לפני שמתחילים, בצעו בידוד פיברובלסטים סינוביאלי והשתמשו בתאים הלא דבקים שנאספו מהצלחת המצופה בקולגן בהליך זה. זרעו את התאים הלא נדבקים על צלחות של 40 עד 60 מילימטר שלא צופו בקולגן. תרבית את התאים בתפזורת ליום אחד בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה עם 5% פחמן דו חמצני.
כדי להסיר לימפוציטים שאינם דבקים, לשאוף את המדיום תרבית ולאחר מכן להוסיף מדיום תרבית טרי. תרבית את התאים הדבקים בתפזורת במשך שבוע עד שבועיים עם שינויים בינוניים כל יומיים, תוך שמירה על מפגש. לאחר מכן שטפו פעמיים עם PBS או HBSS.
בחר מקרופאגים סינוביאליים על ידי טיפול עם 0.05% טריפסין ב- HBSS ודגור במשך שלוש דקות ב 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה עם 5% פחמן דו חמצני. לאחר מכן הוסיפו תרבית בינונית בעדינות ל-0.05% טריפסין ב-HBSS. לאחר שלב זה, אין לשפוך את המדיום ישירות על התאים.
כדי להסיר תאים מנותקים, שאפו את המדיום התרבית ולאחר מכן הוסיפו מדיום תרבית טרי בעדינות. חוזרים על הפעולה פעמיים-שלוש ושומרים את התאים על התבשיל בתרבית טרייה עד לשימוש. תאים דמויי מקרופאגים בודדו מנקבות עכברי C57BL/6 בנות שבעה עד שמונה שבועות ונותחו על ידי RT-qPCR.
ביטוי mRNA של סמני פאן-מקרופאגים CD68, EMR1, ITGAM, CSF1R הראה בידוד עשיר במקרופאגים מרקמת הסינוביטיס. כדי לקבוע את טוהר המקרופאגים, סמני חלבון פני השטח עבור מקרופאגים וסוגי תאים אחרים נותחו על ידי ציטומטריית זרימה. יותר מ-90% מהתאים ביטאו סמני מקרופאגים CD45, CD11b ו-F4/80, בעוד שהביטוי של סמן נויטרופילים Ly6G וסמן תאי T CD3 היה נמוך מ-1%
