The authors thank the three anonymous reviewers for their helpful comments on the manuscript. This work was partly supported by Grant-in-Aid for JSPS Fellows (26.11613).

הערה: מאמר זה מבוסס על העבודה הקודמת שלנו 30. חלקים מסוימים הם נדפסו באישור האגודה הבוטנית של יפן שפרינגר יפן. 1. תצפית של מבקרים פרחוניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחירה של שדות תצפית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חפש את האזורים שבם החומרים הצמחיים מופצים, ולבחור את אתרי מחקר מועמד שימוש במשאבים אמינים, כגון ספרי תמונות, כתבי עת אקדמיות, וכו &#39;התאם את מספר אתרי מחקר כדי להתאים את מטרות המחקר (למשל, מגוון רחב של מקומות עבור ההשוואה של מבקרי פרח ברחבי יפן). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדקו את המיקומים של אוכלוסיות מועמד שנבחרו ואת המרחקים בין נקודות מוצא רלוונטיות, כגון מכוני מחקר ולינה, אם מחקר ארוך טווח הוא זקוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בערך להעריך כל גודל אוכלוסייה על ידי ספירת מספר האנשים צמח באזור יחיד. בחר אוכלוסיות גדולות עבור ניסוי מניפולציותs באמצעות יחידים צמחים רבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תצפית מראש של מבקרים פרחוניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלט אילו מיועד לאנשים פרטיים בכל אזור יקוים באותה מרווח הזמן, תלוי צפיפות האוכלוסין. בחר 5-10 פרחים טריים-פתחו או שביר ניצנים כמו פרחי יעד, ולדחות אלה מושפלים שכבר נפתחו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את התצפית ויזואלית לתקופה של יום שלם, כי את הפרחים יכולים להיות בקרו מאביקים שונים בזמן שונה נע 31,32. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על סדיני ההקלטה, להקליט שם ​​המין של מבקרים פרחוניים ואת הזמן של כל ביקור לכל שעה לכל פרח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרוב לראות האם מבקרים פרחוניים לגעת מאבקים ו / או סטיגמטה; אם הם עושים, להקליט את המבקרים כמו מאביקים. אם המבקרים הפרחוניים רק לבקר את הפרחים ואל תיגעו איברי הרבייה, להקליט אותם, כמו מבקרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש נטו חרקים או aspirator בעבודת יד, ללכוד את המבקרים הפרחוניים לזהותלשמרם כמו דגימות (איור 1F). להרוג את המבקרים לכודים במהירות עם אתיל אצטט או לחץ אצבע אל החזה, ולשמר אותם בתוך התיק רך או בצינור או במקרה פלסטיק עם אתנול 100%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר התצפית, לזהות את השמות הספציפיים של דגימות באמצעות תכונות מורפולוגיות או, במקרה של קשיים בזיהוי, לבקש את עזרתו של מומחים לכל קבוצת טקסונומיות. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תצפית בתחום <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחקר בחר אתרים המבוססים על הנגישות שלהם, גודל אוכלוסייה, ומספר המבקרים פרחוניים. בחר תקופות זמן כולל מדגם מייצג של מבקרים פרחוניים בעונת הפריחה, ולקבוע תקופות תצפית על בסיס מטרות מחקר (למשל, עבור מחקר על תנודות ביקורים בתדירות ידי מבקרים פרחוניים, תקופות זמן רבות צריכות להיות מוגדרות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את ציוד ההקלטה המתאים, כגון מצלמות וידאו דיגיטליות (למשל, עבור הקלטת הלילה, מצלמות וידאו עם פונקציית אינפרא אדומה אמורות לשמש). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את פרחי היעד באותו אופן כמו 1.1.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את מצלמות וידאו חצובות אלומיניום. הגדר את המצלמות עם חצובות מול אנשי היעד, במרחק של כ -50 סנטימטרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק ולשנות את כמות האור ואת המיקוד של חומרים על המסך מציג המצלמות לפני הצילומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את תצפית ויזואלית והסרטה וידאו בו זמנית עבור אזורי הזמן המתאים מוערך על ידי תצפיות מראש (במקרה הנוכחי, תקופות התצפית היו במשך יותר משש שעות בממוצע, מכ 05:00 am כדי 13:00 ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את שמות מינים של מבקרים ומאביקים, ולהקליט את שמם ואת פעמי הביקורים שלהם על סדיני ההקלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכידה ולזהות את המבקרים ומאביקים באותו אופן כמו 1.1.4.