כדי להתחיל, להכין מחט פרפר 23G על ידי חיתוך ההגנה שרוול פלסטיק שלה, כך קצה המחט החשופה נחשף על ידי 7 מ"מ. לאחר מכן, חבר את מחט הפרפר עם צינורות פולימר מזרק 1 מיליליטר. הניחו חולדה מורדמת על מסגרת סטריאוטקסית ושמרו על הרדמה באמצעות מסכת פנים.
לאחר מכן, להסיר את הפרווה על הראש האחורי והצוואר של החולדה. תקן את ראש החולדה עם מוטות אוזניים. הזיזו את מוט האף של המסגרת הסטריאוטקסית כדי להוריד את ראש החיה בכ-45 מעלות אנכית.
מצא משטח מעט מדוכא על הראש האחורי עם היבט של מעוין בין הבליטה העורפית לבין עמוד השדרה האטלס. שפשפו את פני השטח עם 70% אתנול. לאיסוף CSF, הכנס את מחט הפרפר אנכית למרכז המשטח המדוכא בצורת מעוין לתוך מגנה cisterna עד שהתנועה תיחסם על ידי הגנת שרוול הפלסטיק של המחט.
צייר בעדינות את בוכנה מזרק על מנת לאפשר CSF לזרום לאט דרך המחט. לאסוף כ 100 מיקרוליטר של CSF לתוך צינורות פולימר. צבטו את צינור הפולימר קרוב מאוד למחט הפרפר וחתכו את הצינור בשלב זה.
ציירו את הדגימה השקופה לתוך המזרק. יש להוציא את הדגימה לתוך המיקרו-צינורית הסטרילית של 0.2 מיליליטר ולאחסן על קרח למשך עד שעה. לחטא את האתר של נסיגה CSF על הראש של החיה.
הוציאו את החולדה מהמסגרת הסטריאוטקסית והחזירו אותה לכלוב שלה. שים בצד 2 מיקרוליטר של המדגם לבקרת איכות ולאחסן את השאר ב 80 מעלות צלזיוס לניתוח נוסף. נסיגה חוזרת של CSF בוצעה במשך חמישה ימים בשלוש קבוצות ניסוי של חולדות והתבטאה באחוז משיכות מוצלחות שהביאו ל-CSF ברור.
בחולדות בעלות שתל ראש כפול שהוענקו לנסיגת CSF, שיעור ההצלחה היה 71.1%, מה שמצביע על כך שהצינורית שעל ראשו של בעל החיים עלולה להפריע לדגימת CSF חוזרת. לעומת זאת, כאשר איסוף CSF בוצע על ידי ניקוב cisterna magna רק באלקטרודות קשורות או טלמטריה שהושתלו בבעלי חיים, שיעור ההצלחה היה 86.7% ו 88.9% תוצאות אלה מצביעות על כך שטכניקת הניקוב מתאימה יותר למשיכות CSF מרובות בבעלי חיים מושתלי אלקטרודות.
