשר הם נושכים את הפיתיונות (רצוי עם עטי צבע על בסיס מים, ראה שולחן חומרים).
      2. הציבו את הדגל בחוט התחתי שמתחת לצרעה בזמן שהוא נושך את הפיתיון המסומן כשהוא מציג את הפיתיון לצרעה (הצב את הדגל כך שהוא והחוט יעבור מתחת לבטן של הצרעה מתחת לבית החזה).
   3. בעקבות צרעה מסומנת
      1. אספו את הפיתיונות מהאזור שמסביב, כך שהצרעה החוזרת עשויה לחזור לאותה נקודה, לפני שתעקוב אחר צרעה.
         הערה: בעקבות הצרעות המסומנות מתבצע הטוב ביותר עם קבוצה של שניים או יותר אנשים. לפחות אדם אחד נשאר ב-transect, ומספק את הצרעות עם הבשלה מסומנים, בעוד האחרים (עם) לעקוב אחר הצרעה המסומנת. כאשר יותר מצרעה אחת נמשכת לאותו פיתיון, סמן ועקוב רק אחר צרעות העפות באותו כיוון.
      2. עקבו אחר צרעה. עם פיתיון מסומן
      3. כאשר הצרעה הבאה נוחתת איפשהו בדרך לקן שלו, להרים בעדינות את הצרעה עם מקל ארוך (הסניף) או מוט הדיג ולצפות בו עד שהוא מתחדש הטיסה.
         הערה: להיות עדין ולא להכות את הצרעה מנוחה כי זה יהיה להפיל את הפיתיון ולעוף משם.
      4. כאשר הצרעה מעצבת עוד כדור בשר לפני הטיסה חזרה לקן שלו, לקרוא רק את הדגל, אם יש צורך בכך.
         הערה: הצרעות מתאדמות ולעס את החוט, ומסירים את הדגל מפתיון הבשר. אם זה קורה לעתים קרובות, להפוך את הדגלים קצר יותר כדי להגדיל את היכולת טיסה מעופף.
      5. כאשר צרעה בורחת מאיתור בעת היותו אחריו, לחכות הצרעה לחזור לתחנת הפיתיון על הטרנסect לפני שחוזר על המרדף. הפעם, בעוד הצרעה היא נושכת את הפיתיון החדש, לשאת את מקל פיתיון (ואת הצרעה) עד לנקודה שבה זה היה לאחרונה נמלט גילוי.
         הערה: צרעות מזון לא להרפות הפיתיונות שלהם בקלות, לא לעקוץ אם מטופלים בעדינות. לפיכך, הצרעה עם הפיתיון המסומן ניתן להעביר למיקום הרצוי על ידי החזקת הדגל, ללא הצרעה בורחת.

3. העברת הקן

1. מבנה תיבת הנשיאה
   1. לבנות תיבות קן בגדלים שונים, מ 10 עד 20 ס"מ אורך ורוחב בין 10 עד 20 ס מ גובה, כדי להתאים קינים בגדלים שונים.
      הערה: קופסאות בגודל זה גדולות מספיק כדי להכיל קינים צעירים של V. shidai (שנאסף ביפן המרכזית בין אמצע יולי לאמצע אוגוסט). הפוך תיבת נשיאה בהתאם לגודל הקן של כל מין, עבור כל שלב גידול.
   2. בנו את רשת הבמבוק וחברו אותו לתוך הקופסה, כ 2 ס מ מעל החלק התחתון של הקופסה, כדי להקל על המיקום של הקן בתוך תיבת הנשיאה.
   3. לכסות את החלק התחתון של תיבת הנשיאה עם העיתון ולהדביק אותו מעץ, הלוח הנשלף (איור 3).
      הערה: העיתון יהיה, מאוחר יותר, לאפשר לצרעות ללעוס אותה כאשר הם בונים מסרקים נוספים מתחת לתיבת הנשיאה כאשר זה ממוקם בתיבת קן (ראה סעיף 3.2).
2. חפירה של הקן
   1. לפני החשיפה של הקן כולו
      הערה: ללבוש בגדי הגנה כדי להימנע מלהיות עקץ על ידי צרעות המגנים על הקן שלהם.
      1. , ברגע שנמצא קן הצרעות. הוא חפירת את הקן
      2. חותמת נמרצות על הקרקע סביב הקן במשך כ 10 עד 20 דקות כך עובדים עוזבים וחוזרים לקן להישאר בפנים כדי להגן עליו, כדי לאסוף כמה שיותר עובדים.
         הערה: אם הצרעות ממשיכות להישאר מחוץ לקן, עדיף ללכוד אותם באמצעות רשת חרק. למרות הטבעת שימושי עבור v. flaviceps, v. shidai, ו -v. דלקתית, עובדי מינים אחרים מן הקן עשויים לתקוף את האדם ביצוע הטבעה. במקרה זה, דלג על שלב זה.
      3. להאיר אור ישירות לתוך כניסת הקן כדי לקבוע את הכיוון שבו הכניסה הקן רץ. השתמשו באצבע כדי לאשר את הכיוון של חור הקן, בעוד שנחפר בעדינות אדמה מסביב לקן.
   2. לאחר החשיפה של הקן כולו
      1. כאשר הקן כולו נחשף, הפיצו בד ומניחים את הקן מעליו כדי למנוע מצרעות לברוח אל האדמה מתחת לקן.
      2. מניחים את הקן שנחפר לתוך תיבת עץ (נושאת) לצורך הובלה למעבדה (איור 3); לאחר מכן, כיסו אותו בענפים ובעיתון. השאר את החלק העליון של הקן נחשף כאשר הוא בתוך התיבה.
      3. הניחו את תיבת הנשיאה על בד במשך 5 עד 10 דקות, עד אשר הצרעות הופכות לרגועות.
      4. לאסוף כל צרעות בסביבה עם רשת חרק ולהעביר אותם למעבדה עם הקן.
         הערה: כהליך איסוף אלטרנטיבי, הרסם את דיירי הקן על ידי עשן צלולואיד או דיאתיל אתר אל הקן לפני החפירות.

