אנו מודים לד&quot;ר הליו סלגאדו, הרנטה Lataro ומאורו דה אוליביירה, בית הספר לרפואה של Ribeirao Preto, אוניברסיטת סאו פאולו ובן ד&quot;ר ג&#39;נסן, לב וכלי דם מכון המחקר מאסטריכט, מאסטריכט האוניברסיטה, לסיוע נדיב במהלך תהליך ההתקנה. עבודה זו נתמכה על ידי מענק FONDECYT N ° 11090114 לSDC

פרוטוקול אושר על ידי ועדת האתיקה של Facultad דה Medicina Clinica Alemana-Universidad del Desarrollo. I. הכנת עירוי Dobutamine <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להמס 10 מ&quot;ג של dobutamine ב20 מ&quot;ל של מי distillated סטרילי, על מנת לקבל פתרון מניות של 500 מיקרוגרם / המ&quot;ל dobutamine. Aliquot ולאחסן ב -20 ° C. פתרון זה יכול לשמש לפחות במשך 3 חודשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפשר aliquot של פתרון המניות dobutamine בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לדלל פתרון המנייה dobutamine בסטרילי 0.9% NaCl, על מנת לקבל פתרון dobutamine עבודה, שהריכוז מחושב באמצעות נוסחה: dobutamine (מיקרוגרם / מ&quot;ל) = משקל הגוף x 0.2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא מזרק 1 מ&quot;ל 29Gx1 / 2 &quot;עם פתרון עובד dobutamine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את המחט של המזרק לתוך 20 סנטימטרי צינור PE-10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את המזרק במשאבת העירוי בעקבות הוראות יצרן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את עירוי הרמפה בצעדלצעד פורמט עם גידול של 10 μl / דקה לכל שלב, ל6 שלבים. </li></ol> השני. הכנת חיישן לחץ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למזער את סחיפת אות, חיישן לחץ להציף במים סטריליים על 37 מעלות צלזיוס במשך לפחות 15 דקות. אל תשרה את הקטטר יותר מ 0.5 סנטימטר העמוק, כדי למנוע שלחץ ההידרוסטטי משפיע חיישן לחץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופן אלקטרוני לכייל את חיישן לחץ בגיל 25 ו 100 מ&quot;מ כספי. חשמל קלט (וולט) מומר לאות לחץ (מ&quot;מ כספי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את קצב הדגימה של 2 k / s ולהשתמש במסנן הנמוך לעבור עם נחתך ב 100 הרץ. הגדרת אות לחץ לאפס מ&quot;מ כספי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סמן 15 מ&quot;מ מקצה הצנתר. רחוק כדי להגיע ללב מנקודת המבוא הוערך על ידי אקו, זיהוי הנוכחות של קטטר לתוך ventricule השמאל. </li></ol> ג. הכנת עכבר לצנתור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשקל C57BL / 6 עכברי זכרים, 30-32 שבוע ישן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מזריק קטמין intraperitoneally 60 מיקרוגרם / ק&quot;ג ו 4 ק&quot;ג / 1 ק&quot;ג xylazine. הערה: הרדמה אחרת עשויה לשמש, למשל: 350-450 מיקרוגרם / קילו Avertin, 50 מיקרוגרם / קילו פנטוברביטל או 1.5 - 2% 2-3 isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שבי הצוואר עם מכונת גילוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר מורדם במצב שכיבה על צלחת חימום איזוטרמי מחוממת. לאבטח את גפיו בנייר דבק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע קמצוץ בוהן כדי לאשר הרגעה מוחלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בעדינות בפי טבעת כדי לפקח על טמפרטורת גוף. באמצעות בדיקת vaselinized מומלץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם טמפרטורת גוף שונה מ37 ° C ± 0.5 ° C, להתאים אותו באמצעות צלחת החימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את חוטם עכבר ליד אספקת החמצן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר באזור הצוואר מתחת stereomicroscope. </li></ol> IV. רכישת נתונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב7 תוכנת LabChartPro, בחר ערוץ אחד לרישום לחץ וערוץ אחד לקצב לב (HR)רישום. באפשרות השנייה, בחר באפשרות &quot;מדידות מחזוריות&quot; ומדידת הגדרה כשיעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לערוץ הלחץ להגדיר את הטווח בהיקף: 0-150 מ&quot;מ הכספי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לHR ערוץ מוגדר טווח בהיקף: 200-600 פעימות לדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על מקש כדי להתחיל בהרשמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס הערות המצביעות על הליכים שבוצעו, לדוגמה: ממשל הרדמה, להתחיל בעירוי dobutamine, ריכוז dobutamine, נושם שינויים. </li></ol> צנתור לב 4,5 V. