כדי להתחיל, להכין את העכברים מורדמים להליך כירורגי. בעזרת מספריים כירורגיים, חותכים את העור לאורך מרכז האזור המגולח של הראש כדי לחשוף את הגולגולת. לאחר מכן, נקו את הגולגולת עם צמר גפן סטרילי באמצעות מי חמצן מדוללים למשך שנייה עד שלוש שניות וייבשו את הגולגולת עם צמר גפן סטרילי חדש.
כדי ליישר את הגולגולת קדימה ואחורה, מדדו את עומק הגחון הגבי בברגמה ולמבדה. באמצעות bgma כנקודת ההתחלה, אתר וסמן את האזור הרצוי על קליפת המוח. לאחר מכן, השתמשו במקדח טרפין ובמקדחה דנטלית כדי לחשוף את קליפת המוח.
ודא שזווית המקדח מאונכת לעקמומיות הגולגולת כדי להשיג קרניוטומיה אחידה ולמנוע נזק. קדח עד שתורגש ירידה בהתנגדות, ולאחר מכן עצור את תהליך הקידוח. בעזרת קצה מחט 23 מד, הסר בזהירות את שבר העצם המנותק.
כעת, נקו את קליפת המוח החשופה עם קצף כירורגי ספוג ב-ACSF קר כדי להסיר פסולת ולעצור כל דימום. בצע חתך כדי להקל על החדרת המיקרופריזמה ולהקל על הלחץ בקליפת המוח. הצמידו את סכין הניתוח למחזיק על הזרוע הסטריאוטקסית וכוונו את הלהב, או את הזרוע הסטריאוטקסית כדי לחתוך לאורך הציר הלטרלי המדיאלי.
כעת, העבירו את הסכין לקואורדינטה האחורית הקדמית הרצויה. לאחר מכן, להזיז את הסכין לקצה המדיאלי של craniotomy ולאט לאט להוריד אותו עד שהוא נוגע בעצם. השתמש במשוואה הנתונה כדי לקבוע את עומק החתך החתוך מראש מפני השטח של הגולגולת.
יש לוודא שאורך החתך גדול ממילימטר. באופן אידיאלי, זה צריך להיות סביב 1.2 מ"מ. העבירו את הסכין מהקצה המדיאלי של הקרניוטומיה לקואורדינטה המדיאלית ההתחלתית של החתך, והורידו לאט לאט את הסכין לתוך קליפת המוח.
לאחר פירסינג הדורה וכניסה לקליפת המוח, יש למרוח טיפה של ACSF קר כדי לשמור על הרקמה משומנת ורוויה במים. לאחר ההגעה לעומק הסופי, הזיזו את הסכין לאורך הציר הצידי המדיאלי. אם הרקמה נגררת עם הסכין, הזיזו את הסכין למעלה ולמטה כמה פעמים כדי לוודא שהרקמה נחתכת.
לאחר מכן, המשיכו לנוע לרוחב תוך החזרת הסכין לעומקה הסופי. בסיום, להרים לאט את הסכין. אם מופיע דם, נקו את אזור החתך עם קצף כירורגי ספוג ACSF כדי לדלל ולהסיר את הדם.
הניחו קצף רווי על קליפת המוח החשופה עד להחדרת המיקרופריזמה. חברו את המיקרופריזמה לערכת השתל. ודא שצד ההדמיה של המנסרה מנוגד לבורג לוח הבסיס.
הצמידו את המיקרופריזמה למסגרת הסטריאוטקסית וכוונו אותה כך שתתיישר עם החתך. מורידים לאט את המיקרופריזמה לאתר החתך. הסר ACSF בתחילה, אבל ברגע שהמנסרה נמצאת בקליפת המוח, שטוף אותה עם ACSF קר.
במידת הצורך, הוסיפו ACSF נוסף ועוררו את קליפת המוח על ידי הזזת המנסרה למעלה ולמטה. כסו את אזור קליפת המוח החשופה ואת העדשה בשכבת מגן של דבק סיליקון הממזערת את עודפי הדבק על הגולגולת שמסביב ועל היקף הדמה. כעת, מקמו את לוחית הראש אחורית לצורך מיקום נכון של השתל ביישום צמנט.
יישרו מעט את קו האמצע של לוחית הראש מימין לקרניוטומיה המוצעת כדי להבטיח שניתן יהיה לאבטח את שני הצדדים במהלך ניסויים קבועים בראש. לאחר מכן, ערבבו כף מדידה אחת של אבקת מלט אטומה עם ארבע טיפות של מדיום ערבוב, וטיפה אחת של הזרז להכנת מלט דנטלי דביק. מרחו מלט על צלחת הראש והגולגולת, והחזיקו את לוחית הראש במקומה עד שהמלט נרפא.
יש למרוח מלט דביק לכיסוי הגולגולת והרקמה החשופות, תוך שילוב המיקרופריזמה ולוחית הראש עד ליציבות. הזיזו את הזרוע הסטריאוטקסית כלפי מעלה תוך ייצוב המיקרופריזמה בעזרת מלקחיים כדי לנתק את מיקרוסקופ הדמה. הניחו את כיסוי המגן על העדשה ואבטחו אותו על ידי הידוק הבורג.
תאי העצב של בעלי חיים שחקרו זירה פתוחה בחושך הראו רמות דומות של פלואורסצנטיות ושיעורי ירי במפגשים שהיו בהפרש של שלושה שבועות.
