המחברים מודים לורי פון Melchner, ברן בית חולים של האוניברסיטה, מחלקה לנוירוכירורגיה, ברן, שווייץ, להגהה ועריכה של כתב היד וPaskus ירמיהו, בית החולים לילדים בבוסטון, בוסטון, MA להגהת הטיוטה הראשונית. אנו מעריכים את הניהול המיומן של טיפול בבעלי חיים, הרדמה, וסיוע אופרטיבי מדניאל Mettler, DVM, מקס מולר, רופאת וטרינרית, דניאל Zalokar, וOlgica Beslac, מכון כירורגי ניסויי, מחלקה למחקר קליני, האוניברסיטה ברן, ברן, שווייץ. אנו מודים למיכאל Lensch, ראש מחקר אחות, מחלקה לטיפול הנמרץ לרפואה, ברן בית חולים של האוניברסיטה והאוניברסיטה ברן, ברן, שווייץ, לניטור בזמן אמת נתונים ולאחר עיבוד של הפרמטרים הפיסיולוגיים. אנו מודים Edin Nevzati, קרל Muroi, וסלומה ארהרדט, לקבלת סיוע המעבדה המעולה שלהם טכני ותפעולי. עבודה זו נתמכה על ידי המחלקה לIntensivדואר Care Medicine, ברן בית החולים של האוניברסיטה והאוניברסיטה ברן, ברן, שווייץ, המחלקה למחקר קליני, האוניברסיטה ברן, ברן, שווייץ, וקרן המחקר מהקנטונספיטל אראו, אראו, שווייץ. אנו מודים Elsevier, לרשות העתקה לאיורי 1 ו -2.