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבצע חתך קטן בצד הימין ליד הלסת. עם מספריים להפריד את רקמת חיבור של עור שהרירי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע נתיחת אורכית (1.5-2 סנטימטר) בצד ימין של קנה הנשימה. הפרד את הרקמה, שומן ושריר חיבור עם מלקחיים מעוקלים, במטרה לחשוף את העורק הראשי ממש ליד קנה הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח הרחבה בצד ימין החיה לחשוף את העורק הראשי. Pulsatileלחץ שנוצר על ידי הלב מאפשר זיהוי של העורק. וריד הצוואר, שהוא אדום כהה, הוא בצד ימין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את העורק מרקמות סמוכות עם מלקחיים מעוקלים. העצב התועה, אשר דומה בחוט לבן, שוכן לאורך העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך חתיכת 20 סנטימטר של חוט 6/0 משי ו&quot; כפול &quot;אותו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעביר את החוט &quot;הכפול&quot; מתחת לעורק משמאל לימין. חותך את החוט, כדי להשיג מטרות נפרדות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עובר חוט שלישי (10 סנטימטרים) מתחת לעורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור קשר הדוק בנושא מיקומו קרוב לראש, ואחד רופף בחוט הדיסטלי יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור קשר רופף בחוט באמצע, ולתקן את הקצה הימני של החוט האמצעי לכרית החימום עם נייר דבק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור על העורק ראשי לח על ידי הטלת סטרילי 0.9% NaCl. להתנגב עודף של נוזל עם ניצני כותנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למתוח את החוט התחתון עם מהדק מלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתקן את המיקום של מספרי מלקחיים על ידי pהתקדם לעור של הבטן, מתיחת החוט העליון, על מנת לחסום את זרימת דם. ודא שרקמת חיבור סביב העורק הוסרה. העורק צריך להיות מלא בדם ונטול דופק. למנוע אשכולות מלייצר כוח מומנט בעורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך סעיף ניק צלב קרוב לתחתית של העורק עם מייקרו מספרי Vannas. טיפי דם תישפכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הצנתר לתוך העורק הראשי. הקפד להכניס את חיישן לחץ כולו. ודא שאין איבוד דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עדינות להתאים את קשר החוט באמצע, כדי להחזיק את הצנתר במקום. לא לדחוס יותר מדי, חיישן הלחץ הוא מאוד שביר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את מספרי מלקחיים מבטן בעל החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את הקטטר עם היד ולדחוף את החוט באמצע, על מנת להימנע מאיבוד דם. הערה: עורק צריך להיות מלא בדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל אותות לחץ הקלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר הצנתר הוא בפנים,אות לחץ דם משתנית 60-70 ל100-120 מ&quot;מ כספי. הצורה של אות הלחץ מוצגת בביאור 1.A. איור: אם אתם מעוניינים ב, בנקודת זמן זו אתה יכול להקליט את לחץ דם אם האות היא יציבה במשך לפחות 5 דקות. ערכי HR התקבלו מגל הלחץ שוקל הפסקה של 30 שניות של אות שיא. ניתן להשתמש בשיטת א.ק.ג. גם למדידה ישירה של קצב לב, בהתאם למטרות החקירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דחף בעדינות את הצנתר להבחין בשינוי בצורה של אות לחץ (איור 1.B). ברגע שהצנתר נמצא בחדר השמאלי, אות הלחץ נעה בין 0 ל 100-120 מ&quot;מ כספי. אם קשה לחלק את הצנתר, לצבוט חזה חיה בשתי אצבעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רציפות לשלוט בקצב נשימה, טמפרטורת גוף, רמת הרדמה ואות לחץ. כל אחד מהם צריך להישאר יציב. </li></ol> VI. עירוי של Dobutamine <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li&gt; לcannulation וריד צוואר להיות בטוח לקלף רקמת השומן מסביב לווריד, כדי למנוע הניקוב שלו. ההליך כירורגי לחסימת וריד דומה להליך שמוצג לעורק ראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להציג PE-10 צינור לווריד. אשר שזרימת הדם אינו חסום נע בוכנת המזרק אחורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עירוי Dobutamine מתחיל עם 10 μl / דקות וסיים עם 60 μl / דקה. בכל צעד, קצב העירוי נשמר במשך 2 דקות 6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר המנה האחרונה dobutamine, להרדימו עם מנת יתר של חומרי הרדמה. </li></ol> VII. ניתוח נתונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניתוח נתונים, בחר את הקטע של המידע המוקלט של העניין שלך. הקפד לשקול מרווח זמן שבו אות לחץ היא יציבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר בסמל ההגדרה במודול לחץ הדם. לציין את הסוג הנבחר של אות לחץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן אוטומטי את תוכנת 7 מציג LabChartPro כלומר, לכל היותרוערכי מינימום למשאבי אנוש, לחץ הסיסטולי (P מקסימום), יתר לחץ דם הדיאסטולי (p דקות), לחץ סוף דיאסטולי (אמ&quot;ר), פיתוח לחץ חיובי מקסימאלי (DP / dtmax) והתפתחות לחץ שלילית מקסימלי (DP / DT דקות). בנוסף, פרמטרים לבביים יכולים להיות מתוארים על עקבות לחץ. </li></ol>

