This study was supported by the American Heart Association (IRG 14330015, PRE 16850005, PRE 20380386, EIA 0740129N), and the National Institutes of Health (RR 2865AR; P20 RR 016477).

כל ההליכים המתוארים להלן נבדקו ואושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים במדעי בריאות באוניברסיטת מרכז המערב וירג&#39;יניה. 1. בחירה של בעלי החיים דגם הערה: מינים הנפוצים ביותר במודל UCMS כוללים ספראג Dawley, וחולדות Wistar וBALB / CJ עכבר; מודלים עכברי אחרים הראו יעילות מוגבלת (DBA / 2, C57BL / 6). עם זאת, שיקול זהיר יש לתת לעכבר המסוים או זן עכברים של בחירה, כרקע הגנטי והרגישות ללחצים סביבתיים משתנים במידה רבה בין מינים והוכחו כגורמים קריטיים המשפיעים על התוצאות של מחקר 11,14,15, 19. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשתמש בבעלי חיים בגיל המתאים (למשל, אם נקודת הסיום הרצויה הוא להיות מוערכת בחולדה בת 17 שבועות, ולאחר מכן החולדות חייבת להתחיל פרוטוקול UCMS ב ~ 9 שבועות של גיל) כפרוטוקול זה לוקח בלאהשבועות רח 7-9 לגרום לתסמיני דיכאון באופן מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים חד-בית עוברים UCMS בכלובים שאושרו IACUC ומתקנים, במזון וכברצונך אוכל סטנדרטי מודעה זמינה (אלא אם כן נדרש אחרת על ידי פרוטוקול ספציפי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח טיפול מיוחד על מנת להבטיח בקרות הם שוכנו בחדר שקט עם פעילות מינימאלית כדי להפחית את ההשפעות של כל גורמי לחץ סביבתיים לא ידועים אפשריים. </li></ol> 2. פרוטוקול מתח בלתי צפוי כרוני מתון הערה: בעלי חיים עוברים UCMS מועברים יומי (&gt; 5 ימים בשבוע) לחדר נקי משמש למניפולציות UCMS. בעלי חיים נחשפים ל1 או 2 של גורמי הלחץ המפורטים להלן בכל יום. גורמי לחץ מבוצעים על לוח זמנים אקראיים, וכל מתח מנוהל על מינימום של 3-4 שעות (ראה טבלה 1). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצנן את המצעים על ידי שפיכת 10-20 גר &#39;. מים של נקיים לכל כלוב סטנדרטי. התאם את כמות מים בהתאם לגודל שלכלוב כדי לצנן את מלוא המצעים אבל לא לגרום לאיגום מים. מתגורר בעלי החיים בכלוב לח במשך 3-4 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר מצעים מכל כלוב במשך 3-4 שעות, לאחר שבעלי החיים שהועברו ללחץ נוסף הדורשים כלוב ריק (אמבט רדוד, הטיה כלוב) או להציב לתוך כלוב נקי עם מצעים טריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כלובי הטיה לכ 45 מעלות (ללא מצעים) במשך 3-4 שעות. יכולים להיות מוטים כלובים עם אובייקט יציב שיישאר במקום כחיה נעה סביב בכלוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אלתר 12 שעות אור / 12 שעות / מחזורים כהים רגילים לsuccessions של 30 תקופות דקות שנמשך 8 שעות. לאחר, לחזור לבעלי חיים המחזור הרגיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את כל בעלי חיים מהכלוב בבית שלה לזה של הכלוב של חיה השכנה שהוסר למשך 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל המצעים מכלוב ולהוסיף מים עד לעומק של ~ 0.25 אינץ &#39;לעכברים או ~ 0.5 אינץ&#39; לחולדות לכ 4 שעות. השתמש במים שהם חם יותר מאשר RT (~ 30 מעלות צלזיוס) כדי למזער hypothermפוטנציאל IA. בקצרה חיות יבשות עם מגבת רכה בסיומה של חשיפת המים לפני ההשמה לכלובים נקיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף בעלי חיים לטורף ריחות / נשמע על ידי הוספת מדגם קווצות מתפזרות באופן אקראי של פרווה או שתן (10-20 מיליליטר) ממיני טורפים טבעיים לתוך הכלוב במשך 3-4 שעות. לחלופין, לשחק נוהם או רעשי טורפים ממיני טורפים טבעיים בסמוך לכלובים במשך 3 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף כל תקופה לחץ יומיומית, למקם את כל החיות לכלובים נקיים ולהחזיר אותם למתקן הדיור. </li></ol> 3. ניטור בעלי החיים / טיפוח עשרות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק כל חיה יומית לפיתוח פצעים או פצעים שעשויות לדרוש טיפול וטרינרים. בעלי חיים המתפתחים באורח קל עשויים להמשיך בפרוטוקול UCMS על ההסכמה של הווטרינר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני חוקרים מיומנים בהערכת טיפוח מעיל לבדוק כל חיה ולהקצות ציון מעיל שבועי בסולם של 0-1. ציון זה הוא להרתיעממוקש ידי הקצאת עשרות בודדים (0- נקי, 1-מלוכלך) לכל אחד מגוף 8 ראש regions-, צוואר, גב מעיל, מעיל