שלושה ארנבי נקבה בת חודש בניו זילנד במשקל 2.5-3.5 קילוגרם שמשו להליך זה. המחקר בוצע על פי המכון הלאומי לבריאות הנחיות לטיפול ולשימוש בחיות ניסוי ובאישור של ועדת הטיפול בבעלי חיים של קנטון ברן, שוויץ (אישור # 105/13). כל הניתוחים בוצעו בתנאים סטריליים במכון הניסויי כירורגי של המחלקה למחקר קליני בבית החולים של האוניברסיטה ברן ברן, שוויץ. רופא מרדים וטרינרי פיקוח בעלי החיים במהלך ניתוח ובכל רחבי התאוששות. .1 הכנת בעלי החיים, Cannulation עורקי מיצוב וsubclavian <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום להרדמה כללית בארנב עם זריקה תוך שרירית של קטמין (30 מ&quot;ג / קילוגרם; Ketalar, 50 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ו xylazine (6 מ&quot;ג / קילוגרם; Xylapan 20 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ועומק שליטה של ​​הרדמה על ידי בדיקת התגובה של הארנב רעיל stimulatיון (למשל, קמצוץ הבוהן). ראה 1.7 במקרה של תשובה חיובית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך כלפי מטה את העפעפיים התחתונים של שני העיניים ולמרוח כמות קטנה של משחה לעפעפיים כדי למנוע יובש וגירוי נוסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצנתר את וריד אוזן לרוחב עם venflon 20 Gbutterfly (20 צנתר כלי דם G), לתקן עם דבק, ולהתחבר לשקית כובד המכילה 0.9% נתרן כלורי (500 מ&quot;ל / 24hr) וקטמין (40 מ&quot;ג / קילוגרם / שעה) / Xylazine (4 מ&quot;ג / קילוגרם / שעה) לתוך ורידים מתמשכים (iv) הרדמה. לנהל משככי כאבים נוספים בכל iv 15 דקות (פנטניל, מק&quot;ג 1 / קילוגרם). הערה: הימנע מהרדמה נדיפים גז, אשר מזוהה עם ירידת CPP, הגדלת CBF, ולהפחית את קצב חילוף חומרים במוח לחמצן 11 הרדמה תוך ורידים לספק מאפיינים אידיאליים יותר לneuroanesthesia על ידי שמירה על CBF והתכווצות כלי דם במוח, 12 שהוא בעל חשיבות עליונה כאשר לומדים מוחין. vasospasm. בנוסף, למרות שהתמותה מוגברת בspontaneously נשימת בעלי חיים, זה עשוי טוב יותר לחקות את המצב האנושי של SAH החריף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק חמצן (1 - 2 L / min) באמצעות מסכת נשימה המאפשרת לי סוף גאות פחמן דו חמצני (2 Etco) ניטור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתקין שלוש אלקטרודות תת עורית רל 3 ערוץ (ECG) .Place בהסדר משולש בצד הגחון של הארנב; במיוחד, מקום אלקטרודה אחת על אזור midthoracic תקין (עם מרחק לשדה המגולח סטרילי לcannulation עורק subclavian) ושתי אלקטרודות בבטן התחתונה מפוזרת על פני שני הגפיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על עומק ההרדמה כל 15 דקות במהלך ניתוח על ידי ביצוע קצב נשימה, קצב לב (HR) במעקב מאות א.ק.ג., ותגובה לגירוי מזיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרה של תשובה החיובית לגירוי מזיק (קמצוץ הבוהן), להתאים את עומק ההרדמה על ידי בולוס קטמין (6 מ&quot;ג / קילוגרם) iv ובולוס xylazine (0.05 מ&quot;ג / קילוגרם) iv ו / או בולוס שיכוך כאבים נוסף עם פנטניל (1 mciv גר &#39;/ קילוגרם) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן הארנב במצב שכיבה על צלחת התחממות גוף, הטיית הראש 20 ° כלפי מטה והופך אותו מעט contralaterally לצד שבו עורק subclavian יהיה חשוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחיל משחה העין ולהכין את האזור לניתוח על ידי גילוח השיער מעל שריר החזה ממש מעבר לשליש האמצעי של עצם הבריח, ומעל גולגולת frontal-, parietal- והעורפית, הצוואר, ומעל עורק הירך המשותף תקין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את העור במשך 3 דקות עם קשת רחבה חיטוי, למשל., Povidone- יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כסה את הארנב עם סדינים סטריליים. לבצע את כל הליכים נוספים בתנאים סטריליים ולעתים קרובות חל 4% papaverin HCl ופתרון אנטיביוטי (סולפט 5 מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​נאומיצין) מריחה כדי למנוע vasospasm עורקים על ידי מניפולציה כלי וזיהומים מקומיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחדור שריר החזה עם הרדמה מקומית (1% 6 מ&quot;ג / קילוגרם מקסימאלי לידוקאין). לעשות חתך בעור ליד עצם ולהכיןשריר חזה. שימוש במיקרוסקופ, לנתח את עורק subclavian ובטוח עם הפרוקסימלית וקשירת דיסטלי (4-0 תפרים polyfilament) בסביבות הסוף נחשף. שמור מייתר אחד קרוב לשליטה הפרוקסימלי במקום כדי לאבטח את הצנתר ולקשור את כלי distally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע arteriotomy בקיר של עורק subclavian על ידי חריטת העורק עם microscissor מעוקל וcannulate עורק subclavian retrogradely עם ברזלים 3 כיווני intravasal קטן. אבטח את הצנתר על ידי קשירת קשר כפולה כלפי מייתר דיסטלי כדי למנוע פיתול עורקים או כיפוף של חלק הפרוקסימלי של העורק וכדי למנוע דימום החלקה או מסיבי. </li></ol> .2 לחץ דם וניטור עורקי דם גז <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את זין 3 כיווני התחנה לi) צינורית intravasal לגזים בדם העורקי (ABG) מנתח, pH, פאקו 2, פאו 2, ביקרבונט, עודף בסיס, וכן 2, ii) דם עורקים פולשניתלחץ מכשיר מדידה, וiii) את מכשיר המחלף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף דגימות דם למצב ABG (פאקו 2, פאו 2) ולפקח באופן רציף פרמטרים סטנדרטיים לב וכלי דם ומערכת נשימה (לחץ דם, HR, א.ק.ג., קצב נשימה וקצה של גאות ושפל CO 2) והעברת נתונים דרך ממשק הפלט האנלוגי לanalog- ממיר / לוגר הדיגיטלי נתונים וחנות. הערה: הלחצים יהיו מאופסים ברמות לב לפני ואחרי כל פגישה, וכיול לחץ של אנלוגי / מערכת נתוני רישום דיגיטלי ממיר וייעשה פעם אחת לפני הסדרה מתחילה. </li></ol> 3 Baseline הדיגיטלי חיסור אנגיוגרפיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להניח מטען חיצוני לשינוי גודל (כדור קטן) על שני זוויות הלסת התחתונה על מנת לכייל את הצנתור. הערה: זה מאפשר השוואה של מדידות post hoc של בסיס מדויקת ומעקב קוטר כלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע צנתור חיסור דיגיטלי (DSA) על ידי התוך מדרדרהזרקת rterial בולוס של אי יוני Iopamidol (0.6 מ&quot;ל / קילוגרם, 5 מ&quot;ל / שנייה למשך 2 שניות) דרך עורק cannulated ולשטוף את הצינורית באופן מיידי לאחר הזרקת בולוס עם מי מלח כדי למנוע חסימה של זה האחרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג תמונות (7 תמונות ב14 שניות) של מערכת vertebrobasilar באמצעות הקלטת אנגיוגרפיה רציפה מהירה בעמדה אלכסונית 5 ° שמאליים קדמית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחדור סביב עורק הירך המשותף תקין עם הרדמה מקומית (לידוקאין 1%, 6 מ&quot;ג / קילוגרם מקסימאלי) האזור. לעשות חתך בעור מפשעתי קטן. השימוש במיקרוסקופ להדמיה, לנתח את עורק הירך המשותף ובטוח עם הפרוקסימלית וקשירת דיסטלי (4-0 תפרי polyfilament) בסביבות הסוף נחשף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר arteriotomy, cannulate עורק הירך עם נדן 5-F. לשטוף את יציאת הצד של הנדן עם מי מלח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קידום צנתר 5-F לעורק brachiocephalic דרך הנדן תחת שיקוף. צור מפת דרכים, אז לקדם חוט מדריך לthמערכת vertebrobasilar דואר. הזרק בולוס של אי יוני Iopamidol (0.6 מ&quot;ל / קילוגרם, 5 מ&quot;ל / שנייה ב2 שניות) לDSA כמתואר בשלב 3.2. </li></ol> .4 סיבוב למצב שכיבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות DSA תחילת המחקר, למקם מחדש את הארנב מפרקדן למצב שכיבה. היזהר שלא לעשות מניפולציות או מיקום מחדש של העמדה של הצנתרים תוך עורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את הראש בראש של בעל בזווית 30 °, אוריינטציה ראש למטה. </li></ol> .5 Cisterna Magna נקר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את העור מעל הראש והצוואר עם 3 פעמים povidone- יוד 1 דקות כל אחד, ולכסות את אזור הניתוח עם סדינים סטריליים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס 22 G x 40 מ&quot;מ מחט גישת השדרה ילדים transcutaneously לתוך Cisterna magna ללא כל חתך בעור לפני או עקירת שריר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהחיה היא בהרדמה מלאה על ידי הבטחת חוסר תגובת הבוהן קמצוץ לפני הזזה המחט למטה לאורך בליטת הקודקוד החיצונית הגרמיתעד פער מזוהה; לא לדחוף את המחט יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר את המיקום הנכון של המחט על ידי התבוננות טפטוף ספונטני של נוזל השדרתי עם הראש של הארנב המוטה כלפי מטה בזווית של ° 20 לכמה דקות. </li></ol> .6 התקנה של לחץ תוך גולגולתי וניטור זרימת דם במוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר עור קו האמצע וחתך Galea, להכניס מפשק כירורגים קטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך שלוש osteotomies העגול (קוטר 2 מ&quot;מ) באמצעות microdrill במהירות גבוהה בחלקו הקדמי של הגולגולת על פי ציוני דרך הגולגולת החיצוניות (איור 1) 9, כלומר, מעל הנורה חוש הריח והחזיתי בין שתי המדינות עבור