This study was supported by an operating grant from the Canadian Institutes of Health Research (CIHR) to Q.F. (grant #MOP-119600).

זוגות מקננים של C57BL / 6 ועכברים CD-1 IG-S נרכשו צ&#39;ארלס ריבר. בעלי חיים המשמשים במחקר זה טופלו בהתאם להנחיות המועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים, ופרוטוקולים המחקר אושרו על ידי ועדת המשנה שימוש בבעלי חיים באוניברסיטת Western, לונדון, קנדה. 1. טיפול בבעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הלידה היא מלאה גורים כבר בתחילה הניקו ידי אמם במשך כמה שעות, למקם אותם בכלוב שונה עם אמו מאמצת CD-1. CD-1 אמהות להציג פנוטיפ יותר רגוע עם אינסטינקט טיפוח חזק, ויש לי נטייה נמוכה יותר קניבליזציה גורים פצועים 15. </li></ol> 2. כירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשרות הרדמה על ידי הצבת את הגור בתא isoflurane אטום (כ 500 μl של isoflurane 100% v / v מותר לפזר מעל 1,300 ס&quot;מ 3 קאמרית). שמור את העכבר בתא עד להפסקת התנועה (כ -30 שניות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר מולהשתמש מחדר isoflurane ולגרום הרדמה היפותרמיה ידי הצבת העכבר על קרח רטוב. כדי למנוע כוויות קור, למקם קרח בתוך כפפה כירורגית סטרילית, לעטוף את העכבר בתוך כפפה ולכסות את הכפפה עם קרח או לעטוף את העכבר גזה רטוב סטרילית ומניחים אותו על קרח. הערה: עכברים לקרר מהר יותר כאשר במגע עם קרח הוא על פני שטח פנים גדול יותר, וכתוצאה קרח נמס כזה יכול לקצר את זמן אינדוקציה היפותרמיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אשר הרדמה על ידי חוסר תגובת תנועת קמצוץ בוהן וזנב. הערה: הפסקת תנועה עוררה מתרחשת בטמפרטורת גוף בין 15 ° C ו -8 מעלות צלזיוס. (קירור הזמן בטמפרטורה זו כ 1 דק &#39;). דום נשימה ו asystole שלמים אינה נדרשו עבור קשירת LAD. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזיזו את המיטה קרח על אזור הניתוח מאובזר עם מיקרוסקופ ההפעלה. ודא כי גור העכבר נשאר על קרח במהלך ההליך הכירורגי כולו. הערה: אזור הניתוח, גזה מכשירי ניתוח צריך להיות מעוקר. Maintaבשדה סטרילי לאורך כל ההליך, וללבוש ליחד, כפפות מנתחים סטרילית. משחת עיניים אינו נדרש כעכברים נולדים בעיניים עצומות 17. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את גור העכבר במצב משכוב לרוחב הנכון. לחטא החזה ידי מנגב בעדינות עם פתרון povidone יוד ואחריו ספוגית אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע חתך בעור על החזה השמאלי לאורך קו אמצע השחי על ידי חיתוך העור בין xyphoid ו השחי השאירה כמה מילימטרים מתחת רגלה השמאלית הקדמית. כמו כן להשתמש במספריים לחתוך את שכבת השריר הבסיסית החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע פתיחת בית חזה שמאלית במרחב 4 th צלעי ידי הפרדת צלעות ושרירי צלעי עם מלקחיים. הערה: צלעות ילודים הן שבירות מאוד ניתן לשבור בקלות. כדי למנוע זאת, צלעות נפרדות בעדינות על ידי פתיחת מלקחיים לאורך שריר צלעי (ולא אחיזת צלעות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו את השמאלי הקדמי היורד לב כלילית (LAD) המתעוררים משמאל Auricle מאחורי עורק הריאה ויורד מעבר וריד לב הרב. הערה: בחלון בילוד מוקדם זה, התימוס הוא מדמיין לעתים קרובות עשוי לכסות חלק מבסיס הלב. הנער ניתן לראות העולה ליד עמדת התימוס, בהתאם לזווית של חתך בית החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור את LAD ידי העברת תפר ניילון 11-0 (0.007 מ&quot;מ מחט בקוטר) מתחת העורק דרך החדר באמצע מתחת אפרכסת שמאל (תרשים 1C). איסכמיה הוא אישר עם הלבנה של שריר הלב שמתחת לאזור תפר (איור 1G). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת חתך החזה באמצעות 8-0 תפרי ניילון (מחט בקוטר 0.15 מ&quot;מ). השתמש בשני תפרים כדי לסגור את הצלעות. מניח שני תפרי הצלעות לפני ligating כדי להבטיח את המחט לא לנקב את הריאות כאשר עוברים דרך חלל הגוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר סגירת הצלעות, הסר את העכבר מן המיטה קרח. שמור את העכבר בתוך אזור הניתוח, ולמקם אותו ישירות על ניתוח סטרילי כדיwel על כרית חימום חמה ב 37 מעלות צלזיוס להתחיל התחממות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר על האזור המחומם סטרילי, לסגור את שכבות שריר ועור באמצעות 8-0 תפרי ניילון (מחט בקוטר 0.15 מ&quot;מ). השתמש תפר אחד עבור שכבת השריר ולהשתמש שני התפרים עבור החתך בעור. הערה: שרירים ושכבות עור עלולים להיות סגורים על כרית חימום כדי לקצר את זמן חשיפה היפותרמיה. טמפרטורת העכבר מתחילה לעלות להציב פעם על כרית החימום, אבל נשארה מספיק נמוך מספיק עבור תחזוקת הרדמה במהלך סגר שרירים ועור. </li></ol> 3. שחזור כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משך התחממות מהירה על כרית חימום חמה עד להשבת תנועה ספונטנית. אל תשאירו חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. הסר povidone יוד ודם ידי מנגב פגיעה באתר בעדינות עם ספוגית אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר התאוששות מספיק מן ההרדמה, להסיר אותו מאזור ניתוח סטרילי, למרוח אותה עם מצעים מ אומנהאמו של כלוב, ותשואת הגור לטפח אמא. זה עוזר למנוע דחייה או קניבליזציה אימהית. הערה: אל תחזרו גורים לכלוב עם בעלי חיים אחרים עד התאושש לחלוטין. אם המלטה כולו לא נעשה שימוש, ואת להמלטה להישאר עם אמה המאמצת, למקם הגורים התאושש באמצע המלטה. אם ביצוע יותר מאשר ניתוח אחד, להשלים את כל הניתוחים הנדרשים המלטה בודדת לפני שחזר עכברים האם האומנת שלהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתבונן בהתנהגות של אמה המאמצת לעבר הגור כל 10 - 15 דקות עבור 2 - 3 שעות כדי להבטיח קבלה של הגור. במידה והאם מציג בתוקפנות כלפי הגור הפצוע, להסיר את הגור ואת להרדים על ידי יתר isoflurane (&gt; 5%; עד למועד הפסקת נשימה), ואחריו עריפת ראש. הערה: תרופות שיכוך כאבי Perioperative אינן נדרשות כמו רפלקסים כאב הריכוזיים אינם מפותחים בגיל מוקדם זה 15. </li></ol> 4. מדידה של שריר לב אוטם גודל 4 -6 שעות לאחר MI <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר גורים להתאושש בטיפול אם אומנת CD-1 לתקופה של 4 - שעות 6. הסר את הגור מהכלוב עם אמו להרדים אותו על ידי יתר isoflurane ואחריו עריפת ראש במספריים גדולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ובלו הלב תחת מיקרוסקופ לנתח, נזהר שלא לקרוע שריר הלב. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את העור מתהליך xyphoid לחלק העליון של בית החזה. דופן הבטן להרחיב מתחת בית החזה. אחוז כלוב הצלעות התחתון ופצע דרך צלעות שרירי longitudinally לאורך הקו באמצע בית השחי השמאלי מן הסרעפת אל השחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק מספריים מטוס רוחבי בזהירות לחתוך דרך הסרעפת משמאל לצד ימין. הקפד למקם מספריים מתחת לרמה של הלב כדי למנוע נזק הקודקוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחוז כלוב צלעות וחתך צד ימין של צלעות שרירות לאורך קו אמצע השחי הימני. הסר את כל החיבורים של כלי הדם אל הלב במספריים. הסר את הלב מתוך חלל החזה תוך כדי אחיזההבסיס. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סעיף בלב לשלושה חלקים באמצעות סכין גילוח פלדת פחמן כירורגית. הפוך את החתך הראשון לאורך הציר הקצר של הלב בנקודת האמצע בין התפר ואת חוד הלב. עובר את הסינון השני ברמה של התפר (איור 3 א). הערה: זה משאיר קטע איפקס כ 0.75 מ&quot;מ עובי במשקל 0.0018 גרם; קטע באמצע בסיס כ 1 מ&quot;מ עובי, במשקל 0.0065 גרם; והבסיס של הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הסעיפים לב 1% כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium (TTC) בטמפרטורת החדר למשך 10 - 15 דקות. בזהירות לצפות דגימה להימנע מכתים מעל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להגביר את הניגודיות, לתקן פרוסות הלב מוכתם paraformaldehyde 4% בין לילה ב 4 ° C. כדי לחשב שטח אוטם%, סעיפי לב תצלום ולמדוד אזור אוטם על תוכנת הדמיה. שריר לב קיימא כתמים אדום ואילו באזור האוטם הוא תחום כמו 18 לבנים. </li></ol> 5. מדידהתפקוד הלב על ידי אקו לאחר MI <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר הגורים להתאושש בטיפול אם אומנת CD-1 לתקופה של 24 - 48 שעות. להשרות הרדמה על ידי הצבת את הגור בתא isoflurane אטום (isoflurane 5%). שמור את העכבר בתא עד להפסקת התנועה (כ -30 שניות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure את הגור בעמדת פרקדן על מזח מחומם (C ° טמפרטורת 37) עם האף שלה חרוט כדי לספק 0.5 - 1 isoflurane% (לצורך תחזוקת הרדמה). מניחים ג&#39;ל חימם מראש הד על אזור החזה השמאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג ראייה ארוכת ציר parasternal של החדר השמאלי (LV). ודא את התמונות מתקבלות מתחת לרמה של תתפור את LV. לאחר שרכש את העמדה, להפוך בדיקת אולטרסאונד (40 מגה-הרץ) 90 ° עד שייתן להם תמונה קצר ציר parasternal, ולהקליט M-mode תמונות אקו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את הדיאסטולי סוף ולסיים בקטרים ​​חדרית פנימיים השמאלי סיסטולי מתמונות M-mode קצר הציר. חישוב מקטע פליטה ו fractioקיצור סופי. </li></ol> 6. מדידת שריר לב אוטם גודל 24 שעות לאחר MI <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר גורים להתאושש בטיפול אם אומנת CD-1 לתקופה של 24 שעות. הסר את הגור מהכלוב עם אמו להרדים אותו על ידי יתר isoflurane ואחריו עריפת ראש במספריים גדולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את חלל החזה כמו בשלב 4.2. לפני מוציא את הלב, בזהירות לתפוס את אבי העורקים החזי בדיוק מעל הסרעפת עם מלקחיים בסדר. החזק מספריים בסדר במישור העטרה, שטוחים על קיר החזה, וחותכי האאורטה החזי מקיר החזה האחורי נע מספריים בכיוון גולגולתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את אב עורקים חינם מקיר החזה וכל חיבורים אחרים עד שהוא מגיע אל הלב. ובלו הלב ידי אחיזת הווריד הנבוב המעולה חיתוך כל החיבורים של כלי הדם אחרים בגוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוטף את הלב (עם אב עורקים המצורפים) סליין. בזהירות cannulate האאורטה החזה עם מחט 30 מד ולקשוראורטה כדי צינורית עם חוט תפר ניילון 8-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Perfuse הלב עם 1 מ&quot;ל של תמיסת מלח דרך אבי העורקים באמצעות המחט 30 מד בשיעור של 1 מ&quot;ל / דקה. Perfuse הלב עם 150 μl של פתרון כחול -2% אוונס בשיעור של 1 מ&quot;ל / דקה. הסר את הלב מן הצינורית, סעיף אותו לתוך שלוש חתיכות ללכלך אותם עם TTC כמפורט בסעיף 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לחשב את הגודל אוטם, סעיפי לב תצלום ולמדוד אזור אוטם על תוכנת הדמיה. שריר לב קיימא כתמים כחול, באזור ב כתמי סיכון אדום, ואזור האוטם הוא תחום כמו לבן. </li></ol>

<ol>
	<li>Rosamond, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2008+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee.">Heart disease and stroke statistics--2008 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 117 (4), 25-146 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-analysis+Global+Group+in+Chronic+Heart+Failure.+The+survival+of+patients+with+heart+failure+with+preserved+or+reduced+left+ventricular+ejection+fraction:+an+individual+patient+data+meta-analysis.">Meta-analysis Global Group in Chronic Heart Failure. The survival of patients with heart failure with preserved or reduced left ventricular ejection fraction: an individual patient data meta-analysis.</a> Eur Heart J. 33 (14), 1750-1757 (2012).</li><li>Soonpaa, M. H., Field, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cardiomyocyte+DNA+synthesis+in+normal+and+injured+adult+mouse+hearts.">Assessment of cardiomyocyte DNA synthesis in normal and injured adult mouse hearts.</a> Am J Physiol. 272, 220-226 (1997).</li><li>D'Uva, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERBB2+triggers+mammalian+heart+regeneration+by+promoting+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">ERBB2 triggers mammalian heart regeneration by promoting cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nat Cell Biol. 17 (5), 627-638 (2015).</li><li>Oberpriller, J. O., Oberpriller, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+adult+newt+ventricle+to+injury.">Response of the adult newt ventricle to injury.</a> J Exp Zool. 187 (2), 249-253 (1974).</li><li>Poss, K. D., Wilson, L. G., Keating, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration+in+zebrafish.">Heart regeneration in zebrafish.</a> Science. 298 (5601), 2188-2190 (2002).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Porrello, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+regenerative+potential+of+the+neonatal+mouse+heart.">Transient regenerative potential of the neonatal mouse heart.</a> Science. 331 (6020), 1078-1080 (2011).</li><li>Haubner, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+cardiac+regeneration+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Complete cardiac regeneration in a mouse model of myocardial infarction.</a> Aging. 4 (12), 966-977 (2012).</li><li>Soonpaa, M. H., Kim, K. K., Pajak, L., Franklin, M., Field, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiomyocyte+DNA+synthesis+and+binucleation+during+murine+development.">Cardiomyocyte DNA synthesis and binucleation during murine development.</a> Am J Physiol. 271, 2183-2189 (1996).</li><li>Li, F., Wang, X., Capasso, J. M., Gerdes, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+transition+of+cardiac+myocytes+from+hyperplasia+to+hypertrophy+during+postnatal+development.">Rapid transition of cardiac myocytes from hyperplasia to hypertrophy during postnatal development.</a> J Mol Cell Cardiol. 28 (8), 1737-1746 (1996).</li><li>Feng, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevation+of+an+endogenous+inhibitor+of+nitric+oxide+synthesis+in+experimental+congestive+heart+failure.">Elevation of an endogenous inhibitor of nitric oxide synthesis in experimental congestive heart failure.</a> Cardiovasc Res. 37 (3), 667-675 (1998).</li><li>Xiang, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiomyocyte-specific+overexpression+of+human+stem+cell+factor+improves+cardiac+function+and+survival+after+myocardial+infarction+in+mice.">Cardiomyocyte-specific overexpression of human stem cell factor improves cardiac function and survival after myocardial infarction in mice.</a> Circulation. 120 (12), 1065-1074 (2009).</li><li>van Kats, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin-converting+enzyme+inhibition+and+angiotensin+II+type+1+receptor+blockade+prevent+cardiac+remodeling+in+pigs+after+myocardial+infarction:+role+of+tissue+angiotensin+II.">Angiotensin-converting enzyme inhibition and angiotensin II type 1 receptor blockade prevent cardiac remodeling in pigs after myocardial infarction: role of tissue angiotensin II.</a> Circulation. 102 (13), 1556-1563 (2000).</li><li>Mahmoud, A. I., Porrello, E. R., Kimura, W., Olson, E. N., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+models+for+cardiac+regeneration+in+neonatal+mice.">Surgical models for cardiac regeneration in neonatal mice.</a> Nat Protoc. 9 (2), 305-311 (2014).</li><li>Ahn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+C57BL/6+mice.">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in C57BL/6 mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 286 (3), 1201-1207 (2004).</li><li>Kao, W. W., Xia, Y., Liu, C. Y., Saika, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+pathways+in+morphogenesis+of+cornea+and+eyelid.">Signaling pathways in morphogenesis of cornea and eyelid.</a> Ocul Surf. 6 (1), 9-23 (2008).</li><li>Redfors, B., Shao, Y. Z., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice.">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Experimental &amp; Clinical Cardiology. 17 (4), 268-272 (2012).</li><li>Phifer, C. B., Terry, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+hypothermia+for+general+anesthesia+in+preweanling+rodents.">Use of hypothermia for general anesthesia in preweanling rodents.</a> Physiol Behav. 38 (6), 887-890 (1986).</li><li>Jesty, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=c-kit++precursors+support+postinfarction+myogenesis+in+the+neonatal,+but+not+adult,+heart.">c-kit+ precursors support postinfarction myogenesis in the neonatal, but not adult, heart.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (33), 13380-13385 (2012).</li><li>Mahmoud, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meis1+regulates+postnatal+cardiomyocyte+cell+cycle+arrest.">Meis1 regulates postnatal cardiomyocyte cell cycle arrest.</a> Nature. 497 (7448), 249-253 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

קשירת LAD כירורגית הפגינו בזאת היא שיטה אמינה לייצר MI בעכברים הילוד. מודל זה מספק חוקרים עם מודל לשחזור שבה ללמוד התחדשות לב יונקת. ויזואליזציה של כלי הדם הכליליים היא מרכיב מרכזי של שיטה זו, הבטחת מיקום תפר נכון ובכך להבטיח שחזור. בעוד עכברים בוגרים אינם בעלי יכולות poik...

אוטם שריר הלב (MI) הוא הגורם המוביל למוות ברחבי העולם, ונשאר אחראי כשליש מהמקרים אי ספיקת לב 1. בעוד כניסתו של התערבות מלעורית ואופטימיזציה מתמדת של שימוש thrombolytics גדלה reperfusion הבא MI, מות cardiomyocyte ואובדן שריר לב התכווצות בכל זאת מתרחשת. יש גם להישאר מספר רב של &quot;אין-אפשרות&quot; לחולים שאינם מועמדים או לא רואים תועלת התערבויות אלה. חולים אלה ממשיכים לחוות איסכמיה השבתת מוביל צלקת היווצרות שיפוץ חדרית מזיק כמנגנון של ריפוי אוטם. תהליך זה בסופו של דבר התוצאות אי ספיקת לב, אשר הפרוגנוזה נשאר עני למרות ניהול תרופתי אופטימלי עם מעכבי אנגיוטנסין-המרת אנזים (ACE) וחוסמי בטא. למרבה הצער, שיעור התמותה לשנה עבור חולים עם תפקוד חדר שמאל נפגע קשה עדיין נשארגבוה ככל 26% 2. השתלת לב היא אופציית הטיפול הסופי עבור חולים עם כשל לבבי. עם זאת, את מאגר התורמים המוגבל השתלת לב לא להפוך את זה אפשרות מעשית עבור רוב החולים. לפיכך, חשיפת סוכנים טיפוליים חדשניים כדי לשחזר את שריר לב הניזוק נשארת עליונה לפתרון הבעיה מהחלות-הלב. במודלים של בעלי חיים אמינים של פגיעה לבבית ולכן נדרשים כמרכיב קריטי של תהליך זה. דוגמא מסורתית כתיב כי cardiomyocytes המבוגר הם-mitotic פוסט, תאים מובחנים סופנים, מסוגל חלוקתם או דה-הבחנה להחליף את שריר הלב הפגוע 3. ככזה, לב יונקי בוגרים לא יכול להחלים לגמרי מפציעה, ו cardiomyocytes אבד יוחלף עם רקמה סיבית. לפיכך, מחקר התמקד בעיקר בתרופות כדי למזער התרחבות אוטמת ולהפחית היווצרות צלקת. לאחרונה עם זאת, שינוי פרדיגמה התרחשבחשיבה סביב ריפוי לב מאמצי מחקר רבים כבר מנותב להתמקד פוטנציאל התחדשות לב 4. עד לאחרונה, in vivo המחקר של התחדשות לב הוגבל דגמים שאינם חוליות, כגון אלה דו חיים urodele ו teleost דגים 5-7. אולם גילוי יכולת התחדשות לב של העכבר בילוד הוביל להתפתחות של שני מודלים כירורגית של התחדשות לב יונקת: כריתה של הספיגה העורק איפקס הכליליים של הלב לגרום לאוטם שריר לב 8,9. בשנת 2011, מודל כריתת איפקס עכבר שמש על מנת להוכיח כי התחדשות לב מלאה אפשרית יום לאחר לידת 1 (P1). אולם, קיבולת זו צונחת בתוך זמן קצר לאחר תקופת בילוד הראשונית. הלב היונק מאבד פוטנציאל ההתחדשות שלה זמן קצר לאחר לידה ב P7 כמו ירידה במספרי תא אב, ואת cardiomyocytes הופך binucleated, לאבדכשירות השגשוג שלהם, ולצמיתות לצאת 10,11 מחזור התא. הבנת ההבדלים הבסיסיים בין בילוד ולב יונק בוגרים עשויה להוביל לתובנה רומן לתוך התחדשות לב. בעוד כריתת איפקס אכן מציעה תובנה מחדש הצמיחה של רקמת התכווצות, המודל אינו לדמות פציעת לב אנושית טיפוסית, ולכן אינו להשאיל עוצמה כמו גם אל בפיתוח התרופה. המודל חסימה של העורקים הכליליים, אולם, באופן ישיר יותר המדמה את ההיבטים pathophysiologic של פתולוגיה MI, ובכך עשויה לספק תובנות מועילות יותר לתוך המנגנונים שעשויים לחול על קידום טיפולי לשימוש בבני אדם. קשירת כלילית כירורגי נעשה שימוש כטכניקה ניסיוני שימושי במודלים של חיות רבות 12-14. בשנת מודל הקשירה כלילית עורק המבוגרים, בעלי חיים מורדמים חובר לצינור לאפשר פתיחת בית החזה תוך שמירת respiratiעַל. הלב ממשיך לפעום באופן סדיר, המתיר ההדמיה של כלי הדם הכליליים ומאפשר עבור מיקום תפר מדויק. יתר על כן, הלב נשאר ורוד כמו זלוף ממשיך, ואחרי קשירת שריר לב איסכמי מופיע חיוור, המציין קשירת עורקים כלילית מוצלחת. הפרוטוקול המתואר לעכברים ילודים, אולם הוא פחות אמין כמו העורקים כליליים לא דמיינו והמנתח חייב להעריך היכן למקם את התפר 15. למרות האנטומיה כללית של כלי הדם הכליליים זהה, השתנות חיה הפרט בכיוון הסתעפות של LAD קיים 16. לפיכך, כאשר &quot;הולך עיוור,&quot; העורק יכול בקלות לפספס. טכניקות אחרות כגון אקו הם מכן נדרשו לאשר אינדוקציה מוצלחת של MI, ועל מנת להבטיח את כל הניתוחים לגרום גודל אוטם דומה. המתואר כאן הוא שיפור על שיטה שפורסמו לאחרונה 15, שם עמדת LAD ניתן established ובכך LAD ניתן ligated לגרום MI reproducibly. טכניקה זו אינה דורשת אינטובציה endotracheal או אוורור מכני, כמו פתיחת בית החזה במצב היפותרמיה בתוך העכבר הילוד לא לגרום לקריסת הריאות. עם זאת, בשיטה שתוארה לעיל, היפותרמיה חמורה חייבת להיגרם עד לנקודה של שני להשלים דום נשימה והפסקה של קצב לב 15. המגבלה העיקרית של גישה זו היא כי העורק הכלילי הוא perfused כבר לא והלב מופיע חיוור עוד לפני קשירת LAD. לפי הגישה המתוארת כאן, ויזואליזציה עורק כלילי אפשרי בנקודה של קהות חושים לפני היפותרמיה עמוק והפסקת קצב לב, עם החלמה מלאה של העכבר בילוד לאחר הניתוח. שיטה זו מציעה יתרון גדול של שחזור 100%.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="790">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">8-0 Nylon Suture</td>
			<td style="width:244px;">Microsurgery Instruments</td>
			<td style="width:119px;">8-0 Nylon</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="37">
			<td height="37" style="height:38px;width:261px;">11-0 Nylon Suture</td>
			<td style="width:244px;">Shanghai Pudong Medical Products Co Ltd</td>
			<td style="width:119px;">H1101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Fine Scissors</td>
			<td style="width:244px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Small forceps</td>
			<td style="width:244px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11063-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Micro Needle Holder</td>
			<td style="width:244px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">12060-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Zeiss Opmi 6s/S3 Microscope</td>
			<td style="width:244px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;">300002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:244px;">Baxter</td>
			<td style="width:119px;">CA2L9100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Isoflurane Chamber</td>
			<td style="width:244px;">Made in Feng laboratory</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:244px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">2,3,5-Triphenyltetraolium chloride (TTC)</td>
			<td style="width:244px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:261px;">Stereomicroscope SteREO Discovery. V8</td>
			<td style="width:244px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;">435400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">AxioVision 8.0</td>
			<td style="width:244px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Axiocam Icc5</td>
			<td style="width:244px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;">426554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Heat pad</td>
			<td style="width:244px;">Sunbeam&#160;</td>
			<td style="width:119px;">731A0-CN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Sterile Gloves</td>
			<td style="width:244px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">414004-430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Gauze Sponges</td>
			<td style="width:244px;">Ducare</td>
			<td style="width:119px;">90212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Ice</td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

myocardial infarction in neonatal mice, a model of cardiac regeneration

אוטם שריר לב הנגרמת על ידי קשירת עורקים כלילית נעשה שימוש במודלים של בעלי חיים רבים ככלי ללמוד את המכניזם של תיקון לב והתחדשות, ולהגדיר מטרות חדשות עבור רפוי. במשך עשרות שנים, מודלים של התחדשות לב מלאה קיימים דו-חיים ודגים, אבל עמיתו יונק לא היה זמין. התגלית האחרונה של חלון לאחר לידה שבמהלכה עכברים בעלי יכולות משובים הובילה להקמת מודל יונק של התחדשות לב. מודל כירורגית של התחדשות לב יונקת העכבר בילוד מוצג במסמך זה. בקצרה, היום לאחר לידה 1 (P1) בעכברים מורדמים על ידי isoflurane והניחו על כרית קרח כדי לגרום היפותרמיה. לאחר החזה נפתח, ואת השמאלי הקדמי היורד לב כלילי (LAD) הוא מדמיין, תפר ממוקם סביב LAD לגרום איסכמיה לבבית בחדר השמאלי. ההליך הכירורגי לוקח 10-15 דקות. לדמיין את העורקים הכליליים הואחיוני עבור מיקום ואת שחזור תפר מדויק. אוטם שריר הלב וחוסר תפקוד הלב יאושרו על ידי כלוריד triphenyl-tetrazolium (TTC) מכתים אקוקרדיוגרפיה, בהתאמה. התחדשות מלאה 21 ימים לאחר אוטם שריר לב מאומת על ידי היסטולוגיה. פרוטוקול זה יכול לשמש כדי ככלי להבהיר מנגנונים של התחדשות לב יונקת לאחר אוטם שריר לב.

ההליך אוטם שריר הלב בבית P1 יכול להסתיים בתוך כ -10 - 15 דקות ויש לו שיעור תמותה של 7.8% (5 מתוך 64 גורים). לאחר ניתוח, עכברים להתאושש מן ההרדמה היפותרמיה בתוך 5 הבאות - 20 הדקות (זמן החלמה תלוי טמפרטורת גוף הגיע במהלך הרדמה ומהירות המנתח). בעת שימוש גורי P7 (להשווא...

Watch this Scientific Journal Video about Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration at JoVE.com

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

אוטם שריר לב עכברים ילודים, מודל התחדשות לב

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

myocardial-infarction-in-neonatal-mice-a-model-of-cardiac-regeneration

Research

JoVE Journal

Medicine

18.3K Views.  Western University. This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Video: Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

באוטם שריר הלב אצל חולדות

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

אוטם שריר לב והערכת תוצאה תפקודית בחזירים

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

נוהל כירורגי זעיר פולשנית של גרימת אוטם שריר הלב בעכברים

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It is characterized by fluid retention, shortness of breath, and fatigue, in particular on exertion. Heart failure is a growing public health problem, the leading cause of hospitalization, and a major cause of mortality. Ischemic heart disease is the main cause of heart failure.
Ventricular remodelling refers to changes in structure, size, and shape of the left ventricle. This architectural remodelling of the left ventricle is induced by injury (e.g., myocardial infarction), by pressure overload (e.g., systemic arterial hypertension or aortic stenosis), or by volume overload. Since ventricular remodelling affects wall stress, it has a profound impact on cardiac function and on the development of heart failure. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is used to investigate ventricular remodelling and cardiac function post-myocardial infarction. This model is fundamentally different in terms of objectives and pathophysiological relevance compared to the model of transient ligation of the left anterior descending coronary artery. In this latter model of ischemia/reperfusion injury, the initial extent of the infarct may be modulated by factors that affect myocardial salvage following reperfusion. In contrast, the infarct area at 24 hr after permanent ligation of the left anterior descending coronary artery is fixed. Cardiac function in this model will be affected by 1) the process of infarct expansion, infarct healing, and scar formation; and 2) the concomitant development of left ventricular dilatation, cardiac hypertrophy, and ventricular remodelling.
Besides the model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery, the technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented in detail.

Heart failure is the leading cause of hospitalization and a major cause of mortality. A model of permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice is applied to investigate ventricular remodelling and cardiac dysfunction post-myocardial infarction. The technique of invasive hemodynamic measurements in mice is presented.

קשירת קבע של העורק השמאלי קדמי יורד כלילית בעכברים: דגם של Remodelling אוטם שריר לב ופוסט-אי ספיקת לב

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

הערכת התוצאה העיקרית במודל חזיר של באוטם שריר הלב

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח של אוטם אקוטי בעכברים

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

מודל לפציעה בהקפאה לחקור אוטם שריר הלב בעכבר

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major causes of mortality and morbidity around the world. Cell-based therapies for cardiac repair and improvement of left ventricular function after MI have attracted considerable attention. Accordingly, the safety and efficacy of these cell transplantations should be tested in a preclinical large animal model of HF prior to clinical use. Pigs are widely used for cardiovascular disease research due to their similarity to humans in terms of heart size and coronary anatomy. Therefore, we sought to present an effective protocol for the establishment of a porcine chronic HF model using closed-chest coronary balloon occlusion of the left circumflex artery (LCX), followed by rapid ventricular pacing induced with pacemaker implantation. Eight weeks later, the stem cells were administered by intramyocardial injection in the peri-infarct area. Then the infarct size, cell survival, and left ventricular function (including echocardiography, hemodynamic parameters, and electrophysiology) were evaluated. This study helps establish a stable preclinical large animal HF model for stem cell treatment.

We sought to establish a swine model of heart failure induced by left circumflex artery blockage and rapid pacing to test the effect and safety of intramyocardial administration of stem cells for cell-based therapies.

הקמת מודל חזירים של אי ספיקת לב לאחר שריר הלב לטיפול בתאי גזע

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of transplanted cells within the injured myocardium, limiting their therapeutic efficacy. Recently, the use of scaffolding biomaterials has gained attention for improving and maximizing stem cell therapy. The objective of this protocol is to introduce a simple and straightforward technique to transplant bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) using injectable hydroxyphenyl propionic acid (GH) hydrogels; the hydrogels are favorable as a cell delivery platform for cardiac tissue engineering applications due to their ability to be cross-linked in situ and high biocompatibility. We present a simple method to fabricate MSC-loading GH hydrogels (MSC/hydrogels) and evaluate their survival and proliferation in three-dimensional (3D) in vitro culture. In addition, we demonstrate a technique for intramyocardial transplantation of MSC/hydrogels in mice, describing a surgical procedure to induce myocardial infarction (MI) via left anterior descending (LAD) coronary artery ligation and subsequent MSC/hydrogels transplantation.

Stem cell-based therapy has emerged as an efficient strategy to repair injured cardiac tissues after myocardial infarction. We provide an optimal in vivo application for stem cell transplantation using gelatin hydrogels that are able to be enzymatically cross-linked.

השתלה תוך-שרירית של הידרוג'ל להזרקה בטעינת MSC לאחר אוטם שריר הלב במודל מורין

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...