הגחון, זנב, forelimbs, גפיים אחוריות, ואזור איברי המין. אותו החוקרים הם לבצע משימה זו בכל פרוטוקול UCMS לשמור על עקביות בהקצאת עשרות מעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל בעל חיים שחווה ירידה חדה במשקל גוף (כלומר,&gt; 15%) יש לדווח לצוות הוטרינרים ויש להסיר מן הפרוטוקול. </li></ol></li></ol> 4. התנהגות בדיקה ומדידות תוצאה הערה: מספר שיטות של הערכה יכולה לשמש כדי לכמת שינויים התנהגותיים מפרוטוקול UCMS במכרסמים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציון טיפוח המעיל מצטבר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כפי שתואר לעיל, ציון טיפוח מעיל שבועי מוקצה לכל בעל חיים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחן Splash סוכרוז: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה בכלוב נקי מרופד בצמר גפן או מגבת כדי למנוע מצעיםמהקפדה על המעיל שלה. ריסוס תמיסת סוכרוז 10% על מעיל הראש והגב של כל חיה ולהקליט כוללת טיפוח התנהגות במשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיפוח הפעילות (מוגדרת כניקוי של הפרווה על ידי מלקק או מגרדים) נמדד על ידי חביון (זמן המתנה בין הריסוס והייזום של הטיפוח הראשון) ותדירות (מספר הפעמים טיפוח חלק גוף מסוים). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחן העדפת סוכרוז: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרגיל בעלי חיים לשתות 1% תמיסת סוכרוז (w / v) 72 שעות לפני הבדיקה ולאחר מכן לספק חשיפה לשני בקבוקים (1% תמיסת סוכרוז לעומת מים ברז בבקבוקים שונים). אחרי ההתרגלות, לספק חיות גישה כרצונך מודעת מים ברז ופתרון סוכרוז במשך 3 שעות עם. אחרי 3 שעות שיא צריכת הכמויות של תמיסת סוכרוז ומי ברז ולחשב העדפת סוכרוז כ: [(צריכת סוכרוז) / (צריכת מים + צריכת סוכרוז)] × 100. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבחן זנב השעיה (עכברים בלבד): <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סולבלות עכברים בזנב ממוט יציב (20 סנטימטרים מהרצפה) באמצעות דבק (2 סנטימטר מקצה הזנב). זמן חוסר תנועה שיא מעל 5 דקות. עכברים נחשבים נייחים רק כאשר הם תולים באופן פסיבי וחסר תנועה לחלוטין. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המבחן לשחות בכפייה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים מקום במכל (~ סנטימטר קוטר 15-20 לעכברים; ~ קוטר 55-60 סנטימטר לחולדות) מלאים במים בטמפרטורה של 26 מעלות צלזיוס ± 0.5. רשום את חביון התקף הראשון של ניידות ואת משך הזמן ללא תנועה במהלך תקופת הבדיקה 5-דקות. בסוף הבדיקה, למקם את החיה הרטובה בכלוב החזקה על כרית חימום (30-35 מעלות צלזיוס) עם מצעים רגילים מכוסים על ידי מגבת נייר סופגת עד יבש. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גבוה פלוס מבוך: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר לכל בעלי חיים כדי לחקור את המבוך בחופשיות במשך 5 דקות. ערכי שיא כולל לכל זרוע, וזמן כולל בילו בכל זרוע, על פי קריטריונים מראש 20. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Locomoפעילות טור: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רמות שיא הפעילות, מוגדרות כתנועה כללית, תנועות עדינות, תנועות גידול, וחוסר פעילות, לשניהם חריפים (30 דקות) ו / או כרונית (12 שעות) תקופות זמן. לעשות זאת באמצעות כלוב בבית או סביבת רומן, בהתאם לסביבת האדם (אם כי יש לשמור על עקביות) בזמן אמת על ידי משקיף או פוסט-הוק על ידי הפעלה חוזרת וניתוח צילומי מצלמה. </li></ol></li></ol> 5. הרחבה / וריאציה של פרוטוקול UCMS <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל סוכנים טיפוליים מתאימים או אתגרים ללמוד את היכולת שלהם או כדי להקהות את הפיתוח של תוצאות מושרה UCMS (אם יזם מוקדם) או להפוך חומרת תוצאות מושרה UCMS הוקמו (אם יזם מאוחר). זה תלוי במעבדה או פרוטוקול 11 הבודדים. </li></ol> 6. הערכות תוצאה סופיות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר סיום פרוטוקולי UCMS ובדיקות התנהגותיות, לנצל בעלי חיים בexper הבאiments באופן שמתייחס להשערות, מטרות או יעדים של המעבדה האדם הספציפיות. הערה: כדוגמאות, זה יכול לכלול תגובות לב וכלי דם, דלקתיות או האנדוקרינית ללחץ כרוני. לחלופין, יכולות להיות הציגו התערבויות טיפוליות בשלב זה להעריך את יעילותם ויסודות מכניסטית. </li></ol>