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 1.2.1 עד 1.2.7 לכל observatioתקופת n. הגדר את תקופות התצפית מבוססות על מטרות המחקר ונתונים בטחוניים מראש. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח נתונים לאחר תצפית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את שמות מינים של דגימות שנתפסו לאחר תצפית מאביק באותו אופן כמו 1.1.4.6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את קטעי וידאו לציין שמות מינים ושעות הביקור שלהם באותו אופן כמו עבור תצפית ויזואלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשב את תדרי ביקור לכל פרח לשעה של כל מבקר פרחוני מנתוני הקלטת תצפית וידאו ויזואלי. השוואת תדרים אלו סטטיסטיים בין האתרים והשנים של כל מבקר בשיטות סטטיסטיות מתאימות על סמך נתונים סטטיסטיים בסיסיים באמצעות תוכנה מתאימה, כגון R, SPSS, ו / או SAS 33-35 (למשל, ניתוח דו כיוונית של שונות (ANOVA ) עם הבדל משמעותי הכנה של Tukey (HSD) בדיקה בתוכנת R). </li></ol></li></ol> 2. ניסויים Bagging וקייג<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנות Bagging וניסויי קייג <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור הניסויים לצוד, להכין שקיות שיש בגדלים רשת קטנה (~ 0.5-1 מ&quot;מ) ולהשתמש בהם כדי למנוע ביקורים פרח לחלוטין (למשל, שקיות בד לא ארוג שימשו הניסויים לצוד בשנים 2011 ו -2012). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור הניסויים כלוב, להכין לוחות חוט או רשת פלסטיק בקוטר המאפשר היעד מבקרים קטן לעבור אך אינו כולל הגדולות שבהן, ולהתחבר לוחות רשת אלה כדי ליצור כלוב. ודא כי אין פערים גדולים יותר מאשר קוטר הרשת. התאם את הגודל והצורה של כלובי מבוסס על מיני צמחים היעד ומספרים בודדים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניסויי bagging <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר 30 אנשים לכל טיפול שאין להם נזקי אוכלי עשב או מסביבה חמורה. לקבלת טיפול, לבחור פרח בודד מכל צמח פרט, או להשתמש פרחים בודדים על צמח אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיק tהוא למקד פרחים בשטח לאחר תיוגם עם קלטת (מספר סידורי האלפבית; איור 1G). היזהר שלא לגעת מאבקים או סטיגמטה בתוך השקיות כדי למנוע את האפשרות של אבקה עצמית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לתקן שקיות אל הפרחים באמצעות מחרוזת או חוט רך (איור 1 ד). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות להגדיר פרחים בודדים זקוף עם תומך באמצעות חוט או חוט רך לתמוך יחידים נגד הטיה או קריסה תחת המשקל של שקיות או הרוח, לפי הצורך. טוויסט או ללפף חוט או חוט בשקט סביב הגבעול של אדם היעד, כדי לא ליצור נזק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיפולי בניסויים לצוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;השליטה&quot;, להדביק את התוויות על פרחי היעד לנהל שום טיפול. אפשר למבקרים פרחוניים לבקר בחופשיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;Outcrossing&quot;, לכסות את הניצנים עד שהם פרחים, ולאחר מכן להסיר את המאבקים של פרחים ארזו. שים קצת polleדגני n מיחידים מרובים על סטיגמטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;Selfing&quot;, לכסות את הניצנים עד הפרחים פתוחים, ולשים אבקה מאותו הפרחים על סטיגמטה שלהם. מכסה פרחי מטופלים אלה שוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;Auto-העצמי&quot;, לכסות את הניצנים עם שקיות עד סוף עונת הפריחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;ניצן חם&quot;, לזהות הניצנים השבירים כי כבר בקרו ולבחון את הכניסה או יציאה של דבורים קטנות (1b הדמוי, ג). הסר את המאבקים של הניצנים השבירים למנוע תצהירי אבקה חזרו על אותו הפרח אחרי הביקור ידי דבורים קטנים, ואת תיק ניצנים אלה במהירות כדי למנוע ביקורים נוספים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;הפריחה&quot;, תיק הניצנים עד לשלב הפתיחה כדי למנוע ביקורים בשלב השביר-הניצן. לאחר מכן, להסיר את השקיות ולאפשר למבקרים לאסוף צוף ואבקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;באד&quot;,להסיר את המאבקים בין ניצנים שעוד לא פתחו outcross אותם באופן מלאכותי. ניצנים אלה תיק במהירות כדי למנוע ביקורי פרח. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניסויי קייג <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את הפרטים צמחו המטרה שכלוביהם מוכנים. התאם את עמדות פרחים בכלוב ביד כדי למנוע תצהירי קשר ואבקה בין סטיגמטה השונה (איור 1E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול &quot;הכלוב&quot;, בחר את האנשים עם ניצנים סגורים ולשים תוויות עליהם לזיהוי פרחים שנבחר. קייג &#39;אנשים עם ניצנים שכותרתו לדחות את השפעות מלפני הקמת כלובי (כלומר, חרקים פרחוני לא יכולים לבקר ניצנים שלא נפתחו, ורק את ההשפעות של חרקים לבקר לאחר ההקצאה של כלובים ניתן לאמוד). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף הכלובים בחוזקה אל הקרקע באמצעות מוטות ברזל כדי למנוע כניסת מבקרים בין בסיס כלוב הקרקע. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח נתונים אפter Bagging וניסויי קייג <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף את כל הפרחים שכותרתו בסוף בעונת הפריחה (האיור 1G) על ידי הגזירה הפרידו אנשים האימהיים. שמור על מדגם שכותרתו בנפרד על מנת למנוע זיהום שלהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדוק את קיומו או אי קיומו של פרות להגדיר על כל אחד המסומן flower.Record מספרי הזרע של כל פרי במקרה של הגדרת פרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשב את היחס בין מספרים פירות לכל פרח (יחס שנקבע פירות, מוגדר כמספר של פירות מחולק במספר פרחים) ושל מספרים זרע לכל פירות בשלים (יחס זרע-סט, מוגדר כמספר של זרעים מחולק במספר של ביציות) באמצעות כל המספרים שנרשמו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סטטיסטית להשוות את יחסי-סט זרע התועלת שבזה ובין הטיפולים בשיטות המתאימות ותוכנה, כגון אלה המפורטים ב 1.3.3 (למשל, חד סטרי ANOVA עם HSD של Tukey או הבדיקה המדויקת של פישר R תוכנה 33). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החקירות של חומרים באמצעות תוצאות הניסויים לצוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבדוק את הצורך מהאביקים חיים, סטטיסטית להשוות את התוצאות בין &quot;שליטה&quot; ו &quot;Auto-עצמי&quot; טיפולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להעריך את מידת הגבלת אבקה, להשוות את &quot;השליטה&quot; וטיפולים &quot;Outcrossing&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבדוק תאימות עצמית, להשוות את &quot;Outcrossing&quot; ו &quot;Selfing&quot; טיפולים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ערכות של השפעות של אבקה שוברת ניצן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השווה את הטיפולים &quot;שליטה&quot; ו &quot;באד&quot; כדי לקבוע אם הסטיגמטה של ​​הניצנים השבירים הם reproductively בוגר והאם הערך של הטיפול &quot;השליטה&quot; יכול לשמש עבור השליטה בשלב השביר-הניצן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השווה את &quot;עצמי האוטומטית&quot; ו &quot;ניצן שובר&quot; טיפולים כדי לקבוע אם צלחת רבייה של פרחי האבקה עם דבורים קטנים השבירבשלב -bud סטטיסטי גבוה מזו של צמחי ביצוע אוטוגמיה (כלומר, על מנת לבחון את קיומה של אבקה שוברת ניצן). לאחר מכן, להשוות בין שני הטיפולים האלה עם &quot;השליטה&quot; כדי להעריך את יעילות ההאבקה של אבקה שוברת ניצן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השווה את &quot;הניצן החם,&quot; &quot;קייג &#39;,&quot; ו &quot;פריחה&quot; טיפולים להעריך את שפעות רבייה של אבקה שוברת ניצן. </li></ol></li></ol></li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

