The authors would like to thank the MSKCC Tissue Procurement Service Team (TPS), specifically, Maria Corazon Mariano, Priscilla McNeil, Anas Idelbi, Daniel Navarrete and Katrina Allen, in all of their efforts in the successful pursuit of this project and funding from the following sources: 5 R21 CA158609-02 and the Conquer Cancer Foundation and the Breast Cancer Research Foundation. In addition, the authors would like to thank Eric Cottington PhD, Vice President of the Office of Research and Project Administration, the Office of Technology Development, Research Outreach and Compliance and RTM Information Systems Support, in the support of the submission of this manuscript.

הערה: רכש רקמות חולה הוסמך באמצעות מועצה לביקורת מוסדית (IRB) -approved Biospecimen ופרוטוקולים קליניים (מספרי פרוטוקול 09-121 ו11-041, בהתאמה) בשעה Memorial Sloan Kettering Cancer Center. רכש .1 רקמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רכש של גידול / גרורות ראשוניות מטופל הערה: נכון להיום, בפרוטוקול זה בוצע על סוגים הוסרו בניתוח בלבלב, קיבה וסרטן השד, כמו גם, גרורות לימפומה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוון את צוות כירורגי כדי לספק את הדגימה על ידי מערכת צינור פנאומטי שליח או למחלקה לפתולוגיה בשקית דגימת פלסטיק דליפת הוכחה בחוזקה אטומה וסטרילי בתוך מיכל הוכחה לשפוך סטרילי. כוון את צוות כירורגי להעביר את הדגימה במדינה הטרי ללא פורמלין או מקבע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוון את עוזר פתולוג או פתולוג לקצור את הדגימה הטרי באמצעות טכניקה סטרילית, שincשימוש לרכב של כפפות ומכשירים סטריליים תחת הזרימה למינרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את זמן הקציר של דגימת הרכש, אשר נשמרה בקפדנות תחת 30 דקות מסיום ההליך הכירורגי. אם ניקח בחשבון את ההשפעות של איסכמיה הקרה, לא לוקח דגימות מדגימות שעברו כריתה עם זמן איסכמי קר של&gt; 30 דקות 18. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוון את אנשי פתולוגיה המחלקה כדי להסיר דגימת גידול ראשונית של כ 0.5 סנטימטר 3-1.0 סנטימטר 3 בזרימה למינרית לשמור על סביבת סטרילית. במידת האפשר, לבחור רקמת גידול מהפריפריה של נגע המדד, כדי למנוע נמק מרכזי (מוות של תאים) פרנק פוטנציאלי. הערה: רקמת נימקי עשויה להיות מוכרת באופן בוטה על ידי כל אחד מהקריטריונים הבאים: אובדן צבע או החיוורון של הרקמות; איבוד כוח שברקמות נמקית היא רכות ופריכה; תיחום ברור בין הרקמות נמקית ובת קיימא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כוון את pathologist או עוזר פתולוג כדי לספק רקמות היקפיים שהיא ב( קלפים שנזרקו כירורגית) עודפים לאחר דגימה מיידית של הגידול להערכת אבחון. הנח את הדגימה בצינור צנטריפוגות חרוטי 15 מ&quot;ל סטרילי המכיל כ 5 מ&quot;ל של תקשורת המינימלית חיונית (MEM) המכילה אנטיביוטיקה (1% פניצילין וסטרפטומיצין). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם זמין (לדוגמא, בלוטות לימפה בבית השחי של זנב של דגימת כריתת שד), להשיג דגימת בלוטות לימפה קשורה בעליל חיובית באותו הגודל (0.5 סנטימטר 3-1.0 סנטימטר 3) ולהשוות לתגובת תרופה של גידול ראשוני. כמו דגימת הגידול הראשונית, למקם את הדגימה הקשורים הבלוטה לימפה בצינור צנטריפוגות חרוטי 15 מ&quot;ל סטרילי המכילה כ 5 מ&quot;ל של מינימום תקשורת חיונית (MEM) המכילה אנטיביוטיקה (1% פניצילין וסטרפטומיצין). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם גודל של היתרים כירורגית דגימה (לדוגמא, דגימת כריתת שד), להסיר (רחוקה מגידול ראשוני) דגימה של רקמה נורמלית (כלומר,parenchyma נורמלי צפוף / סיבי שד) ומקום בצינור צנטריפוגות חרוטי 15 מ&quot;ל סטרילי המכיל כ 5 מ&quot;ל של תקשורת המינימלית חיונית (MEM) המכילה אנטיביוטיקה 1% למטרות העברה בלבד. בעקבות העברה למתקני המעבדה, להעביר את הדגימה &#39;הנורמלית&#39; להקפאת cryovial, &quot;הצמד&quot; וחנות במקפיא -80 מעלות צלזיוס לניתוחים מולקולריים עתיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את כל הדגימות על קרח רטוב, ומייד להעביר למרחב המעבדה לחתך רקמה הטרי ex vivo. אל סעיף הדגימה הנורמלית אלא לאחסן במקפיא -80 מעלות צלזיוס לניתוחים מולקולריים עתיד. להעביר חלק מהגידול הראשוני וגרורות קשורות להקפאת cryovial, &quot;הצמד&quot; וחנות במקפיא -80 מעלות צלזיוס לניתוחים מולקולריים עתיד. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רכש של רקמה ממחקרים קליניים (למשל, ביופסיות מחט ליבה אופציונלית (CNB)) הערה: אנו משיגים רקמות גידול מחוליםנרשם על פרוטוקולים קליניים שנותנים את הסכמתם לעבור CNB של גרורות סרטנית נגישות לפני התחלת טיפול. CNBs, עד היום, בוצעו על חולים עם שד, לימפומה האזור שולית, לימפומה תא מעטפת, paraganglioma גרורתי, צוואר רחם (תאי קשקש) וסרטן השחלות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כ 5 מ&quot;ל של תקשורת המינימלית חיונית (MEM) המכילה אנטיביוטיקה (1% פניצילין וסטרפטומיצין) יש אנשים קליניים מהתערבותית רדיולוגיה או מחלקה רלוונטית לבצע ביופסיה מחט ליבת טיפול מראש ומניחים את הדגימה ב15 מ&quot;ל צינור צנטריפוגות חרוטי סטרילית המכילים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את דגימת הביופסיה על קרח רטוב, ומייד להעביר למרחב המעבדה לחתך רקמה הטרי ex vivo. </li></ol></li></ol> 2 הכנת חומרים להגדרות חתך וVibratome <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת חומרים לחתך <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע פתרון agarose 4% על ידי הוספת 4 גרם של האגאעלה לשל PBS 100 מ&quot;ל. החיטוי (הגדרות מחזור: נוזל, 121 מעלות צלזיוס, 30 דקות, 15 ק&quot;ג לסנטימטר רבוע) הפתרון לפני השימוש ראשון. לשימושים שלאחר מכן, הנח את agarose 4% במיקרוגל לנזל (חום גבוה במשך 30 מרווחי שניות) לפני כל שימוש ולקרר כראוי ל~ 25 ° C (כלומר, חם למגע) מודעת כי agarose מתמצק ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש agarose 4% כאמצעי תקשורת רקמות הטבעה שאינה קבוע. כאשר agarose 4% יתקרר, והוא עדיין במצב נוזלי, עם מלקחיים סטריליות למקם את דגימת הרקמה בעובש הטבעה ויוצקים בagarose 4%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את דגימת הרקמה הקרובה (~ מרחק 2 מ&quot;מ), אך לא באופן ישיר על הקיר של עובש הטבעת משטח חיתוך. Agarose 4% יתחיל לגבש במהירות, ולכן כראוי למקם את דגימת הרקמה במהירות. במהלך חתך, לשמור agarose 4% באמבט המים C ° 55 לשמור בפתרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצלחת 24 גם לניתוח סעיף, להוסיף 1 מ&quot;ל of מדיה מלאה (כלומר, אנטיביוטיקה סרום + 1% MEM + 10% שור עוברי) זה טוב. שמור את צלחת 24 גם ב RT (~ 25 ° C) בכל משך הזמן של חתך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת הגדרות Vibratome <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות microtome הרוטט, להגדיר את המהירות שבה להב גישות הדגימה [0 (0.00 מ&quot;מ / השנייה) ל10 (2.5 מ&quot;מ / שנייה)] ואת התדירות של (Hz 0) להב [0 עד 10 (100 הרץ) ]. התאם את ההגדרות בהתאם למרקם של הרקמה (כלומר, צפיפות / מוצקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגידול שד ראשוני של קרצינומה ductal פולשנית, להתאים את הגדרות ל6 ו -3, מהירות ותדירות בהתאמה. לרקמת גידול פחות צפופה / חברה, להקטין את המהירות ולהגדיל את התדירות בהתאם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את עובי הסעיף בגבולות המכשיר (1-999 מיקרומטר). לניתוחים אלו, להגדיר את עובי הסעיף ב200 מיקרומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר הדגימה מוטבע agarose באמצעות שכבה דקה של דבק נוזלי על tha דיסק הדגימהt הוא טבל במאגר של תקשורת, כי הוא עטוף בקרח רטוב. </li></ol></li></ol> .3 רקמות חתך, טיפול וניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את החלקים שנחתך בדייקנות מייד עם חתך באמצעות מלקחיים ומקום סטרילי בצלחת רב גם עם 1 מ&quot;ל של מדיה מלאה. כאשר חלקים מספיקים נרכשים לתגובה וניתוחים גומלים, למקם את הצלחת רב גם לתגובה לטיפול בתרבית רקמת חממה נקבעה בתנאי culturing הרקמה סטנדרטיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את סעיפי שליטה מרובים שbookend הסעיפים שטופלו במאמץ כדי לאשר תגובה תלוית מינון בניגוד לממצאים בתרבית. לבצע רקמת חתך במהירות (~ 30 - 40 דקות), גם בתוך כל השפעות מזיקות של זמן איסכמי הקר (~ 2 - 4 שעות) 18. בצע טיפול בחלקים רק לאחר תקופת הסתגלות לשעה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תקופת הסתגלות 1 שעות, להוסיף הגדלת מינון (רלוונטי טיפולי; <em.&gt; למשל, 0 - 10 מיקרומטר ריכוזים) של תרופה לסעיפים והבית בתנאי תרבית רקמה סטנדרטית לתקופת הטיפול. לצורך המחקר, השתמש 24 ו / או 48 תקופות הערכת שעות. עם זאת, סעיפי רקמות שליטה (רכב בלבד) יישארו קיימא, כפי שנבדקו במחקר זה, לתקופות עד וכוללים תקופות הערכה 96 שעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות טיפול, להסיר את כל הסעיפים בתנאים סטריליים ופורמלין לתקן על ידי הצבת קטע הרקמה בצינור המכיל גם 10% פורמלין ומקום שנאגרו ב RT O / N או בצינור המכיל 4% paraformaldehyde (לדלל paraformaldehyde 16% מבקבוקון עם PBS לריכוז סופי של 4%) ומקום בRT עבור שעה 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתקן סעיפי רקמות גדולים יותר (למשל., ~ 6 מ&quot;מ x 4 מ&quot;מ) 200 מיקרומטר עבה ב10% O נאגר פורמלין / N ב RT. לתקן חלקים קטנים יותר (לדוגמא., 1 מ&quot;מ x 1 מ&quot;מ) 200 מיקרומטר עבה בparaformaldehyde 4% עבור שעה 2 ב RT. הערה: לחדירה יעילה של מקבע את עוצמת הקול של fixative יש 20x הנפח של רקמה. בהתחשב בכך שתוצאות פרוטוקול זה בגדלים קטנים מאוד רקמות (לדוגמא, 6 מ&quot;מ 3 רקמה = 6 μl נפח), להבטחת שימוש קיבעון הנכון 1 מ&quot;ל של מקבע לכל גדלי הרקמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות קיבעון יש לי דגימות רקמת פרפין מוטבעות על ידי אנשי המחלקה לפתולוגיה. סעיף דגימה בלוקים פרפין על גבי שקופיות טעונות להיות hematoxylin וeosin מוכתם והעריך immunohistochemically (למשל, אפופטוזיס). </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Abercrombie, M., Ambrose, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interference+Microscope+Studies+of+Cell+Contacts+in+Tissue+Culture.">Interference Microscope Studies of Cell Contacts in Tissue Culture.</a> Experimental Cell Research. 15 (58), 332-345 (1958).</li><li>Coriell, L. L., McAllister, R. M., Wagner, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+for+Determining+Malignancy+in+Tissue-Culture+Cell+Lines+in+the+Albino+Rat.">Criteria for Determining Malignancy in Tissue-Culture Cell Lines in the Albino Rat.</a> New York Academy of Science. 5, 351-355 (1957).</li><li>Paul, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Cancer+Cell+in+Vitro:+A+Review.">The Cancer Cell in Vitro: A Review.