התחל את ההכנה של ביו-דיו הידרוג'ל באופן אספטי בתוך ארון בטיחות ביולוגית על ידי הכנת תחילה תמיסת מלאי של 0.25 מיליגרם למיליליטר של PEG אלפא מתקרילט במדיה סטרילית של תרביות תאים ללא FBS. כמו כן, באמצעות TCEP סטרילי 20 מילימולרי, להכין פתרונות מלאי 250 מילימולרי של DTT, crosslinker מתכלה MMP2, ואת פפטיד RGD. לבסוף, הכינו תמיסת מלאי של 15 אחוזי משקל של PEO באמצעות מים מזוקקים.
שלב את הכמויות הנדרשות של תמיסות מלאי ריאגנטים מוכנות ומדיה של תרביות תאים בעלות נסיוב נמוך עם הפיברובלסטים בצינור חרוטי של 15 מיליליטר. ערבבו היטב את הדיו הביולוגי שנוצר באמצעות פיפטה בעלת תזוזה חיובית כדי להבטיח שהתאים יהיו יחידים. ודא שהפתרון המקדים הסופי הוא בעל pH של 6.2.
הסר את ראש ההדפסה מהמדפסת הביולוגית כדי לגשת למזרק הזכוכית. כדי לטעון את הדיו הביולוגי לתוך מזרק הזכוכית, הסר את בוכנת המזרק. לאחר מכן, אספו את הדיו הביולוגי מצינור הצנטריפוגה באמצעות מזרק נפרד המותאם למחט באורך 1.5 אינץ', 15 מד וקצה קהה.
החליפו את המחט בעלת 15 המדידות במחט בעלת קצה קהה באורך 30 אינץ', באורך 0.5 אינץ' והעבירו אותה למזרק הזכוכית, תוך הימנעות מהיווצרות בועות אוויר. לבסוף, הניחו את מזרק הזכוכית בתוך ראש ההדפסה וחברו את רכיבי ראש ההדפסה תוך הקפדה על הרכבה יציבה להדפסה.
