אנחנו אסירי תודה Eleut הרננדז לגידול בעלי חיים, גייב Gaidosh למומחיות מיקרוסקופיה, וKhue טראן וZhenyang זאו לעריכת וידאו. מחקר זה מומן על ידי העין הלאומית מעניק R01-EY022129 לEY022589 JLG ומענקי P30 לUCSD וEY014801 אל UM; איגוד הלב האמריקאי, קרן ג&#39;יימס ואסתר המלך, קרן התכנית חילופי סטודנטים לתואר השלישי של אוניברסיטת פודאן בית הספר למוסמכים (מס &#39;2,010,033), ומענק בלתי מוגבל ממחקר למניעת העיוורון, Inc.

נהלי כל החיה אושרו על ידי אוניברסיטת קליפורניה בסן דייגו ואוניברסיטת מיאמי טיפול בבעלי חיים מוסדי ועדות שימוש (IACUC) ובוצעו בהתאם להצהרת ארוו לשימוש בבעלי חיים ברפואת עיניים ומחקר חזותי. כל ריאגנטים והמכשירים המשמשים בניתוחים עקרים. 1. להרדים והכן את העכברוש לכירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני ההליך, חולדות מורדמים עם זריקת intraperitoneal של קטמין (60 מ&quot;ג / קילוגרם) ו xylazine (8 מ&quot;ג / קילוגרם) לפי משקל גוף. עומק נאות של הרדמה צריך להיקבע על ידי תגובה שלילית לגירוי קמצוץ הבוהן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהרדים, למשוך את הלשון קדימה כדי למנוע חנק ולהחיל סיכה משחה לשתי העיניים כדי למנוע התייבשות של הקרניות במהלך ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את האתרים כירורגית באמצעות גוזז שיער ולנגב את האזור שלוש פעמים עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לא וילוןהוא החיה בתוך שדה סטרילי. כפפות סטריליות ומכשירי ניתוח משמשים במהלך ניתוח הישרדות. לעקר מחדש הטיפים של מכשירים באמצעות מעקר חרוז חם בין בעלי החיים. </li></ol> 2. גישה ניתוחית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אינדוקציה פיון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנתור וריד הירך <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין ולנקות את האתר כירורגית. לגלח את הירך הפנימית הנכונה באמצעות גוזז שיער ולנגב את האזור שלוש פעמים כל אחד עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את צינורות. לחתוך באורך 40 ס&quot;מ של צינורות פוליאתילן (PE 10) עיקור באתנול 70%. לשטוף את צינורות עם מי מלח ולחבר אותו למזרק 1 מיליליטר המכיל פתרון נמדד מראש של 2% erythrosin B צבע (μl 1 / מ&quot;ג, מניב מינון של 20 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף). הר המזרק לתוך משאבת עירוי רגל-מתג מבוקר נקבעה לשיעור של 600 μl / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות סכין מס &#39;15, לעשות חתך אופקי קטן בהבסיס של ירך ימין. לגזור ולהפיץ את הקרום בתוך ולנקות את האזור עם צמר גפן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את השריר עם מלקחיים עד הסניף של וריד הירך הוא גלוי. נדן מקיף את העורק, וריד והעצב. לצבוט ולמשוך נדן זה כלפי מעלה עם מלקחיים (מלקחיים עדינים-קצה דומון), ולחתוך חתך קטן (2-4 מ&quot;מ הוא בדרך כלל מספיק) ליד הבסיס של הטריז בצורת המשולש עם מספריים באביב Vannas. להרחיב את החתך לפי צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את הווריד ועורק עם מקביל וו בוטה מיקרו-כירורגית לכיוון של הווריד. היזהר שלא לפגוע בסניפי הקרום ווריד העדינים. ואז, בעדינות להרים את הווריד ולהפריד אותו מרקמות חיבור הבסיסיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג תפר ניילון מחטים ולמקם אותו בסמוך לוריד הירך. השימוש במייקרו-כירורגית הוו, לרומם את הרוח ולהעביר את המלקחיים העדין-קצה מתחת לאזור דיסטלי. תפוס את הקצה אחד של התפר ולמשוך אותו מתחת לוָרִיד. לקשור את וריד דיסטלי בחוזקה. לעבור תפר שני באופן דומה תחת הווריד הפרוקסימלי ולעשות קשר רופף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בווריד ליד קשירת דיסטלי עם מספריים באביב Vannas. להרחיב את החור במידת הצורך עם המלקחיים בסדר-קצה. דם מסוים עשוי לדלוף דרך החתך. נקה את אזור הניתוח עם BSS הקר, סטרילי וצמר גפן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחזיק קיר הווריד בקצה החתך, קטטר הכלי עם צינורות-סמוק המלוחים מוכנים באמצעות בעל מחט. להדק את הקשר הפרוקסימלי מסביב לווריד והצינורות. לאחר מכן, לעגן את צינורות על ידי קשירתו לתפר דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את האיכות של הצנתור על ידי לחיצה על מתג הרגל להזריק מלוח, &lt;1 מיליליטר הוא נאות. ודא צינורות הוא בלא הפרעה ואין דליפות. באופן זמני לסגור את החתך עם תפרים כדי להגן על הצנתור ורקמות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשיפה של עצב הראייה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנהדואר האתר כירורגית ידי ניגוב אזור קדם-מגולח מעל עין שמאל שלוש פעמים כל אחד עם 10% תמיסת ניקוי providone-יוד ו -70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עושה חתך לאורך מ&quot;מ עור 2-3 מאחורי העין עם להב מס &#39;15. לצבוט ולהרים את רקמת חיבור עם מלקחיים משוננים, ולעשות חתך קטן עם מספריים באביב Vannas. חתך קטן זה בדרך כלל כ -5 מ&quot;מ אורך, אבל יכול להיות ארוך יותר כדי לספק חשיפה גדולה יותר למנתח בהכשרה. תמשיך לנתח בצורה בוטה ברקמת החיבור לאורך השפה מעולה של העצם מסלולית, לטפל כדי למנוע שיבוש כלי דם. נקה