</a> Cancer Research. 22, 431-440 (1962).</li><li>Dean, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+response+to+CDK4/6+inhibition+in+breast+cancer+defined+by+ex+vivo+analysis+of+human+tumors.">Therapeutic response to CDK4/6 inhibition in breast cancer defined by ex vivo analysis of human tumors.</a> Cell Cycle. 11 (14), 2756-2761 (2012).</li><li>Bray, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bcl-2+Modulation+to+Activate+Apoptosis+in+Prostate+Cancer.">Bcl-2 Modulation to Activate Apoptosis in Prostate Cancer.</a> Molecular Cancer Research. 7 (9), 1487-1496 (2009).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Nakasone, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Tumor-Stroma+Interactions+during+Chemotherapy+Reveals+Contributions+of+the+Microenvironment+to+Resistance.">Imaging Tumor-Stroma Interactions during Chemotherapy Reveals Contributions of the Microenvironment to Resistance.</a> Cancer Cell. 21, 488-503 (1016).</li><li>Shi, Y., Hogue, J., Dixit, D., Koh, J., Olson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+genetic+studies+of+isolated+cells+from+parathyroid+tumors+reveal+the+complex+pathogenesis+of+parathyroid+neoplasia.">Functional and genetic studies of isolated cells from parathyroid tumors reveal the complex pathogenesis of parathyroid neoplasia.</a> PNAS. 111 (8), 3092-3097 (2014).</li><li>Vidal, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+cancer+stem+cells+from+human+prostate+cancer+samples.">Isolation of cancer stem cells from human prostate cancer samples.</a> J. Vis. Exp. (85), e51332 (2014).</li><li>Wanping, X., Neckers, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Molecular+Chaperone+Heat+Shock+Protein+90+Provides+a+Multifaceted+Effect+on+Diverse+Cell+Signaling+of+Cancer+Cells.">Targeting the Molecular Chaperone Heat Shock Protein 90 Provides a Multifaceted Effect on Diverse Cell Signaling of Cancer Cells.</a> Clinical Cancer Research. 13, 1625-1629 (2007).</li><li>Moulick, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affinity-based+proteomics+reveal+cancer-specific+networks+coordinated+by+Hsp90.">Affinity-based proteomics reveal cancer-specific networks coordinated by Hsp90.</a> Nature Chemical Biology. 7 (11), 818-826 (1038).</li><li>Alpaugh, M. L., Tomlinson, J. S., Ye, Y., Barsky, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+sialyl-Lewis(x/a)+underexpression+and+E-cadherin+overexpression+in+the+lymphovascular+embolus+of+inflammatory+breast+cancer.">Relationship of sialyl-Lewis(x/a) underexpression and E-cadherin overexpression in the lymphovascular embolus of inflammatory breast cancer.</a> American Journal of Pathology. 161 (2), 619-628 (2002).</li><li>Chu, K., Boley, K. M., Moraes, R., Barsky, S. H., Robertson, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+paradox+of+E-cadherin:+role+in+response+to+hypoxia+in+the+tumor+microenvironment+and+regulation+of+energy+metabolism.">The paradox of E-cadherin: role in response to hypoxia in the tumor microenvironment and regulation of energy metabolism.</a> Oncotarget. 4 (3), 446-462 (2013).</li><li>Vaira, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+model+of+organotypic+culture+for+pharmacodynamic+profiling+of+human+tumors.">Preclinical model of organotypic culture for pharmacodynamic profiling of human tumors.</a> PNAS. 107 (18), 8352-8356 (2010).</li><li>Centenera, M. M., Raj, G. V., Knudsen, K. E., Tilley, W. D., Butler, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+human+prostate+tissue+and+drug+development.">Ex vivo culture of human prostate tissue and drug development.</a> Nature Reviews Urology. 10, 483-487 (2013).</li><li>Jhaveri, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+protein+90+inhibitors+in+the+treatment+of+cancer:+current+status+and+future+directions.">Heat shock protein 90 inhibitors in the treatment of cancer: current status and future directions.</a> Expert Opinion on Investigational Drugs. 5, 611-628 (2014).</li><li>Gerecitano, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+124-PU-H71PET+imaging+to+predict+intratumoral+concentration+in+patients+on+a+phase+I+trial+of+PU-H71.">Using 124-PU-H71PET imaging to predict intratumoral concentration in patients on a phase I trial of PU-H71.</a> Journal of Clinical Oncology. 31, 11076-11 (2013).</li><li>Yildiz-Aktas, I., Dabbs, D. J., Bhargava, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+cold+ischemic+time+on+the+immunohistochemical+evaluation+of+estrogen+receptor,+progesterone+receptor,+and+HER2+expression+in+invasive+breast+carcinoma.">The effect of cold ischemic time on the immunohistochemical evaluation of estrogen receptor, progesterone receptor, and HER2 expression in invasive breast carcinoma.</a> Modern Pathology. 25, 1098-1105 (2012).</li></ol>