<ol>
	<li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice.">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).</li><li>Janssen, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anesthetics+on+systemic+hemodynamics+in+mice.">Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).</li><li>Lorenz, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+guide+to+evaluating+cardiovascular,+renal,+and+pulmonary+function+in+mice.">A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).</li><li>Lorenz, J. N., Robbins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+intraventricular+pressure+and+cardiac+performance+in+the+intact+closed-chest+anesthetized+mouse.">Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse.</a> Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).</li><li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+catheterization+technique+in+a+closed-chest+murine+model.">Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).</li><li>Daniels, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+cardiac+functional+reserve+in+type+2+diabetic+db/db+mice+is+associated+with+metabolic,+but+not+structural,+remodelling.">Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling.</a> Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).</li><li>De Celle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+structural+and+functional+consequences+of+cardiac+ischaemia-reperfusion+injury+in+vivo+in+mice.">Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice.</a> Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).</li><li>Huntgeburth, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor+beta+oppositely+regulates+the+hypertrophic+and+contractile+response+to+beta-adrenergic+stimulation+in+the+heart.">Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart.</a> PLoS One. 6, e26628 (2011).</li><li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+function+in+young+and+old+Little+mice.">Cardiac function in young and old Little mice.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).</li><li>Christoffersen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+lipid+accumulation+associated+with+diastolic+dysfunction+in+obese+mice.">Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice.</a> Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