מיקום של מכשיר neuromonitoring אם הכרחי. השתמש בסרגל קנה מידה מילימטר כדי לקבוע את הקואורדינטות למיקום חור בר כדלקמן: ניטור לחץ תוך גולגולתי (ICP) בשורת midpupillary, 01:59 מ&quot;מ מקו midsagittal; בדיקות לייזר דופלר intraparenchymalקדמי 4:56 מ&quot;מ ורוחב לגבחת (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו את הדורה, ולבצע עצירת דימום מוקפדת: להשתמש בשעוות עצם לעצירת דימום עצם מכוח פעולת tamponade ולבצע עצירת דימום מקומית באמצעות קרישה דו קוטבית של הדורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את קצה צג לחץ תוך גולגולתי (ICP) intraparenchymal לתוך הנורה חוש הריח תקין עד לעומק של 2 מ&quot;מ ואז לכייל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח בדיקות המחט דקות שני Flowmetry לייזר דופלר באמצעות מערכת מהדק חיצונית ולהכניס אותם לתוך החורים בר המקבילים מהימין ומהמוח קדמי השמאלי לרוחב מערכת חדרית, כלומר, בקו האמצע, כדי למנוע הפרעה בנוזל המוח והשדרה. הנח בדיקות מחט לעומק של 2.5 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי המיקום של חלליות neuromonitoring, לאטום את כל החורים בר עם תקע עבה של שעוות עצם על מנת לשמור על הנוזל חזק גולגולת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדוד פרמטרים בסיסיים של לחץ דם עורקי ממוצע (MAP), ICP וזרימת דם במוח (CBF) באמצעות צג פרמטרים מרובה וצג זלוף דם רקמת לייזר דופלר ארבעה ערוץ. </li></ol> .7 שאנט אינדוקציה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מחט גישת השדרה בCisterna magna לעורק subclavian צינתור בעבר באמצעות צינורות ניטור לחץ מלא בדם. השתמש בברזלי 3 הכיוונים למדידת לחץ דם וכנמל דגימת דם. הערה: חומרת SAH תלויה בכמות של דם, וניתן להעריך בגסות על ידי הפשיטות של קרישים תת עכבישים בעת קציר המוח 5,11. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח באופן רציף MAP, HR, א.ק.ג., קצב נשימה וקצה של גאות ושפל CO 2 בקצב דגימה של 1 הרץ מ6 דקות לפני לפחות עד 20 דקות לאחר SAH. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהחיה היא בהרדמה מלאה על ידי הבטחת חוסר תגובת קמצוץ הבוהן לפני פתיחת חיבור המחלף בין עורק subclavian וCisterna magna לגרום SAH ידי gradie הלחץnt. הערה: ניתן להשיג SAH נשלט על ידי סגירת המחלף בכל נקודת זמן (למשל, ברמה רצויה של ICP.). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקליט ערכי מצב יציבים בתקופה של כ 15 דקות זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ICP מגיע לשיאו, לשמור את מחט גישת השדרה במקום עד ICP חוזר למצב יציב קרוב לערכי בסיס. אם רמת ICP נשמר במשך יותר מ -10 שניות או אם ICP יורד באופן ספונטני, לסגור את המחלף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר בדיקות עדינות מחט CBF ובדיקת ICP, לחבר חורים בר בשעוות עצם, להסיר את כל הצנתרים (כולל צנתר subclavian, מאז המניפולציה קטטר עם דימום ברציפות קשורה לתחלואה גבוהה ותמותה, ומגבירה את קצב זיהום), לבצע השקיה פצע מחמירה עם סולפט נאומיצין ולתפור את העור. </li></ol> ניהול לאחר ניתוח .8 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ההליך נמשך כשעה 2. בשל זמן מחצית החיים של קטמין ו xylazine, זמן ההתאוששות של האנימהl הוא די קצר - כ 1 שעות. בעלי החיים נשמרים תחת מנורת חימום במהלך התאוששות. נוזלים נוספים לא מסופקים. בשלב התאוששות ראשוני זה שלאחר ניתוח, חל עצירות 0.02 מ&quot;ג / קילוגרם sc כל שעה 8 ל24 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל טלאי מטריצת פנטניל transdermal שחרור 12.5 מיקרוגרם / שעה באזור הצוואר המגולח של בעלי החיים לשיכוך כאבים יעילים על 72 שעות הבאות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אל תשאיר חיה ללא השגחה עד שהוא חזר להכרה מספיק כדי לשמור על כיבה sternal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אל תחזור חיה שעברה ניתוח בחברתם של בעלי חיים אחרים, עד שהתאושש באופן מלא. </li></ol> .9 מעקב הדיגיטלי חיסור אנגיוגרפיה להערכת DCVS ביום 3 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע צעדים 1.1-3.6 כפי שתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את בעלי החיים על ידי הזרקת intraarterial בולוס של thiopenthal נתרן (40 מ&quot;ג / קילוגרם) (הפנטוטאל, Ospedalia AG, Hünenberg, שווייץ). במקרים בהם היסטולוגיה וimmunohistochemistry יש צורך, לבצע זלוף-קיבעון intracardiac ב RT בלחץ זלוף של 100 סנטימטר H 2 O. </li></ol>