No conflicts of interest disclosed.

ביולוגים הסרטן מתמודדים עם אתגרים משמעותיים כאשר מנסים לפתח אסטרטגיות טיפוליות יעילות. בדיקת תרופות בפיתוח בשורות תאי הסרטן שהוקמו לא יכולה לשקף באופן מדויק בתגובה vivo ובניסויי vivo על המודלים PDX הן עבודה אינטנסיבית ויקר מאוד. לאור אמור לעיל, היישום של טכניקות vi...

פיתוח תרופות לסרטן יעילים הוכיח להיות מאוד מאתגר. קווי סרטן תאים וexplants גידול - כמו גם xenografts היו בשימוש במחקר סרטן ליותר ממחצית המאה 1,2,3. עד כה, הניתוח המולקולרי של רגישות לסמים והתנגדות בשתי שורות תאי הסרטן הוקמו וxenografts המופק מחולה (PDX) הוא הכרחי. עם זאת, הבדיקה של תרכובות בשורות תאי הסרטן שהוקמו לא לעתים קרובות חזויה של יעילות in vivo, ומקביל במחקרי vivo בבעלי חיים, במיוחד בדגמי PDX, זה מאוד יקר וגוזל זמן. המגבלות של מערכות מודל אלה, כלומר חוסר היכולת להודיע ​​על ההשפעה של microenvironment הילידים בהתקדמות גידול ותגובה לאסטרטגיות טיפוליות, הובילו את תחום המחקר לפיתוח שיטות נוספות כדי לשבח ניתוחים אלו. של אחרונים, תשומת לב מוגברת משלמת לכיוון ניתוח vivo לשעבר של קיבת חולהאו explants 4, 5 בשל ההבנה הגדולה יותר שתגובה לטיפול בסרטן אינה בלעדית להרכב המולקולרי הגלום של תאי סרטן, אלא מושפעת במידה רבה על ידי מייקרו-סביבת התאים הסרטניים 6, 7 תכונה שלא יכול להיות סכם על ידי שיטות culturing מסורתיות ו / או PDX. ניתוח Ex vivo בהקשר הנ&quot;ל (כלומר., השפעה של microenvironment תאים הסרטני המקיף הסמוך) מרמזת הערכת סעיפים גידול / גרורות עיקריות קיימא, ולא ניתוח vivo לשעבר של בידודים סלולריים 8, 9. אנו מדווחים כאן על טכניקת vivo לשעבר (כלומר., קטעים שנחתך בדייקנות טריות רקמה) של שני גידולים הראשוניים המטופל וגרורות קשורות (כלומר, בלוטות לימפה) שנאמנות מודיעה על תגובה (IC50), השפעות מחוץ היעד ומאפשר מולקולריים ניתוח של מנגנוני התנגדות ומשוב. בנוסף, ניתוח מתאם של therapeרגישות / התנגדות utic לעומת פרופיל ביטוי סמן ביולוגי והגנטי יכולה להתבצע במאמץ לזהות חולי סיכוי גבוה יותר להגיב לתרופה הניסיונית של עניין (כלומר., תגובת סמים גבוהה תואמת מטופל עם פרופיל ביולוגי מסוים). יישום של טכניקת vivo לשעבר והערכה באופנה רב פרמטר הוא תנועה לכיוון בחירת מטופלים ושיפור כללי של תוצאות קליניות. Ex vivo ניתוח תגובה לטיפול יכול להיות כלי סטנדרטי בפיתוח הקליני ופרה קליני של תרופות לסרטן והוא חזה כצעד לקראת גישת רפואה מותאמת אישית באסטרטגיות פיתוח טיפוליות.