את אזור הניתוח עם צמר גפן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח כלפי מטה דרך הלחמית עד שריר rectus מעולה גלוי. לצבוט ולנתח דרך השריר; השריר ישוחרר ממעמקי המסלול. עכשיו, יכולות להיות מנוצלת רקמות הסובבות כדי לסייע בנסיגה והעלאה של העין על מנת להקל על הדמיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מִחָדָשׁבדרכי את קפל עור ורקמות חיבור רוחבי וכלפי מטה, ולהחזיק במקום עם תפר וhemostat. זה יהיה לסובב את העין קדימה והחוצה כדי לחשוף את הנדן המכיל שומן שמקיף את עצב הראייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות להכניס זוג מלקחיים חדים ולהרחיב במקביל לעצב הראייה להפריד את רקמות חיבור המקיפות את הנדן. אל תיגע בעצב הראייה עם הטיפים החדים של המלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אורך 5 מ&quot;מ של עצב הראייה ונדן סביב צריך עכשיו להיות גלוי. רשת של microvessels על פני השטח הנדן מקיפה את עצב הראייה. אלה יהיו ממוקדים במהלך הקרנת לייזר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרקה תוך ורידית של Erythrosin B וקרינת לייזר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש להרכיב משקפיים בטיחות בצבע כתומים בכל העת בעת הפעלת מכשיר הקרנת הלייזר כדי להגן על עצמך מאור הלייזר הירוק. הפעל את הלייזר, לפתוח את התריס ולהתאים את השיא וpowe הממוצעRS של הלייזר במידת צורך. סגור את התריס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את העכברוש במנגנון קרינת לייזר. כדי להבטיח מיקום נכון קרן, קרן מכוונת חלשה מופקת על ידי מרחבית סינון הלייזר דרך חור בקוטר 100 מיקרומטר נקדח בלהב התריס הסגור. -לחשוף מחדש את עצב הראייה עם זוג מלקחיים טיפ נאה, ולמקם את הקרן מכוונת על עצב הראייה intraorbital בין 3 מ&quot;מ ו 4 מ&quot;מ מאחורי ראש עצב הראייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק את הפתרון של 2% erythrosin B באמצעות הפעלה של משאבת העירוי. זה יכול לזרום לכמה שניות בזמן שהמנתח מוסיף טיפה קטנה של BSS כדי ללחלח את פני השטח של עצב הראייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא את המיקום של הקרן במטרה ולאחר מכן לחץ על הרגל-המתג ליזום הקרנה. מסנן בטיחות בצבע כתום, שהוסיף לנתיב האופטי של מיקרוסקופ, יהיה מייד אחרי שחולל פתיחת התריס לאחר עיכוב 1 שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכשיר את עצב הראייה ל9שניות 0 עם כוח שיא של 135mW והספק ממוצע של 18mW מיוצר על ידי מסוק קרן מסתובב ברץ 250 עם מחזור של 15% (זה ממזער אפקטים תרמיים). צהובה הקרינה, דמיין כתום בהיר דרך מסנן הבטיחות, תהיה נפלטת מפני השטח מעולה של עצב הראייה ודי בכך כדי להבטיח שהקרן irradiates העצב סימטרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ההקרנה, מסנן הבטיחות בצבע הכתום ייפתח באופן אוטומטי. Microhemorrhage ניתן לצפות בחלק ממקרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקל על המתיחה על שרירי העין נוספים ולהחזיר את העין למצב ניטראלי. לסגור את החתך עם תפרים שהופסקו. אז למשוך את הקטטר ולקשור את עורק הירך בחוזקה כדי למנוע דליפה; לסגור עם תפרים שהופסקו. החל משחה אנטיביוטית לשני החתכים. בדוק את קרקעית העין כדי לוודא את תקינות כלי הדם של וריד הרשתית המרכזי והעורק. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיוג מדרדרשל תאי הגנגליון ברשתית (RGCs) הערה:. על מנת להעריך הישרדות RGC, תיוג מדרדר עם fluorogold (FG) אמורים להסתיים שבוע לפני פיון. השיטה מתוארת בפירוט בפרוטוקול יופיטר 819 13. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בקצרה: להרדים את החיה עם קטמין (60 מ&quot;ג / קילוגרם) ו xylazine (8 מ&quot;ג / קילוגרם) ולגלח את הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח לשפשף את אתר החתך ולעשות חתך קו האמצע על הראש כדי לחשוף את הגולגולת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדוח חורים דו-צדדיים דרך הגולגולת (מ&quot;מ 2x2 O) 0.5 מ&quot;מ משני תפרי sagittal ורוחביים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לשאוב את תוכן המוחין שנמצאת מעל פני השטח הגבי של colliculus מעולה (SC) באמצעות משאבת ואקום. ואז, במקום פיסה קטנה של gelfoam הספוגה עם FG 4% על פני השטח של SC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את החתך עם תפרים ולטפל בבעלי החיים באמצעות טיפול לאחר ניתוח סטנדרטי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיפול שלאחר ניתוח והמתת חסד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר ניתוח, להציב חיה בכלוב נקי נפרד על גבי משטח מים הסירקולציה המחודשת המחומם עד שהחיה הוא התאוששה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משככי כאבים לאחר ניתוח (עצירות HCl, 0.01 מ&quot;ג / קילוגרם) צריכים להינתן פעמיים ביום במשך שלושה ימים רצופים כדי למזער אי נוחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברוש צריך להישמר בנפרד ונצפה עד שהם הצליחו לשמור על כיבו sternal ולהחזיר את התודעה מספיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סימני התאוששות ובריאות טובה מנוטרים יומיים במשך לפחות 5 ימים לאחר הניתוח, או עד להסרת תפרים וריפוי נאות של האתר כירורגית, מוקדם מבין השניים אחרונות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי החיים על ידי זלוף עם PFA 4% בנקודות זמן מדעי מתאימות לאחר הניתוח על פי עניין חקירה. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Wang, Y., Brown, D. P., Duan, Y., Kong, W., Watson, B. D., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+model+of+posterior+ischemic+optic+neuropathy..">A novel rodent model of posterior ischemic optic neuropathy..</a> JAMA Ophthalmology. 131, 194-204 (2013).</li><li>Rucker, J. C., Biousse, V., Newman, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+optic+neuropathies.">Ischemic optic neuropathies.</a> Curr Opin Neurol. 17, 27-35 (2004).</li><li>Hayreh, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Posterior+ischaemic+optic+neuropathy:+clinical+features,+pathogenesis,+and+management..">Posterior ischaemic optic neuropathy: clinical features, pathogenesis, and management..</a> Eye (Lond). 18, 1188-1206 (2004).</li><li>Hayreh, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter-Individual+Variation+in+Blood-Supply+of+the+Optic-Nerve+Head..">Inter-Individual Variation in Blood-Supply of the Optic-Nerve Head..</a> Doc Ophthalmol. 59, 217-246 (1985).</li><li>Jacobson, D. M., Vierkant, R. A., Belongia, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy+-+A+case-control+study+of+potential+risk+factors..">Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy - A case-control study of potential risk factors..</a> Arch Ophthalmol-Chic. 115, 1403-1407 (1997).</li><li>Kosmorsky, G., Straga, J., Knight, C., Dagirmanjian, A., Davis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+transcranial+Doppler+in+nonarteritic+ischemic+optic+neuropathy..">The role of transcranial Doppler in nonarteritic ischemic optic neuropathy..</a> Am J Ophthalmol. 126, 288-290 (1998).</li><li>Hayreh, S. S., Zimmerman, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-arteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy:+role+of+systemic+corticosteroid+therapy..">Non-arteritic anterior ischemic optic neuropathy: role of systemic corticosteroid therapy..</a> Graefe's archive for clinical and experimental ophthalmology. 246, 1029-1046 (2008).</li><li>Prado, R., Dietrich, W. D., Watson, B. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+Induced+Graded+Spinal-Cord+Infarction+-+Behavioral,+Electrophysiological,+and+Morphological+Correlates..">Photochemically Induced Graded Spinal-Cord Infarction - Behavioral, Electrophysiological, and Morphological Correlates..</a> J Neurosurg. 67, 745-753 (1987).</li><li>Dietrich, W. D., Busto, R., Watson, B. D., Scheinberg, P., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+infarction.+II.+Edema+and+blood-brain+barrier+disruption..">Photochemically induced cerebral infarction. II. Edema and blood-brain barrier disruption..</a> Acta Neuropathologica. 72, 326-334 (1987).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis..">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis..</a> Annals of Neurology. 17, 497-504 (1985).</li><li>Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+photochemically+induced+brain+ischemia+and+stroke..">Animal models of photochemically induced brain ischemia and stroke..</a> Cerebrovascular Disease - Pathophysiology, Diagnosis and Treatment. , 52-73 (1998).</li><li>Watson, B. D., Prado, R., Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+spinal+cord+injury+in+the+rat..">Photochemically induced spinal cord injury in the rat..</a> Brain Research. 367, 296-300 (1986).</li><li>Chiu, K., Lau, W. M., Yeung, S. C., Chang, R. C., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+labeling+of+retinal+ganglion+cells+by+application+of+fluoro-gold+on+the+surface+of+superior+colliculus..">Retrograde labeling of retinal ganglion cells by application of fluoro-gold on the surface of superior colliculus..</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2008).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Here we describe in detail a method for inducing PION in a rat model. The most critical part of the protocol is the exposure and irradiation of the optic nerve &#8211; to expose the nerve as long as possible while avoiding damage caused by the sharp fine tip forceps or from stretching. In rats, the ophthalmic artery enters the optic nerve &#8804;1 mm from the optic nerve head. Therefore, irradiation of the optic nerve 3-4 mm away from the optic nerve head should only result in ischemia of the capillaries feeding the nerv...