<ol>
	<li>Taylor, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifetime+cost+of+stroke+in+the+United+States.">Lifetime cost of stroke in the United States.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).</li><li>Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+feedback+regulation+of+the+receptor+activity+and+the+myofilament+Ca2++sensitivity+contributes+to+increased+vascular+reactiveness+after+subarachnoid+hemorrhage.">Impaired feedback regulation of the receptor activity and the myofilament Ca2+ sensitivity contributes to increased vascular reactiveness after subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of cerebral blood flow and metabolism : official journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 30, 1637-1650 (2010).</li><li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm.">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British journal of neurosurgery. 24, 415-434 (2010).</li><li>Marbacher, S., Neuschmelting, V., Graupner, T., Jakob, S. M., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+delayed+cerebral+vasospasm+by+continuous+intrathecal+infusion+of+glyceroltrinitrate+and+nimodipine+in+the+rabbit+model+in+vivo.">Prevention of delayed cerebral vasospasm by continuous intrathecal infusion of glyceroltrinitrate and nimodipine in the rabbit model in vivo.</a> Intensive care medicine. 34, 932-938 (2008).</li><li>Zhou, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+one-+and+two-hemorrhage+models+of+cerebral+vasospasm+in+rabbits.">Comparison between one- and two-hemorrhage models of cerebral vasospasm in rabbits.</a> Journal of neuroscience. 159, 318-324 (2007).</li><li>Vatter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+in+the+development+of+cerebral+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage:+clinical+and+neuroradiological+assessment+of+the+rat+double+hemorrhage+model.">Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model.</a> Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).</li><li>Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+experimental+rat+models+of+early+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage.">Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65, 331-343 (2009).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rabbit+model+for+the+study+of+early+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage.">A new rabbit model for the study of early brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of neuroscience. 208, 138-145 (2012).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outer+skull+landmark-based+coordinates+for+measurement+of+cerebral+blood+flow+and+intracranial+pressure+in+rabbits.">Outer skull landmark-based coordinates for measurement of cerebral blood flow and intracranial pressure in rabbits.</a> Journal of neuroscience methods. 201, 322-326 (2011).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extra-intracranial+blood+shunt+mimicking+aneurysm+rupture:+intracranial-pressure-controlled+rabbit+subarachnoid+hemorrhage+model.">Extra-intracranial blood shunt mimicking aneurysm rupture: intracranial-pressure-controlled rabbit subarachnoid hemorrhage model.</a> Journal of neuroscience. 191, 227-233 (2010).</li><li>Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+grading+system+evaluating+bleeding+scale+in+filament+perforation+subarachnoid+hemorrhage+rat+model.">A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model.</a> J Neurosci Methods. 167, 327-334 (2008).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature reviews. Neurology. 10, 44-58 (2014).</li><li>Zhang, Z. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+growth+factor-induced+severe+and+chronic+vasoconstriction+of+cerebral+arteries:+proposed+growth+factor+explanation+of+cerebral+vasospasm.">Platelet-derived growth factor-induced severe and chronic vasoconstriction of cerebral arteries: proposed growth factor explanation of cerebral vasospasm.</a> Neurosurgery. 66, 728-735 (2010).</li><li>Laslo, A. M., Eastwood, J. D., Chen, F. X., Lee, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+CT+perfusion+imaging+in+subarachnoid+hemorrhage-related+vasospasm.">Dynamic CT perfusion imaging in subarachnoid hemorrhage-related vasospasm.</a> AJNR. American journal of neuroradiology. 27, 624-631 (2006).</li><li>Shao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+tetramethylpyrazine+on+nitric+oxide/cGMP+signaling+after+cerebral+vasospasm+in+rabbits.">Effects of tetramethylpyrazine on nitric oxide/cGMP signaling after cerebral vasospasm in rabbits.</a> Brain research. 1361, 67-75 (2010).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1086-1091 (1995).</li><li>Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1279-1283 (1995).</li><li>Zakhartchenko, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-mediated+transgenesis+in+rabbits:+chimeric+and+nuclear+transfer+animals.">Cell-mediated transgenesis in rabbits: chimeric and nuclear transfer animals.</a> Biology of reproduction. 84, 229-237 (2011).</li><li>Capecchi, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+targeting+in+mice:+functional+analysis+of+the+mammalian+genome+for+the+twenty-first+century.">Gene targeting in mice: functional analysis of the mammalian genome for the twenty-first century.</a> Nature reviews. Genetics. 6, 507-512 (2005).</li><li>Flisikowska, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+immunoglobulin+gene+disruption+and+targeted+replacement+in+rabbit+using+zinc+finger+nucleases.">Efficient immunoglobulin gene disruption and targeted replacement in rabbit using zinc finger nucleases.</a> PloS one. 6, e21045 (2011).</li><li>Nakajima, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+aging+on+cerebral+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+rabbits.">Effects of aging on cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage in rabbits.</a> Stroke. 32, 620-628 (2001).</li></ol>