<table><tbody><tr><td>Vibratome Leica VT1000s</td><td>Leica</td><td>14047235613</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure agarose</td><td>Invitrogen</td><td>16500500</td><td>Prepare 4% and 6% before use</td></tr><tr><td>Injector blade</td><td>Ted Pella</td><td>121-4</td><td></td></tr><tr><td>MEM with Penicillin&amp;nbsp; + Streptomycin</td><td>Media Core Facilities (MSKCC)</td><td></td><td>The media is prepared at Memorial Sloan Kettering Cancer Center&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Scalpel no. 10</td><td>Thermo Scientific</td><td>31-200-32</td><td></td></tr><tr><td>Disposable forceps</td><td>Cole-Parmer</td><td>84011182</td><td></td></tr><tr><td>Embedding mold</td><td>Electron Microscopy Science</td><td>70181</td><td></td></tr><tr><td>FBS (heat inactivated)</td><td>Gemini</td><td>100106</td><td></td></tr><tr><td>24 well plates</td><td>Corning</td><td>3524</td><td></td></tr><tr><td>Formalin (10%)</td><td>Sigma Diagnostics</td><td>SDHT501128&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>16% Formaldehyde solution</td><td>Thermo Scientific</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>Embedding microsettes</td><td>Simport</td><td>M503-2</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol (70%)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A405P-4</td><td></td></tr><tr><td>Waterbath</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-462-2SQ</td><td></td></tr><tr><td>Microwave</td><td>General Electric</td><td>ModelJES2051DNBB</td><td></td></tr><tr><td>Adhesive (Ethyl Cyanoacrylate)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E1505-5G</td><td></td></tr><tr><td>10 mm dishes</td><td>BD Falcon</td><td>353003</td><td></td></tr><tr><td>15 ml tubes</td><td>BD Falcon</td><td>352096</td><td></td></tr></tbody></table>

ex vivo treatment response of primary tumors and/or associated metastases for preclinical and clinical development of therapeutics

The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both direct and rapid analysis of therapeutic sensitivity and resistance. However, recent evidence suggests that therapeutic response is not exclusive to the inherent molecular composition of cancer cells but rather is greatly influenced by the tumor cell microenvironment, a feature that cannot be recapitulated by traditional culturing methods. Even implementation of tumor xenografts, though providing a wealth of information on drug delivery/efficacy, cannot capture the tumor cell/microenvironment crosstalk (i.e., soluble factors) that occurs within human tumors and greatly impacts tumor response. To this extent, we have developed an ex vivo (fresh tissue sectioning) technique which allows for the direct assessment of treatment response for preclinical and clinical therapeutics development. This technique maintains tissue integrity and cellular architecture within the tumor cell/microenvironment context throughout treatment response providing a more precise means to assess drug efficacy.

במחקר זה, טכניקת vivo לשעבר הייתה בשימוש בניתוח מתאם של רגישות / התנגדות טיפולית של מעכב חלבון הלם חום 90 (Hsp90i). בהערכה פרה קלינית של Hsp90i זה, גידול הראשוני בסרטן השד, ER + קרצינומה ductal פולשנית (IDC), וגרורות בלוטה לימפה קשורות נותחו vivo לשעבר לתגובה לטיפול &#160;...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics at JoVE.com

Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

קווים הוקמו סרטן התאים וxenografts היו עמוד התווך של מחקר הסרטן בעשורים האחרונים. עם זאת, הראיות האחרונות עולה כי תגובה לטיפול מושפעת במידה רבה על ידי מייקרו-סביבת התאים הסרטניים. לכן, פיתחנו ניתוח vivo לשעבר של דגימות גידול ראשוניות למטרות פיתוח תרופות.

Ex Vivo טיפול תגובה של גידולים ראשוניים ו / או הקשורים גרורות לפרה קלינית וקליני של Therapeutics

The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both ...

ex-vivo-treatment-response-primary-tumors-andor-associated-metastases

Research

JoVE Journal

Medicine

Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

14.7K Views.  Memorial Sloan Kettering Cancer Center.  קווים הוקמו סרטן התאים וxenografts היו עמוד התווך של מחקר הסרטן בעשורים האחרונים. עם זאת, הראיות האחרונות עולה כי תגובה לטיפול מושפעת במידה רבה על ידי מייקרו-סביבת התאים הסרטניים. לכן, פיתחנו ניתוח vivo לשעבר של דגימות גידול ראשוניות למטרות פ...

Video: Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional co-culture systems are frequently used to explicate tumor-stroma interactions, including their role in drug responses. However, many of the interactions that occur in vivo in the intact microenvironment cannot be completely replicated in these in vitro settings. Thus, direct visualization of these processes in real-time has become an important tool in understanding tumor responses to therapies and identifying the interactions between cancer cells and the stroma that can influence these responses. Here we provide a method for using spinning disk confocal microscopy of live, anesthetized mice to directly observe drug distribution, cancer cell responses and changes in tumor-stroma interactions following administration of systemic therapy in breast cancer models. We describe procedures for labeling different tumor components, treatment of animals for observing therapeutic responses, and the surgical procedure for exposing tumor tissues for imaging up to 40 hours. The results obtained from this protocol are time-lapse movies, in which such processes as drug infiltration, cancer cell death and stromal cell migration can be evaluated using image analysis software.