<ol>
	<li>Lett, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression+as+a+risk+factor+for+coronary+artery+disease:+evidence,+mechanisms,+and+treatment.">Depression as a risk factor for coronary artery disease: evidence, mechanisms, and treatment.</a> Psychosom Med. 66 (3), 305-315 (2004).</li><li>Plante, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression+and+cardiovascular+disease:+a+reciprocal+relationship.">Depression and cardiovascular disease: a reciprocal relationship.</a> Metabolism. 54, 45-48 (2005).</li><li>Pizzi, C., Manzoli, L., Mancini, S., Bedetti, G., Fontana, F., Costa, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nervous+system,+inflammation+and+preclinical+carotid+atherosclerosis+in+depressed+subjects+with+coronary+risk+factors.">Autonomic nervous system, inflammation and preclinical carotid atherosclerosis in depressed subjects with coronary risk factors.</a> Atherosclerosis. 212 (1), 292-298 (2010).</li><li>Barden, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implication+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+in+the+physiopathology+of+depression.">Implication of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the physiopathology of depression.</a> J Psychiatry Neurosci. 29 (3), 185-193 (2004).</li><li>Bowman, R. E., Beck, K. D., Luine, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+effects+on+memory:+sex+differences+in+performance+and+monoaminergic+activity.">Chronic stress effects on memory: sex differences in performance and monoaminergic activity.</a> Horm Behav. 43, 48-59 (2003).</li><li>Baune, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+subtypes+of+depression+and+cardiovascular+disease:+a+systematic+review+of+biological+models.">The relationship between subtypes of depression and cardiovascular disease: a systematic review of biological models.</a> Transl Psychiatry. 2, e92 (2012).</li><li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+translational+rodent+models+of+depression.">Towards translational rodent models of depression.</a> Cell Tissue Res. 354 (1), 141-153 (2013).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav Brain Res. 175 (1), 43-50 (2006).</li><li>Yalcin, I., Belzung, I., Surget, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress:+a+four-antidepressant+survey.">Mouse strain differences in the unpredictable chronic mild stress: a four-antidepressant survey.</a> Behav Brain Res. 193 (1), 140-143 (2008).</li><li>d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Stapleton, P. A., Goodwill, A. G., Isingrini, E., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depressive+behavior+and+vascular+dysfunction:+a+link+between+clinical+depression+and+vascular+disease.">Depressive behavior and vascular dysfunction: a link between clinical depression and vascular disease.</a> J Appl Physiol. 108 (5), 1041-1051 (2010).</li><li>Stanley, S. C., Brooks, S. D., Butcher, J. T., d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+sex+on+chronic+stress-+and+depressive+behavior-induced+vascular+dysfunction+in+BALB/cJ+mice.">Protective effect of sex on chronic stress- and depressive behavior-induced vascular dysfunction in BALB/cJ mice.</a> J Appl Physiol. 117 (9), 959-970 (2014).</li><li>Ibarguen-Vargas, Y., Surget, A., Touma, C., Palme, R., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifaceted+strain-specific+effects+in+a+mouse+model+of+depression+and+of+antidepressant+reversal.">Multifaceted strain-specific effects in a mouse model of depression and of antidepressant reversal.</a> Psychoneuroendocrinology. 33 (10), 1357-1368 (2008).</li><li>Dalla, C., Pitychoutis, P. M., Kokras, N., Papadopoulou-Daifoti, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+animal+models+of+depression+and+antidepressant+response.">Sex differences in animal models of depression and antidepressant response.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 106 (3), 226-233 (2010).</li><li>Mutlu, O., Gumuslu, E., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Kokturk, S., K&#305;r, H. M., Akar, F., Erden, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+fluoxetine,+tianeptine+and+olanzapine+on+unpredictable+chronic+mild+stress-induced+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of fluoxetine, tianeptine and olanzapine on unpredictable chronic mild stress-induced depression-like behavior in mice.</a> Life Sci. 91 (25-26), 1252-1262 (2012).</li><li>Gumuslu, E., Mutlu, O., Sunnetci, D., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Cine, N., Akar, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+tianeptine,+olanzapine+and+fluoxetine+on+the+cognitive+behaviors+of+unpredictable+chronic+mild+stress-exposed+mice.">The effects of tianeptine, olanzapine and fluoxetine on the cognitive behaviors of unpredictable chronic mild stress-exposed mice.</a> Drug Res (Stuttg). 63 (10), 532-539 (2013).</li><li>Isingrini, E., Belzung, C., Freslon, J. L., Machet, M. C., Camus, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluoxetine+effect+on+aortic+nitric+oxide-dependent+vasorelaxation+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress+model+of+depression+in+mice.">Fluoxetine effect on aortic nitric oxide-dependent vasorelaxation in the unpredictable chronic mild stress model of depression in mice.</a> Psychosom Med. 74 (1), 63-72 (2012).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hasco&#235;t, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test.</a> Behav Brain Res. 143, 193-200 (2003).</li><li>Komada, M., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+plus+maze+for+mice.">Elevated plus maze for mice.</a> J Vis Exp. (22), 1088 (2008).</li><li>Golbidi, S., Frisbee, J. C., Laher, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+impacts+the+cardiovascular+system:+animal+models+and+clinical+outcomes.">Chronic stress impacts the cardiovascular system: animal models and clinical outcomes.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Extensive clinical and epidemiological evidence has indicated that chronic stress is one of the most potent precipitating factors for depression. Repeated exposure to stressors may potentiate individual vulnerability to depression and other neuropsychiatric disorders as a consequence of the psychological and physical demands within the body that accumulate over time. The use of validated preclinical animal models offers a valuable translational tool for studying depression and comorbid diseases. Firstly, an ideal animal ...