None. The authors have no financial or commercial interest in any of the drugs, materials, or equipment used. No specific funding was received for this work. The authors are solely responsible for the design and conduct of the presented study and report no conflict of interest concerning the materials and methods used in this study or the findings specified in the paper. They confirm the adherence of ethical standards. The study was performed in accordance with the National Institutes of Health guidelines for the care and use of experimental animals and with the approval of the Animal Care Committee of the Canton of Bern, Switzerland (approval #109/07 and #107/09).

מודל המחלף מייצר פתולוגיה דומה לזה שנצפה בבני אדם לאחר אקוטי SAH 3,8,10. היה מי שהציע שEBI עלול להחמיר, לשמור ואפילו לעורר 12 DCVS, וכמודל כזה זה עשוי לסייע בחקירת שני שלבי DCVS המוקדמים ומאוחרים, כוללים אינטראקציות EBI וDCVS הבאות SAH. בפרט, הדיר in vivo DCVS טכניקות ניטור ...

דימום תת עכבישי Aneurysmal (SAH) הוא אחד של רוב מצבי מסכני החיים נוירו, לעתים קרובות מובילים לנזק נוירולוגים קבוע או מות 1. מחקר בעבר התמקד בvasospasm מושהה המוחית (DCVS) כאטיולוגיה העיקרית של גירעונות נוירולוגיות הקשורות לSAH 2. עם זאת, התוצאות הקליניות הירודה בדרך כלל חולים הסובלים מSAH לאחר הטיפול של vasospasm הובילו להרחבת המיקוד המחקרי כך שתכלולנה את ההשפעות של פגיעה מוחית המוקדמת (EBI) לאחר SAH 3. הבנה טובה יותר של המשמעות של שני EBI וDCVS בתרומה לתוצאות קליניות גרועות לאחר SAH היא חיונית לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות יעילות יותר. עד עכשיו, הזרקת דם אוטולוגי יחידה וכפולה לCisterna magna הייתה השיטה סטנדרטית לזירוז SAH לחקר DCVS 2-6. למרות שימוש נפוץ במחקרים קודמים,מודל זה ככל הנראה אינו משחזר את השינויים המרכזיים נוירו קשור עם SAH מושרה EBI 7. בניגוד לכך, ניקוב endovascular ידוע כדי לייצר שינויי pathophysiological חריפים חמורים שחלקו לחקות את התסמינים של 7 EBI. דו&quot;ח זה מתאר מודל ארנב רומן של SAH נועד לאפשר חקירה של שני EBI וDCVS, ובכך לאפשר אפיון מדויק יותר של פתולוגיה הנגרמת על ידי SAH 8-10. עם הטכניקה המתוארת, מודל הסטנדרטי Cisterna magna מותאם על ידי חיבור מערכת העורקים של עורק subclavian וCisterna magna באמצעות מחלף extracorporeal. זרימת הדם קשורה ובכך לפיסיולוגיה של הארנבת ומונעות על ידי מפל לחצים בין דם העורקים ולחץ תוך גולגולתי. הדימום מפסיק כאשר לחץ תוך מוחי (ICP) שווה לחץ דם הדיאסטולי והדם במערכת נט coagulates. ניצול המארח &amp; #8217; של פיזיולוגיה מפחיתה אינדוקציה SAH בוחן תלוי, שמוביל למודל עקבי יותר של SAH שאופן מהימן מייצר שני EBI ופנוטיפים DCVS 3,8-10.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="905">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:279px;">Name</td>
			<td style="width:236px;">Company</td>
			<td style="width:223px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Equipment</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">operation microscope</td>
			<td style="width:236px;">Zeiss, Jena, Germany</td>
			<td colspan="2">Zeiss, OPMI-MD surgical microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:279px;">surgical equipment</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:223px;">forceps medical n&#176;5, vessel sciccors 8cm, microclip 4mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">respirator</td>
			<td style="width:236px;">Hugo Sachs</td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">hair clipper</td>
			<td style="width:236px;">3M Surgical Clipper&#160;</td>
			<td style="width:223px;">&#160;Starter Kit 9667A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">body warm plate</td>
			<td style="width:236px;">FHC</td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:279px;">blood gas analyzer</td>
			<td style="width:236px;">Radiometer, Copenhagen, Denmark</td>
			<td style="width:223px;">ABL 725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:279px;">cardiac monitoring</td>
			<td style="width:236px;">Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US</td>
			<td style="width:223px;">AP-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">software analysis</td>
			<td style="width:236px;">BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USA</td>
			<td style="width:223px;">Biopac MP100 and acqKnowledge software,version 3.8.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">software analysis</td>
			<td style="width:236px;">ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA</td>
			<td style="width:223px;">image-Pro Plus version&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">angiography apparatus</td>
			<td style="width:236px;">DFP 2000 A-Toshiba</td>
			<td style="width:223px;">MIIXR0001EAA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ICP monitor</td>
			<td style="width:236px;">Camino Laboratories, San Diego, CA, USA</td>
			<td style="width:223px;">ICP monitor, Model 110-4B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">blood flow monitor</td>
			<td style="width:236px;">Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK</td>
			<td style="width:223px;">CAL KIT microsphere solution</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">laser-Doppler flowmetry fine needle probes&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Oxford Optronix Ltd., Oxford, UK</td>
			<td style="width:223px;">MNP110XP, 0.48 mm diameter</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">pressure tube</td>
			<td>B. Braun, Germay</td>
			<td style="width:223px;">PE 1.0 mm &#215; 2.0 mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">anesthesia monitor</td>
			<td>GE Medical Systems, Switzerland&#160;</td>
			<td style="width:223px;">Datex S5 Monitor</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Material</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">20 G vascular catheter</td>
			<td style="width:236px;">Smiths Medical</td>
			<td style="width:223px;">Jelco i.v. catheter, REF 4057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">5.5F three-lumen central venous catheter&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Connectors, Tagelswangen, Switzerland</td>
			<td>silicone catheter STH-C040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">22Gx40mm needle&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Emergo Group Inc., Netherlands</td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">high-speed microdrill</td>
			<td style="width:236px;">Stryker, Solothurn, Switzerland</td>
			<td>5400-15&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">bone wax</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon, Johnson &#38; Johnson,NJ, USA</td>
			<td style="width:223px;">ETHW31G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">bipolar forceps</td>
			<td style="width:236px;">Aesculap, Inc., PA, US</td>
			<td>US349SP&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">Ketamin</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">Buprenorphine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fentanyl</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">transdermal fentanyl matrix patches&#160;</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lidocaine 1%&#160;</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">4% papaverin HCl&#160;</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Neomycin sulfate&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Research Organics Inc., OH, USA</td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Povidone-iodine&#160;</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">0.9% sodium chloride</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">Iopamidol&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Abott Laboratories, IL, USA</td>
			<td style="width:223px;"></td>
			<td>Any generic product</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">3-0 resorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td>VCP824G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">5-0 non absorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td>8618G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">4-0 polyfilament sutures</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td style="width:223px;">VCP284G</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the rabbit blood-shunt model for the study of acute and late sequelae of subarachnoid hemorrhage: technical aspects

פגיעה מוחית מוקדמת וvasospasm המוחית עיכבה שני לתרום לתוצאות שליליות לאחר דימום תת עכבישים (SAH). מודלים של בעלי חיים לשחזור ושליטה המדמים את שני התנאים הם כיום נדירים. לכן, יש צורך במודלים חדשים כדי לחקות את תנאי pathophysiological אנושיים הנובעים מSAH. דו&quot;ח זה מתאר את הדקויות הטכניות של דגם SAH דם מחלף ארנב המאפשר שליטה על לחץ תוך מוחי (ICP). מחלף extracorporeal ממוקם בין מערכת העורקים והחלל תת עכבישים, המאפשר SAH בוחן עצמאי בגולגולת סגורה. צעד אחר צעד הוראות נוהל וציוד דרוש מתוארות, כמו גם שיקולים טכניים כדי לייצר את הדגם עם מינימאלית תמותה ותחלואה. פרטים חשובים הנדרשים ליצירה כירורגית מוצלחת של מודל ארנב SAH זה חזק, פשוט ועקבי בשליטת ICP מתוארים.

<html> מודל מחלף דם הארנב של SAH שתואר בדוח זה מייצר EBI בהיפוקמפוס (איור 2 א, ב &#39;), בסיס קליפת המוח (איור 2 א, ב&#39;), וכלי דם במוח (איור 2 ג) מוקדם ככל 24 שעות לאחר פציעה ומראה אופייני הפצת דם (איור 2 ד) 8. בנוסף, המודל מעורר מתון בדרגות חמורו...