We describe a method for imaging response to anti-cancer treatment in vivo and at single cell resolution.

חי הדמיה של תגובות סמים בmicroenvironment הגידול במודלים עכבריים של סרטן השד

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional ...

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

In vivo models of pancreatic cancer provide invaluable tools for studying disease dynamics, immune infiltration and new therapeutic strategies. The orthotopic murine model can be performed on large cohorts of immunocompetent mice simultaneously, is relatively inexpensive and preserves the cognate tissue microenvironment. The quantification of T cell infiltration and cytotoxic activity within orthotopic tumors provides a useful indicator of an antitumoral response.
This protocol describes the methodology for surgical generation of orthotopic pancreatic tumors by injection of a low number of syngeneic tumor cells resuspended in 5 &#181;L basement membrane directly into the pancreas. Mice bearing orthotopic tumors take approximately 30 days to reach endpoint, at which point tumors can be harvested and processed for characterization of tumor-infiltrating T cell activity. Rapid enzymatic digestion using collagenase and DNase allows a single-cell suspension to be extracted from tumors. The viability and cell surface markers of immune cells extracted from the tumor are preserved; therefore, it is appropriate for multiple downstream applications, including flow-assisted cell sorting of immune cells for culture or RNA extraction, flow cytometry analysis of immune cell populations. Here, we describe the ex vivo stimulation of T cell populations for intracellular cytokine quantification (IFN&#947; and TNF&#945;) and degranulation activity (CD107a) as a measure of overall cytotoxicity. Whole-tumor digests were stimulated with phorbol myristate acetate and ionomycin for 5 h, in the presence of anti-CD107a antibody in order to upregulate cytokine production and degranulation. The addition of brefeldin A and monensin for the final 4 h was performed to block extracellular transport and maximize cytokine detection. Extra- and intra-cellular staining of cells was then performed for flow cytometry analysis, where the proportion of IFN&#947;+, TNF&#945;+ and CD107a+ CD4+ and CD8+ T cells was quantified.
This method provides a starting base to perform comprehensive analysis of the tumor microenvironment.

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

This protocol describes the surgical generation of orthotopic pancreatic tumors and the rapid digestion of freshly isolated murine pancreatic tumors. Following digestion, viable immune cell populations can be used for further downstream analysis, including ex vivo stimulation of T cells for intracellular cytokine detection by flow cytometry.

הדור של הלבלב אורתוטואט גידולים ואפיון Vivo Ex של תאים הסתננות של הגידול תא T

In vivo models of pancreatic cancer provide invaluable tools for studying disease dynamics, immune infiltration and new therapeutic strategies. The ...

Cancer Research

Testing Targeted Therapies in Cancer using Structural DNA Alteration Analysis and Patient-Derived Xenografts

We present here an integrative approach for testing efficacy of targeted therapies that combines the next generation sequencing technolo-gies, therapeutic target analyses and drug response monitoring using patient derived xenografts (PDX). This strategy was validated using ovarian tumors as an example. The mate-pair next generation sequencing (MPseq) protocol was used to identify structural alterations and followed by analysis of potentially targetable alterations. Human tumors grown in immunocompromised mice were treated with drugs selected based on the genomic analyses. Results demonstrated a good correlation between the predicted and the observed responses in the PDX model. The presented approach can be used to test the efficacy of combination treatments and aid personalized treatment for patients with recurrent cancer, specifically in cases when standard therapy fails and there is a need to use drugs off label.

Here we present a protocol to test the efficacy of targeted therapies selected based on the genomic makeup of a tumor. The protocol describes identification and validation of structural DNA rearrangements, engraftment of patients&#8217; tumors into mice and testing responses to corresponding drugs.

בדיקת טיפולים ייעודיים בסרטן באמצעות ניתוח שינוי DNA מבנית והמטופל נגזר Xenografts

We present here an integrative approach for testing efficacy of targeted therapies that combines the next generation sequencing technolo-gies, therapeutic ...

Combined Use of Tail Vein Metastasis Assays and Real-Time In Vivo Imaging to Quantify Breast Cancer Metastatic Colonization and Burden in the Lungs

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification and testing of novel therapeutic targets that will facilitate the development of better treatments for metastatic disease requires preclinical in vivo models. Demonstrated here is a syngeneic mouse model for assaying breast cancer metastatic colonization and subsequent growth. Metastatic cancer cells are stably transduced with viral vectors encoding firefly luciferase and ZsGreen proteins. Candidate genes are then stably manipulated in luciferase/ZsGreen-expressing cancer cells and then the cells are injected into mice via the lateral tail vein to assay metastatic colonization and growth. An in vivo imaging device is then used to measure the bioluminescence or fluorescence of the tumor cells in the living animals to quantify changes in metastatic burden over time. The expression of the fluorescent protein allows the number and size of metastases in the lungs to be quantified at the end of the experiment without the need for sectioning or histological staining. This approach offers a relatively quick and easy way to test the role of candidate genes in metastatic colonization and growth, and provides a great deal more information than traditional tail vein metastasis assays. Using this approach, we show that simultaneous knockdown of Yes associated protein (YAP) and transcriptional co-activator with a PDZ-binding motif (TAZ) in breast cancer cells leads to reduced metastatic burden in the lungs and that this reduced burden is the result of significantly impaired metastatic colonization and reduced growth of metastases.