בדיקת מאמץ לב הנגרמת על ידי dobutamine ופיקוח על ידי צנתור היא מייגעת. עם זאת, בעקבות הפרוטוקול כאן לתאר ועם זמן קצר של אימונים, אפשר להעריך שישה פרמטרי hemodynamic בניסוי אחד שעבר כשעה. השלבים הקריטיים של הפרוטוקול כאן מוצג הם cannulations של כלי ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> ריאגנטים </td></tr><tr><td> PE-50/10 </td><td> וורנר מכשירים </td><td> 64-0752 </td><td></td></tr><tr><td> חוט משי 6/0 HR17 </td><td> Tagum </td><td> SN0713K </td><td></td></tr><tr><td> Xylacin 20 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td><td> Centrovet Laboratorio </td><td></td><td></td></tr><tr><td> קטמין 100 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td><td> גרירת פארמה </td><td></td><td></td></tr><tr><td> נתרן כלורי 0.9% </td><td> מעבדת סנדרסון SA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> hydrochloride Dobutamine </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> D0676 </td><td></td></tr><tr><td> מזרק אינסולין U-100 29G x ½ &quot; </td><td> Terumo רפואי ושות </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מלקחיים לנתח סגנון סנטימטרי מייקר 11.5 7 </td><td> לוטוןMedizintechnik </td><td> 09-0959 </td><td></td></tr><tr><td> גרף מלקחי CVD 0.7mm 7 סנטימטר </td><td> הווטו Medizintechnik </td><td> 62-0263 </td><td></td></tr><tr><td> מלחציים Str Dieffenbach בולדוג Cl 38 מ&quot;מ </td><td> הווטו Medizintechnik </td><td> 60-010 </td><td></td></tr><tr><td> מספרי Vannas 8 סנטימטרים Str FH </td><td> הווטו Medizintechnik </td><td> 63-1400 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> ציוד </td></tr><tr><td> SPR-671 קטטר לחץ Mikro-עצה </td><td> מילר מכשירים </td><td> 840-6719 </td><td></td></tr><tr><td> PCU-2000 יחידת בקרת לחץ </td><td> מילר מכשירים </td><td> 880-0129 </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab 4/30 </td><td> ADinstruments Pty בע&quot;מ </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> 7 LabChartPro </td><td> ADinstruments Pty בע&quot;מ </td><td> MLU260 / 7 </td><td></td></tr><tr><td> משאבת העירוי Legato200 </td><td> KdScientific </td><td> KD-KDS210P </td><td></td></tr><tr><td> בקר טמפרטורת TCAT-2LV וצלחת החימום איזוטרמי </td><td> PhysiTemp המכשירים בע&quot;מ </td><td></td><td></td></tr><tr><td> אספקת חמצן רפואית </td><td> Indura </td><td></td><td></td></tr><tr><td> בדיקה רקטלית </td><td> ADinstruments Pty בע&quot;מ </td><td> MLT1404 </td><td></td></tr><tr><td> מיקרוסקופ Trinocular, תאורה צירית </td><td> LW מדעי </td><td> Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF </td><td></td></tr></tbody></table>

cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in mice

Dobutamine הוא אגוניסט β-adrenergic עם זיקה גבוהה יותר לרצפטור בטא בלב (β 1) מאשר לקולטניים בטא בעורקים (β 2). כאשר באופן מערכתי, זה מגדיל את הביקוש של לב. לפיכך, dobutamine חושף קצב נורמלי או אזורים איסכמיים בסיכון פוטנציאלי לאוטם. ניטור של תפקוד לב במהלך בדיקת מאמץ לב יכול להתבצע על ידי שתי ecocardiography או צנתור. האחרון הוא טכניקה פולשנית אבל יותר מדויקת ואינפורמטיבי שלשעבר. בדיקת מאמץ לב הנגרם על ידי dobutamine ופיקוח על ידי הצנתור נעשה כמתואר כאן מאפשרת, בניסוי אחד, המדידה של פרמטרי hemodynamic הבאים: קצב לב (HR), לחץ הסיסטולי, לחץ הדיאסטולי, לחץ סוף דיאסטולי, לחץ חיובי מקסימאלי הפיתוח (DP / dtmax) ולחץ שלילי מקסימאלייור פיתוח (DP / DT דקות), בתנאים בסיסיים ותחת הגדלת מינון של dobutamine. כצפוי, בעכברים נורמלים שנצפינו עלייה קשור למינון dobutamine במשאבי אנוש, DP / DT ומקסימום DP / DT דקות. יתר על כן, במינון הגבוה ביותר נבדק (12 ng / g / דקות) decompensation הלב של עכברים שמנים גבוהים דיאטה מושרה שמנים נחשף.

אות לחץ הדם מוגדרת על ידי הסיסטולי ולחץ הדיאסטולי. כאשר חיישן הלחץ נמצא בחדר השמאלי, הלחץ שלה (LVP) גל מאופיין בירידה לאפס של לחץ הדיאסטולי ואת המראה של התכווצות הפרוזדורים השמאלית לפני התכווצות חדר לב (איור 1). במצב בסיסי, עכברים נורמלים מורדמים קטמין-xylazine היה H...

