לאחר אוטוקלאבינג של שתי צלחות סיליקון, בתנאים סטריליים מוציאים את הצלחות משקית האוטוקלאבה ומניחים אותן בצלחות 150 מ"מ. הוסף 400 מיקרוליטר של תמיסת פיברונקטין לכל באר של לוחות סיליקון. לאחר מכן, השהה מחדש את תאי הסטרומה המזנכימליים המושרים על ידי סקלרקסיס חיובי בתווך MSC וספור את התאים הקיימים באמצעות מונה תאים אוטומטי.
חשב את נפח תרחיף התא הדרוש כדי לקבל 1.25 כפול 10 לתא הרביעי לסנטימטר מרובע. הסר נפח זה של מדיית מתיחה MSC מצינור החרוטי של 15 מיליליטר והוסף את הנפח הנדרש של השעיית תאי סטרומה מזנכימליים מושרים חיוביים לסקלרקסיס. הפוך את הצינור לקבלת הומוגניות של מתלה התא החדש.
הוסיפו 400 מיקרוליטר של תרחיף תאים לכל באר של שני לוחות הסיליקון. החזירו את המכסה ללוחות ה-150 מ"מ ודגרו על הלוחות בטמפרטורה של 37 מעלות למשך 24 שעות. למתח חד צירי, שטפו את מנגנון המתיחה במים מזוקקים כפול, ולאחר מכן 70% אתנול.
נגבו את המכשיר, הניחו אותו במכסה המנוע של תרבית התאים וחשפו אותו לאור אולטרה סגול למשך 15 דקות. לאחר מכן, מניחים צלחת אחת באינקובטור כבקרה סטטית. הניחו את צלחת הסיליקון השנייה בישיבה במנגנון המתיחה על ידי יישור הברגים עם החורים בלוח הסיליקון.
לאחר מכן מניחים את המכסה על המנגנון. חברו את המכשיר עם צלחת הסיליקון היושבת למקור האלקטרוני והניחו אותו באינקובטור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. הגדר את תוכנית המתיחה המחזורית לזן סינוסואידלי 4% ב- 0.5 הרץ למשך שעתיים ביום.
התחל את המתיחה על ידי לחיצה על לחצן התחל. במהלך העמסה מכנית של תאי סטרומה מזנכימליים מושרים חיוביים לסקלרקסיס, צפיפות זריעה גבוהה מדי הובילה להתכווצות מוקדמת של התאים ולמוות מוקדם של תאים. לאחר מספר ימים של מתיחה, נצפתה מידה מסוימת של ארגון תאים בקבוצה המתוחה של תאי סטרומה מזנכימליים מושרים חיוביים, בהשוואה לארגון התא האקראי בקבוצה הסטטית.
צביעת פלואדין של חוטי האקטון הראתה כי התאים גדלו בניצב לכיוון המתיחה, בניגוד לארגון התאים האקראי שנצפה בלוחות הסטטיים. ניתוח ביטוי גנים גילה שיפור משמעותי בגנים הטנוגניים הן בשלושה והן בשבעה ימים, בהשוואה רק ל- IMSCs ביום האפס. שקיעת הקולגן בתקשורת לאחר שבעה ימים של מתיחות הייתה גבוהה משמעותית בקבוצת תאי סטרומה מזנכימליים מושרים חיוביים בהשוואה לכל הקבוצות האחרות.