The described approach combines experimental tail vein metastasis assays with in vivo live animal imaging to allow real-time monitoring of breast cancer metastasis formation and growth in addition to the quantification of metastasis number and size in the lungs.

שימוש משולב של הזנב וריד גרורה Assays ובזמן אמת ב Vivo הדמיה כדי לכמת מושבת סרטן השד ונטל בריאות

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification ...

Measuring Real-time Drug Response in Organotypic Tumor Tissue Slices

Tumor tissues are composed of cancerous cells, infiltrated immune cells, endothelial cells, fibroblasts, and extracellular matrix. This complex milieu constitutes the tumor microenvironment (TME) and can modulate response to therapy in vivo or drug response ex vivo. Conventional cancer drug discovery screens are carried out on cells cultured in a monolayer, a system critically lacking the influence of TME. Thus, experimental systems that integrate sensitive and high-throughput assays with physiological TME will strengthen the preclinical drug discovery process. Here, we introduce ex vivo tumor tissue slice culture as a platform for medium-high-throughput drug screening. Organotypic tissue slice culture constitutes precisely-cut, thin tumor sections that are maintained with the support of a porous membrane in a liquid-air interface. In this protocol, we describe the preparation and maintenance of tissue slices prepared from mouse tumors and tumors from patient-derived xenograft (PDX) models. To assess changes in tissue viability in response to drug treatment, we leveraged a biocompatible luminescence-based viability assay that enables real-time, rapid, and sensitive measurement of viable cells in the tissue. Using this platform, we evaluated dose-dependent responses of tissue slices to the multi-kinase inhibitor, staurosporine, and cytotoxic agent, doxorubicin. Further, we demonstrate the application of tissue slices for ex vivo pharmacology by screening 17 clinical and preclinical drugs on tissue slices prepared from a single PDX tumor. Our physiologically-relevant, highly-sensitive, and robust ex vivo screening platform will greatly strengthen preclinical oncology drug discovery and treatment decision making.&#160;

We introduce a protocol for measuring real-time drug response in organotypic tumor tissue slices. The experimental strategy outlined here provides a platform to carry out medium-high throughput drug screens on tissue slices derived from clinical or mouse tumors in ex vivo conditions.

מדידת תגובת התרופה בזמן אמת בפרוסות רקמה אורגנוטימית לגידול

Tumor tissues are composed of cancerous cells, infiltrated immune cells, endothelial cells, fibroblasts, and extracellular matrix. This complex milieu ...

Orthotopic Transplantation of Breast Tumors as Preclinical Models for Breast Cancer

Preclinical models that faithfully recapitulate tumor heterogeneity and therapeutic response are critical for translational breast cancer research. Immortalized cell lines are easy to grow and genetically modify to study molecular mechanisms, yet the selective pressure from cell culture often leads to genetic and epigenetic alterations over time. Patient-derived xenograft (PDX) models faithfully recapitulate the heterogeneity and drug response of human breast tumors. PDX models exhibit a relatively short latency after orthotopic transplantation that facilitates the investigation of breast tumor biology and drug response. The transplantable genetically engineered mouse models allow the study of breast tumor immunity. The current protocol describes the method to orthotopically transplant breast tumor fragments into the mammary fat pad followed by drug treatments. These preclinical models provide valuable approaches to investigate breast tumor biology, drug response, biomarker discovery and mechanisms of drug resistance.

Patient-derived xenograft (PDX) models and transplantable genetically engineered mouse models faithfully recapitulate human disease and are preferred models for basic and translational breast cancer research. Here, a method is described to orthotopically transplant breast tumor fragments into the mammary fat pad to study tumor biology and evaluate drug response.

השתלה אורתוטופית של גידולי שד כמודלים פרה-אקליניים לסרטן השד

Preclinical models that faithfully recapitulate tumor heterogeneity and therapeutic response are critical for translational breast cancer research. ...

Patient-Derived Tumor Explants As a "Live" Preclinical Platform for Predicting Drug Resistance in Patients

An understanding of drug resistance and the development of novel strategies to sensitize highly resistant cancers rely on the availability of suitable preclinical models that can accurately predict patient responses. One of the disadvantages of existing preclinical models is the inability to contextually preserve the human tumor microenvironment (TME) and accurately represent intratumoral heterogeneity, thus limiting the clinical translation of data. By contrast, by representing the culture of live fragments of human tumors, the patient-derived explant (PDE) platform allows drug responses to be examined in a three-dimensional (3D) context that mirrors the pathological and architectural features of the original tumors as closely as possible. Previous reports with PDEs have documented the ability of the platform to distinguish chemosensitive from chemoresistant tumors, and it has been shown that this segregation is predictive of patient responses to the same chemotherapies. Simultaneously, PDEs allow the opportunity to interrogate molecular, genetic, and histological features of tumors that predict drug responses, thereby identifying biomarkers for patient stratification as well as novel interventional approaches to sensitize resistant tumors. This paper reports PDE methodology in detail, from collection of patient samples through to endpoint analysis. It provides a detailed description of explant derivation and culture methods, highlighting bespoke conditions for particular tumors, where appropriate. For endpoint analysis, there is a focus on multiplexed immunofluorescence and multispectral imaging for the spatial profiling of key biomarkers within both tumoral and stromal regions. By combining these methods, it is possible to generate quantitative and qualitative drug response data that can be related to various clinicopathological parameters and thus potentially be used for biomarker identification.