Watch this Scientific Journal Video about Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice at JoVE.com

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

אנו מתארים את הפרוטוקול לביצוע מבחן מאמץ לב הנגרם על ידי dobutamine ופיקוח על ידי צנתור בעכברים נורמלים. כמו כן אנו מציגים יישומה לחשוף מחלת לב תת קלינית בעכברים שמנים גבוהים דיאטה מושרה שמנים.

בדיקת מאמץ לב הנגרמת על ידי Dobutamine ופיקוח על ידי צנתור בעכברים

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

cardiac-stress-test-induced-dobutamine-monitored-cardiac

Research

JoVE Journal

Medicine

18.0K Views.  Clínica Alemana Universidad del Desarrollo. אנו מתארים את הפרוטוקול לביצוע מבחן מאמץ לב הנגרם על ידי dobutamine ופיקוח על ידי צנתור בעכברים נורמלים. כמו כן אנו מציגים יישומה לחשוף מחלת לב תת קלינית בעכברים שמנים גבוהים דיאטה מושרה שמנים.

Video: Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

Cryoballoon ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF). Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral contact and PV isolation and is typically assessed by contrast injection. We present a novel method of direct pressure monitoring for assessment of PV occlusion.
Transcatheter pressure is monitored during balloon advancement to the PV antrum. Pressure is recorded via a single pressure transducer connected to the inner lumen of the cryoballoon. Pressure curve characteristics are used to assess occlusion in conjunction with fluoroscopic or intracardiac echocardiography (ICE) guidance. PV occlusion is confirmed when loss of typical left atrial (LA) pressure waveform is observed with recordings of PA pressure characteristics (no A wave and rapid V wave upstroke). Complete pulmonary vein occlusion as assessed with this technique has been confirmed with concurrent contrast utilization during the initial testing of the technique and has been shown to be highly accurate and readily reproducible.
We evaluated the efficacy of this novel technique in 35 patients. A total of 128 veins were assessed for occlusion with the cryoballoon utilizing the pressure monitoring technique; occlusive pressure was demonstrated in 113 veins with resultant successful pulmonary vein isolation in 111 veins (98.2%). Occlusion was confirmed with subsequent contrast injection during the initial ten procedures, after which contrast utilization was rapidly reduced or eliminated given the highly accurate identification of occlusive pressure waveform with limited initial training.
Verification of PV occlusive pressure during CBA is a novel approach to assessing effective PV occlusion and it accurately predicts electrical isolation. Utilization of this method results in significant decrease in fluoroscopy time and volume of contrast.

Effective pulmonary vein isolation utilizing a cryoballoon depends on complete pulmonary vein occlusion. The point of occlusion can be effectively predicted by direct analysis of pulmonary vein pressure waveform analysis during balloon inflation using a simple and reproducible technique.

ניטור לחץ ישיר מנבא במדויק חסימת וריד ריאתי במהלך אבלציה Cryoballoon

Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, the RV is significantly affected in pulmonary diseases such as pulmonary artery hypertension (PAH). In addition, the RV is remarkably sensitive to cardiac pathologies, including left ventricular (LV) dysfunction, valvular disease or RV infarction4. To understand the role of RV in the pathogenesis of cardiac diseases, a reliable and noninvasive method to access the RV structurally and functionally is essential.
A noninvasive trans-thoracic echocardiography (TTE) based methodology was established and validated for monitoring dynamic changes in RV structure and function in adult mice. To impose RV stress, we employed a surgical model of pulmonary artery constriction (PAC) and measured the RV response over a 7-day period using a high-frequency ultrasound microimaging system. Sham operated mice were used as controls. Images were acquired in lightly anesthetized mice at baseline (before surgery), day 0 (immediately post-surgery), day 3, and day 7 (post-surgery). Data was analyzed offline using software.
Several acoustic windows (B, M, and Color Doppler modes), which can be consistently obtained in mice, allowed for reliable and reproducible measurement of RV structure (including RV wall thickness, end-diastolic&#160;and end-systolic dimensions), and function (fractional area change, fractional shortening, PA peak velocity, and peak pressure gradient) in normal mice and following PAC.
Using this method, the pressure-gradient resulting from PAC was accurately measured in real-time using Color Doppler mode and was comparable to direct pressure measurements performed with a Millar high-fidelity microtip catheter. Taken together, these data demonstrate that RV measurements obtained from various complimentary views using echocardiography are reliable, reproducible and can provide insights regarding RV structure and function. This method will enable a better understanding of the role of RV cardiac dysfunction.

