כדי להתחיל, להעביר 500 ל 1, 000 L1 שלב מסונכרן Caenorhabditis elegans תולעים על צלחת אגר NGM לדגור ב 20 מעלות צלזיוס עד ליום הבדיקה. עצב את לוח הזמנים של הבדיקה עבור שתי קבוצות ניסוי. באמצעות מאגר M9, אספו תולעי L4 ותולעי בגרות ביום המתאים.
העבירו את התולעים שנאספו לצינורות מיקרו של 1.5 מיליליטר והמתינו עד שתולעים ישקעו על ידי כוח הכבידה. לשטוף את התולעים שלוש פעמים עם מיליליטר אחד של חיץ M9, משאיר כ 500 מיקרוליטר בצינור לאחר הכביסה האחרונה. באמצעות פיפטה אוטומטית, הוסף 10 מיקרוליטר של תרחיף התולעת לשקופית מיקרוסקופ וחשב את הנפח הדרוש לקבלת 100 תולעים למיקרוליטר.
במיקרו צינור חדש, הוסף את הנפח הדרוש עבור 100 תולעים ו 100 מיקרוליטר של 25% תמיסת מלח דיסודיום אריוגלאוצין. לאחר מכן, הוסף 200 מיקרוליטר של תרבית E.coli OP50 והגדל את הנפח ל -500 מיקרוליטר באמצעות מאגר M9. לדגור על הצינור במשך שלוש שעות עם תסיסה במיקסר, להגן עליו מפני אור.
עם הדגירה, יש לאפשר לתולעים לשקוע בכוח הכבידה לפני ששוטפים אותן במיליליטר אחד של חיץ M9 עד להסרה מוחלטת של תמיסת הצביעה. לאחר השטיפה האחרונה, להשעות מחדש את התולעים ב 250 מיקרוליטר של חיץ M9 ולהעביר כ 50 מיקרוליטר על המגלשה. מניחים את הכיסוי ודוגרים על המגלשה בטמפרטורה של 20 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות כדי לשתק את התולעים.
באמצעות מיקרוסקופ סטריאו, במצב שדה בהיר, ספור את המספר הכולל של התולעים ואת סך התולעים הצבועות. בדיקת חדירות המעי הראתה מחסום מעיים חזק בתולעים צעירות המונע דליפת צבע. לעומת זאת, תולעים מזדקנות הפגינו עודף צבע בכל הגוף, מה שמעיד על נזק לקרום המעי.