בחולים מעל גיל 50 שנים, נוירופתיה אופטית איסכמית (ION) הוא הסוג הנפוץ ביותר של אופטית החריף נוירופתיה 2. המצב יכול להציג כאחד משני תת-סוגים לפי מקור אספקה ​​ספציפית מושפעת דם והצגה קלינית: קדמי (AION) או אחורי (פיון) 3. בעוד פתוגנזה וכמובן של AION נחקרו רב 4-7, פיון שנשאר הבין היטב בשל השכיחות נמוכה, ההצגה משתנה, הקריטריונים שלה לא מוגדר אבחון וחוסר במודל חיה. יתר על כן, אין טיפולים הוכחו כדי למנוע או להפוך אובדן ראייה מAION או פיון ביעילות. לכן, מודל חיה לשחזור ואמין של פיון הוא בעל ערך רב ללמוד את תהליך המחלה in vivo ולבדוק משטרים טיפוליים חדשים לneuroprotection והתחדשות האקסון. Photochemically מושרה פגיעת איסכמית לנימי הדם הזעירה וכתוצאה מכך vasogבצקת enic ופקקת ביעילות יוצרים איסכמיה רקמות אזוריות 8-12. לאחר הזרקה למחזור הדם בכלי הדם, erythrosin צבע B רגיש מייצר חמצן תגובתי גופייה מולקולרית על הפעלה על ידי הקרנת לייזר של כלי יעד. חמצן הגופייה ישירות peroxidizes האנדותל של כלי הדם, מגרה את דבקות / הצטברות טסיות דם ומוביל להיווצרות אוטמת פקיק. נזק איסכמי הוא להתפשט לאזורים השכנים והחמיר עוד יותר על ידי דחיסת כלי דם עקב בצקת vasogenic. המטרה הכללית של פרוטוקול זה היא לגרום לphotochemically איסכמיה בעצב הראייה retrobulbar לשקף את הנזק שנגרם על ידי פיון. למיטב ידיעתנו, זהו המודל הראשון של פגיעת איסכמית בעצב הראייה האחורית 1. כמודל זה מייצר איסכמיה תוך הימנעות טראומה פיזית, התהליכים הפיסיולוגיים של נוירופתיה אופטי איסכמית אחורית הם טובים יותר חיקו ולמדו. כמו כן, מודל זה מציע פלטפורמה חדשנית להקרנה של תרופות מועמד לנוירופתיה אופטית ומחלה איסכמית של מערכת העצבים המרכזית אחרת. כאן, פרוטוקול מפורט לצנתור הירך וריד, חשיפת עצב ראייה, הזרקה תוך ורידית של Erythrosin B וקרינת לייזר במודל פיון עכברוש מתואר.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>532-nm Nd:YAG laser&#160;</td>
			<td>Laser glow</td>
			<td>LRS-532-KM-200-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beam chopper</td>
			<td>custom-made</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical shutter and corresponding shutter drive timer</td>
			<td>AAM Vincent Associates</td>
			<td>SD-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25-cm focal length spherical lens</td>
			<td>CVI/Mellles-Griot</td>
			<td>01 LPX 293</td>
			<td>plano-convexBK7 glass lens with HEBBARTM antireflection coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erythrosin B&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>190449</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorogold</td>
			<td>Fluorochrome,LLC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>CAH1203421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene tubing (PE10)</td>
			<td>BD Intramedic</td>
			<td>427400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 10 Blade</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>4-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>91150-20</td>
			<td>DUMONT #5 RUSTLESS NON-MAGNETIC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps with Teeth</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11153-10</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>18025-10&#160;</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas spring scissors</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>2-220&#160;</td>
			<td>JJECK Stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J488G</td>
			<td>7-0 suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hemostat</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>12075-12&#160;</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rat model of photochemically-induced posterior ischemic optic neuropathy