תצפיות וניסויי פרח לצוד הועסקו במחקר זה לחשוף את תדרי ביקור ואת הצלחת הרבייה הנשית של צמחים, בהתאמה. בשנת הדפנים (1992) 38, שיטת הקלטת הייתה יעילה כי זה יכול להקליט את העיתוי ומשך המבקרים לניתוח ולמנוע הטיה צופה. עם זאת, באותה העת, שיטה זו נדרשת ציוד יקר, ועל פי ההתבונ...

אינטראקציות צמח-מאביק הן דוגמאות מובהקות לחקר ביולוגיה ואקולוגיה אבולוציוני. היחסים ההדדיים בין פרחים ומאביקים נחשבים קדמו את פיזור angiosperm 1,2 כתוצאה של ברירה טבעית, אם כי גורמים ביוטיים אביוטי אחרים יש גם השפיעו 3,4,5. הוא חשב גם כי תכונות פרחוניות השתנו להסתגל המאביקים היעילים ביותר כדי לייצר יותר פרות וזרעים 6. אמונות אלה נבנו על פי מחקרים גדולים על מדדים שונים, כגון יעילות אבקה, שכוללים פרשנויות שונות 7. צמחים בעלי פרחים אשר להכליל מערכות אבקה נצפים על ידי סוגים שונים של מאביקים 8. בזאת, מבקר פרח הוגדר כזן חיה שבקר כדי לקבל פרס פרחוני, ומהאביקים הוגדרו מבקרים פרחוניים המאביקים.חלק מהמבקרים האלה לשאת גרגרי אבקה conspecific לסטיגמטה של ​​פרחים ביקרו ניתן לסווג מאביקים. מבקרים אחרים יכולים להיות גם קצת אבקת intraspecific; הם עלולים לנהל פחות האבקה בשל חוסר התאמה התנהגותית או מורפולוגיים בין מאביקים את הפרחים. הבדלים דומים אלה בתרומת רביית צמח יכולים לייצר בדרגות שונות של לחץ סלקטיבי על תכונות פרחוניות 9 ועלולים לגרום להסתעפות אדפטיבית של צמחים פורחים. לכן, למרות רכב הקהילה מהאביק ואת שפע המינים ביחס חשובים 10, ההערכה המדויקת של כל האפקטיביות של מבקר היא גם קריטית כדי לקבוע את אדפטיבית ו / או תהליכי התפתחות של הצמחים. במחקר זה, ערכות כמותיות של יעילות מאביק, מוגדר ייצור הפרות וזרעים לכל תדירות ביקור, נקבעו 11. המפרטies ותדירות כל מבקר פרחוני נצפו, ואפקטי רבייה על הפרחים ביקר נאמדו. ההקלטה של ​​ביקורים פרחוניים באמצעות תצפיות אנושיות היא שיטה קלסית באקולוגית אבקה. עם זאת, שיטה זו מטילה נטל גדול על משקיפים, אשר נדרשים להישאר מול הצמחים לקחת זהיר, מדידות לטווח ארוך. לאחרונה, הטכנולוגיות של צילומים והקלטה התפתחו במהירות, ומצלמות וידאו דיגיטלי בעלות הנמוכה אפשרו כניסתה של הקלטת וידאו לתצפיות מאביק 12,13. שיטות אלה יכולים להקל על האיסוף של מידע בסיסי על מבקרים פרחוניים יכולות לעזור לפתח הבנה של אקולוגית ההאבקה של מיני צמחי יעד. עם זאת, את תדרי הביקורים של המאביקים אינם בקורלציה בהכרח לאפקטיביות האבקה שלהם 7,14, וזה חשוב כדי להעריך את ההשפעות האיכותיות של כל מאביקעל כושר פרח. האפקטיביות אבקה הוערכה באמצעות מספר גרגרי אבקה על 15,16 סטיגמטה, 17,18 צמיחת צינור האבקה ופרות ו / או זרעי ייצור 19,20. לצוד ניסויים, שנערך באמצעות שקיות בלעדיות-מבקרות, הן השיטות הטיפוסיות לבדיקת תאימות עצמית, אוטוגמיה 21,22, ואת הנוכחות של apomixes 23. בנוסף, ההערכה אפקטיבית האבקה עבור המאביק מסוים מאסף המבקר כבר לבצע בתדירות גבוהה בסביבות שבן מבקרים פרחוניים אחרים הוגבלו (כלומר, כלוב תיל, נטו, או שקית עם רשת קטנה מספיק כדי לכלול מאביקים גדולים כי הוא סט על צמחים פורחים). לדוגמא, ניסויים לצוד עם שקיות רשת קטנות נערכו במטרה לחשוף את יכולת ההאבקה של נמלים או תריפסים 24,25. יתר על כן, ניסויי הדרת ציפור באמצעות כלוב מתכת או נטו הראו המאביקים האפקטיביים של מיני אלוורה26-28. מטרות המחקר היו: 1) כדי להציג את השיטות בהן השתמשו במאמר הקודם ו -2) כדי לשפר את השיטות האלה לשימוש כללי במחקרים אחרים על מבקרים פרחוני, תדרים לביקור שלהם, והשפעתם על כושר צמח var sanguinea Lycoris.. sanguinea הוא אחד המינים הכלולים הסוג Lycoris, אשר מופץ באופן נרחב ברחבי יפן ומצמצם בקוריאה 29 ויש לו בצורת משפך פרחים אדמדם כתום (איור 1 א). מחקר קודם גילה כי ל sanguinea var. sanguinea בקר מינים רבים של חרקים, כוללים מיני דבורה קטנים מזוהים ואת המינים הגדולים Amegilla Florea 29. עם זאת, את האפקטיביות תדרי אבקת ביקורים של מבקרים אלה לא מזוהים. תצפיות מאביק לזיהוי מבקרים פרחוניים נערכו לראשונה. ביקור על ידי דבורים קטנים היה observed על פרחים שלא נפתחו עדיין לחלוטין (שבירת ניצנים; 1b הדמוי, ג). דבורים קטנים זזו במהירות סביב המאבקים undehisced ב הניצנים השבירים ואסף אבקה באמצעות הלסתות שלהם. ההשערה הייתה כי הדבורים הקטנים יכולים להיות מאביקים בשלב השביר-ניצן כי הפערים בין המאבקים ואת סטיגמטה הפרחים היו קטנים יותר מאורך הגוף של הדבורים. לכן, ניסויים לצוד נערכו על מנת לבחון את יכולת ההאבקה של דבורים קטנות בשלב השביר-הניצן, ובנוסף לבחון את אסטרטגיות רבייה של L. var sanguinea. sanguinea. ניצנים אלה היו שקיות אחרי הדבורים הקטנים בקרו, אשר אפשרו הערכה של יכולת ההאבקה של הדבורים. האנשים היו בכלוב עם ניצנים שטרם נפתחו. כלוב קטן-רשת שמש, שדרכו רק דבורים קטנים יכולים לעבור, המאפשר הערכה של יעילות האבקה של דבורים קטנות לאורך flowe כולובשלב טבעת.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="535">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:200px;">recording sheet</td>
			<td style="width:159px;">any</td>
			<td style="width:112px;">NA</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">insect net</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">pooter</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ethyl acetate</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">100% Ethanol</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plastic tube</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plastic case</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">soft bag</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">digital video camera(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">tripod(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">bags</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">wire or plastic mesh boards</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">iron wires</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">labeling tape</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">stick supporters</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">soft strings or wire</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">pincette(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

field experiments of pollination ecology: the case of lycoris sanguinea var. sanguinea