Right ventricle (RV) dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease, yet limited methodologies are available for its evaluation. Recent advances in ultrasound imaging provide a noninvasive and accurate option for longitudinal RV study. Herein, we detail a step-by-step echocardiographic method using a murine model of RV pressure overload.

הערכה של מבנה הנכון חדרית ותפקוד בעכבר הדגם של תעוקת עורק ריאה על ידי Transthoracic אקו

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is estimated to contribute to 19- 25% of all clinical cases of acute kidney injury (AKI) in critically ill patients. AKI detection has historically relied on metrics such as serum creatinine (sCr) or blood urea nitrogen (BUN) which are demonstrably inadequate in full assessment of nephrotoxicity in the early phase of renal dysfunction. Currently, there is no robust diagnostic method to accurately detect hemodynamic alteration in the early phase of AKI while such alterations might actually precede the rise in serum biomarker levels. Such early detection can help clinicians make an accurate diagnosis and help in in decision making for therapeutic strategy. Rats were treated with Cisplatin to induce AKI. Nephrotoxicity was assessed for six days using high-frequency sonography, sCr measurement and upon histopathology of kidney. Hemodynamic evaluation using 2D and Color-Doppler images were used to serially study nephrotoxicity in rats, using the sonography. Our data showed successful drug-induced kidney injury in adult rats by histological examination. Color-Doppler based sonographic assessment of AKI indicated that resistive-index (RI) and pulsatile-index (PI) were increased in the treatment group; and peak-systolic velocity (mm/s), end-diastolic velocity (mm/s) and velocity-time integral (VTI, mm) were decreased in renal arteries in the same group. Importantly, these hemodynamic changes evaluated by sonography preceded the rise of sCr levels. Sonography-based indices such as RI or PI can thus be useful predictive markers of declining renal function in rodents. From our sonography-based observations in the kidneys of rats that underwent AKI, we showed that these noninvasive hemodynamic measurements may consider as an accurate, sensitive and robust method in detecting early stage kidney dysfunction. This study also underscores the importance of ethical issues associated with animal use in research.

Early stage hemodynamic dysfunction is critical to the development of kidney disease. Yet, detection methodologies are limited. Recent advances in sonography provide a noninvasive, accurate option for early detection of kidney injury. This study outlines a step-by-step, sonographic methodology for detecting kidney dysfunction using a drug-induced nephrotoxicity rat model.

גילוי מוקדם של הפרעות בתפקוד הכליות המודינמי סמים באמצעות טכנולוגיה Sonographic בחולדות

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these strategies is to examine their effects on heart function. There are several techniques to measure in vivo cardiac mechanics (e.g., echocardiography, pressure/volume relations, etc.). Compared to echocardiography, real-time left ventricular (LV) pressure/volume analysis via catheterization is more precise and insightful in assessing LV function. Additionally, LV pressure/volume analysis provides the ability to instantaneously record changes during manipulations of contractility (e.g., &#946;-adrenergic stimulation) and pathological insults (e.g., ischemia/reperfusion injury). In addition to the maximum (+dP/dt) and minimum (-dP/dt) rate of pressure change in the LV, an accurate assessment of LV function via several load-independent indexes (e.g., end systolic pressure volume relationship and preload recruitable stroke work) can be attained. Heart rate has a significant effect on LV contractility such that an increase in the heart rate is the primary mechanism to increase cardiac output (i.e., Bowditch effect). Thus, when comparing hemodynamics between experimental groups, it is necessary to have similar heart rates. Furthermore, a hallmark of many cardiomyopathy models is a decrease in contractile reserve (i.e., decreased Bowditch effect). Consequently, vital information can be obtained by determining the effects of increasing heart rate on contractility. Our and others data has demonstrated that the neuronal nitric oxide synthase (NOS1) knockout mouse has decreased contractility. Here we describe the procedure of measuring LV pressure/volume with increasing heart rates using the NOS1 knockout mouse model.