נוירופתיה האחורית איסכמי האופטי (פיון) היא מחלה הרסני ראייה בפרקטיקה קלינית. עם זאת, פתוגנזה שלה וההיסטוריה הטבעית נשארו הבינו היטב. לאחרונה, פיתחנו מודל אמין, לשחזור בבעלי חיים של פיון ובדק את השפעת הטיפול של גורמי neurotrophic מסוימים במודל זה 1. המטרה של הווידאו הזה היא להדגים המודל המושרה photochemically של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית, ולהעריך את השפעותיו עם תיוג מדרדר של תאי הגנגליון ברשתית. בעקבות חשיפה כירורגית של העצב האופטי האחורי, צבע photosensitizing, erythrosin B, מוזרק לוריד ועל פני השטח עצב הראייה קרן לייזר ממוקדת. האינטראקציה פוטו של erythrosin B והליזר בניזקי קרינת האנדותל של כלי הדם, מה שגרמו לחסימת כלי דם בתיווכו של פקקת טסיות דם ודחיסת בצקים. פגיעת איסכמית וכתוצאה מכך תשואות הדרגתית אך pronouncאד dieback תא הגנגליון ברשתית, בשל אובדן קלט אקסונים - מרוחק, הנגרמת על-פגיעה ותוצאה רלוונטית מבחינה קלינית. לפיכך, מודל זה מספק פלטפורמה חדשנית ללמוד קורס pathophysiologic של פיון, ויכול להיות מותאם יותר לבדיקת גישות טיפוליות לנוירופתיה אופטית כמו גם מחלות של מערכת העצבים המרכזית איסכמי אחרות.