Watch this Scientific Journal Video about The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects at JoVE.com

The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects

The experimental intracranial pressure-controlled blood shunt subarachnoid hemorrhage (SAH) model in the rabbit combines the standard procedures &#8212; subclavian artery cannulation and transcutaneous cisterna magna puncture, which enables close mimicking of human pathophysiological conditions after SAH. We present step-by-step instructions and discuss key surgical points for successful experimental SAH creation.

דגם ארנב דם מחלף לחקר חריף והמאוחר Sequelae של דימום תת עכבישים: היבטים טכניים

Early brain injury and delayed cerebral vasospasm both contribute to unfavorable outcomes after subarachnoid hemorrhage (SAH). Reproducible and ...

the-rabbit-blood-shunt-model-for-study-acute-late-sequelae

Research

JoVE Journal

Medicine

13.5K Views.  University and Bern University Hospital (Inselspital). The experimental intracranial pressure-controlled blood shunt subarachnoid hemorrhage (SAH) model in the rabbit combines the standard procedures — subclavian artery cannulation and transcutaneous cisterna magna puncture, which enables close mimicking of human pathophysiological conditions after SAH. We present step-by-step instructions and discuss key surgical points for successful experimental SAH creation.

Video: The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

Microsurgical ורידי עורקי פאוץ-הסתעפות מפרצת במודל הארנב: היבטים טכניים

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

סמנים ביולוגיים במודל חיה לחשיפה קושרת עצבית, המטולוגית, והתנהגות של PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

NADH Fluorescence Imaging of Isolated Biventricular Working Rabbit Hearts

Since its inception by Langendorff1, the isolated perfused heart remains a prominent tool for studying cardiac physiology2. However, it is not well-suited for studies of cardiac metabolism, which require the heart to perform work within the context of physiologic preload and afterload pressures. Neely introduced modifications to the Langendorff technique to establish appropriate left ventricular (LV) preload and afterload pressures3. The model is known as the isolated LV working heart model and has been used extensively to study LV performance and metabolism4-6. This model, however, does not provide a properly loaded right ventricle (RV). Demmy et al. first reported a biventricular model as a modification of the LV working heart model7, 8. They found that stroke volume, cardiac output, and pressure development improved in hearts converted from working LV mode to biventricular working mode8. A properly loaded RV also diminishes abnormal pressure gradients across the septum to improve septal function. Biventricular working hearts have been shown to maintain aortic output, pulmonary flow, mean aortic pressure, heart rate, and myocardial ATP levels for up to 3 hours8.
When studying the metabolic effects of myocardial injury, such as ischemia, it is often necessary to identify the location of the affected tissue. This can be done by imaging the fluorescence of NADH (the reduced form of nicotinamide adenine dinucleotide)9-11, a coenzyme found in large quantities in the mitochondria. NADH fluorescence (fNADH) displays a near linearly inverse relationship with local oxygen concentration12 and provides a measure of mitochondrial redox state13. fNADH imaging during hypoxic and ischemic conditions has been used as a dye-free method to identify hypoxic regions14, 15 and to monitor the progression of hypoxic conditions over time10.
The objective of the method is to monitor the mitochondrial redox state of biventricular working hearts during protocols that alter the rate of myocyte metabolism or induce hypoxia or create a combination of the two. Hearts from New Zealand white rabbits were connected to a biventricular working heart system (Hugo Sachs Elektronik) and perfused with modified Krebs-Henseleit solution16 at 37 &deg;C. Aortic, LV, pulmonary artery, and left &amp; right atrial pressures were recorded. Electrical activity was measured using a monophasic action potential electrode. To image fNADH, light from a mercury lamp was filtered (350&plusmn;25 nm) and used to illuminate the epicardium. Emitted light was filtered (460&plusmn;20 nm) and imaged using a CCD camera. Changes in the epicardial fNADH of biventricular working hearts during different pacing rates are presented. The combination of the heart model and fNADH imaging provides a new and valuable experimental tool for studying acute cardiac pathologies within the context of realistic physiological conditions.

The objective is to monitor the mitochondrial redox state of isolated hearts within the context of physiologic preload and afterload pressures. A biventricular working rabbit heart model is presented. High spatiotemporal resolution fluorescence imaging of NADH is used to monitor the mitochondrial redox state of epicardial tissue.

NADH Fluorescence הדמיה של Biventricular מבודדת עבודה לבבות ארנב

Since its inception by Langendorff1, the isolated perfused heart remains a prominent tool for studying cardiac physiology2. However, it is not well-suited ...

A Low Mortality Rat Model to Assess Delayed Cerebral Vasospasm After Experimental Subarachnoid Hemorrhage