מחלת נפש דיכאון היא הפרעת נוירולוגית מורכבת שמוכרת כיום כגורם מוביל לניטל נכות והמחלה בעולם. NIMH מדווח כי כ -12% מהאמריקאים סובלים מדיכאון קליני, עם נשים פעמיים רבות המושפעות לעומת גברים 1. בארה&quot;ב לבדה, הדיכאון מהווה מיליארדים דולרים עלויות בריאות ישירות ומוערך 193,000,000,000 $ יותר בעלויות עקיפות (הוריד רווחים ואיבד את הפרודוקטיביות) 2. סימפטומים של דיכאון כוללים anhedonia, שינויים במחזורי משקל ושינה, ירידה בפעילות גופנית והיגיינה אישית, תחושות של חוסר תקווה או אשמה, ו / או מחשבות חוזרות של מוות או התאבדות. במהלך העשור האחרון, אפידמיולוגיים ומחקרים קליניים הראו כי דיכאון הוא גורם סיכון בלתי תלוי למחלות לב וכלי דם תחלואה (CVD) ותמותה 3, והוא מנבא פרוגנוזה חמורה יותר של פתולוגיות לב וכלי דם, כולליםtherosclerosis, יתר לחץ דם, אוטם שריר לב, ומחלת לב כלילית, ללא קשר להיסטוריה הקודמת של CVD הגלוי 4. למרות השכיחות הגוברת והשפעה על בריאות הציבור שלילית של דיכאון, הפתופיזיולוגיה אטיולוגיה ונלווית של מחלה זו הוא הבין היטב וההטרוגניות של ההפרעה בשל גורמים שונים (לדוגמא, ומרכיבים גנטיים, ביולוגיים, סביבתיים) עשתה אבחנה קלינית קשה לְהַגדִיר. ראיות מצביעות על כך שלחץ נפשי בלתי ניתן לפתרון הוא גורם תורם גדול לפיתוח מחלות דיכאון ויכול להיות גם דיכאון חזק פתוגניים גורם מקשר וCVD, בין שאר בשל שיבוש וחוסר ויסות של ההיפותלמוס יותרת המוח-יותרת הכליה (HPA) ציר 5,6. תפקוד לקוי של ציר HPA הוא מנגנון עיקרי שנקשר לשינויים התנהגותיים ופיסיולוגיים שנצפו בדיכאון והפיתוח של מספר גורמי סיכון CVD, כוללדיסליפידמיה, השמנת יתר, סוכרת ו-7. מודלים פרה מרובים של דיכאון פותחו בניסיון לשכפל את המנגנון של מאפיין פעילות הציר שינה HPA של דיכאון קליני; מודלים כאלה לספק אמצעי תוקף לחקירת השינויים התנהגותיים, נוירולוגים, ופיסיולוגיים הקשורים ללחץ כרוני ואקוטי בבעלי חיים. תוקפו של מודל חיה של מחלת מבוסס על הרלוונטיות של אטיולוגיה וההתקדמות של עיצוב המודל ויכולתה לשחזר אנטומיים, neurophysiological, ותכונות התנהגותיות שנצפו במחלות של בני אדם. בנוסף, תגובות פרה-קליניים לטיפולים (כגון SSRI) אמורות להניב תוצאות דומות לאלו שנצפו במסגרות קליניות. מודלים של בעלי חיים כמה מדיכאון מתח מושרה כיום מנוצלים במחקר, כגון חוסר אונים נלמדו, מתח בתחילת חיים, ולחץ חברתי תבוסה. עם זאת, כל אחד מהמודלים האלה יש חסרונות טבועיםשלהפחית את היעילות של התרגום שלהם 8. בתוך העשורים האחרונים, מתח מתון פרוטוקול בלתי צפוי הכרוני (UCMS) התפתח כאחד הדגמים הכי translationally-הרלוונטיים ללימוד הפתופיזיולוגיה של דיכאון במכרסמים 9. מודל זה מבוסס על הרעיון הבסיסי שחשיפה כרונית לגורמי לחץ משבשת מערכות תגובת לחץ וסופו של דבר מוביל להתפתחות של הפרעות דיכאון. במהלך פרוטוקול UCMS, בעלי החיים שנחשפו לסדרה אקראית של גורמי לחץ סביבתיים וחברתיים מתונים על בסיס יומי. גורם מכריע שמשפר את הרלוונטיות של מודל זה למצבים אנושיים טמון ברמה הגבוהה של ודאות וחוסר יכולת שליטה של ​​גורמי הלחץ, כמו גם את הזמן שבו הם הציגו. בנוסף, פרוטוקול UCMS משתמש רק לחצים קלים, במקום להסתמך על חייו המוקדמים או גירויים פיזיים אגרסיביים. על פני תקופה של חשיפת UCMS, התנהגויות דיכאון לפתח ודומות לClinסימפטומים iCal, לרבות ירידה בהיענות לתגמולים (anhedonia), שינויים בפעילות גופנית והתנהגות חוקרת (חוסר אונים וייאוש), הידרדרות של מדינת המעיל ופעילות מינית שינתה 10. כמעט כל סימפטומים של דיכאון להדגמה כבר דיווח על השימוש במודל זה, ומחקרים הראו כי התנהגויות אלו יימשכו מספר שבועות בעקבות ההפסקה של מתח. בנוסף, יכולות להיות בהדרגה נערצת התנהגויות דיכאון הנגרמות UCMS אלה על ידי כרוניים, אבל לא חריפים, טיפול בתרופות נוגדות דיכאון מסוים, המצביעות על תופעות נוירולוגיות דומות של שיפור טיפולי המשקף את הפעולה הקלינית ויעילות משתנה של סוכנים אלה בבני האדם באופן הדוק 11,14- 18. כאן אנו מדווחים תיאור מפורט של פרוטוקול UCMS ולתאר תוצאות התנהגותיות וכלי דם אופייניות בעכברים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Temporary animal cages with lids</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent bedding</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Predator fur or urine</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent cage drinking bottles</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 ml graduated cylinder</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>This is optional.&#160; Any container from which a known quantiity of water can be poured will be appropriate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden blocks cut from 2x4</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>8 inch sections are cut to facilitate cage tilt procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft paper towels</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your institution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small spray bottle&#160;</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>100-200 ml volume is sufficient, used for sucrose splash test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium (mice) or large (rats) plastic tubs for swim testing</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>variable</td>
			<td>Should be of sufficient depth that the animals cannot touch bottom (e.g., 2 feet)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an unpredictable chronic mild stress protocol for instigating depressive symptoms, behavioral changes and negative health outcomes in rodents