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

צנתור לב בעכברים כדי למדוד את יחסי נפח לחץ: חקירת אפקט Bowditch

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

אוטם שריר לב עכברים ילודים, מודל התחדשות לב

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents responsible for the action potential can cause pro-arrhythmic substrates that underlie arrhythmias, such as atrial fibrillation, which are highly prevalent in many conditions and disease states. Isolating adult mouse atrial cardiomyocytes for use in patch-clamp experiments has greatly advanced our knowledge and understanding of the cellular electrophysiology in the healthy atrial myocardium and in the setting of atrial pathophysiology. In addition, studies using genetic mouse models have elucidated the role of a vast array of proteins in regulating atrial electrophysiology. Here we provide a detailed protocol for the isolation of cardiomyocytes from the atrial appendages of adult mice using a combination of enzymatic digestion and mechanical dissociation of these tissues. This approach consistently and reliably yields isolated atrial cardiomyocytes that can then be used to characterize cellular electrophysiology by measuring action potentials and ionic currents in patch-clamp experiments under a number of experimental conditions.

This protocol is used to isolate single atrial cardiomyocytes from the adult mouse heart using a chunk digestion approach. This approach is used to isolate right or left atrial myocytes that can be used to characterize atrial myocyte electrophysiology in patch-clamp studies.

בידוד של פרפור מיוציטים מעכברים למבוגרים

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

Biventricular Assessment of Cardiac Function and Pressure-Volume Loops by Closed-Chest Catheterization in Mice

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) generated by recording both pressure and volume during cardiac catheterization are vital when assessing both systolic and diastolic cardiac function. Left and right heart function are closely related, reflected in ventricular interdependence. Thus, recording biventricular function in the same animal is important to get a complete assessment of cardiac function. In this protocol, a closed chest approach to cardiac catheterization consistent with the way catheterization is performed in patients is adopted in mice. While challenging, the closed chest strategy is a more physiological approach, because opening the chest results in major changes in preload and afterload that create artifacts, most notably a fall in systemic blood pressure. While high-resolution echocardiography is used to assess rodents, cardiac catheterization is invaluable, particularly when assessing diastolic pressures in both ventricles.
Described here is a procedure to perform invasive, closed chest, sequential left and right ventricular pressure-volume (PV) loops in the same animal. PV loops are acquired using&#160;admittance technology with a mouse pressure-volume catheter and pressure-volume system acquisition. The procedure is described, beginning with the neck dissection, which is required to access the right jugular vein and the right carotid artery, to the insertion and positioning of the catheter, and finally the data acquisition. Then, the criteria required to ensure the acquisition of high-quality PV loops are discussed. Finally, the analysis of the left and right ventricular PV loops and the different hemodynamic parameters available to quantify systolic and diastolic ventricular function are briefly described.

Presented here is a protocol to assess biventricular heart function in mice by generating pressure-volume (PV) loops from the right and left ventricle in the same animal using closed chest catheterization. The focus is on the technical aspect of surgery and data acquisition.

הערכה דו-חדרית של תפקוד הלב ולולאות נפח לחץ על ידי צנתור חזה סגור בעכברים

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) ...

Cardiac Response to &#946;-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of specific treatments on the heart. Due to the feasibility of genetic manipulations the mouse has become the most common mammalian animal model to study cardiac function and to search for new potential therapeutic targets. Here we describe a protocol to determine cardiac function&#160;in vivo using pressure-volume loop measurements and analysis during basal conditions and under &#946;-adrenergic stimulation by intravenous infusion of increasing concentrations of isoproterenol. We provide a refined protocol including ventilation support taking into account the positive end-expiratory pressure to ameliorate negative effects during open-chest measurements, and potent analgesia (Buprenorphine) to avoid uncontrollable myocardial stress evoked by pain during the procedure. All together the detailed description of the procedure and discussion about possible pitfalls enables highly standardized and reproducible pressure-volume loop analysis, reducing the exclusion of animals from the experimental cohort by preventing possible methodological bias.