Objective: To characterize and establish a reproducible model that demonstrates delayed cerebral vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) in rats, in order to identify the initiating events, pathophysiological changes and potential targets for treatment.
Methods: Twenty-eight male Sprague-Dawley rats (250 - 300 g) were arbitrarily assigned to one of two groups - SAH or saline control. Rat subarachnoid hemorrhage in the SAH group (n=15) was induced by double injection of autologous blood, 48 hr apart, into the cisterna magna. Similarly, normal saline (n=13) was injected into the cisterna magna of the saline control group. Rats were sacrificed on day five after the second blood injection and the brains were preserved for histological analysis. The degree of vasospasm was measured using sections of the basilar artery, by measuring the internal luminal cross sectional area using NIH Image-J software. The significance was tested using Tukey/Kramer's statistical analysis.
Results: After analysis of histological sections, basilar artery luminal cross sectional area were smaller in the SAH than in the saline group, consistent with cerebral vasospasm in the former group. In the SAH group, basilar artery internal area (.056 &mu;m &plusmn; 3) were significantly smaller from vasospasm five days after the second blood injection (seven days after the initial blood injection), compared to the saline control group with internal area (.069 &plusmn; 3; p=0.004). There were no mortalities from cerebral vasospasm.
Conclusion: The rat double SAH model induces a mild, survivable, basilar artery vasospasm that can be used to study the pathophysiological mechanisms of cerebral vasospasm in a small animal model. A low and acceptable mortality rate is a significant criterion to be satisfied for an ideal SAH animal model so that the mechanisms of vasospasm can be elucidated 7, 8. Further modifications of the model can be made to adjust for increased severity of vasospasm and neurological exams.

Aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) is bleeding that occurs into the subarachnoid space when an aneurysm ruptures. While the morbidity and mortality from this event has been on a decline due to improved treatment approaches, the risk of vasospasm after subarachnoid hemorrhage continues to be the same as it was several years ago. The importance of establishing a comprehensive and reproducible animal model to identify initiating events of cerebral vasospasm has been the focus of research since the first use of rats in an experimental vasospasm model in 1979 by Barry et al. Early work in rats demonstrated that a single injection of autologous blood into the cisterna magna led to acute (within minutes) but not delayed cerebral vasospasm 3, 6, 14. Here we characterize a low mortality SAH rat model that results in reproducible delayed vasospasm.

מודל חולדת תמותה נמוך להערכת Vasospasm מוחות המושהה לאחר דימום subarachnoid ניסויי

Objective: To characterize and establish a reproducible model that demonstrates delayed cerebral vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human malignancies.1 Other than surgery for the minority of patients who present with localized disease, there is little or no survival benefit of systemic therapy. Therefore, there is a great need to better understand the biology of NETs, and in particular define new therapeutic targets for patients with nonresectable or metastatic neuroendocrine tumors. 3D cell culture is becoming a popular method for drug screening due to its relevance in modeling the in vivo tumor tissue organization and microenvironment.2,3 The 3D multicellular spheroids could provide valuable information in a more timely and less expensive manner than directly proceeding from 2D cell culture experiments to animal (murine) models.
To facilitate the discovery of new therapeutics for NET patients, we have developed an in vitro 3D multicellular spheroids model using the human NET cell lines. The NET cells are plated in a non-adhesive agarose-coated 24-well plate and incubated under physiological conditions (5% CO2, 37 &deg;C) with a very slow agitation for 16-24 hr after plating. The cells form multicellular spheroids starting on the 3rd or 4th day. The spheroids become more spherical by the 6th day, at which point the drug treatments are initiated. The efficacy of the drug treatments on the NET spheroids is monitored based on the morphology, shape and size of the spheroids with a phase-contrast light microscope. The size of the spheroids is estimated automatically using a custom-developed MATLAB program based on an active contour algorithm. Further, we demonstrate a simple method to process the HistoGel embedding on these 3D spheroids, allowing the use of standard histological and immunohistochemical techniques. 
This is the first report on generating 3D spheroids using NET cell lines to examine the effect of therapeutic drugs. We have also performed histology on these 3D spheroids, and displayed an example of a single drug's effect on growth and proliferation of the NET spheroids. Our results support that the NET spheroids are valuable for further studies of NET biology and drug development.

We present a simple agarose overlay platform to grow 3D multicellular spheroids using neuroendocrine cancer cell lines. This method provides a very convenient way to examine the effect of therapeutic drugs on the neuroendocrine tumor cells. It could also help us establish human neuroendocrine tumor spheroids for cancer therapy.

האדם תאים סרטניים נוירואנדוקריניים קווים כמו מודל תלת ממדי לחקר הטיפול האנושי גידול נוירואנדוקריניים

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

דגם Murine של השתלת תומכן בעורק הראשי לחקר restenosis

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

היבטים טכניים של מורסת Aortocaval מאוס

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of Willis perforation (CWp) and proven by intracranial pressure (ICP) monitoring. Thereby a homogenous blood distribution in subarachnoid spaces surrounding the arterial circulation and cerebellar fissures is achieved. Animal physiology is maintained by intubation, mechanical ventilation, and continuous on-line monitoring of various physiological and cardiovascular parameters: body temperature, systemic blood pressure, heart rate, and hemoglobin saturation. Thereby the cerebral perfusion pressure can be tightly monitored resulting in a less variable volume of extravasated blood. This allows a better standardization of endovascular filament perforation in mice and makes the whole model highly reproducible. Thus it is readily available for pharmacological and pathophysiological studies in wild type and genetically altered mice.

A standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage by intraluminal Circle of Willis perforation is described. Vessel perforation and subarachnoid bleeding are monitored by intracranial pressure monitoring. In addition various vital parameters are recorded and controlled to maintain physiologic conditions.

מודל Murine של תת עכבישי דימום

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

דגם Murine של עורקי היצרות: היבטים טכניים של עצם הירך חוט פגיעה

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...