לביצוע קריופציית מיומרים על דגי זברה, השתמש בקריופרובי מפלדת אל-חלד המיוצר בהתאמה אישית. כדי למנוע כוויות קור בעת הטיפול בבדיקה במהלך ההליך, הכנס את ידית הבדיקה לקצה פיפטה וחבר אותה על ידי עטיפתה בנייר דבק. לפני תחילת הליך ההקפאה, הכינו לתמיסת העבודה בהרדמה, כף לטיפול בדגים, ספוג לח ומיכל עם מי מערכת להתאוששות הדג לאחר ההליך.
הכן את תמיסת מלאי ההרדמה לפי השלבים המוצגים על המסך. לאחר מכן הוסף ארבעה מיליליטר של תמיסת המלאי המוכנה ל -100 מיליליטר של מי מערכת בכד כדי להכין את פתרון העבודה של הטריקאין. כדי להתחיל את הליך cryoinjury, לטבול את הבדיקה בחנקן נוזלי במשך מינימום של שלוש דקות.
הרטיבו את הספוג במי המערכת והניחו אותו על משטח ישר. לאחר מכן דקה עד שתיים לאחר העברת דג זברה בוגר יחיד לתמיסת העבודה של הטריקאין, אשרו את חוסר התגובה שלו על ידי נגיעה עדינה בדג עם הכפית. הניחו את הדג המרדים על הספוג הרטוב.
אתר את הפדונקל הקאודלי אחורי לסנפיר פי הטבעת וקדמי לסנפיר הקאודלי. בשלב זה, להסיר את cryoprobe מן החנקן הנוזלי. נערו את הגשושית בעדינות כדי לוודא שלא נותרו שאריות חנקן נוזלי בקצה.
מניחים את קצה המרית בניצב לגוף על הפדונקל הקאודלי. שמור את הבדיקה במצב זה במשך שש שניות מבלי להפעיל לחץ, לפני שחרור cryoprobe מן הרקמה. לאחר מכן העבירו את הדגים למי המערכת במיכל ההתאוששות.
יש לעקוב אחר הדג בזמן שהוא חוזר לנשום ולשחות לאחר שהתעורר מההרדמה. אם תנועות אופרקולריות אינן מתרחשות לאחר 30 שניות, יש לגרות את הדג על ידי הזרמת מי מערכת לתוך הזימים עד שבעל החיים מתחיל נשימה בעצמו. הקלטת וידאו של דגי בקרה וקריו-פצועים ביום אחד לאחר הפציעה או DPCI חשפה כי למרות שהדגים הקרופידיים שחו פחות פעיל, הם לא הציגו תנועות חריגות, כגון מערבולת, פיתול או שיווי משקל מופחת.
במערכת הגידול, מיקומם במיכל ובצריכת המזון היה דומה לזה של הדגים שלא נפגעו. כפי שנצפה ב 5 DPCI, התנהגות נורמלית עדיין הייתה מתמשכת המציינת כי הליך cryoinjury לא השפיע באופן חמור על רווחתם של בעלי החיים.