Here we describe a cardiac pressure-volume loop analysis under increasing doses of intravenously infused isoproterenol to determine the intrinsic cardiac function and the &#946;-adrenergic reserve in mice. We use a modified open-chest approach for the pressure-volume loop measurements, in which we include ventilation with positive end-expiratory pressure.

תגובת לב לגירוי β-אדנרגיות שנקבע על ידי ניתוח לולאת נפח לחץ

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of ...

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most common cause of AKI. To mimic this clinical scenario, this study presents a highly reproducible large animal model of renal IRI in swine using temporary percutaneous bilateral balloon-catheter occlusion of the renal arteries. The renal arteries are occluded for 60 min by introducing the balloon-catheters through the femoral and carotid artery and advancing them into the proximal portion of the arteries. Iodinated contrast is injected in the aorta to assess any opacification of the kidney vessels and confirm the success of the artery occlusion. This is furtherly confirmed by the flattening of the pulse waveform at the tip of the balloon catheters. The balloons are deflated and removed after 60 min of bilateral renal artery occlusion, and the animals are allowed to recover for 24 h. At the end of the study, plasma creatinine and blood urea nitrogen significantly increase, while eGFR and urine output significantly decrease. The need for iodinated contrast is minimal and does not affect renal function. Bilateral renal artery occlusion better mimics the clinical scenario of perioperative renal hypoperfusion, and the percutaneous approach minimizes the impact of the inflammatory response and the risk of infection seen with an open approach, such as a laparotomy. The ability to create and reproduce this clinically relevant swine model eases the clinical translation to humans.

This study presents a highly reproducible large animal model of renal ischemia-reperfusion injury in swine using temporary percutaneous bilateral balloon-catheter occlusion of the renal arteries for 60 min and reperfusion for 24 h.

מודל בעלי חיים גדול לפגיעה חריפה בכליות על ידי אומת עורק כליות דו-צדדית זמנית

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

Advanced Cardiac Rhythm Management by Applying Optogenetic Multi-Site Photostimulation in Murine Hearts

Ventricular tachyarrhythmias are a major cause of mortality and morbidity worldwide. Electrical defibrillation using high-energy electric shocks is currently the only treatment for life-threatening ventricular fibrillation. However, defibrillation may have side-effects, including intolerable pain, tissue damage, and worsening of prognosis, indicating a significant medical need for the development of more gentle cardiac rhythm management strategies. Besides energy-reducing electrical approaches, cardiac optogenetics was introduced as a powerful tool to influence cardiac activity using light-sensitive membrane ion channels and light pulses. In the present study, a robust and valid method for successful photostimulation of Langendorff perfused intact murine hearts will be described based on multi-site pacing applying a 3 x 3 array of micro light-emitting diodes (micro-LED). Simultaneous optical mapping of epicardial membrane voltage waves allows the investigation of the effects of region-specific stimulation and evaluates the newly induced cardiac activity directly on-site. The obtained results show that the efficacy of defibrillation is strongly dependent on the parameters chosen for photostimulation during a cardiac arrhythmia. It will be demonstrated that the illuminated area of the heart plays a crucial role for termination success as well as how the targeted control of cardiac activity during illumination for modifying arrhythmia patterns can be achieved. In summary, this technique provides a possibility to optimize the on-site mechanism manipulation on the way to real-time feedback control of cardiac rhythm and, regarding the region specificity, new approaches in reducing the potential harm to the cardiac system compared to the usage of non-specific electrical shock applications.

This work reports a method for controlling the cardiac rhythm of intact murine hearts of transgenic channelrhodopsin-2 (ChR2) mice using local photostimulation with a micro-LED array and simultaneous optical mapping of epicardial membrane potential.

ניהול מתקדם של קצב הלב על ידי יישום פוטו-גירוי אופטוגנטי מרובה אתרים בלבבות מורין

Ventricular tachyarrhythmias are a major cause of mortality and morbidity worldwide. Electrical defibrillation using high-energy electric shocks is ...