לאחר הדמיה של תאי Hep-3B המטופלים בתרופה, פתח את התמונות הקונפוקליות בתמונה J באמצעות תוסף הקולוקליזציה. פתח את קובץ ה- ND בשרת J התמונה ובחר באפשרות ערוצים מפוצלים בתיבת הדו-שיח. עבודה עם תמונות ירוקות ואדומות.
צור כפילויות של תמונות אלה כדי לשמור על התמונה המקורית ללא נגיעה על ידי לחיצה על התמונה ובחירה באפשרות שכפל או באמצעות קיצור המקשים shift בתוספת D.To להקטין את הרקע, ליצור תמונה נוספת משוכפלת, להחסיר את הרקע ברדיוס גלגול של 100, ובחר באפשרות צור רקע כדי ליצור תמונה עם רקע התמונות הנתונות. לאחר מכן, עבור לתהליך. לחץ על מחשבון תמונות והחסר את התמונה המשוכפלת הראשונה מהתמונה המשוכפלת השנייה.
השתמש בתמונות המתקבלות לניתוח קולוקליזציה. כדי להשתמש בתוסף הלוקליזציה, המר את תמונות הערוץ הירוק והאדום ל- 8 סיביות על ידי לחיצה על תמונה, בחירת סוג ואחריו 8 סיביות. לאחר מכן, לחץ על תוספים ובחר colocalization.
כדי למדוד את הקולוקליזציה של אותות מיטוכונדריה וליזוזומים, הגדר את היחס ל- 75%, את הערוץ האדום הסף ל- 80.0, ואת ערוץ הסף הירוק ל- 50.0. תיווצר תמונה בינארית של 8 סיביות המכילה פונקטה מותאמת לשפות אחרות ושילוב של שלוש תמונות של 8 סיביות בתמונת RGB. המירו תמונות אלה לתמונות של 8 סיביות.
כדי להשיג את אזור העניין של התאים, צור תמונה המדגישה את אזור התאים על-ידי בחירת תמונה של נקודה המותאמת לשפות אחרות. לבחירת כל אזור התא, בחרו בתמונת הנקודות המותאמות לשפות אחרות ולחצו על התמונה, התאימו את הסף וקבעו סף כדי להבטיח שכל אזור התא יסומן. לניתוח אזור התא, בחרו 'נתח', לחצו על 'נתח חלקיקים' ומדדו את כל החלקיקים בתמונה מאפס עד אינסוף, הגדרת ברירת המחדל לניתוח חלקיקים.
כדי לנתח את האזור של המיטוכונדריה והליזוזומים שעברו לוקליזציה, בחרו בתמונה של 8 סיביות שעברו לוקליזציה. לאחר מכן, בחר נתח. לחץ, נתח חלקיקים ומדוד את סיכום הפונקטה בין 0.1625 מיקרומטר מרובע לארבעה מיקרומטרים רבועים.
חלקו את שטח המיטוכונדריה והליזוזומים המשותפים בשטח התא הכולל כדי למדוד את הפונקטה המקומית. התמונות הקונפוקליות של תאי Hep-3B הציגו קולוקליזציה של מיטוכונדריה וליזוזומים. VL 850 ו-FCCP גרמו למיטופגיה משמעותית בתאי Hep-3B.
