כדי להתחיל, הניחו את הצינורות המכילים 25 מיליליטר של מדיה מתקדמת קרה מוכנה DMEM/F-12 על קרח. מוסיפים את המטריצות המופשרות לכל צינור. מערבבים את המתלים יחד, ומבטיחים שלא ייווצרו גושים.
עכשיו פיפטה 250 מיקרוליטר של מטריצות מדולל לתוך כל באר של צלחת 24 באר. הטו את הצלחת כדי לפזר את תמיסת הציפוי באופן שווה. לאחר הדגירה, השתמש פיפטה סרולוגית כדי להסיר בעדינות את התמיסה העודפת מבלי לשרוט את המשטחים המצופים.
מיד פיפטה 250 מיקרוליטר של מדיום תאי גזע שלמים חמים לתוך כל באר. כדי לצפות את צלחות תרבית הרקמה בהידרוג'ל ללא קסנול Matrix 4, יש לחמם תחילה את ההידרוג'ל לטמפרטורת החדר. הוסף שני נפחים של ההידרוג'ל לצינור המכיל נפח אחד של מדיום תרבית תאי גזע 3x.
פיפטה את הפתרון למעלה ולמטה כדי לערבב אותו היטב. מעבירים 250 מיקרוליטר של ההידרוג'ל לבארות של צלחת תרבית רקמה בת 24 בארות. לאחר מכן הטו את הצלחת כדי לפזר את ההידרוג'ל באופן שווה.
לאחר 10 עד 15 דקות, הצלחות המצופות מוכנות כעת לתרבית של תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים.