המחברים מודים אנשי המשרד לאיכות הסביבה רבים שתרומות שנעשו הניטור שנערך בICR וUCMR3 האפשרי, החוקרים הבאים הראשיים של מחקרים אחרים דיווחו EPA: דניאל &quot;יהקירת&#39;, אלפרד דופור, אנדריי Egorov, סוזן Glassmeyer, Asja Korajkic, ריצ&#39;רד ליברמן, רוברט Safferman, וטים ווייד; ושאנון גריפין ומייקל וייר ללאור כתב היד הזה. המחברים מודים עבודות המים ההודים היל לשימוש באחד מבתי משאבתם להפגין איסוף דגימה. למרות שעבודה זו נסקרה על ידי USEPA ואושרה לפרסום, זה לא בהכרח משקף את מדיניות הסוכנות רשמית. אזכור של שמות מסחריים או מוצרים מסחריים אינו מהווה אישור או המלצה לשימוש.

1. נהלים ראשוניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרכיב מכשירי סינון סטנדרטיים כפי שמוצג באיור 1 בהיקף של מודול הצריכה, מודול דיור מחסנית, ומודול שחרור כפי שתוארו בחומרים נוספים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכייל את המד / totalizer הזרימה בספיקות המשמשות לדגימה לפני השימוש הראשון. בדוק את הכיול לאחר השימוש הראשון ולאחר מכן לאחר חודש של שימוש. אם כיול קצב הזרימה השתנה לאחר או השימוש הראשון או לאחר החודש הראשון של שימוש, לקבוע את התדירות לבדיקות כיול כמתואר בחומרים נוספים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר מודול פריקה למודול הצריכה ולאחר מכן חבר את מודול הצריכה לברז. הגדר את המטר / totalizer הזרימה לקרוא את קצב הזרימה. הפעל את ברז לחלוטין ולאחר מכן להתאים את קצב הזרימה עד 10 L / min באמצעות שסתום גלובוס ברונזה. ברגע שקצב הזרימה יציב של 10 L / min, לאפס את המד / totalizer הזרימה לקרוא נפח כולל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החוצהבואו של מודול הזרמה לL 4 או יותר סיימתי גליל ובו-זמנית לאפס totalizer לאפס. מדוד את קריאת totalizer בסימן 4 L-ואת הזמן הנדרש כדי להגיע לסימן 4 L על הגליל. לשנות את המטר / totalizer זרימת הגדרה חזרה לקצב זרימה. הערה: אם קצב זרימת ירד אל מתחת ל 9.95 L או עלה ליותר מ 10.05 L לאחר שסיים את שלב 1.2.2, לחכות עד שקצב הזרימה הוא שלב יציב וחזור על 1.2.2. מטר מכויל כראוי יגיע סימן 4 L בגליל סיים ב 24 ± 1 שניות עם קריאת totalizer של 4.0 ± 0.04 ל &#39; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם קריאת totalizer היא פחות מ 3.96 או יותר מ 4.04 L, לחשב גורם תיקון הדרוש כדי להתאים את ההבדל שנצפה. לדוגמא, אם המטר / totalizer הזרימה קוראת 3.9 L בסימן 4 L בגליל סיים, גורם התיקון יהיה 1.026 (4 ÷ 3.9). לכן, אם הנפח הרצוי של מדגם שדה היה 300 L, אסף את הנפח פי reading על המטר / totalizer הזרימה צריכה להיות 300 מעלות 1.026 = 292.4 L. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את מנגנון הסינון הסטנדרטי ולהכין אותו לאיסוף דגימה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את המודולים דיור הצריכה ומחסנית עם .525% היפוכלוריט נתרן לפחות 30 דקות לפני כל שימוש על ידי הטבילה באופן מלא את המודולים בפתרונות או על ידי במחזור hypochlorite נתרן אם כי מודולים באמצעות משאבה. יש לשטוף את המודולים עם סטרילי DH 2 O ולאחר מכן dechlorinate בתמיסה המכילה 50 מיליליטר של 1 thiosulfate M נתרן לליטר המים כיתה מגיב סטרילי במשך 5 דקות. מכסה את מודול מנגנון דגימת המסנן מסתיים ברדיד אלומיניום סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוספת מסנן מחסנית electropositive לסביבה נקיה מחיידקי מודול דיור המחסנית. הערה: תשמור על מנת להבטיח שמסנן המחסנית יושב כראוי את מעטה. כראוי מסננים יושבים לא ידלפו והמסנן לא יעבור בתוך הדיור כאשר מזועזע. האטמים על aproperly מסנן יושב יהיה חריצים גלויים מראים אם במגעים מסננם. האטמים תמיד צריכים להיבדק לחריצים מייד לאחר הסינון הוא להסיר את הדיור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקליט מספר מדגם ייחודי בגיליון נתוני מדגם (ראה נוספים חומרים לדוגמא) ולאחר מכן לקחת או לשלוח את מכשיר דגימת מסנן וגיליון נתונים לדוגמא לאדם שיהיה איסוף דגימת השדה, יחד עם כל הוראות הדרושות בנוגע למדגם אוסף (לדוגמא, נפח דגימה, מיקום דגימה, וכו &#39;). </li></ol></li></ol> 2. הכנה לאוסף דוגמאות באתר הדגימה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את הידיים בעת הגעה לאתר האיסוף ודון כפפות מנתחים כדי למזער את האפשרות של זיהום מדגם. אל תאספו דגימות אם חווים תסמיני מעי או בדרכי הנשימה. שנת כפפות בתדירות גבוהה, ובמיוחד לאחר שנגע ברזי מים ופריטים אחרים שעשויות להיות המשךaminated. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדגם רלוונטי שיא מעקב אחר מידע על גיליון נתונים לדוגמה. מידע רלוונטי כולל אתר וזיהוי מדגם, שמו של דגם, ודגמי ציוד ומספרים סידוריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את ברז המים במשך 2-3 דקות כדי לנקות את כל פסולת שהתיישבה בשורה. במידת צורך, להשתמש בצינור גינה או צינורות כדי להגיע לטמיון במהלך שלב זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם מודולים מנגנון הדגימה מחוברים, נתק אותם ולהגן על הקצוות הפתוחים של מודול דיור המחסנית בנייר סטרילי. חבר את מודול ההזרמה למודול הצריכה ולאחר מכן לחבר את שני לברז המים. חבר צינור גינה בסופו של מודול הפריקה ולמקם את הקצה החופשי במכל פוליפרופילן 1 ליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את הברז ולהעביר לפחות 75 ליטר של המים שנדגמו באמצעות המנגנון. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד ורשום את הפרמטרים של איכות מים בתקופת הסומק במים זורמות לתוך מיכל resid כלור פוליפרופילןרע&quot;מ, pH, טמפרטורה, ועכירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כיבוי במים בברז, נתק את מודול השחרור ממודול הצריכה, ולאחר מכן חבר את מודול דיור מחסנית ליציאה של מודול הצריכה ואת מודול ההזרמה ליציאה של מודול דיור מחסנית. איפוס totalizer קריאה לאפס. </li></ol></li></ol> אוסף דוגמאות 3. שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את קריאת totalizer הראשונית יחד עם התאריך והשעה ולאחר מכן פתח את ברז המים באיטיות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שמחסנית הדיור הוא בתנוחה זקופה ושימלא לחלוטין במים. יש לי מעטה חלקן פורקן אשר יכול להיות לחוץ למוציא אוויר מהדיור במהלך תהליך המילוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את הברז לחלוטין. התאם את קצב הזרימה עד 10 L / min באמצעות שסתום גלובוס ברונזה ואז להקליט את קצב הזרימה הראשוני. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור 300 ליטר של מים עיליים או 1,500 ל -1,800 ליטר של מי תהום באמצעות המנגנון באמצעותקריאות totalizer (כפי שהותאם, במידת צורך). אם קבקבי המסנן לפני הנפח הנדרש הוא הגיע ויותר ממחצית הנפח נאסף, להשתמש במודול בית מסנן שני כדי לאסוף את המדגם שנותר, אם זמין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב לקצב הזרימה כנפח הדגימה מתקרב לסוף תקופת הדגימה ולאחר מכן לכבות את זרימת מים בברז המדגם. רשום את קצב הזרימה הסופי, תאריך, השעה ביום, קריאת totalizer הסופית, ונפח הדגימה הכולל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתק את מכשיר דגימת מסנן מהברז. נתק את מודול דיור מחסנית ממודולים האחרים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל בית המסנן (ים) במהופך ולאפשר למים לזרום החוצה עודפים עד לא יותר מים יהיה לנקז משתי יציאות הכניסה ויציאה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל הדיור זקוף ולכסות את החיבור מהיר בכל קצה ברדיד אלומיניום סטרילי. הנח את הדיור לשקיות פלסטיק סגר אחד או יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מסננים את המים מהצריכה ודמודולים ischarge. הנח את המודולים לשקיות פלסטיק סגר אחד או יותר. </li></ol></li></ol> 4. משלוח של דוגמאות שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את המודולים מנגנון דגימת מסנן למקרר אחסון והובלה מבודד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף שקיות קרח קפוא או קוביות קרח כפולות שטיח עטוף לאחסון והובלה קריר כדי להבטיח כי המדגם נותר בין 1-10 מעלות צלזיוס במהלך משלוח. שתי גדולים או 6-8 שקיות קרח קטנות צריכה להיות מספיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את מכשיר הקלטה בטמפרטורה באחסון המבודד וחזה תחבורה במיקום ללא קשר לשקיות קרח או שקיות קרח. הערה: מכשיר טמפרטורת ההקלטה הוא אופציונאלי אם המעבדה האנליטית תהיה באמצעות מדחום אינפרא אדום חזותי כדי למדוד את הטמפרטורה של דיור המחסנית מייד עם הגעה והפתיחה של המכל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למלא את כל חלל הריק עם חומרי אריזה ולאחר מכן למקם את גיליון נתוני מדגם, מוגן בשקית ניילון סגר, על top. סגור את האחסון מבודד וחזה תחבורה וקלטתו כדי למנוע כל דליפה של מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחבורה או לשלוח את הדגימה למעבדה האנליטית. ודא כי המדגם מגיע למעבדה האנליטית לא יאוחר מ -24 שעות לאחר תחילת איסוף דגימת שדה (כלומר, הזמן שנרשם בשלב 3.1). </li></ol>

<ol>
	<li>Katayama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-year+monthly+quantitative+survey+of+noroviruses,+enteroviruses,+and+adenoviruses+in+wastewater+collected+from+six+plants+in+Japan.">One-year monthly quantitative survey of noroviruses, enteroviruses, and adenoviruses in wastewater collected from six plants in Japan.</a> Water Res. 42 (6-7), 1441-1448 (2008).</li><li>La Rosa, G., Pourshaban, M., Iaconelli, M., Muscillo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+real-time+PCR+of+enteric+viruses+in+influent+and+effluent+samples+from+wastewater+treatment+plants+in+Italy.">Quantitative real-time PCR of enteric viruses in influent and effluent samples from wastewater treatment plants in Italy.</a> Annali Dell Istituto Superiore Di Sanita. 46 (3), 266-273 (2010).</li><li>Sedmak, G., Bina, D., MacDonald, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+an+enterovirus+sewage+surveillance+system+by+comparison+of+clinical+isolates+with+sewage+isolates+from+milwaukee,+wisconsin,+collected+august+1994+to+december+2002.">Assessment of an enterovirus sewage surveillance system by comparison of clinical isolates with sewage isolates from milwaukee, wisconsin, collected august 1994 to december 2002.</a> Appl. Environ. Microbiol. 69 (12), 7181-7187 (1994).</li><li>Berg, H., Lodder, W., van der Poel, W., Vennema, H., de Roda Husman, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+diversity+of+noroviruses+in+raw+and+treated+sewage+water.">Genetic diversity of noroviruses in raw and treated sewage water.</a> Res Microbiol. 156 (4), 532-540 (2005).</li><li>Haramoto, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+profiles+of+human+noroviruses+and+indicator+bacteria+in+a+wastewater+treatment+plant+in+Tokyo,+Japan.">Seasonal profiles of human noroviruses and indicator bacteria in a wastewater treatment plant in Tokyo, Japan.</a> Water Sci Technol. 54 (11-12), 301-308 (2006).</li><li>Denis-Mize, K., Fout, G. S., Dahling, D. R., Francy, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+human+enteric+viruses+in+stream+water+with+RT-PCR+and+cell+culture.">Detection of human enteric viruses in stream water with RT-PCR and cell culture.</a> J Water Health. 2 (1), 37-47 (2004).</li><li>Hamza, I. A., Jurzik, L., Stang, A., Sure, K., Uberla, K., Wilhelm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+human+viruses+in+rivers+of+a+densly-populated+area+in+Germany+using+a+virus+adsorption+elution+method+optimized+for+PCR+analyses.">Detection of human viruses in rivers of a densly-populated area in Germany using a virus adsorption elution method optimized for PCR analyses.</a> Water Res. 43 (10), 2657-2668 (2009).</li><li>Lieberman, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Microbial monitoring of vulnerable public groundwater supplies. , (2002).</li><li>Parshionikar, S. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Waterborne+outbreak+of+gastroenteritis+associated+with+a+norovirus.">Waterborne outbreak of gastroenteritis associated with a norovirus.</a> Appl. Environ. Microbiol. 69 (9), 5263-5268 (2003).</li><li>Hewitt, J., Bell, D., Simmons, G. C., Rivera-Aban, M., Wolf, S., Greening, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gastroenteritis+outbreak+caused+by+waterborne+norovirus+at+a+New+Zealand+ski+resort.">Gastroenteritis outbreak caused by waterborne norovirus at a New Zealand ski resort.</a> Appl. Environ. Microbiol. 73 (24), 7853-7857 (2007).</li><li>Shaw, S., Regli, S., Chen, J., Maguire, M. J., McLain, J. L., Odolensky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virus+occurrence+and+health+risks+in+drinking+water.">Virus occurrence and health risks in drinking water.</a> Information Collection Rule Data Analysis. , 437-462 (2002).</li><li>Sobsey, M. D., Wallis, C., Henderson, M., Melnick, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+of+Enteroviruses+from+Large+Volumes+of+Water.">Concentration of Enteroviruses from Large Volumes of Water.</a> Appl Microbiol. 26 (4), 529-534 (1973).</li><li>Hill, W. F., Akin, E. W., Benton, W. H., Metcalf, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virus+in+water.+II.+Evaluation+of+membrane+cartridge+filters+for+recovering+low+multiplicities+of+poliovirus+from+water.">Virus in water. II. Evaluation of membrane cartridge filters for recovering low multiplicities of poliovirus from water.</a> Appl Microbiol. 23 (5), 880-888 (1972).</li><li>USEPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=40+CFR+Part+141+National+Primary+Drinking+Water+Regulations:+Monitoring+Requirements+for+Public+Drinking+Water+Supplies;+Final+Rule.">40 CFR Part 141 National Primary Drinking Water Regulations: Monitoring Requirements for Public Drinking Water Supplies; Final Rule.</a> Federal Register. 61 (94), 141 (1996).</li><li>Pang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+removal+rates+in+subsurface+media+estimated+from+published+studies+of+field+experiments+and+large+intact+soil+cores.">Microbial removal rates in subsurface media estimated from published studies of field experiments and large intact soil cores.</a> J Environ Qual. 38 (4), 1531-1559 (2009).</li><li>Johnson, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viruses+and+Bacteria+in+Karst+and+Fractured+Rock+Aquifers+in+East.">Viruses and Bacteria in Karst and Fractured Rock Aquifers in East.</a> Ground Water. 49 (1), 98-110 (2011).</li><li>Fout, G. S., Schaefer, F. W., Messer, J. W., Dahling, D. R., Stetler, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ICR Microbial Laboratory Manual. , (1996).</li><li>Fout, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Method 1615: Measurement of enterovirus and norovirus occurrence in water by culture and RT-qPCR. , 1-91 (2012).</li><li>Borchardt, M. A., Spencer, S. K., Kieke, B. A., Lambertini, E., Loge, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viruses+in+nondisinfected+drinking+water+from+municipal+wells+and+community+incidence+of+acute+gastrointestinal+illness.">Viruses in nondisinfected drinking water from municipal wells and community incidence of acute gastrointestinal illness.</a> Environ Health Perspect. 120 (9), 1272-1279 (2012).</li><li>Francy, D. S., Bushon, R. N., Stopar, J., Luzano, E. J., Fout, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scientific+Investigations+Report+2004-5219,+U.S.+Geological+Survey.">Scientific Investigations Report 2004-5219, U.S. Geological Survey.</a> Environmental factors and chemical and microbiological water-quality constituents related to the presence of enteric viruses in ground water from small public water supplies in southeastern Michigan. , 1-54 (2004).</li><li>Regli, S., Rose, J. B., Haas, C. N., Gerba, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+the+Risk+from+Giardia+and+Viruses+in+Drinking-Water.">Modeling the Risk from Giardia and Viruses in Drinking-Water.</a> Journal American Water Works Association. 83 (11), 76-84 (1991).</li><li>USEPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parts+141+and+142+Revisions+to+the+Unregulated+Contaminant+Monitoring+Regulation+(UCMR3)+for+Public+Water+Systems;+Final+Rule.">Parts 141 and 142 Revisions to the Unregulated Contaminant Monitoring Regulation (UCMR3) for Public Water Systems; Final Rule.</a> Federal Register. 77 (85), 26072-26101 (2012).</li><li>Lambertini, E., Spencer, S. K., Bertz, P. D., Loge, F. J., Kieke, B. A., Borchardt, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+of+enteroviruses,+adenoviruses,+and+noroviruses+from+drinking+water+by+use+of+glass+wool+filters.">Concentration of enteroviruses, adenoviruses, and noroviruses from drinking water by use of glass wool filters.</a> Appl. Environ. Microbiol. 74 (10), 2990-2996 (2008).</li><li>Butot, S., Le Guyader, F. S., Krol, J., Putallaz, T., Amoroso, R., Sanchez, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+various+real-time+RT-PCR+assays+for+the+detection+and+quantitation+of+human+norovirus.">Evaluation of various real-time RT-PCR assays for the detection and quantitation of human norovirus.</a> J Virol Methods. 167 (1), 90-94 (2010).</li><li>Cashdollar, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+Evaluation+of+EPA+Method+1615+for+Detection+of+Enterovirus+and+Norovirus+in+Water.">Development and Evaluation of EPA Method 1615 for Detection of Enterovirus and Norovirus in Water.</a> Appl. Environ. Microbiol. 79 (1), 215-223 (2013).</li><li>Cashdollar, J. L., Wymer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+primary+concentration+of+viruses+from+water+samples:+a+review+and+meta-analysis+of+recent+studies.">Methods for primary concentration of viruses from water samples: a review and meta-analysis of recent studies.</a> J Appl Microbiol. 115 (1), 1-11 (2013).</li><li>Rhodes, E. R., Hamilton, D. W., See, M. J., Wymer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+hollow-fiber+ultrafiltration+primary+concentration+of+pathogens+and+secondary+concentration+of+viruses+from+water.">Evaluation of hollow-fiber ultrafiltration primary concentration of pathogens and secondary concentration of viruses from water.</a> J Virol Methods. 176 (1-2), 38-45 (2011).</li><li>Katayama, H., Shimasaki, A., Ohgaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+virus+concentration+method+and+its+application+to+detection+of+enterovirus+and+norwalk+virus+from+coastal+seawater.">Development of a virus concentration method and its application to detection of enterovirus and norwalk virus from coastal seawater.</a> Appl. Environ. Microbiol. 68 (3), 1033-1039 (2002).</li><li>Haramoto, E., Katayama, H., Utagawa, E., Ohgaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+human+norovirus+from+water+by+virus+concentration+methods.">Recovery of human norovirus from water by virus concentration methods.</a> J Virol Methods. 160 (1-2), 206-209 (2009).</li><li>Sobsey, M. D., Jones, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+of+poliovirus+from+tap+water+using+positively+charged+microporous+filters.">Concentration of poliovirus from tap water using positively charged microporous filters.</a> Appl. Environ. Microbiol. 37 (3), 588-595 (1979).</li><li>Karim, M. R., Rhodes, E. R., Brinkman, N., Wymer, L., Fout, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+electropositive+filter+for+concentrating+enteroviruses+and+noroviruses+from+large+volumes+of+water.">New electropositive filter for concentrating enteroviruses and noroviruses from large volumes of water.</a> Appl. Environ. Microbiol. 75 (8), 2393-2399 (2009).</li><li>Ko, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+electropositive+filtration+for+recovering+norovirus+in+water.">Evaluation of electropositive filtration for recovering norovirus in water.</a> J Water Health. 9 (1), 27-36 (2011).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+Evidence+of+Norwalk+Virus+Contamination+Levels+on+the+Hands+of+Infected+Individuals.">Laboratory Evidence of Norwalk Virus Contamination Levels on the Hands of Infected Individuals.</a> Appl. Environ. Microbiol. 79 (24), 7875-7881 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

סוגי מסנן שונים לריכוז וירוסים ממים הסביבתיים כבר בשימוש במשך השנים 26. שיטות קיימים כיום מעסיקות 27 ultrafilters, מסנני אלקטרו 13,28,29, מסנני צמר זכוכית 23, ומסנני electropositive 30. מסנני אלקטרו היו בשימוש נרחב במשך שנים רבות, אך דרישה לתוספת של מלח והתאמת pH המים בתחום לפני או במהלך הדגימה מגבילה את השימושיות שלהם 13. בחירת המסנן המעשית ביותר לדגימת שדה היא מסנני electropositive. מסננים אלה מאפשרים הדגימה של כמויות גדולות של מים בספיקה גבוהה וללא כל תניה של המים. מסנני צמר זכוכית הם האופציה הפחות יקרה, אבל יש לי ספיקות איטיות יותר ממסנני electropositive ואינם זמינים באופן מסחרי. Ultrafilters לספק ההחלמה הווירוס הגבוהה ביותר על פני טווח גדול של איכות מים, אך הציוד דרוש לשם sampling לא מתקיים שדה נייד ואת הזמן הנדרש כדי לאסוף דגימות הוא הרבה יותר 27. שיטות לאחרונה פותחו כי שימוש preconditioned מסנני אלקטרו, כדי למנוע את הצורך בהתאמה בתחום, אבל אלה לא יכולים להיות ישימים לאיסוף כרכי מדגם גדול 28,29. EPA שיטה 1,615 משתמשת במסנני מחסנית electropositive אשר להשיג מטען החיובי שלהם משני nanofibers תחמוצת אלומיניום או אמינים רבעונים. היתרונות של הראשונה על פני האחרונה הוא שזה פחות יקר ויעילות אוסף וירוס ממים על פני טווח רחב יותר של pH הטבעי ערכי 30,31; עם זאת, כל מחסנית, כמו גם את מסנני צמר זכוכית בשימוש על ידי Borchardt ועמיתים לתת החלמה דומה של enterovirus וnorovirus מ23,31,32 מים (Cashdollar, נתונים שלא פורסמו). מסנני מחסנית ממוקמים לתוך מנגנון דגימה פשוט שנועד לפשט את איסוף דגימותולהפחית את הזיהום במהלך דגימה. שיטות סטנדרטיים הן לא יסולא בפז, כאשר מחקרים גדולים שנערכו באמצעות מעבדות אנליטיות מרובות. EPA שיטת 1,615 קובעת נהלים והדרכה כדי למזער את שתי סוגיות אוסף מדגם גדולות שיכול להשפיע על נתונים שנאספו במהלך אלה סטנדרטיים לימודים-שווא תוצאות חיוביות הנובעות מזיהום במהלך איסוף דגימה או מרכיבים כראוי חיטוי מכשיר, והסתימה נקבוביות סינון לפי רכיבים ב שנדגמו המים. בדיוק כפי שניתן להפיץ וירוסי enteric אדם לאדם בשל היגיינה לקויה, יכולים להיות הציגו וירוסים לתוך דגימות מהידיים או כפות הידיים שטפו היטב עם כפפות מזוהמות 33. זה חיוני כי דוגמים להבין את המסלולים האפשריים של זיהום ולהשתמש בטכניקת ספטית בדגימה. דוגמים צריכים להבין כי כפפות משמשות בעיקר כדי להגן על סמפלר מחשיפה ולא protect המנגנון מזיהום. יש לשטוף ידיים לפני תחילת הדגימה ויש להקפיד במהלך עוטת כפפות כדי למנוע יד לכפפת זיהום. דוגמים עם סימפטומים במערכת עיכול או בדרכי הנשימה אסור לאסוף דגימות, כפי שהם יכולים להיות שפיכת enteroviruses או noroviruses ברמות גבוהות. שנית, יש להקפיד כדי למנוע שריד של וירוס מאירועי דגימה קודמים. כדי למזער את המקור פוטנציאלי של זיהום, מנגנון הדגימה בשיטה 1,615 שונה מזה של ICR על ידי לא כולל ווסת לחץ ומד לחץ בין הכניסה ומודול דיור מחסנית. רכיבים אלו הוסרו בגלל הלחצים שנצפו במהלך אירועי דגימה תמיד היו מתחת לדירוג המרבי הדיור (למשל, 125 psi למבני מחסנית 5 אינץ &#39;) ובגלל שהם היו קשים לחיטוי. הבעיה האחרונה הודגמה באמצעות פקדים ריקים ציוד בstudies לאחר ICR 6,20. המידה שבה זה השפיע על נתוני ICR אינם ידוע, אך עשוי קטן; היו רק שתי דוגמאות שליליות חיוביות כוזבות הערכת ביצועים במהלך המחקר (מידע לא מוצג). כדי לצמצם את האפשרות של זיהום שריד נוסף, מומלץ גם שצינורות מודול הכניסה יוחלפו לאחר כל אירוע דגימה. זה חשוב במיוחד על מנת להבטיח חיטוי נאות אם המנגנון שימש לבקרת איכות או ביצועים שנזרעה עם וירוס. קודם לביצוע חיטוי, הריכוז של כלור חופשי יש למדוד לכל אובדן במהלך האחסון. בנוסף לשינויים בתצורה של המנגנון שתואר לעיל, הוא חיוני, כי חסר ציוד רגיל לרוץ להפגין החיטוי כי הוא יעיל. שיטת 1,615 מנדטים שחסרי ציוד להתבצע באמצעות מנגנונים שכבר לחטא לאחר שמשמש לבקרת וירוס-זרע, ובכך לפשטההליך על ידי ביטול הצורך לעבור פתרון וירוס זרע באמצעות המנגנון לפני החיטוי. הריכוז של חומר חיטוי הוגדל ל .525 היפוכלוריט% לשיטה 1615, כפי שנדרש ריכוז זה הן כדי להשבית כל וירוסי קיימא על הציוד ולהשפיל חומצות גרעין. לכן, חסר ציוד חייב להיות מנותח בשתי תרבית תאים ומבחני qPCR. שני הסוגים של מסנני electropositive היו כפופים לסתימה במחקרים שדווחו בטבלה 1. מספר לא ידועים של דגימות עם כרכים מופחתים אולי בשל טעויות דגימה, כגון הבנה מוטעית של totalizer או עצירה מוקדמת מכוונת של דגימה לפגוש עוד מועד אחרון, במיוחד למים עם קריאות עכירות פחות מ -20 NTU. התואר של סתימה תלוי הן בפרמטרי סוג המסנן ואיכות מים. Prefilters לספק מידה מסוימת של שיפור, אבל אם משתמש בו, צריך להיות מעובד ומנותחבנפרד ממסנן electropositive. ההמלצה הנוכחית לUCMR3 היא שהמדגם ייאסף ללא prefilters באמצעות מסננים מבוססי nanofiber תחמוצת אלומיניום שני אם לפחות מחצית מהנפח יכול להיות שנאסף באמצעות המסנן הראשון.

וירוסי enteric אדם לשכפל בתוך מערכת העיכול ומתפשטים באמצעות מחזור הצואה-פה. וירוסים אלה נמצאים לעתים קרובות בשפכים בריכוזים גבוהים 1-3. הם יכולים להתמיד בשפכי ביוב 4,5, ובמשטח 6,7, קרקע 8-10, והתייחסו שתיית מים 11. כאשר קיימים, הריכוז של וירוס במים הסביבתיים בארה&quot;ב בדרך כלל נמוך מדי למדידה ישירה 12,13. זה דורש שוירוסים להיות מרוכזים מכמויות גדולות של מים. במהלך איסוף המידע כלל (ICR) ניטור שנערך על ידי הסוכנות האמריקנית להגנת הסביבה (USEPA) 14, ריכוזי הווירוס של דגימות חיוביות במי המקור של כלי עזר גדולים נעו בפריסה ארצית .009-19.7 מספר הסביר ביותר של יחידות זיהומיות (MPN) / L. ריכוזי חציון והממוצעים של דגימות חיוביות היו 0.03 ו 0.17 MPN / L למי מקור מנחלים זורמים, 0.010.07 MPN / L למי מאגמים ומאגרי מים, ו0.04-0.74 MPN / L של אלה המשתמשים groundwaters 11 (נתונים מבסיס נתוני גישת 18 חודש מיום ICR Aux1 2000/04/25). ריכוזי וירוס של דגימות חיוביות ממחקר USEPA של groundwaters הלאומי נעו .009-2.12 יחידות מדבקות / L עם חציון וריכוזים ממוצעים של 0.13 ו0.29 יחידות מדבקות / L 8. הריכוז של וירוס בדגימות מי תהום חיוביות היה גבוה יותר מאלו בנחלים זורמים. רוב המתקנים באמצעות מי תהום במחקרים אלה הושגו מים מאקוויפרים הממוקמים באזורי הקארסט. אלה, יחד עם אלה הממוקמים באבן גיר וגבישי הגדרות (סלע שבר) עשויים להיות להם ריכוזי וירוס גבוהים יותר מאשר בהגדרות אחרות 8,15,16. שיטות וירוס USEPA לציין כרכי דגימה של 200 L (ICR) 300 L (שיטת 1,615) של מים עיליים ו1,000 L (ICR) ל -1,500 ליטר (שיטת 1,615) של מי תהום 17,18. עם זאת, אפילו עם השימוש בכרכי מדגם גדולים, רוב דגימות פני השטח ומי תהום הן שליליות לנגיף 8,11,19,20. וירוסים הנמצאים במים עיליים מהווים סיכון בריאותי פוטנציאלי לצרכנים של מי שתייה. Surface טיפול במים כלל מחייב את כל מתקני הטיפול באמצעות מים עיליים להפחתת ריכוזי נגיף על ידי לפחות 4 log-. אפילו עם ירידת 4 log-, ריכוזי וירוס מדבקים במי מקור קטנים כמו .0044 MPN / L עלולים להוביל לזיהום אחד ליום בהנחה כגון תנאי חשיפה וטיפול ממוצע ופרמטרי תגובת המינון לרוטה-וירוס 11,21. הסיכון מהווירוס בgroundwaters שלא טופל עלול להיות גדול עוד יותר בשל חוסר הטיפול והתרחשות ויראלי. Borchardt ועמיתים מעריכים כי עד 22% מקיבה והמעיים חריפים במבוגרים ו -63% בילדים פחות מחמש שנים יכולות להיות בגלל הווירוס במי שתייה בקהילות באמצעות groundwaters שלא טופל 19. USEPA Method 1,615 פותח כדי לזהות enterovirus וnorovirus במהלך מחזור הניטור השלישי של תקנת הניטור המזהם ללא פיקוח (UCMR3) 22 כלאומי מעקב לממצאי Borchardt ועמיתי 19,23. שיטת USEPA נועדה בעיקר למדידת וירוס במערכות באמצעות groundwaters שלא טופל, אך נכתבה באופן כללי יותר לכוללת סוגים אחרים מטריצת מים. השיטה החדשה היא היברידית שימור מרכיבים רבים משיטת הווירוס הקודמת שימשה במהלך ICR 17, התוספת של נהלים מולקולריים המבוססת על השיטה של Borchardt et al. 19,23, וערכות פריימר נוספות לnorovirus 24. מטרת מאמר זה היא לתאר את הליך דגימה ואת הצעדים הדרושים כדי לשמור על שלמות המדגם במהלך איסוף ומשלוח. הערכה של השיטה הכוללת מתוארת בet al Cashdollar. 25. פרוטוקול זה מכסה collectio שדה פשוטn של מים עיליים והקרקע שבה משאבה וprefilter אינם נחוצות ושבו התאמות אינן נדרשות לpH או הנוכחות של חומר חיטוי במים שנדגמו. דרישות הדגימה מורכבות יותר מתוארות בet al Fout. 17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="711">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:215px;">Name of the reagent/Equipment</td>
			<td style="width:99px;">Company</td>
			<td style="width:129px;">Catalogue number</td>
			<td style="width:271px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">1-L polypropylene bottle</td>
			<td style="width:99px;">Nalgene</td>
			<td style="width:129px;">2104-0032</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Aluminum foil squares</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06275-40</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Autoclave</td>
			<td style="width:99px;">Steris</td>
			<td style="width:129px;">Amsco Lab Series</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Bubble wrap</td>
			<td style="width:99px;">U.S. Plastics</td>
			<td style="width:129px;">50776</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Closable bag</td>
			<td style="width:99px;">Uline</td>
			<td style="width:129px;">S-12283</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Closable bag</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">S31798C</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Commercial ice packs</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06345-20</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Cool safe box</td>
			<td style="width:99px;">Diversified Biotech</td>
			<td style="width:129px;">CSF-BOX</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Gauze sponge</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">22-415-469</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Graduated cylinder</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06135-90</td>
			<td style="width:271px;">4-L or larger</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Hype Wipe</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">14-412-56</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">iButtons temperature data logger</td>
			<td style="width:99px;">Maxim</td>
			<td style="width:129px;">DS1921G</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Insulated storage and transport chest</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">11-676-12</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Packing tape</td>
			<td style="width:99px;">U.S. Plastics</td>
			<td style="width:129px;">50083</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable chlorine colorimeter II test kit</td>
			<td style="width:99px;">Hach</td>
			<td style="width:129px;">5870062</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable pH and temperature probe</td>
			<td style="width:99px;">Omega</td>
			<td style="width:129px;">PHH-830</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable turbidity meter</td>
			<td style="width:99px;">Omega</td>
			<td style="width:129px;">TRB-2020-E</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">PTFE thread tape</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">08270-34</td>
			<td style="width:271px;">Use on all threaded connections</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Pump, Centrifugal Magnetic Drive</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">72010-20</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Reduction nipple</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06349-87</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Sodium hypochlorite (NaClO)</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:271px;">Use locally available household bleach</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Sodium thiosulfate (Na2S2O3)</td>
			<td style="width:99px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:129px;">217247</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Surgical gloves</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">19-058-800</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Waterproof marker</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">22-290546</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;"></td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:215px;">Media</td>
			<td style="width:99px;">Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="299">
			<td height="299" style="height:299px;width:215px;">0.525% sodium hypochlorite (NaClO)</td>
			<td style="width:99px;">Prepare a 0.525% NaClO solution by diluting household bleach 1:10 in dH2O.&#160; Store 0.525% NaClO solutions for up to 1 week at room temperature.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="240">
			<td height="240" style="height:240px;width:215px;">1 M sodium thiosulfate (Na2S2O3) pentahydrate</td>
			<td style="width:99px;">Prepare a 1 M solution by dissolving 248.2 g of Na2S2O3 in 1 L of dH2O.&#160; Store sodium thiosulfate for up to 6 months at room temperature.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

