כדי להתחיל, לחתוך את נייר סינון לצורה מלבנית של כ 17 על 20 מ"מ ולהסיר את ארבע הפינות. לאחר מכן, צור כשבעה על 10 מילימטרים של מרכז חלול בנייר הסינון. חברו טבעת מסחרית לשכבת פילם גמישה וצרו מרכז חלול בשכבת הסרט הגמישה.
מניחים רינג מוכן לתוך צלחת פטרי 35 מ"מ. לאחר גידול מקדים, מוציאים את הביצה מהאינקובטור, ומניחים אותה על צירה הארוך על מגש קרטון הביצים. נקו את כל פני השטח של קליפת הביצה עם 70% אתנול, ואפשרו לה לנוח במשך 15 דקות.
מחזיקים את הביצה על צירה הקצר ומפצחים אותה בתחתית. פתחו את הביצה מעל צלחת פטרי נקייה בקוטר 100 מ"מ כדי לחלץ את תכולתה. בעזרת פיפטה מעבירים כ-10 מיליליטר מהאלבומין הדק לצינור של 15 מיליליטר לתרבית אקס-אובו.
ממלאים היטב את מרכז צלחת התרבות באלבומין דק. בעזרת נייר טישו, להסיר בעדינות את אלבומין עבה מחובר קרום ויטלין של העובר. כעת, הדביקו בזהירות את נייר הסינון לקרום הוויטליין, וודאו שציר הגוף של העובר מיושר עם המלבן המרכזי שעל נייר הסינון.
חותכים את הקרום המקיף את נייר הסינון במספריים. בעזרת פינצטה, משכו בעדינות את נייר הסינון המבודד מהעול לכיוון אלכסוני. הפכו את נייר הסינון כדי למקם את העובר כשהצד הגבי שלו כלפי מטה.
טבלו בזהירות את כל נייר הסינון מצד אחד של הציר הארוך לתוך צלחת פטרי 100 מ"מ המכילה מדיום שטיפה. בעזרת פיפטה נקייה, רססו בעדינות את מצע הכביסה במקביל לנייר הסינון כדי להסיר שאריות חלמון. לאחר מכן, הסר בזהירות את נייר הסינון ממדיום הכביסה, והשתמש בנייר טישו כדי לספוג כל מדיום עודף משולי העובר.
הניחו את נייר הסינון עם העובר על צלחת התרבית, וודאו שהצד הגבי של העובר פונה כלפי מטה. העבירו את מנת התרבית לחממה על הבמה לתרבות אקס אובו. ממלאים את כלי התרבות במדיום כביסה חם.
כאשר העובר מגיע לשלב התפתחותי רצוי, מעבירים את נייר הסינון עם העובר לצלחת התרבית המלאה במדיום שטיפה. הכניסו את מנת התרבית לחממה שעל הבמה של המיקרוסקופ ברילואן. עבור תהליך הכיול, למדוד את אות Brillouin של מים.
לאחר מכן, למדוד את אות Brillouin של מתנול. בהדמיה בשדה בהיר עם עדשה אובייקטיבית פי ארבעה, כוונן את נקודת תאורת הלייזר לזוג הסומיטים השני. לאחר מכן, עברו לעדשה אובייקטיבית פי 40 ובצעו התאמה עדינה של נקודת הלייזר למרכז הצינור העצבי.
בטל את חסימת קרן הלייזר וכוונן את מישור המוקד. סרוק את העובר באמצעות שלב תרגום דו מימדי וקבל תמונה ברילואין של אזור העניין. לאחר השלמת הסריקה, הסר בזהירות את נייר הסינון עם העובר.
השתמשו בנייר טישו כדי לספוג את עודפי השטיפה מהעובר. החזירו את העובר לצלחת התרבית המלאה באלבומין דק לתרבית רציפה. עבור שחזור תמונה Brillouin, לטעון את נתוני אות המים מתנול.
לחץ על הגדר אזור ובחר באזור עם ארבע נקודות לחישוב פרמטרי כיול. שמור את תוצאות הכיול. טען את נתוני סריקת העוברים ולחץ על התחל לעיבוד הפרמטרים.
לבסוף, שחזרו את תמונת Brillouin הדו-ממדית בהתבסס על הזזות Brillouin של כל הפיקסלים. שינוי ברילואין במודולוס האורכי המשוער של הלוח העצבי כנגד מספר הסומיט וזמן הדגירה הראה עלייה בהסטת ברילואין של הרקמה במהלך סגירת הצינור העצבי.