פגיעת איסכמית וכתוצאה מכך נגרמת על ידי טכניקה זו מניבה מוות הדרגתי אך בולט של תאי הגנגליון ברשתית לאחר פציעת האקסון איסכמי. זוהי תוצאה רלוונטית קליני דומה לזה שנצפה במחלות של בני האדם. תיוג מדרדר FG משמש לכמת הישרדות RGC לאחר פיון. באותה השיטה מועסקת כדי לאמת יצירת מודל ...

Watch this Scientific Journal Video about Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy at JoVE.com

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

המטרה של פרוטוקול זה היא לגרום לפגיעת איסכמית photochemically לעצב הראייה האחורי בחולדה. מודל זה הוא קריטי ללימודים של הפתופיזיולוגיה של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית, וגישות טיפוליות לזה ונוירופתיה אופטית אחרת, כמו גם במחלות של מערכת העצבים המרכזית איסכמי אחרות.

מודל עכברוש של אחורי איסכמי אופטי נוירופתיה המושרית photochemically

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

rat-model-photochemically-induced-posterior-ischemic-optic

Research

JoVE Journal

Medicine

8.5K Views.  University of Miami Miller School of Medicine.  המטרה של פרוטוקול זה היא לגרום לפגיעת איסכמית photochemically לעצב הראייה האחורי בחולדה. מודל זה הוא קריטי ללימודים של הפתופיזיולוגיה של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית, וגישות טיפוליות לזה ונוירופתיה אופטית אחרת, כמו גם במחלות של מערכת העצבים ה...

Video: Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and affect the nutritional status and surgical outcomes. Study of the pathophysiological changes occurring in the liver and other organs is of importance. Various studies have been done in cholestatic rat models.
We used a reversible cholestatic rat model in our recent study looking at the role of methylprednisolone in the ischemia reperfusion injury. Various techniques for creation of a reversible cholestatic model have been described. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.
This model can be used in various studies, such as looking at the changes in nutritional, physiological, pathological, histological and immunological changes in the gastrointestinal tract. This model can also be used to see the effects of cholestasis and various therapeutic interventions on major hepatic surgeries.

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.

יצירתו של מודל הפיך עכברוש Cholestatic

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine their efficacy and safety.
Gene therapy using viral vectors is one of the most promising approaches for treating cardiac diseases. Viral delivery of various different genes by changing the carrier gene has immeasurable therapeutic potential.
In this video, the full process of an animal model of heart failure creation followed by gene transfer is presented using a swine model. First, myocardial infarction is created by occluding the proximal left anterior descending coronary artery. Heart remodeling results in chronic heart failure. Unique to our model is a fairly large scar which truly reflects patients with severe heart failure who require aggressive therapy for positive outcomes. After myocardial infarct creation and development of scar tissue, an intracoronary injection of virus is demonstrated with simultaneous nitroglycerine infusion. Our injection method provides simple and efficient gene transfer with enhanced gene expression. This combination of a myocardial infarct swine model with intracoronary virus delivery has proven to be a consistent and reproducible methodology, which helps not only to test the effect of individual gene, but also compare the efficacy of many genes as therapeutic candidates.

A method of gene transfer for the treatment of ischemic heart failure is described using a swine model of myocardial infarction. Our simple and reproducible method enables us to readily evaluate the efficacy of various gene transfers with a very simple and reproducible way.

Gene Transfer לאי ספיקת לב איסכמי במודל פרה

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work well in non-ischemic wounds may not work in human diabetic wounds because vasculopathy is one major factor that hinders healing of these wounds. We published an article in 2007 describing a rabbit ear ischemic wound model created by a minimally invasive surgical technique. Since then, we have further simplified the procedure for easier operation. On one ear, three small skin incisions were made on the vascular pedicles, 1-2 cm from the ear base. The central artery was ligated and cut along with the nerve. The whole cranial bundle was cut and ligated, leaving only the caudal branch intact. A circumferential subcutaneous tunnel was made through the incisions, to cut subcutaneous tissues, muscles, nerves, and small vessels. The other ear was used as a non-ischemic control. Four wounds were made on the ventral side of each ear. This technique produces 4 ischemic wounds and 4 non-ischemic wounds in one animal for paired comparisons. After surgery, the ischemic ear was cool and cyanotic, and showed reduced movement and a lack of pulse in the ear artery. Skin temperature of the ischemic ear was 1-10 &deg;C lower than that on the normal ear and this difference was maintained for more than one month. Ear tissue high-energy phosphate contents were lower in the ischemic ear than the control ear. Wound healing times were longer in the ischemic ear than in the non-ischemic ear when the same treatment was used. The technique has now been used on more than 80 rabbits in which 23 were diabetic (diabetes time ranging from 2 weeks to 2 years). No single rabbit has developed any surgical complications such as bleeding, infection, or rupture in the skin incisions. The model has many advantages, such as little skin disruption, longer ischemic time, and higher success rate, when compared to many other models. It can be safely used in animals with reduced resistance, and can also be modified to meet different testing requirements.