epa method 1615. measurement of enterovirus and norovirus occurrence in water by culture and rt-qpcr. i. collection of virus samples

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. The standardized sampling component of the method concentrates viruses that may be present in water by passage of a minimum specified volume of water through an electropositive cartridge filter. The minimum specified volumes for surface and finished/ground water are 300 L and 1,500 L, respectively. A major method limitation is the tendency for the filters to clog before meeting the sample volume requirement. Studies using two different, but equivalent, cartridge filter options showed that filter clogging was a problem with 10% of the samples with one of the filter types compared to 6% with the other filter type. Clogging tends to increase with turbidity, but cannot be predicted based on turbidity measurements only. From a cost standpoint one of the filter options is preferable over the other, but the water quality and experience with the water system to be sampled should be taken into consideration in making filter selections.

סתימת מסנן היא בעיה פוטנציאלית גדולה שניתן נתקלה עם שיטת 1615. סתימה מקטינה את קצב הזרימה של מים דרך המסנן. בחלק מהמקרים ניתן להתגבר על ידי פתיחת שסתום הגלובוס כדי לאפשר זרימה גדולה יותר. במקרים אחרים המסנן להיות סתום לחלוטין לפני הנפח הנדרש עבר דרכו. טבלת 1 מציגה את אחוז הדגימות עם כרכים מופחתים כפונקציה של סוג המסנן, סוג מים, ועכירות. סתימה התרחשה עם דגימות שניהם מי תהום ומים עיליים, עם המסנן מבוסס nanofiber תחמוצת האלומיניום יעלה בביצועי המסנן האמין מבוססת הרבעונים לדגימות מי תהום ואילו ההפוך היה במקרה של דגימות מים עיליות. בסך הכל, 6% מהדגימות שנאספו באמצעות המסנן אמין מבוסס רבעונים היו לקויים בהיקף גדול, תוך 10% מהדגימות שנאספו עם המסננים המבוססים על תחמוצת אלומיניום nanofiber לא עמדו במינימום הנדרש שצוין הנפח עקב סתימה. בgeneral, סתימה גדל עם עכירות, אבל מספר הרכיבים שונים תורם לעכירות וחלק מאלה לא יובילו לסתימה. לדוגמא, 43% מכל האירועים המתרחשים סתימה במהלך מחקר ICR היו מוגבלים לשתי מערכות נהר (מידע לא מוצג). במהלך ICR מינימום נפח היעד למים עיליים היה 200 ל &#39;הנפח הממוצע שנאסף במהלך המחקר היה L 217 ± 32 עם נפח ממוצע של 208 L (נתונים מבסיס נתוני גישת 18 חודש מיום ICR Aux1 2000/04/25) . לפיכך, מלא נפח ניתן לאסוף ממים רבים אפילו גבוה turbidities. ICR נדרש דוגמים להשתמש prefilter כאשר turbidities היה מעל 75 NTU, אבל גם עם prefilter, 34% מהדגימות שנאספו במים עם turbidities מעל 75 NTU סתום. שיטה 1,615 ממליצה על השימוש בprefilter עם מים מעל 50 NTU; עם זאת, מאז פרסום השיטה 1615, מספר אפשרויות prefilter שונות בנוסף לכך רשום בשיטה היונבדק. אף אחד מאלה הביא לשיפור משמעותי בנפח דגימה (מידע לא מוצג). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52067/52067fig1.jpg" /> איור 1. מכשירי סינון רגילים. מנגנון המסנן הסטנדרטי מורכב מהצריכה, בית המסנן, ומודולים פריקה (ראה נוספים חומרים לתיאור של כל מודול). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52067/52067fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> סה&quot;כ דוגמאות </td><td> מספר b דוגמאות הלקויה </td><td> דוגמאות לקויות אחוזים </td><td> עכירות (NTU) </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center"> מי תהום באמצעות NanoCeram<html> ג מסננים </td></tr><tr><td> 113 </td><td> 1 </td><td> 1 </td><td> &lt;20 </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center"> מים עיליים באמצעות ג מסנני NanoCeram </td></tr><tr><td> 83 </td><td> 12 </td><td> 14 </td><td> &lt;20 ד </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 4 </td><td> 50 </td><td> 20 - &lt;50 </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 5 </td><td> 83 </td><td> ≥ 50 ד </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="230px" style="text-align:center"> סה&quot;כ ג NanoCeram </td></tr><tr><td> 210 </td><td> 22 </td><td> 10 </td><td> ≥ 0 </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center"> מי תהום באמצעות ג מסנני 1MDS </td></tr><tr><td> 374 </td><td> 75 </td><td> 20 </td><td> &lt;20 </td></tr><tr>שלוחה-align: מרכז &quot;&gt; מים עיליים באמצעות ג מסנני 1MDS </td></tr><tr><td> 2,693 </td><td> 27 </td><td> 1 דואר </td><td> &lt;20 דואר </td></tr><tr><td> 505 </td><td> 36 </td><td> 7 ו </td><td> 20 - &lt;50 f </td></tr><tr><td> 122 </td><td> 19 </td><td> 16 דואר </td><td> 50 - &lt;75 g </td></tr><tr><td> 175 </td><td> 60 </td><td> 34 E, F </td><td> ≥ 75 E, F, G </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="240px" style="text-align:center"> ג סה&quot;כ 1MDS </td></tr><tr><td> 3,869 </td><td> 217 </td><td> 6 </td><td> ≥ 0 </td></tr></tbody></table> קיבולת סינון טבלת 1. דוגמאות מהמחקרים הבאים שממנו נפח הנתונים ועכירות זמינים:. 1) מחקר ICR של USEPA (נתונים מבסיס נתוני גישת 18 חודש מיום 4/2 ICR Aux15/2000), 2) מחקר מי תהום USEPA 8, 3) USEPA לורנס וואל,, 4) USEPA נהר המיסיסיפי מחקר מחקר MA (נתונים שלא פורסמו) (נתונים שלא פורסמו), 5) מחקר מתקן לטיפול במי שתיית USEPA (נתונים שלא פורסמו), USEPA שיטת 1,615 מחקר הערכה 25, ו -6) 7) בשלושת החודשים הראשונים של ניטור UCMR3 (נתונים שלא פורסם). דוגמאות b בי המסנן סתום לפני ההיקף המינימאלי של מים שנקבעו לכל מחקר נאסף. זה היה 200 L למים עיליים ו1,500 L לgroundwaters, אבל היה 200 L למי מקור שהיו מי תהום מתחת לICR USEPA ו1,893 L לחקר תהום USEPA. ג היכולת לאסוף המינימום המלא צוין נפח הוא שונה באופן משמעותי ל דגימות שנאספו באמצעות NanoCeram ומסנני 1MDS (P = 0.002) ובין מים העיליים וgroundwaters שתי כולל (P &lt;0.001) ולכל סוג מסנן (P &lt;0.001) באמצעות בדיקת מאן-ויטני הדרגה הסכום. d &amp; #8211; g קבוצות עם אותו הערך עילי שונות באופן משמעותי (P &lt;0.05) על פי ניתוח קרוסקל-ווליס דרך אחת של שונות במבחן דרגות וPairwise השוואת הנוהל המרובים של דאן. לכל המבחנים הסטטיסטיים המשתנה התלוי הוא הנפח עבר דרך המסנן כחלק של המינימום שצוין הנפח, אבל עם ערך מקסימאלי של 1.0.

