כדי להתחיל, אספו את הסופרנאטנט מתרבית תאי גזע מזנכימלית שמקורם בשומן אנושי ברגע שהתאים נפגשו ב-80%. אוספים את הסופרנאטנט בזהירות באמצעות פיפטה ומעבירים אותו לצינור צנטריפוגה של 50 מיליליטר. צנטריפוגה את הצינור ב 300 x גרם במשך 10 דקות בטמפרטורת החדר כדי להסיר תאים מרחפים, ולאחר מכן להשתמש פיפטה לאסוף את supernatant מבלי להפריע את הכדור.
צנטריפוגה את הסופרנאטנט ב 2000 x גרם במשך 10 דקות בארבע מעלות צלזיוס כדי להסיר פסולת תאית. אספו את הסופרנאטנט שנוצר עם פיפטה וסננו אותו דרך קרום של 0.22 מיקרון כדי להסיר חלקיקים גדולים ופסולת תאים. נושא את התסנין לצנטריפוגה אולטרה ב 10, 000 x גרם במשך 30 דקות בארבע מעלות צלזיוס.
לאחר מכן בצע צנטריפוגה סופית ב 100, 000 x גרם במשך 70 דקות בארבע מעלות צלזיוס. בעזרת פיפטה, מוציאים את הסופרנאטנט מבלי לאסוף את הכדורית. השהה מחדש את הגלולה ב- PBS לפני צנטריפוגה של הצינור ב 100, 000 x גרם במשך 70 דקות בארבע מעלות צלזיוס.
הסר את supernatant ו resuspend את הגלולה המתקבלת של שלפוחיות חוץ-תאיות, או EVs, במיליליטר אחד של PBS. לבסוף, העבירו את מתלה הרכב החשמלי לצינור צנטריפוגה של מיליליטר אחד ואחסנו אותו בארבע מעלות צלזיוס עד לניתוח נוסף. מיקרוסקופ אלקטרונים תמסורת חשף בבירור את המבנה דמוי הגביע של כלי הרכב החשמליים עם קרום דו-שכבתי.
ניתוח מעקב אחר ננו-חלקיקים הצביע על כך שיש להם התפלגות גודל חלקיקים של כ-50 עד 150 ננומטר. ניתוח כתמים מערביים הראה כי חלבוני הסמן האופייניים של כלי רכב חשמליים בוטאו בצורה חלקה.