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify the pollination effectiveness of each pollinator for visited flowers. Pollinator observations have been one of the most common methods to identify pollinators, and bagging and cage experiments have been conducted to show the effectiveness of specific pollinators. In a previous study of Lycoris sanguinea var. sanguinea, its effective pollinators, the visitation frequencies of each floral visitor, and its reproductive strategies were not identified. This study reports the observation that small bees visited flowers that were partially opened (breaking buds). To the best of our knowledge, this phenomenon has not been reported previously. Further, this study investigates the hypothesis that small bees can pollinate at that flowering stage. This study demonstrates the basic methods of field experiments in pollination ecology using L. sanguinea var. sanguinea. Pollinator observations and digital video showed the visitation frequencies of each floral visitor. Bagging and cage experiments revealed that these flowers could be pollinated fully and that breaking-bud pollination could be important for the pollination of this plant species. The advantages and disadvantages of each method are discussed, and recent developments, including laboratory experiments, are described.

חמש אוכלוסיות נבחרו לתצפיות המאביק. בשלב טרום התצפית, ביקורים של מינים שונים של חרקים לפרחי פתיחה ודבורים קטנים ניצנים שבירים אושרו. תצפיות מבקר פרחוניות גילו כי רוב המבקרים עד החמישה כל אתרי המחקר היו פרטים של מיני הדבורים הקטנים japonicum Lasioglossum....

Watch this Scientific Journal Video about Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea at JoVE.com

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

כדי לחשוף את האפקטיביות המאביק של מיני צמחים נתונים, מספר שיטות של ניסויי שדה פותחו. מחקר זה מדגים את השיטות הבסיסיות של ניסויי שדה לאקולוגית אבקה באמצעות מקרה המבחן של Lycoris sanguinea var. Sanguinea ומנגנון אבקת הרומן, אבקה שוברת ניצן.

ניסויי שדה לאקולוגית אבקה: המקרה של<em&gt; Lycoris sanguinea</em&gt; Var.<em&gt; sanguinea</em

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify ...

field-experiments-pollination-ecology-case-lycoris-sanguinea-var

Research

JoVE Journal

Environment

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

11.4K Views.  Chiba University.  כדי לחשוף את האפקטיביות המאביק של מיני צמחים נתונים, מספר שיטות של ניסויי שדה פותחו. מחקר זה מדגים את השיטות הבסיסיות של ניסויי שדה לאקולוגית אבקה באמצעות מקרה המבחן של Lycoris sanguinea var. Sanguinea ומנגנון אבקת הרומן, אבקה שוברת ניצן. 

Video: Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

Modifying the Bank Erosion Hazard Index (BEHI) Protocol for Rapid Assessment of Streambank Erosion in Northeastern Ohio

Understanding the source of pollution in a stream is vital to preserving, restoring, and maintaining the stream&#8217;s function and habitat it provides. Sediments from highly eroding streambanks are a major source of pollution in a stream system and have the potential to jeopardize habitat, infrastructure, and stream function. Watershed management practices throughout the Cleveland Metroparks attempt to locate and inventory the source and rate the risk of potential streambank erosion to assist in formulating effect stream, riparian, and habitat management recommendations. The Bank Erosion Hazard Index (BEHI), developed by David Rosgen of Wildland Hydrology is a fluvial geomorphic assessment procedure used to evaluate the susceptibility of potential streambank erosion based on a combination of several variables that are sensitive to various processes of erosion. This protocol can be time consuming, difficult for non-professionals, and confined to specific geomorphic regions. To address these constraints and assist in maintaining consistency and reducing user bias, modifications to this protocol include a &#8220;Pre-Screening Questionnaire&#8221;, elimination of the Study Bank-Height Ratio metric including the bankfull determination, and an adjusted scoring system. This modified protocol was used to assess several high priority streams within the Cleveland Metroparks. The original BEHI protocol was also used to confirm the results of the modified BEHI protocol. After using the modified assessment in the field, and comparing it to the original BEHI method, the two were found to produce comparable BEHI ratings of the streambanks, while significantly reducing the amount of time and resources needed to complete the modified protocol.

Modifying the Bank Erosion Hazard Index BEHI Protocol for Rapid Assessment of Streambank Erosion in Northeastern Ohio

Streambank erosion potential can be evaluated and ranked using David Rosgen&#8217;s Bank Erosion Hazard Index (BEHI), however this protocol has significant limitations. Here we present protocol modifications to address time constraints, allow nonprofessionals to complete accurate assessments, and account for non-alluvial stream conditions in Northeast Ohio.