לחץ כרוני, בלתי פתור הוא גורם סיכון עיקרי להתפתחות של דיכאון קליני. בעוד רבים מודלים פרה של דיכאון מתח מושרה דווחו, הלחץ המתון הכרוני בלתי צפוי (UCMS) פרוטוקול הוא מודל translationally-רלוונטי שהוקם לגרימת תסמינים התנהגותיים נפוצות הקשורים דיכאון קליני, כגון anhedonia, שינה את התנהגות טיפוח, וחוסר אונים נלמד במכרסמים. פרוטוקול UCMS גם גורם פיסיולוגי (, hypercortisolemia, יתר לחץ דם דואר .g.) ונוירולוגיות (למשל, anhedonia, חוסר אונים נלמד) שינויים הקשורים קליני עם דיכאון. חשוב לציין, יכולים להשתפר תסמיני דיכאון הנגרמים UCMS דרך כרוני, אבל לא חריף, טיפול עם SSRI הנפוץ. ככזה, פרוטוקול UCMS מציע יתרונות רבים על פני פרוטוקולי מתח חריפים או פרוטוקולים שמשתמשים בגורמי לחץ קיצוניים יותר. הפרוטוקול שלנו כולל חשיפות אקראיות, מדי יום עד 7 stre מובחןssors: מצעים לחים, הסרת המצעים, הטיה כלוב, שינוי של מחזורי אור / חושך, לחצים חברתיים, אמבט מים רדוד, וטורף נשמע / מריח. על ידי חשיפת מכרסמים 3-4 שעות מדי יום ללחצים מתונים אלה במשך 8 שבועות, אנחנו מדגימים שני שינויים התנהגותיים משמעותיים ותוצאות בריאותיות ירודים למערכת הלב וכלי הדם. גישה זו מאפשרת לחקירה מעמיקה של שינויי נוירולוגים, התנהגות, ופיסיולוגיים הקשורים לדיכאון מושרה לחץ כרוני, כמו גם לבדיקה של סוכנים חדשים פוטנציאל טיפוליים או אסטרטגיות התערבות.