We have developed a minimally invasive technique to create a rabbit ischemic ear wound model by dividing the central artery and nerve and the cranial neurovascular bundle. A subcutaneous tunnel then cuts all subcutaneous tissues. This procedure causes minimal skin disruption and can be safely used in diabetic animals.

טכניקה פשוטה לייצור דגם פצע איסכמי

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in 20091, 2. Several models of cerebral ischemia have been developed to mimic the human condition of stroke. It has been suggested that up to 80% of all strokes result from ischemic damage in the middle cerebral artery (MCA) area3. In the early 1990s, endothelin-1 (ET-1) 4 was used to induce ischemia by applying it directly adjacent to the surface of the MCA after craniotomy. Later, this model was modified 5 by using a stereotaxic injection of ET-1 adjacent to the MCA to produce focal cerebral ischemia. The main advantages of this model include the ability to perform the procedure quickly, the ability to control artery constriction by altering the dose of ET-1 delivered, no need to manipulate the extracranial vessels supplying blood to the brain as well as gradual reperfusion rates that more closely mimics the reperfusion in humans5-7. On the other hand, the ET-1 model has disadvantages that include the need for a craniotomy, as well as higher variability in stroke volume8. This variability can be reduced with the use of laser Doppler flowmetry (LDF) to verify cerebral ischemia during ET-1 infusion. Factors that affect stroke variability include precision of infusion and the batch of the ET-1 used6. Another important consideration is that although reperfusion is a common occurrence in human stroke, the duration of occlusion for ET-1 induced MCAO may not closely mimic that of human stroke where many patients have partial reperfusion over a period of hours to days following occlusion9, 10. This protocol will describe in detail the ET-1 induced MCAO model for ischemic stroke in rats. It will also draw attention to special considerations and potential drawbacks throughout the procedure.

Several animal models of cerebral ischemia have been developed to simulate the human condition of stroke. This protocol describes the endothelin-1 (ET-1) induced middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke in rats. In addition, important considerations, advantages, and shortcomings of this model are discussed.

אנדותלין-1 דגם מושרה מזרח מוחות עורקים ספיגים לשבץ איסכמי עם הדרכת Flowmetry ליזר דופלר בעכברוש

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

The adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung pathologies, it is the smaller systemic vasculature that responds to a need for enhanced lung perfusion and shows robust neovascularization. Pulmonary vascular ischemia induced by pulmonary artery obstruction has been shown to result in rapid systemic arterial angiogenesis in man as well as in several animal models. Although the histologic assessment of the time course of bronchial artery proliferation in rats was carefully described by Weibel 1, mechanisms responsible for this organized growth of new vessels are not clear. We provide surgical details of inducing left pulmonary artery ischemia in the rat that leads to bronchial neovascularization. Quantification of the extent of angiogenesis presents an additional challenge due to the presence of the two vascular beds within the lung. Methods to determine functional angiogenesis based on labeled microsphere injections are provided.

The lung is perfused by both the systemic bronchial artery and pulmonary arteries. In most lung pathologies, it is the smaller systemic vasculature that shows robust neovascularization. Cessation of pulmonary blood flow promotes brisk bronchial angiogenesis. We provide surgical details of inducing left pulmonary artery ischemia that promotes bronchial neovascularization.

