כדי להתחיל, הניחו צינור 50 מיליליטר על קרח והוסיפו קולגן תמיסה אחת יחד עם רכיבים אחרים ברצף. נערו את הצינורית כדי לערבב היטב. באמצעות פיפטה P10, הוסף תמיסת נתרן הידרוקסיד טוחנת אחת תוך כדי ניעור תמיסת התערובת כדי להתאים את ה- pH ל- 7.3.
הוסיפו 1.25 מיליליטר של מטריצת קרום מרתף לתערובת קולגן אחת של חמישה מיליליטר וערבבו את התמיסה בעדינות. לאחר מכן מניחים צלחת 12 בארות על קרח במשך שתי דקות. בעזרת קצוות רחבים, מוסיפים את תערובת מטריצת הקולגן במרתף אחד באיטיות לצלחת בעלת 12 הקידוחים.
מניחים את צלחת 12 בארות באינקובטור 37 מעלות צלזיוס למשך שעתיים כדי למצק את שכבת ההידרוג'ל הראשונה. שמרו את יתרת הקולגן בתערובת מטריצת קרום מרתף אחת על קרח לשימוש מאוחר יותר. לאחר מכן להעביר כ 60 צברי תאים לתוך צינור מיקרוצנטריפוגה 1.5 מיליליטר.
ומקררים את הצינור על קרח במשך חמש דקות. בעזרת קצה פיפטה P200, הסר בזהירות את המדיום מהצינור. הוסיפו 1.5 מיליליטר מתערובת הקולגן במרתף אחד, זרקו לאגרגטים של התא וערבבו אותם בעדינות בעזרת קצה פיפטה P200 רחב כדי להשהות מחדש.
מעבירים את הצלחת עם שכבת ההידרוג'ל הראשונה מהאינקובטור לארון הבטיחות הביולוגית. הוסיפו 1.5 מיליליטר מתרחיף האגרגטים לשכבת ההידרוג'ל שנרפאה ונערו בעדינות את הצלחת כדי לפזר את האגרגטים באופן שווה. דוגרים על הצלחת בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני למשך שעתיים.
התמיינות כלי דם טרום חמה בינונית שתיים באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. מוסיפים שני מיליליטר של מדיום לכל באר ומגדלים את התאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני. החליפו את המדיום כל שלושה ימים עם מדיום טרי שחומם מראש להתמיינות כלי דם בינונית שתיים.
אורגנואידים ביטאו CD31, ERG1 ובטא PDGFR, מה שמצביע על נוכחות של תאי אנדותל וטפילים וסקולריים. רשתות כלי הדם הודגמו באמצעות מיקרוסקופ אימונופלואורסצנטי שלם לאחר ניקוי רקמות. אורגנואידים בוגרים שהוכתמו ביום ה-17 הראו רשתות כלי דם העוטפות את הספרואידים בתוך גוש הג'ל.
אורגנואידים שנלקחו ביום ה-28 היו בעלי רשתות כלי דם העוטפות את הספרואידים במקום להתרחב רדיאלית.