שינוי פרוטוקול מדד סיכוני שחיקת בנק (BEHI) לראפיד הערכה של שחיקת Streambank בצפון מזרח אוהיו

Understanding the source of pollution in a stream is vital to preserving, restoring, and maintaining the stream&#8217;s function and habitat it provides. ...

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% fine dust formation within the EU15. But NH3 emissions also mean a considerable loss of nutrients. Many studies on NH3 emission from organic and mineral fertilizer application have been performed in recent decades. Nevertheless, research related to NH3 emissions after application fertilizers is still limited in particular with respect to relationships to emissions, fertilizer type, site conditions and crop growth. Due to the variable response of crops to treatments, effects can only be validated in experimental designs including field replication for statistical testing. The dominating ammonia loss methods yielding quantitative emissions require large field areas, expensive equipment or current supply, which restricts their application in replicated field trials. This protocol describes a new methodology for the measurement of NH3 emissions on many plots linking a simple semi-quantitative measuring method used in all plots, with a quantitative method by simultaneous measurements using both methods on selected plots. As a semi-quantitative measurement method passive samplers are used. The second method is a dynamic chamber method (Dynamic Tube Method) to obtain a transfer quotient, which converts the semi-quantitative losses of the passive sampler to quantitative losses (kg nitrogen ha-1). The principle underlying this approach is that passive samplers placed in a homogeneous experimental field have the same NH3 absorption behavior under identical environmental conditions. Therefore, a transfer co-efficient obtained from single passive samplers can be used to scale the values of all passive samplers used in the same field trial. The method proved valid under a wide range of experimental conditions and is recommended to be used under conditions with bare soil or small canopies (&#60;0.3 m). Results obtained from experiments with taller plants should be treated more carefully.

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Ammonia emissions are a major threat to the environment by eutrophication, soil acidification and fine particle formation and stem mainly from agricultural sources. This method allows ammonia loss measurements in replicated field trials enabling statistical analysis of emissions and of relationships between crop development and emissions.

מכויל דגימה פסיבית - מדידות שדה רבה-עלילה של NH<sub&gt; 3</sub&gt; פליטות עם שילוב של שיטת Tube הדינמית דוגמים פסיביים

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% ...

Spotting Cheetahs: Identifying Individuals by Their Footprints

The cheetah (Acinonyx jubatus) is Africa's most endangered large felid and listed as Vulnerable with a declining population trend by the IUCN1. It ranges widely over sub-Saharan Africa and in parts of the Middle East. Cheetah conservationists face two major challenges, conflict with landowners over the killing of domestic livestock, and concern over range contraction. Understanding of the latter remains particularly poor2. Namibia is believed to support the largest number of cheetahs of any range country, around 30%, but estimates range from 2,9053 to 13,5204. The disparity is likely a result of the different techniques used in monitoring.
Current techniques, including invasive tagging with VHF or satellite/GPS collars, can be costly and unreliable. The footprint identification technique5 is a new tool accessible to both field scientists and also citizens with smartphones, who could potentially augment data collection. The footprint identification technique analyzes digital images of footprints captured according to a standardized protocol. Images are optimized and measured in data visualization software. Measurements of distances, angles, and areas of the footprint images are analyzed using a robust cross-validated pairwise discriminant analysis based on a customized model. The final output is in the form of a Ward's cluster dendrogram. A user-friendly graphic user interface (GUI) allows the user immediate access and clear interpretation of classification results.
The footprint identification technique algorithms are species specific because each species has a unique anatomy. The technique runs in a data visualization software, using its own scripting language (jsl) that can be customized for the footprint anatomy of any species. An initial classification algorithm is built from a training database of footprints from that species, collected from individuals of known identity. An algorithm derived from a cheetah of known identity is then able to classify free-ranging cheetahs of unknown identity. The footprint identification technique predicts individual cheetah identity with an accuracy of &gt;90%.

The cheetah (Acinonyx jubatus) is an iconic, endangered species, but conservation efforts are challenged by habitat shrinkage and conflict with commercial farmers. The footprint identification technique, a robust, accurate and cost-effective image classification system, is a new approach to monitoring cheetahs.

בחינת ברדלסים: אנשי זיהוי על ידי עקביהם

The cheetah (Acinonyx jubatus) is Africa's most endangered large felid and listed as Vulnerable with a declining population trend by the IUCN1. It ranges ...