באנגיוגנזה ריאות עכברוש איסכמי

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the world&#8217;s 2.9 million neonatal deaths. Animal models of HIE have contributed to the understanding of the pathophysiology in HIE, and have highlighted the dynamic process that occur in brain injury due to perinatal asphyxia. Thus, animal studies have suggested a time-window for post-insult treatment strategies. Hypothermia has been tested as a treatment for HIE in pdiglet models and subsequently proven effective in clinical trials. Variations of the model have been applied in the study of adjunctive neuroprotective methods and piglet studies of xenon and melatonin have led to clinical phase I and II trials1,2. The piglet HIE model is further used for neonatal resuscitation- and hemodynamic studies as well as in investigations of cerebral hypoxia on a cellular level. However, it is a technically challenging model and variations in the protocol may result in either too mild or too severe brain injury. In this article, we demonstrate the technical procedures necessary for establishing a stable piglet model of neonatal HIE. First, the newborn piglet (&#60; 24 hr old, median weight 1500 g) is anesthetized, intubated, and monitored in a setup comparable to that found in a neonatal intensive care unit. Global hypoxia-ischemia is induced by lowering the inspiratory oxygen fraction to achieve global hypoxia, ischemia through hypotension and a flat trace amplitude integrated EEG (aEEG) indicative of cerebral hypoxia. Survival is promoted by adjusting oxygenation according to the aEEG response and blood pressure. Brain injury is quantified by histopathology and magnetic resonance imaging after 72 hr.

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

דגם חזרזיר של ילודים חוסר חמצן-איסכמי אנצפלופתיה

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and unrelieved pressure due to immobility. Animal models have been developed that attempt to mimic these conditions for the purpose of furthering our understanding of the complexity of chronic wounds. The model described herein is a rat ischemic skin flap model that permits a prolonged reduction of blood flow resulting in wounds that become ischemic and resemble a chronic wound phenotype (reduced vascularization, increased inflammation and delayed wound closure). It consists of a bipedicled dorsal flap with 2 ischemic wounds placed centrally and 2 non-ischemic wounds lateral to the flap as controls. A novel addition to this ischemic skin flap model is the placement of a silicone sheet beneath the flap that functions as a barrier and a splint to prevent revascularization and reduce contraction as the wounds heal. Despite the debate of using rats for wound healing studies due to their quite distinct anatomic and physiologic differences compared to humans (i.e., the presence of a panniculus carnosus muscle, short life-span, increased number of hair follicles, and their ability to heal infected wounds) the modifications employed in this model make it a valuable alternative to previously developed ischemic skin flap models.

The rat, due to its size, availability, and rather docile behavior, has been utilized as a research model for many years. The goal of this protocol is to utilize the rat as an ischemic skin wound healing model to provide valuable insight into the pathophysiology of chronic wounds.

הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their lifetime. NAION results in optic nerve edema, selective loss of the retinal ganglion cell neurons (RGCs) and atrophy of the optic nerve. A rodent model of NAION that expresses most NAION features and sequelae has been developed, which is applicable to both rats and mice. This model utilizes a focal laser application of 532 nm wavelength to illuminate a photoactive dye, Rose Bengal (RB), to cause capillary damage and leakage at the targeted anterior optic nerve (the laminar region). After rNAION induction, there is an early optic nerve ischemia, optic nerve edema, and intraneural inflammation, followed by selective RGC and axonal loss. Since the optic nerve is a CNS white matter tract, the rNAION model is applicable to mechanistic studies of selective white matter ischemia, as well as neuroprotective analyses and short and long-term mechanisms of glial and neuronal response to ischemia.

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

The following report describes how to replicate the rodent model of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (rNAION), using the appropriate dye, contact lens and laser parameters. We also reveal the appropriate steps for evaluating the rNAION lesion in vivo.

המודל המכרסם של Nonarteritic Anterior Ischemic Optic נוירופתיה (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR model induction and its readouts in both mice and rats. Retinal neovascularization is induced in OIR by exposing rodent pups either to hyperoxia (mice) or alternating levels of hyperoxia and hypoxia (rats). The primary readouts of these models are the size of neovascular (NV) and avascular (AVA) areas in the retina. This preclinical in vivo model can be used to evaluate the efficacy of potential anti-angiogenic drugs or to address the role of specific genes in the retinal angiogenesis by using genetically manipulated animals. The model has some strain and vendor specific variation in the OIR induction which should be taken into consideration when designing the experiments.

Oxygen-induced retinopathy (OIR) can be used to model ischemic retinal diseases such as retinopathy of prematurity and proliferative diabetic retinopathy and to serve as a model for proof-of-concept studies in evaluating antiangiogenic drugs for neovascular diseases. OIR induces robust and reproducible neovascularization in the retina that can be quantified.

מודל רטינופתיה הנגרמת על ידי חמצן למחלות רשתית איסכמיות במכרסמים

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...