כדי להתחיל, לחמם כמות מספקת של מדיה בתרבית סטרילית בעוד הטיפול מקדים dexamethasone 48 שעות של צמח הגפיים האחוריות murine עומד להסתיים. לאחר סיום הטיפול המקדים, העבירו את הצמחים שטופלו מראש לארון הבטיחות הביולוגית. עבור הקבוצה המפורקת, שאפו את המדיה שלפני הטיפול והעבירו את הצמחים לצלחות פטרי טריות.
הוסיפו 70 מיליליטר של מדיה תרבותית לכל מנה לפני החזרתם לאינקובטור. כדי להכין את פלטפורמות האקספלנט לקבוצת המתח הבסיסי והפגיעה הסטטית, חתכו פיסות נייר זכוכית כך שיתאימו לגודל לוחות האחיזה. עבור קבוצת הפגיעה הסטטית, חתכו חתיכות של קו קלוע וקשרו קשר רופף באמצע הקו.
קרעו חתיכות של רדיד אלומיניום כדי לכסות כל אמבטיה אקרילית ורססו אותן באתנול 70%. העבירו את הרכיבים המוכנים לארון הבטיחות הביולוגית. סדרו את הרכיבים כגון אמבטיה אקרילית, בסיס, תוספות להפחתת נפח, תפס וידיות אחיזה להרכבת פלטפורמה.
מקם רכיבי פלטפורמה בתוך מיכלים משניים בעלי נפח מספיק כדי להכיל הדלפות פוטנציאליות לתקשורת התרבות. יש לטבול את המיכלים בתמיסה של לפחות 10% אקונומיקה למשך שעה לפחות. שטפו את תמיסות האקונומיקה במי ברז.
לאחר העברת הרכיבים השטופים לארון הבטיחות הביולוגית, השתמש בברגי M3 ובקפיצי דחיסה כדי להצמיד את הפלטות לידיות האחיזה. חברו היטב את ידיות האחיזה לבסיס באמצעות בורג M5 והכניסו את ברגי ה-M6 עד שהם באים במגע עם הלוחות. שפר את הפונקציונליות של הצלחות על ידי הדבקת נייר זכוכית באמצעות סרט דו-צדדי.
סגור את ידיות האחיזה כדי להקל על הדבקת נייר הזכוכית לצלחות. כדי לטעון פלטפורמה, פתח את ידיות האחיזה במלואן והשתמש במלקחיים כדי למקם בזהירות את הרגל העליונה והברך בין הלוחות. סגור את ידיות האחיזה בעדינות כדי להחזיק את האיבר במקומו.
השתמשו במלקחיים כדי לתפוס את ראש הירך או כף הרגל החשופים ולהתאים את זווית כיפוף הברך, תוך סגירה הדרגתית של המלקחיים כדי לאבטח אותה במקומה. עבור קבוצת המתח הבסיסית, האריכו את מפרק הברך תוך סגירת האחיזות. במקרה של קבוצת הפגיעה הסטטית, כופפו את מפרק הברך תוך סגירת האחיזות.
עבור קבוצת הפגיעה הסטטית, הניחו את הקשר העילי של המיתר סביב הכף הדיסטלית והדקו אותה היטב. נתב את החוט דרך חריץ בבסיס מתחת לעציץ ודרך חור הקליפ. מקמו את הבסיס לתוך האמבטיה האקרילית והדקו את האטב לקצה העליון של האמבטיה.
כדי dorsiflex כף הרגל, למשוך את החוט עד שהוא מגיע לפחות 110 מעלות ביחס לשוקה. השתמש בסמן קבוע כדי לסמן את המחרוזת כשהיא יוצאת מהקליפ. צלם תצלום של האקספלנט במצב דורסיפלקסי זה לכימות עתידי של זווית הדורסיפלקסיה.
הסר את הבסיס מההתקנה וחבר את תוספת הפחתת עוצמת הקול על-ידי החלקתו לאורך מסילה בבסיס. החזירו את הבסיס לאמבטיה האקרילית ומקמו מחדש את האטב בקצה העליון. השתמש במחרוזת המסומנת כקו מנחה.
משוך אותו כדי להחזיר את כף הרגל לזווית הדורסיפלקסיה המקורית שלה וחבר את החוט לחלק החיצוני של האמבטיה באמצעות סרט דבק כדי לשמור על תנוחה דורסיפלקסית סטטית. עבור קבוצת המתח הבסיסית, ברגע שהאקספלנט ממוקם בין האחיזות, צלם תמונה כדי לכמת את זווית הדורסיפלקסיה. לאחר מכן החלק את הכנס להפחתת עוצמת הקול על הבסיס והנח אותו לתוך האמבטיה האקרילית.
הוסף 125 מיליליטר של מדיה תרבותית מחוממת מראש לכל פלטפורמה כדי לטבול את הצמחים. לאחר כיסוי החלק העליון של האמבטיה עם רדיד אלומיניום, מניחים את כל ההתקנה לתוך מיכל משני. להעביר את המכולה המשנית לחממה ולתרבות למשך שבעה ימים.