דוגמא ללוח הזמנים לשבוע הבא הליך UCMS אחד מוצגת בטבלה 1. בכל שבוע, גורמי לחץ חולקו באקראי למניעת מצעד תמיכה ולהבטיח ודאות של אתגר המתח בכל יום. מדדים של דיכאון כמו התנהגויות בעקבות 8 שבו?...

Watch this Scientific Journal Video about An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents at JoVE.com

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

פרוטוקול מתח מתון כרוני בלתי צפוי לתסמיני דיכאון ייזום, שינויים התנהגותיים ותוצאות בריאותיות שליליות במכרסמים

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

an-unpredictable-chronic-mild-stress-protocol-for-instigating

Research

JoVE Journal

Behavior

22.2K Views.  West Virginia University Health Sciences Center. The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

Video: An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals and humans. However, many animal models of depression were developed in males and are not applicable or effective in studies of postpartum females. Recent studies have reported significant effects of chronic social stress during lactation, an ethologically relevant and effective stressor, on maternal behavior, growth, and behavioral neuroendocrinology. This manuscript will describe this chronic social stress paradigm using repeated exposure of a lactating dam to a novel male intruder, and the assessment of the behavioral, physiological, and neuroendocrine effects of this model. Chronic social stress (CSS) is a valuable model for studying the effects of stress on the behavior and physiology of the dam as well as her offspring and future generations. The exposure of pups to CSS can also be used as an early life stress that has long term effects on behavior, physiology, and neuroendocrinology.

This article describes the use of chronic resident intruder social stress as an ethologically relevant paradigm to model postpartum depression and anxiety in lactating rodents.

שימוש בלחץ חברתי כרוני לדיכאון לאחר לידה בדגם מניקות מכרסמים

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this negative experience one must be able to identify when an animal is actually in distress. Pain, illness, or distress cannot be managed if unrecognized. Evaluation of pain or illness typically involves the measurement of physiologic and behavioral indicators which are either invasive or not suitable for large scale assessment. The observation of nesting behavior shows promise as the basis of a species appropriate cage-side assessment tool for recognizing distress in mice. Here we demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an ethologically relevant indicator of welfare. The methods presented can be successfully used to identify thermal stressors, aggressive cages, sickness, and pain. Observation of nest building behavior in mouse colonies provides a refinement to health and well-being assessment on a day to day basis.

We demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an indicator of welfare. Nest scoring is a sensitive technique that is altered by temperature, illness, and aggression. The time to integrate into nest test (TINT) is a simple cage-side assessment that can detect postoperative pain.

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like behavior in rodents. The FST is based on the assumption that when placing an animal in a container filled with water, it will first make efforts to escape but eventually will exhibit immobility that may be considered to reflect a measure of behavioral despair. This test has been extensively used because it involves the exposure of the animals to stress, which was shown to have a role in the tendency for major depression. Additionally, the FST has been shown to share some of the factors that are influenced or altered by depression in humans, including changes in food consumption, sleep abnormalities and drug-withdrawal-induced anhedonia. The main advantages of this procedure are that it is relatively easy to perform and that its results are easily and quickly analyzed. Moreover, its sensitivity to a broad range of antidepressant drugs that makes it a suitable screening test is one of the most important features leading to its high predictive validity. Despite its appeal, this model has a number of disadvantages. First, the issue of chronic augmentation is problematic in this test because in real life patients need to be treated for at least several weeks before they experience any relief from their symptoms. Last, due to the aversiveness of the FST, it is important to take into account possible influences it might have on brain structure/function if brain analyses are to be carried out following this procedure.

This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.

המבחן לשחות בכפייה כמודל להתנהגות דמוית דיכאון

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

זוגי H-המבוך: מבחן חזק התנהגות למידה וזיכרון במכרסמים

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of depression is essential. Because there are several types of depression, various animal models are needed for a deeper understanding of the disorder. Previously, a mouse model of subchronic and mild social defeat stress (sCSDS) using a modified chronic social defeat stress (CSDS) paradigm was established. In the paradigm, to reduce physical injuries from aggressors, the duration of physical contact between the aggressor and a subordinate was reduced compared to in the original CSDS paradigm. sCSDS mice showed increased body weight gain, food intake, and water intake during the stress period, and their social behaviors were suppressed after the stress period. In terms of the face validity of the stress-induced overeating and overdrinking following the increased body weight gain, the sCSDS mice may show some features related to atypical depression in humans. Thus, a mouse model of sCSDS may be useful for studying the pathogenic mechanisms underlying depression. This protocol will help establish the sCSDS mouse model, especially for studying the mechanisms underlying stress-induced weight gain and polydipsia- and hyperphagia-like symptoms.

Here, methods for developing a mouse model of subchronic and mild social defeat stress are described and used to investigate the pathogenic features of depression including hyperphagia- and polydipsia-like symptoms following increased body weight.

במודל עכבר של מתח הבס חברתי Subchronic והקל להבנת גירעונות התנהגותיים ופיסיולוגיים הנגרם על-מתח

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Feeding Experimentation Device (FED): Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in mice: the Feeding Experimentation Device (FED). FED is an open-source system that was designed to facilitate flexibility in food intake studies. Due to its compact and battery powered design, FED can be placed within standard home cages or other experimental equipment. Food intake measurements can also be synchronized with other equipment in real-time via FED's transistor-transistor logic (TTL) digital output, or in post-acquisition processing as FED timestamps every event with a real-time clock. When in use, a food pellet sits within FED's food well where it is monitored via an infrared beam. When the pellet is removed by the mouse, FED logs the timestamp onto its internal secure digital (SD) card and dispenses another pellet. FED can run for up to 5 days before it is necessary to charge the battery and refill the pellet hopper, minimizing human interference in data collection. Assembly of FED requires minimal engineering background, and off-the-shelf materials and electronics were prioritized in its construction. We also provide scripts for analysis of food intake and meal patterns. Finally, FED is open-source and all design and construction files are online, to facilitate modifications and improvements by other researchers.

Feeding Experimentation Device FED: Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Feeding Experimentation Device (FED) is an open-source device for measuring food intake in mice. FED can also synchronize food intake measurements with other techniques via a real-time digital output. Here, we provide a step-by-step tutorial for the construction, validation, and usage of FED.

האכלת התקני ניסויים (FED): בנייה ותיקוף של התקן קוד פתוח עבור מדידת צריכת מזון במכרסמים

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in ...

