כדי להתחיל, למחוץ את החומרים הרפואיים Pheretima, Periplaneta americana, ו Hirudo עם מטחנת צמחים. לנפות את אבקת המרפא דרך מסננות תרופות סטנדרטיות של מספר שתיים ומספר ארבע. אספו את האבקה בין שתי המסננות כדי לקבל את אבקת הדגימה הנדרשת.
קח גרם אחד של האבקה בצינור צנטריפוגת פלסטיק 50 מיליליטר. הוסף 20 מיליליטר של תמיסת חומצה טריכלורואצטית 5% והומוגניזציה ב -1, 000 סל"ד למשך דקה אחת עם הומוגנייזר פיזור במהירות גבוהה. לאחר הומוגניזציה, צנטריפוגה את ההומוגנאט ב 1, 717 G במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר ולסנן את supernatant דרך משפך זכוכית סופג כותנה טבול לתוך בקבוק נפח 50 מיליליטר.
לאחר חזרה על תהליך המיצוי פעמיים עם 15 ו -10 מיליליטר של תמיסת חומצה טריכלורואצטית 5%, שלב את התסנין והשלם את הנפח עד 50 מיליליטר עם תמיסת חומצה טריכלורואצטית 5%. לאחר מכן, להוסיף במדויק שני מיליליטר של תמיסת הידרוקסיד נתרן ו 0.5 גרם של פרפין מוצק בבקבוקונים 20 מיליליטר headspace. לאחר מכן מניחים אותם בתנור ב 70 מעלות צלזיוס במשך כ 30 דקות.
הוציאו את הבקבוקונים ותנו להם להתקרר לטמפרטורת החדר כך שהפרפין יתמצק. כדי לעבד את מרווח ראש הדגימה, הוסף שני מיליליטר מכל תמיסת מיצוי דגימה לפרפין המוצק המכיל בקבוקונים. לחץ על המכסה ואטם את הבקבוקון.
הניחו את בקבוקוני הראש האטומים על ה-GCMS למדידה. כדי לקבל את העקומה הסטנדרטית, שאפו סדרה של שני מיליליטר של תמיסה סטנדרטית של טרימתילאמין על גבי שכבת הפרפין המוצקה. הניחו את בקבוקוני הראש האטומים על המכונה למדידת טרימתילאמין.
כדי לבצע את הבדיקה המדויקת, שאפו שני מיליליטר של 0.1 מיקרוגרם למיליליטר טרימתילאמין תמיסה סטנדרטית על גבי שכבת הפרפין המוצקה. בצע שש בדיקות מקבילות במכונה בהתאם להוראות היצרן. לניסוי קצב ההתאוששות, אפו מספר אצוות של אבקת הדגימה בתנור עד שלא זוהה טריאתילאמין ב-GCMS כפי שהודגם קודם לכן.
לאחר מכן, קחו כל גרם אחד של אבקה אפויה ודקה בתנור לצינורות צנטריפוגות פלסטיק נפרדים של 50 מיליליטר. הוסף 50 מיקרוליטר של תמיסה סטנדרטית של טרימתילאמין לכל הצינורות ותמץ עם תמיסת חומצה טריכלורואצטית 5% כפי שהודגם קודם לכן. זמן השמירה של טרימתילאמין נמצא 2.3 דקות עם שיא חד וללא הפרעה מזיהומים אחרים.
דגימות Pheretima, Periplaneta americana ו-Hirudo שנבדקו על ידי ייבוש כדי להפחית את רמות הטריאתילאמין בעשבי התיבול הראו שיעורי התאוששות ממוצעים של 84.49, 94.66 ו-85.67% בהתאמה. Triethylamine זוהה בתשע קבוצות של עשבי תיבול עם ריכוזים הנעים בין 13.23 ל 271.63 מיליגרם לקילוגרם.
