כדי להתחיל, לערבב רכיבים A ו- B של polydimethylsiloxane, או PDMS, ביחס של 10 לאחד. לאחר ערבוב התערובת היטב, יוצקים את התערובת לתוך תבנית מאסטר. מניחים את תבנית PDMS תחת לחץ של פאונד אחד לכל אינץ 'מרובע למשך 15 דקות כדי להסיר בועות אוויר.
לרפא את עובש PDMS ב 60 מעלות צלזיוס במשך שעתיים. De-mold כדי להשיג את תבנית הייצור של microneedle. לאחר מכן, נקו את תבנית הייצור במים טהורים במיוחד לפני השימוש.
כמת את תכולת החלבון של התמיסה האקזוזום המוכנה באמצעות ערכת בדיקת BCA. הוסף כמות מתאימה של DPBS לתמיסת האקזוזום. עכשיו, להכין פתרון של 200 מיליגרם למיליליטר של trehalose באמצעות DPBS כמו ממס.
ערבבו במשך 20 דקות כדי להבטיח המסה מלאה. לאחר מכן, להכין פתרון של חומצה היאלורונית ו polyvinylpyrrolidone, או PVP, באמצעות DPBS ואתנול כמו ממס, בהתאמה. יש לערבב למשך הלילה כדי להבטיח המסה מלאה.
מערבבים את התמיסה האקזוזום ותמיסת הטרלוז ביחס שווה. הוסיפו נפח שווה של תמיסת חומצה היאלורונית וערבבו היטב לקבלת תמיסת החוד. באמצעות חומר ניקוי פלזמה, עבד את פני השטח של תבנית PDMS במשך 30 שניות בדרגה נמוכה כדי לשפר את ההידרופיליות שלה.
הוסף 40 מיקרוליטר של תמיסת קצה לתבנית PDMS. צנטריפוגה ב 3, 000G במשך שלוש דקות בטמפרטורת החדר כדי להבטיח את הנוזל ממלא את שכבת המחט של התבנית. מוציאים את עודפי הנוזלים מהתבנית ומייבשים בטמפרטורת החדר בתנור ייבוש בוואקום למשך יום אחד.
לאחר מכן, הוסף 200 מיקרוליטר של תמיסת PVP לתבנית PDMS. צנטריפוגה ב 3, 000G למשך שלוש דקות בטמפרטורת החדר כדי להבטיח שהנוזל ימלא את שכבת הגב של התבנית. לאחר ייבוש התבנית ליום אחד, הסירו את העובש כדי לקבל את המדבקה של המיקרו-מחט העמוסה באקסוזום.