An Automated T-maze Based Apparatus and Protocol for Analyzing Delay- and Effort-based Decision Making in  Free Moving Rodents

Many neurological and psychiatric patients demonstrate difficulties and/or deficits in decision making. Rodent models are helpful to produce a deeper understanding of the neurobiological causes underlying the decision-making problems. A cost-benefit based T-maze task is used for measuring decision making in which rodents choose between a high reward arm (HRA) and a low reward arm (LRA). There are two paradigms of the T-maze decision-making task, one in which the cost is a time delay and the other in which it is physical effort. Both paradigms require a tedious and labor-intensive management of experimental animals, multiple doors, pellet reward, and arm choice recordings. In the current work, we invented an apparatus based on traditional T-maze with full automation for pellet delivery, door management and choice recordings. This automated setup can be used for the evaluation of both delay- and effort-based decision making in rodents. With the protocol described here, our lab investigated the decision-making phenotypes of multiple genetically modified mice. In the representative data, we showed that the mice with ablated medial habenular showed aversions of both delay and effort and tended to choose the immediate and effortless reward. This protocol helps to decrease the variability caused by experimenter intervention and to enhance experiment efficiency. In addition, chronic silicon probe or microelectrode recording, fiber-optic imaging and/or manipulation of neural activity can be easily applied during the decision-making task using the setup described here.

This article introduces an automated T-maze apparatus that we invented, and a protocol based on this apparatus for analyzing delay-based decision making and effort-based decision making in free moving rodents.

T-maze אוטומטית המבוסס על המנגנון ופרוטוקול לניתוח עיכוב מאמץ מבוססות החלטות בחולדות העברה חינם

Many neurological and psychiatric patients demonstrate difficulties and/or deficits in decision making. Rodent models are helpful to produce a deeper ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

פרוטוקול לא צפוי מתח כרוני מתון להשראת אנהדוניה בעכברים

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders such as post-traumatic stress disorder (PTSD). To understand the biological mechanisms of fear dysregulation in PTSD, it is important to start with a valid animal model of the disorder. This protocol describes the methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of PTSD, in both rats and mice. SEFL was developed to recapitulate critical aspects of PTSD, including long-term sensitization of fear learning caused by an acute stressor. SEFL uses aspects of Pavlovian fear conditioning but produces a distinct and robust sensitized fear response far greater than normal conditional fear responses. The trauma procedure involves placing a rodent in a conditioning chamber and administering 15 unsignaled shocks randomly distributed over 90 minutes (for rat experiments; for mouse experiments, 10 unsignaled shocks randomly distributed over 60 minutes are used). On day 2, rodents are placed in a novel conditioning context where they receive a single shock; then, on day 3 they are placed back in the same context as on day 2 and tested for changes in freezing levels. Rodents that previously received the trauma display enhanced levels of freezing on the test day compared to those that received no shocks on the first day. Thus, with this model, a single highly stressful experience (the trauma) produces extreme fear of the stimuli associated with the traumatic event.

Here we describe the detailed methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of post-traumatic stress disorder, in both rats and mice. The model utilizes aspects of Pavlovian fear conditioning and freezing as an index of enhanced fear in rodents.

פחד משופרת מתח למידה, מודל מכרסמים חזקים של הפרעה פוסט-טראומטית

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various physiological or pathological changes. The object location task (OLT) and the novel object recognition task (NORT) are two effective behavioral tasks commonly used to reveal the function and relative health of specific brain regions involved in memory. While both of these tests exploit the inherent preference of mice for the novelty to reveal memory for previously encountered objects, the OLT primarily evaluates spatial learning, which relies heavily on hippocampal activity. The NORT, in contrast, evaluates non-spatial learning of object identity, which relies on multiple brain regions. Both tasks require an open-field-testing arena, objects with equivalent intrinsic value to mice, appropriate environmental cues, and video recording equipment and the software. Commercially available systems, while convenient, can be costly. This manuscript details a simple, cost-effective method for building the arenas and setting up the equipment necessary to perform the OLT and NORT. Furthermore, the manuscript describes an efficient testing protocol that incorporates both OLT and NORT and provides typical methods for data acquisition and analysis, as well as representative results. Successful completion of these tests can provide valuable insight into the memory function of various mouse model systems and appraise the underlying neural regions that support these functions.

Here we provide a protocol which includes comprehensive instructions for the economical establishment of murine object location and novel object recognition behavioral testing, including the design, cost, and construction of required equipment as well as execution of behavioral testing, data collection, and analysis.