השגת תאים דמויי מיקרוגליה מושרית ממונוציטים שמקורם בדם מלא לצורך חקירת דינמיקה של תאי מיקרוגליאה במחלות אנושיות

כדי להתחיל, להשיג תאים חד-גרעיניים אנושיים מדם שלם. מערבולת מגיב חוסם FcR אנושי, ולהוסיף את הכמות הנדרשת של מגיב לתאים. לדגור את הצינור עם תאים בארבע מעלות צלזיוס במשך חמש דקות.

הוסף 20 מיקרוליטר של CD11b MicroBeads לכל 10 לעוצמה של שבעה תאים בסך הכל, ודגור בארבע מעלות צלזיוס במשך 20 דקות. יש לחטא היטב את המעמד המגנטי באתנול 70%. לאחר הדגירה, להוסיף 10 מיליליטר של חיץ בידוד.

מערבבים, וצנטריפוגות את הצינור ב 300G במשך 10 דקות בארבע מעלות צלזיוס. לאחר שהמעמד מתייבש, מקם את העמוד המגנטי על המעמד המגנטי. לאחר הסרת הסופרנטנט, מוסיפים מיליליטר אחד של חיץ בידוד ומערבבים בעדינות עם הפיפטה.

לאחר מכן טען את מתלה התא על העמוד ושטוף אותו שלוש פעמים עם שלושה מיליליטר של מאגר בידוד בכל פעם שמאגר העמוד ריק. מניחים את העמוד בצינור חרוטי של 15 מיליליטר מבלי לגעת בחלק המגנטי. לאחר הוספת חמישה מיליליטר של חיץ בידוד, דחפו את הבוכנה לתוך הצינור כדי לדחוף את הנוזל החוצה דרך העמודה.

צנטריפוגה את תרחיף התא שנאסף בצינור. שאפו את הסופרנאטנט והשעו מחדש את התאים בתווך בידוד. לאחר ספירת תאים, יש להכניס 500 מיקרוליטר של תרחיף תאים לכל באר של צלחת בת 24 בארות, ולדגור במשך הלילה.

כדי לגרום לתאים דמויי מיקרוגליה, החליפו את אמצעי הבידוד מהזריעה של היום הקודם בתווך אינדוקציה ודגרו על התאים במשך 14 יום. התאים דמויי תאי המיקרוגליה המושרים הציגו גופי סומא זעירים ובטחונות מסועפים רבים.