אוסף CSF מעכברים עם מחלת Leptomeningeal להרחבת שיבוט לאחר מכן

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

114 Views

•

02:03 min

•

March 29th, 2024

DOI :

10.3791/201630-v

March 29th, 2024

•

Vincent Law¹^,², Inna Smalley³, Brittany R. Evernden², Margaret Baldwin⁴, Keiran S. M. Smalley¹, Peter A. Forsyth¹^,²

¹Department of Tumor Biology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ²Department of Neuro-Oncology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ³Department of Cancer Physiology, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, ⁴Department of Comparative Medicine, University of South Florida, H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute

Transcript

כדי להתחיל, לזהות את נקבת עכברי NSG מדוכאי חיסון, שיש להם מחלת leptomeningeal, או LMD. הניחו עכבר מורדם על שולחן הניתוחים. מקם את אפו של העכבר בחרוט בצורת L שונה של מכשיר סטריאוטקטי, וודא שהנחיריים נשארים ללא הפרעה.

משכו את העור בעדינות קדימה על פני משטחי הגחון של שתי הפינות, ואז קבעו אותו לקונוס האף בעזרת נייר דבק. יש להנחות את קצות המספריים הכירורגיים כלפי מטה מהפינה על פני עצם העורף. צור חתך קטן בקו האמצע בגודל חמישה עד שבעה מילימטרים בדיוק מעל הקרום המישוש.

עם זוג מלקחיים קהים בעלי קצוות של מילימטר עד שניים, הפעילו בעדינות לחץ על מגננת הסיסטרנה. הציגו את הקצוות במצב סגור ופתחו אותם תוך הפעלת לחץ כלפי מטה על הדורה. המשך לבצע דיסקציה קהה עד שניתן להבחין בבירור בקרום הדוראלי וכלי הדם הקשורים נראים בתוך האזור החשוף.

כעת השאירו את המלקחיים פתוחים כדי למשוך את השרירים שמסביב. לאחר מכן חבר מחט 27 עד 29 מד מזרק אחד מיליליטר. הכנס את המזרק מתחת לדורה כדי לדמיין את השיפוע.

בהדרגה למשוך את הבוכנה מזרק לאסוף כמה נוזל השדרה ככל האפשר. מעבירים את הנוזל לצינור מיקרוצנטריפוגה. מיד מניחים אותו על קרח.

צנטריפוגה הדגימה ב 257 גרם במשך חמש דקות בארבע מעלות צלזיוס. לאחר שאיפת הסופרנטנט, פיפטה 500 מיקרוליטר של PBS סטרילי לגלולת התא. צנטריפוגה את הגלולה ב 257 גרם במשך חמש דקות בטמפרטורת החדר.

השליכו את הסופרנטנט, ואז העבירו את הגלולה לצלחת בת 96 בארות המכילה מדיה מותנית של HMC.

Explore More Videos

From the series

מודל מורין לחקר מחלות Leptomeningeal באמצעות תאי גידול במחזור הדם