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and detritus, and excreting particulate and dissolved compounds, they serve as important agents for benthic-pelagic coupling. Accurately measuring the compounds removed and excreted by suspension feeders (such as sponges, ascidians, polychaetes, bivalves) is crucial for the study of their physiology, metabolism, and feeding ecology, and is fundamental to determine the ecological relevance of the nutrient fluxes mediated by these organisms. However, the assessment of the rate by which suspension feeders process particulate and dissolved compounds in nature is restricted by the limitations of the currently available methodologies. Our goal was to develop a simple, reliable, and non-intrusive method that would allow clean and controlled water sampling from a specific point, such as the excurrent aperture of benthic suspension feeders, in situ. Our method allows simultaneous sampling of inhaled and exhaled water of the studied organism by using minute tubes installed on a custom-built manipulator device and carefully positioned inside the exhalant orifice of the sampled organism. Piercing a septum on the collecting vessel with a syringe needle attached to the distal end of each tube allows the external pressure to slowly force the sampled water into the vessel through the sampling tube. The slow and controlled sampling rate allows integrating the inherent patchiness in the water while ensuring contamination free sampling. We provide recommendations for the most suitable filtering devices, collection vessel, and storing procedures for the analyses of different particulate and dissolved compounds. The VacuSIP system offers a reliable method for the quantification of undisturbed suspension feeder metabolism in natural conditions that is cheap and easy to learn and apply to assess the physiology and functional role of filter feeders in different ecosystems.

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

We introduce the VacuSIP, a simple, non-intrusive, and reliable method for clean and accurate point sampling of water. The system was developed and evaluated for the simultaneous collection of the water inhaled and exhaled by benthic suspension feeders in situ, to cleanly measure removal and excretion of particulate and dissolved compounds.

VacuSIP, שיטת INEX משופרת<em&gt; באתרו</em&gt; מדידה של חלקיקים מומס תרכובות מעובד על ידי האכלת השעית Active

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropod populations in rice. When used in combination with an enclosure, application of this sampling device provides absolute estimates of the populations of arthropods as numbers per standardized sampling area. The sampling efficiency depends critically on the sampling duration. In a mature rice crop, a two-minute sampling in an enclosure of 0.13 m2 yields more than 90% of the arthropod population. The device also allows sampling of arthropods dwelling on the water surface or the soil in rice paddies, but it is not suitable for sampling fast flying insects, such as predatory Odonata or larger hymenopterous parasitoids. The modified blower-vac is simple to construct, and cheaper and easier to handle than traditional suction sampling devices, such as D-vac. The low cost makes the modified blower-vac also accessible to researchers in developing countries.

Assessment of arthropod abundance in crops is critical for investigating population dynamics and species interactions. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropods in rice.

שינוי ויישום של VAC מפוח עלים עבור דגימת שדה של פרוקי רגליים

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester fabric and glue can be folded and glued to construct a strip of compartments that house seeds and identifying information, while allowing contact with soil leachate, water, microorganisms, and ambient temperature. Strips may be constructed with a wide range of compartment numbers and sizes and allow the researcher to house a variety of genotypes within a single species, different species, or seeds that have experienced different treatments. As opposed to individual seed packets, strips are more easily retrieved as a unit. While replicate packets can be included within a strip, different strips can act as blocks or can be retrieved at different times for observation of seed behavior over time. We used a high temperature glue gun to delineate compartments and sealed the strips once the seed and tags identifying block and removal times were inserted. The seed strips were then buried in the field at the desired depth, with the location marked for later removal. Burrowing animal predators were effectively excluded by use of a covering of metal mesh hardware cloth on the soil surface. After the selected time interval for burial, strips were dug up and seeds were assessed for germination, dormancy and mortality. While clearly dead seeds can often be distinguished from ungerminated living ones by eye, dormant seeds were conclusively identified using a standard Tetrazolium chloride colorimetric test for seed viability.

Here we present a protocol for assessing seed survivorship, germination and dormancy under field conditions using buried, labeled seed strips and tetrazolium chloride (TZ) viability testing.

דרך אמין להערכת זרע נביטה, תרדמת, ותמותה בתנאי שדה

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

Construction of a Compact Low-Cost Radiation Shield for Air-Temperature Sensors in Ecological Field Studies

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although cost-effective, if not deployed with proper solar radiation shielding, the observations recorded from these sensors will be biased and inaccurate. Manufactured radiation shields are effective at minimizing this bias, but are expensive compared to the cost of these sensors. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom fabricated radiation shield, which is more accurate than other published shielding methods that attempt to minimize shield size or construction costs. The method requires very little material: corrugated plastic sheets, aluminum foil duct tape, and cable ties. One 15 cm and two 10 cm squares of corrugated plastic are used for each shield. After cutting, scoring, taping and stapling of the sheets, the 10 cm squares form the bottom two layers of the solar radiation shield, while the 15 cm square forms the top layer. The three sheets are held together with cable ties. This compact solar radiation shield can be suspended, or placed against any flat surface. Care must be taken to ensure that the shield is completely parallel to the ground to prevent direct solar radiation from reaching the sensor, possibly causing increased warm biases in sun-exposed sites in the morning and afternoon relative to the original, larger design. Even so, differences in recorded temperatures between the smaller, compact shield design and the original design were small (mean daytime bias = 0.06 &#176;C). Construction costs are less than half of the original shield design, and the new design results in a less conspicuous instrument that may be advantageous in many field ecology settings.