איור 3: תיבת נשיאה. (א) תיבה לנשיאת קנים שנאספו בשדה. (ב) רשת במבוק ממוקמת בתחתית הקופסה. שתי התיבות בתמונה מימין הן הפוכות. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

4. גידול אספולה

1. מבנה תיבת הקן
   הערה: תיבת הקן עשויה מעץ, עם מימדים של 50 ס מ באורך וברוחב ובגובה 70 ס מ לגידול V. shidai (קן בוגר הוא כ 40 ס מ קוטר בטבע). הפוך את תיבת הקן על פי גודל הקן של המינים כדי להיות מתרומם.
   1. לספק את תיבת הקן עם חור כניסה (בדרך כלל ממוקם בחלק העליון של התיבה) כדי לאפשר צרעות לעזוב את הקן כדי מספוא.
   2. מלא כ 1/3 של תיבת הקן עם אדמה כזאת המתרחשת במקום שבו הקן נאסף.
   3. התקן רשת תיל (עם גודל שינוי של 1.5 ס מ²) בכניסה של תיבת הקן כדי למנוע חדירה של צרעות אחרות (טורפים, כגון וספה מאנדארניה והווספה).
   4. מניחים שני מוטות עץ בתיבת הקן שיכולים לשאת את תיבת הנשיאה (איור 4).

איור 4: מעבדה התקנה. (א) הגדרת תיבת מנשא לתיבת קן המשמשת למחקר ארוך טווח. לפני הצבת תיבת הנשיאה בתיבת הקן, לוח העץ בחלק התחתון של תיבת הנשיאה הוסר, ומשאיר רק את העיתון כדי לכסות את החלק התחתון של הקן. (ב) סדרה של תיבות קינון עם משאבי מזון התלויים בקו תיל. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

2. השתלת תיבת הנשיאה לתוך תיבת הקן
   1. שמרו את תיבת הקן במקום יבש תוך כדי גידול צרעות בקנים שנאספו (כלומר, במקום שאינו חשוף לגשם).
   2. הסירו את לוח העץ בתחתית תיבת הנשיאה והכניסו אותו לתיבת הקן למחקר ארוך טווח (איור 4).
      הערה: לעתים קרובות, הצרעות ינשכו חורים בעיתון המכסה את החלק התחתון של תיבת הנשיאה, ולכן יש סכנה של להיות מרוח על ידי צרעות לברוח דרך החורים. לכן, ללבוש בגדים הגנה בעת שתילת הקן.
3. האכלה צרעות
   1. מניחים סוגים שונים של בשר (דיונון, דגי מים מתוקים, חזה עוף או לב עוף) ופתרון 1:3 של דבש ומים בערך 3 מ' מתיבת הקן.
   2. ספק מספיק מזון לדרישות ההזנה של יום אחד. מחדש מזון טרי מדי יום (וspinae לא מספוא על בשר ישן/רקוב).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

תוצאות

מטרה אחת של מחקר זה היה לקבוע כמה דגימות נדרשות כדי לקבל SEM של מספר של meconia לכל תא שהוא פחות מ 0.05. במחקר זה, מסרק עם גודל תא ממוצע של < 20 מ"מ² הוגדרה כמסרק עובד, ואילו מסרקים גדולים יותר הוגדרו כמלכה קומבס. ספרתי את מספר התאים עבור המלכה קומבס ומסרקים עובד (במחקר זה, ספירות...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

הפרודוקטיביות של המושבה של דבורים, נמלים וצרעות הוערך בעבר על ידי מספר העובדים והתאים בקינים או לפי משקל הקנים^3,9,10. מחקר זה מראה כי האומדן של מספר meconia מספק אומדן טוב יותר של המספר הכולל של אנשים המיוצרים (כלומר, אינדיקטור טוב יותר לפר?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
cuttlefish	Any		fresh/ as a bait
dace	Any		fresh/ as a bait
chichken heart	Any		fresh/ as a bait
plastic bag (polyethylene)	Any		as a flag
bamboo skewer	Any
industrial sewing thread	FUJIX Ltd.	King polyester, No.100
paint marker pen	Mitsubishi pencil	UNI, POSCA, PC5M
fishing rod	ANY
carrying box			made of wood
nest box			made of wood