Watch this Scientific Journal Video about EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples at JoVE.com

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. I. איסוף דגימות וירוסים

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

epa-method-1615-measurement-enterovirus-norovirus-occurrence-water

Google

Research

JoVE Journal

Environment

12.0K Views.  U.S Environmental Protection Agency. EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

Video: EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

A Small Volume Procedure for Viral Concentration from Water

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to identify optimal parameters for virus concentration. Viruses can be concentrated from water using filtration (electropositive, electronegative, glass wool or size exclusion), followed by secondary concentration with beef extract to release viruses from filter surfaces, and finally tertiary concentration resulting in a 5-30 ml volume virus concentrate. In order to identify optimal concentration procedures, two different electropositive filters were evaluated (a glass/cellulose filter [1MDS] and a nano-alumina/glass filter [NanoCeram]), as well as different secondary concentration techniques; the celite technique where three different celite particle sizes were evaluated (fine, medium and large) followed by comparing this technique with that of the established organic flocculation method. Various elution additives were also evaluated for their ability to enhance the release of adenovirus (AdV) particles from filter surfaces. Fine particle celite recovered similar levels of AdV40 and 41 to that of the established organic flocculation method when viral spikes were added during secondary concentration. The glass/cellulose filter recovered higher levels of both, AdV40 and 41, compared to that of a nano-alumina/glass fiber filter. Although not statistically significant, the addition of 0.1% sodium polyphosphate amended beef extract eluant recovered 10% more AdV particles compared to unamended beef extract.

An approach was developed for identifying optimal viral concentration conditions for small volume water samples using spikes of human adenovirus. The techniques described here are used to identify concentration parameters for other viral targets, and applied to large-scale viral concentration experimentation.

נוהל נפח קטן לריכוז נגיפי ממים

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. The U.S Environmental Protection Agency&#8217;s (USEPA) Method 1615 was developed with the goal of providing such a standard for measuring Enterovirus and Norovirus in these waters. Virus is concentrated from water using an electropositive filter, eluted from the filter surface with beef extract, and then concentrated further using organic flocculation. Herein we present the protocol from Method 1615 for filter elution, secondary concentration, and measurement of total culturable viruses. A portion of the concentrated eluate from each sample is inoculated onto ten replicate flasks of Buffalo Green Monkey kidney cells. The number of flasks demonstrating cytopathic effects is used to quantify the most probable number (MPN) of infectious units per liter. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. Laboratories must meet defined performance standards. Method 1615 was evaluated by examining virus recovery from reagent-grade and ground waters seeded with Sabin poliovirus type 3. Mean poliovirus recoveries with the total culturable assay were 111% in reagent grade water and 58% in groundwaters.

Here we present a procedure to measure total culturable viruses using the Buffalo Green Monkey kidney cell line. The procedure provides a standardized tool for measuring the occurrence of infectious viruses in environmental and drinking waters.

מדידת שיטת EPA 1615. של enterovirus ואת מופע norovirus במים על ידי תרבות RT-qPCR. II. Assay וירוס culturable סה&quot;כ

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a standardized method for use in multiple analytical laboratories during monitoring period 3 of the Unregulated Contaminant Monitoring Rule. Herein we present the protocol for extraction of viral ribonucleic acid (RNA) from water sample concentrates and for quantitatively measuring enterovirus and norovirus concentrations using reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR). Virus concentrations for the molecular assay are calculated in terms of genomic copies of viral RNA per liter based upon a standard curve. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. The method has been evaluated by examining virus recovery from ground and reagent grade waters seeded with poliovirus type 3 and murine norovirus as a surrogate for human noroviruses. Mean poliovirus recoveries were 20% in groundwaters and 44% in reagent grade water. Mean murine norovirus recoveries with the RT-qPCR assay were 30% in groundwaters and 4% in reagent grade water.

Here we present a procedure to quantify enterovirus and norovirus in environmental and drinking waters using reverse transcription-quantitative PCR. Mean virus recovery from groundwater with this standardized procedure from EPA Method 1615 was 20% for poliovirus and 30% for murine norovirus.

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. חלק שלישי. איתור וירוסים על ידי RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Automated Gel Size Selection to Improve the Quality of Next-generation Sequencing Libraries Prepared from Environmental Water Samples

Next-generation sequencing of environmental samples can be challenging because of the variable DNA quantity and quality in these samples. High quality DNA libraries are needed for optimal results from next-generation sequencing. Environmental samples such as water may have low quality and quantities of DNA as well as contaminants that co-precipitate with DNA. The mechanical and enzymatic processes involved in extraction and library preparation may further damage the DNA. Gel size selection enables purification and recovery of DNA fragments of a defined size for sequencing applications. Nevertheless, this task is one of the most time-consuming steps in the DNA library preparation workflow. The protocol described here enables complete automation of agarose gel loading, electrophoretic analysis, and recovery of targeted DNA fragments. 
In this study, we describe a high-throughput approach to prepare high quality DNA libraries from freshwater samples that can be applied also to other environmental samples. We used an indirect approach to concentrate bacterial cells from environmental freshwater samples; DNA was extracted using a commercially available DNA extraction kit, and DNA libraries were prepared using a commercial transposon-based protocol. DNA fragments of 500 to 800 bp were gel size selected using Ranger Technology, an automated electrophoresis workstation. Sequencing of the size-selected DNA libraries demonstrated significant improvements to read length and quality of the sequencing reads.

This manuscript describes an automated gel size selection approach for purifying DNA fragments for next-generation sequencing. The Ranger Technology provides complete automation of the entire process of agarose gel loading, electrophoretic analysis, and recovery of targeted DNA fragments allowing for high-throughput and high quality next-generation sequencing libraries.

בחירת גודל האוטומטי ג&#39;ל כדי לשפר את האיכות של ספריות רצף הדור הבא הוכן מדגימות סביבתיות מים

Next-generation sequencing of environmental samples can be challenging because of the variable DNA quantity and quality in these samples. High quality DNA ...

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and enables to perform rapid, automated and simple SPE. The pre-concentrated solution is compatible with analysis by immunoassay, with a low organic solvent content. A method is described for the extraction and pre-concentration of natural hormone 17&#946;-estradiol in 100 ml water samples. Reverse phase SPE is performed with octadecyl-silica sorbent and elution is done with 200 &#181;l of methanol 50% v/v. Eluent is diluted by adding di-water to lower the amount of methanol. After preparing manually the SPE column, the overall procedure is performed automatically within 1 hr. At the end of the process, estradiol concentration is measured by using a commercial enzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA). 100-fold pre-concentration is achieved and the methanol content in only 10% v/v. Full recoveries of the molecule are achieved with 1 ng/L spiked de-ionized and synthetic sea water samples.

A protocol for the extraction and pre-concentration of estradiol from water samples by using an automated and miniaturized system is presented.