With the advent of small, low-cost environmental sensors, it is now possible to deploy high-density networks of sensors to measure hyper localized temperature variation. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom-fabricated radiation shield for use with inexpensive thermochrons.

בניית מגן קרינה נמוכים קומפקטי לחיישני הטמפרטורה בלימודי שדה אקולוגי

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although ...

Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform across ecological zones. To best protect public and veterinary health from these insects, the environmental limitations of pesticides need to be investigated to inform effective use of the most appropriate pesticide formulations and techniques. We have developed a research program to evaluate combinations of pesticides, pesticide application equipment, and application techniques in hot-arid desert, hot-humid tropical, warm and cool temperate, and urban locations to derive pesticide use guidelines specific to target insect and environment. To these ends we designed a system of protocols to support efficient, cost-effective, portable, and standardized evaluation of a diverse range of pesticides and equipment across multiple environments. At the core of these protocols is the use of an array of small cages with colony-reared sentinel mosquitoes (adults and immatures) and sand flies (adults), strategically arranged in natural habitats and exposed to pesticide spray. Spatial and temporal patterns of pesticide efficacy are derived from percent mortality in sentinel cages, then mapped and visualized in a geographic information system. Maps of sentinel mortality data may be statistically compared to evaluate relative efficacy of a pesticide across multiple environments, or to study multiple pesticides in a single environment. Protocols may be modified to accommodate a variety of scenarios, including, for example, the vertical orientation of sentinels in canopy habitats or simultaneous testing of ground and aerial application methods.

The efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects is not uniform across different ecological zones. Here we present a system of techniques using captive vector insects as sentinels for pesticide efficacy to derive electronic maps supporting the standard evaluation of pesticides across multiple environments.

להמחיש את היעילות של חומרי הדברה נגד יתושים וקטור מחלת בשטח

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform ...

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster (Nephrops norvegicus)

We present a protocol related to a video-tracking technique based on the background subtraction and image thresholding that makes it possible to individually track cohoused animals. We tested the tracking routine with four cohoused Norway lobsters (Nephrops norvegicus) under light-darkness conditions for 5 days. The lobsters had been individually tagged. The experimental setup and the tracking techniques used are entirely based on the open source software. The comparison of the tracking output with a manual detection indicates that the lobsters were correctly detected 69% of the times. Among the correctly detected lobsters, their individual tags were correctly identified 89.5% of the times. Considering the frame rate used in the protocol and the movement rate of lobsters, the performance of the video tracking has a good quality, and the representative results support the validity of the protocol in producing valuable data for research needs (individual space occupancy or locomotor activity patterns). The protocol presented here can be easily customized and is, hence, transferable to other species where the individual tracking of specimens in a group can be valuable for answering research questions.

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster Nephrops norvegicus

Here we present a protocol to individually track animals over a long period of time. It uses computer vision methods to identify a set of manually constructed tags by using a group of lobsters as case study, simultaneously providing information on how to house, manipulate, and mark the lobsters.

מעקב וידאו לטווח ארוך של בעלי חיים ימיים Cohoused: חקר מקרה של הפעילות גינקולוגיות יומי של הלובסטר של נורבגיה (Nephrops norvegicus)

We present a protocol related to a video-tracking technique based on the background subtraction and image thresholding that makes it possible to ...

Standard Operating Procedure for Lyssavirus Surveillance of the Bat Population in Taiwan

Viruses within the genus Lyssavirus are zoonotic pathogens, and at least seven lyssavirus species are associated with human cases. Because bats are natural reservoirs of most lyssaviruses, a lyssavirus surveillance program of bats has been conducted in Taiwan since 2008 to understand the ecology of these viruses in bats. In this program, non-governmental bat conservation organizations and local animal disease control centers cooperated to collect dead bats or bats dying of weakness or illness. Brain tissues of bats were obtained through necropsy and subjected to direct fluorescent antibody test (FAT) and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for detection of lyssavirus antigens and nucleic acids. For the FAT, at least two different rabies diagnosis conjugates are recommended. For the RT-PCR, two sets of primers (JW12/N165-146, N113F/N304R) are used to amplify a partial sequence of the lyssavirus nucleoprotein gene. This surveillance program monitors lyssaviruses and other zoonotic agents in bats. Taiwan bat lyssavirus is found in two cases of the Japanese pipistrelle (Pipistrellus abramus) in 2016&#8211;2017. These findings should inform the public, health professionals, and scientists of the potential risks of contacting bats and other wildlife.

This protocol introduces a standard laboratory operating procedure for diagnostic testing of lyssavirus antigens in bats in Taiwan.

נוהל הפעלה רגיל של מעקב וירוס של אוכלוסיית העטלף בטייוואן

Viruses within the genus Lyssavirus are zoonotic pathogens, and at least seven lyssavirus species are associated with human cases. Because bats are ...