This paper describes methods for the generation, drug treatment, and analysis of patient-derived explants for assessing tumor drug responses in a live, patient-relevant, preclinical model system.

גידול שמקורו במטופל explants כפלטפורמה פרה-אקלינית "חיה" לחיזוי עמידות לתרופות בחולים

An understanding of drug resistance and the development of novel strategies to sensitize highly resistant cancers rely on the availability of suitable ...

Profiling Sensitivity to Targeted Therapies in EGFR-Mutant NSCLC Patient-Derived Organoids

Novel 3D cancer organoid cultures derived from clinical patient specimens represent an important model system to evaluate intratumor heterogeneity and treatment response to targeted inhibitors in cancer. Pioneering work in gastrointestinal and pancreatic cancers has highlighted the promise of patient-derived organoids (PDOs) as a patient-proximate culture system, with an increasing number of models emerging. Similarly, work in other cancer types has focused on establishing organoid models and optimizing culture protocols. Notably, 3D cancer organoid models maintain the genetic complexity of original tumor specimens and thus translate tumor-derived sequencing data into treatment with genetically informed targeted therapies in an experimental setting. Further, PDOs might foster the evaluation of rational combination treatments to overcome resistance-associated adaptation of tumors in the future. The latter focuses on intense research efforts in non-small-cell lung cancer (NSCLC), as resistance development ultimately limits the treatment success of targeted inhibitors. An early assessment of therapeutically targetable mechanisms using NSCLC PDOs could help inform rational combination treatments. This manuscript describes a standardized protocol for the cell culture plate-based assessment of drug sensitivities to targeted inhibitors in NSCLC-derived 3D PDOs, with potential adaptability to combinational treatments and other treatment modalities.

This protocol describes a standardized evaluation of drug sensitivities to targeted signaling inhibitors in NSCLC patient-derived organoid models.

רגישות ליצירת פרופילים לטיפולים ממוקדים באורגנוידים שמקורם ב-EGFR-Mutant NSCLC

Novel 3D cancer organoid cultures derived from clinical patient specimens represent an important model system to evaluate intratumor heterogeneity and ...

Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex vivo drug screenings. However, current adenosine triphosphate (ATP)-based drug screening assays do not capture the complexity of a drug response (cytostatic or cytotoxic) and intratumor heterogeneity that has been shown to be retained in PDTOs due to a bulk readout. Live-cell imaging is a powerful tool to overcome this issue and visualize drug responses more in-depth. However, image analysis software is often not adapted to the three-dimensionality of PDTOs, requires fluorescent viability dyes, or is not compatible with a 384-well microplate format. This paper describes a semi-automated methodology to seed, treat, and image PDTOs in a high-throughput, 384-well format using conventional, widefield, live-cell imaging systems. In addition, we developed viability marker-free image analysis software to quantify growth rate-based drug response metrics that improve reproducibility and correct growth rate variations between different PDTO lines. Using the normalized drug response metric, which scores drug response based on the growth rate normalized to a positive and negative control condition, and a fluorescent cell death dye, cytotoxic and cytostatic drug responses can be easily distinguished, profoundly improving the classification of responders and non-responders. In addition, drug-response heterogeneity can by quantified from single-organoid drug response analysis to identify potential, resistant clones. Ultimately, this method aims to improve the prediction of clinical therapy response by capturing a multiparametric drug response signature, which includes kinetic growth arrest and cell death quantification.

This protocol describes a semi-automated method for medium- to high-throughput organoid drug screenings and microscope-agnostic, automated image analysis software to quantify and visualize multiparametric, single-organoid drug responses to capture intratumor heterogeneity.

בדיקת תרופות אורגנואידיות של גידולים רב-פרמטריים באמצעות הדמיית תאים חיים של Widefield לניתוח בתפזורת ואורגנואיד יחיד

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same pathway, are likely to fail. Emphasis must be placed upon the inhibition of pathways that are responsible for intrinsic and/or adaptive resistance to therapy. An active field of investigation is the development and testing of DNA repair inhibitors that promote the action of, and prevent resistance to, commonly used chemotherapy and radiotherapy. We used a novel protocol to evaluate the effectiveness of BRCA2 inhibition as a means to sensitize tumor cells to the DNA damaging drug cisplatin. Tumor cell metabolism (acidification and respiration) was monitored in real-time for a period of 72 hr to delineate treatment effectiveness on a minute by minute basis. In combination, we performed an assessment of metastatic frequency using a chicken embryo chorioallantoic membrane (CAM) model of extravasation and invasion. This protocol addresses some of the weaknesses of commonly used in vitro and in vivo methods to evaluate novel cancer therapy regimens. It can be used in addition to common methods such as cell proliferation assays, cell death assays, and in vivo murine xenograft studies, to more closely discriminate amongst candidate targets and agents, and select only the most promising candidates for further development.

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Here, real-time monitoring of tumor cell metabolism, combined with an in vivo chicken embryo chorio-allantoic membrane (CAM) model of metastasis, are used to evaluate novel anti-cancer targets/agents for their ability to sensitize tumor cells to DNA damaging chemotherapeutics.

הערכת היעילות של תרופות למלחמה בסרטן רגישות<em&gt; במבחנה</em&gt; ו<em&gt; In vivo</em

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same ...

Ex Vivo טיפול תגובה של גידולים ראשוניים ו / או הקשורים גרורות לפרה קלינית וקליני של Therapeutics

Summary

Explore More Videos

PLAYLIST