שיטה פשוטה למיצוי שלב המוצק האוטומטי של דגימות מים לניתוח החיסוני של מזהמים קטנים

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and detritus, and excreting particulate and dissolved compounds, they serve as important agents for benthic-pelagic coupling. Accurately measuring the compounds removed and excreted by suspension feeders (such as sponges, ascidians, polychaetes, bivalves) is crucial for the study of their physiology, metabolism, and feeding ecology, and is fundamental to determine the ecological relevance of the nutrient fluxes mediated by these organisms. However, the assessment of the rate by which suspension feeders process particulate and dissolved compounds in nature is restricted by the limitations of the currently available methodologies. Our goal was to develop a simple, reliable, and non-intrusive method that would allow clean and controlled water sampling from a specific point, such as the excurrent aperture of benthic suspension feeders, in situ. Our method allows simultaneous sampling of inhaled and exhaled water of the studied organism by using minute tubes installed on a custom-built manipulator device and carefully positioned inside the exhalant orifice of the sampled organism. Piercing a septum on the collecting vessel with a syringe needle attached to the distal end of each tube allows the external pressure to slowly force the sampled water into the vessel through the sampling tube. The slow and controlled sampling rate allows integrating the inherent patchiness in the water while ensuring contamination free sampling. We provide recommendations for the most suitable filtering devices, collection vessel, and storing procedures for the analyses of different particulate and dissolved compounds. The VacuSIP system offers a reliable method for the quantification of undisturbed suspension feeder metabolism in natural conditions that is cheap and easy to learn and apply to assess the physiology and functional role of filter feeders in different ecosystems.

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

We introduce the VacuSIP, a simple, non-intrusive, and reliable method for clean and accurate point sampling of water. The system was developed and evaluated for the simultaneous collection of the water inhaled and exhaled by benthic suspension feeders in situ, to cleanly measure removal and excretion of particulate and dissolved compounds.

VacuSIP, שיטת INEX משופרת<em&gt; באתרו</em&gt; מדידה של חלקיקים מומס תרכובות מעובד על ידי האכלת השעית Active

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies employed disk fiber filters to collect eDNA from water samples, although a number of microbial studies in aquatic environments have employed filter cartridges, because the cartridge has the advantage of accommodating large water volumes and of overall ease of use. Here we provide a protocol for filtration of water samples using the filter cartridge and extraction of eDNA from the filter without having to cut open the housing. The main portions of this protocol consists of 1) filtration of water samples (water volumes &#8804;4 L or &gt;4 L); (2) extraction of DNA on the filter using a roller shaker placed in a preheated incubator; and (3) purification of DNA using a commercial kit. With the use of this and previously-used protocols, we perform metabarcoding analysis of eDNA taken from a huge aquarium tank (7,500 m3) with known species composition, and show the number of detected species per library from the two protocols as the representative results. This protocol has been developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

We describe a protocol for filtration of water samples with a filter cartridge and extraction of environmental DNA (eDNA) without having to cut open the housing to remove the filter. This protocol is developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

שימוש במחסנית סינון עבור הסינון של מי דוגמאות הפקת DNA הסביבה

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial communities, a relatively precise but effort-intensive technique to assay microbial community composition is phospholipid fatty acid (PLFA) analysis. PLFA was developed to analyze phospholipid biomarkers, which can be used as indicators of microbial biomass and the composition of broad functional groups of fungi and bacteria. It has commonly been used to compare soils under alternative plant communities, ecology, and management regimes. The PLFA method has been shown to be sensitive to detecting shifts in microbial community composition.
An alternative method, fatty acid methyl ester extraction and analysis (MIDI-FA) was developed for rapid extraction of total lipids, without separation of the phospholipid fraction, from pure cultures as a microbial identification technique. This method is rapid but is less suited for soil samples because it lacks an initial step separating soil particles and begins instead with a saponification reaction that likely produces artifacts from the background organic matter in the soil. 
This article describes a method that increases throughput while balancing effort and accuracy for extraction of lipids from the cell membranes of microorganisms for use in characterizing both total lipids and the relative abundance of indicator lipids to determine soil microbial community structure in studies with many samples. The method combines the accuracy achieved through PLFA profiling by extracting and concentrating soil lipids as a first step, and a reduction in effort by saponifying the organic material extracted and processing with the MIDI-FA method as a second step.

The article describes a method that increases throughput while balancing effort and accuracy for extraction of lipids from the cell membranes of microorganisms for use in characterizing both total lipids and the relative abundance of indicator lipids to determine soil microbial community structure in studies with many samples.

ליפיד הפקת וניתוח שיטה לאפיון קרקע חיידקים בניסויים עם דוגמאות רבות

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

Collection and Extraction of Occupational Air Samples for Analysis of Fungal DNA

Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several limitations that have resulted in the exclusion of many species. Advances in the field over the last two decades have led occupational health researchers to turn to molecular-based approaches for identifying fungal hazards. These methods have resulted in the detection of many species within indoor and occupational environments that have not been detected using traditional methods. This protocol details an approach for determining fungal diversity within air samples through genomic DNA extraction, amplification, sequencing, and taxonomic identification of fungal internal transcribed spacer (ITS) regions. ITS sequencing results in the detection of many fungal species that are either not detected or difficult to identify to species level using culture or microscopy. While these methods do not provide quantitative measures of fungal burden, they offer a new approach to hazard identification and can be used to determine overall species richness and diversity within an occupational environment.

Determining the fungal diversity within an environment is a method utilized in occupational health studies to identify health hazards. This protocol describes DNA extraction from occupational air samples for amplification and sequencing of fungal ITS regions. This approach detects many fungal species that can be overlooked by traditional assessment methods.

אוסף והפקת האוויר תעסוקתית דוגמאות לניתוח של DNA פטרייתי

Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric hydroxide (GFH), with little effort and high reliability. The phosphonate, e.g., nitrilotrimethylphosphonic acid (NTMP), is brought into contact with the GFH in a rotator in a solution buffered by an organic acid (e.g., acetic acid) or Good buffer (e.g., 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid) [MES] and N-cyclohexyl-2-hydroxyl-3-aminopropanesulfonic acid [CAPSO]) in a concentration of 10 mM for a specific time in 50 mL centrifuge tubes. Subsequently, after membrane filtration (0.45 &#181;m pore size), the total phosphorus (total P) concentration is measured using a specifically developed determination method (ISOmini). This method is a modification and simplification of the ISO 6878 method: a 4 mL sample is mixed with H2SO4 and K2S2O8 in a screw cap vial, heated to 148-150 &#176;C for 1 h and then mixed with NaOH, ascorbic acid and acidified molybdate with antimony(III) (final volume of 10 mL) to produce a blue complex. The color intensity, which is linearly proportional to the phosphorus concentration, is measured spectrophotometrically (880 nm). It is demonstrated that the buffer concentration used has no significant effect on the adsorption of phosphonate between pH 4 and 12. The buffers, therefore, do not compete with the phosphonate for adsorption sites. Furthermore, the relatively high concentration of the buffer requires a higher dosage concentration of oxidizing agent (K2S2O8) for digestion than that specified in ISO 6878, which, together with the NaOH dosage, is matched to each buffer. Despite the simplification, the ISOmini method does not lose any of its accuracy compared to the standardized method.

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric hydroxide, with little effort and high reliability. In a buffered solution, the phosphonate is brought into contact with the adsorbent using a rotator and then analyzed via a miniaturized phosphorus determination method.

אופטימיזציה הליך לקביעת ספיחה של Phosphonates על גבי הידרוקסיד Ferric פרטנית באמצעות שיטה נחישות זרחן מיניאטורי

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...