The authors acknowledge support from a Translational Breast Cancer Research Grant (14-60-26-BROC to AB) from the Breast Cancer Research Foundation and the American Association for Cancer Research.

נהלים באמצעות בנושאים בעלי חיים אושרו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש מאוניברסיטת טקסס באוסטין. 1. הכנה לפני הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את משקל הגוף של כל ארנבת. כמו בכל במחקרים פרה, לפקח משקולות חיה בקביעות כדי להעריך את רעילות אפשרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני הרדמה הארנב, למלא צינור חרוטי 50 מ&quot;ל עם ג&#39;ל ספין אולטרסאונד זמינים מסחרית ב XG 500 עבור 30 s; לא אמור להיות שום בועות גלויות בתוך הג&#39;ל עם השלמת צנטריפוגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל תת עורי glycopyrrolate במינון של 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג ו acepromazine לשריר במינון של 0.75 מ&quot;ג / ק&quot;ג. מתן 15-20 דקות עבור ההרגעה ייכנס לתוקף תוך מעקב אחר סימנים והתנהגות חיוניים. הערה: Glycopyrrolate הוא סוכן אנטי-כולינרגיות שמונע ברדיקרדיה ומפחית פרשות נשימת עיכול. Acepromazine היא תרופת הרגעה, אשר משמשת premedicatiעל הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל 35 מ&quot;ג / ק&quot;ג של קטמין ו 5 מ&quot;ג / ק&quot;ג של xylazine תת עורי כמו הרדמה. עם זאת, כמפעיל הופך להיות יותר מנוסה יכול לבצע את משלוח intraductal במהירות רבה יותר, להקטין את המינונים התרופה ל -15 מ&quot;ג / ק&quot;ג של קטמין ו 3 מ&quot;ג / ק&quot;ג של תת-עורית xylazine; זה יקצר את זמן ההרדמה ואת הזמן הנדרש עבור החיה להתאושש מההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק ולתעד את קצב הלב, 2 SPO, טמפרטורה, קצב נשימה, וצבע קרום ריר כל 15 דק &#39;. החל סיכת עין לשתי העיניים. הערה: רק טכנאים שעברו הכשרה מתאימה אושרו על ידי IACUC של המוסד שלהם צריך לנהל או לפקח הרדמה. שימוש צג הרדמת וטרינרים יכול לסייע ברכישת סימנים חיוניים והוא מומלץ. צג הרדמת הווטרינרים, לעומת זאת, אינו מחליף את הצורך לבדוק באופן ידני את החיה כל 15 דק &#39;. ראו את הוראות היצרן fאו את השימוש הנכון של צג וטרינרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את התחלתה של הרדמה על ידי קמצוץ בוהן עדין; הארנב צריך להיות ללא תגובה לפני שתמשיך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לגלח את הבטן הזנב של הארנב באזור סביב זוגות השלישי והרביעי של מוצצים מפשעתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם רוב של השיער הוסר, להחיל קרם להסרת שיער Over-the-counter לאזור המגולח. הסר את דקות שמנת 10 לאחר יישום באמצעות מגבות נייר לחה רטובות עם מים חמים. הערה: ארנב עור הוא מאוד שביר / רגיש. הקרם להסרת השיער אמור לשמש לא יותר מ -10 דקות. למעשה, זה בטוח לנסות &quot;נקודת מבחן&quot; ב 5 דקות ורק לעזוב על זמן רב יותר אם במקום בדיקה מצביע על זמן ארוך יותר תקופה נדרשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נגב את האזור עם פדי גזה ספוג באלכוהול לניקוי הזריקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את הארנב על dorsum שלה שוקת נ בצורה מרופדת שמיכת מים חמה הסירקולציה מחודשת וכרית סופגת. </li></ol> 2. Preparation של חומר ניגוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחדש את מגיב בניגוד הלא ממוקד על פי הוראות היצרן. פיפטה למעלה ולמטה בעדינות לתערובת. הערה: חומר הניגוד להשתמש בפרוטוקול זה הוא יציב בטמפרטורת חדר למשך 4 - 6 שעות לאחר כינון מחדש. נער בעדינות את הבקבוקון בין כל אחזור. הערה: היקף הפתרון הנדרש יהיה תלוי במספר הצינוריות להיות מוזרק. הארנב יש 4 פתחים ductal לכל פטמה, ו -0.2 מ&quot;ל של תמיסת מספיקה כדי למלא עץ ductal אחד של הארנב הלבן מבוגר ניו זילנד (Oryctolaguscuniculus). לכן, בהיקף כולל של 0.8 מיליליטר עשוי להישלח בלוטת חלב אחד. </li></ol> 3. משלוח Intraductal <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את הפטמות המתאים להיות מוזרק; זוגות -3 וה -4 th של מוצצי מפשעה מומלצים, כפי שהם דמיינו בקלות כאשר החיה ממוקמת על dorsum שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען 0.2 מ&quot;ל של תמיסת מלח 0.9% סטרילי לתוךמזרק טוברקולין 1 מ&quot;ל Luer נעילת עם מחט 22 G. כראוי להשליך את המחט 22 G פעם מלוחים הוא בתוך המזרק ולהחליף אותו עם מחט 25-מד סטרילית. נגב בעדינות את האזור עם אלכוהול איזופרופיל 85% על פד גזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם השיפוע של עד המחט במקביל המזרק לגוף של בעלי החיים, להכניס את השיפוע של המחט לתוך הצד של הפטמה לאט להזריק 0.1-0.2 מיליליטר של תמיסת מלח; זה יאפשר להדמיה טובה יותר של פתחי ductal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען 0.2 מ&quot;ל של תמיסת ההזרקה לתוך מזרק טוברקולין מ&quot;ל Luer נעילת 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את הפטמה בעדינות עם האגודל ואצבע מורה ומרים אותו מעט כדי למקם אותו על הזרקת intraductal; זכוכית מגדלת עינית לביש עשויה לסייע לדמיין את פתחי ductal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוך שמירה על עמדת הרים של הפטמה, בזהירות cannulate צינור עניין באמצעות מחט 25 G קהה קצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר cannulation, בעדינות לסובב את מזרק נעילת Luer ברכזת של-t הבוטהמחט עירוי ip עד שהוא ננעל במקומו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את פטמה ולהזריק הפתרון לאט כדי למזער את הנזק הפוטנציאלי שנגרם על ידי העברת נוזל במהירות בתוך צינור; ללא בזמן אם יש התנגדות כאשר הזרקת הפתרון. </li></ol> 4. הדמיה אולטראסאונד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח כמות ליברלית של ג&#39;ל אולטרסאונד centrifuged על העור של האזור של עניין. ודא שאין בועות בתוך הג&#39;ל, כמו אלה יתפשרו על איכות התמונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את עומק הדמיה עד 6 מ&quot;מ. מניחים את מתמר 21 מגה-הרץ במגע עם ג&#39;ל ולסרוק את האזור של עניין במצב B. שים את חומר הניגוד באזור הסרוקים לרבות פתיחת ductal וברחבי הדביקים. הערה: הגדרות אלו פותחו לשימוש עם מכונת אולטרסאונד ספציפית photoacoustic. עיין בטבלה של חומרים לקבלת פרטים נוספים. זה עשוי להיות נחוץ כדי להתאים את עוצמת השידור ועומק הדמיה של מערכות הדמיה אחרות כדי לייעל חלבלהדמיה בלוטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את ג&#39;ל אולטרסאונד מעורו של בעלי החיים עם פד גזה. </li></ol> 5. טיפול לאחר הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את הזריקה: לא אמור להיות שום סימנים של טראומה לאזור הפטמה או הרקמה הסובבת, ונפיחות באזור המקיף את הפטמה מציינת שקיימת זריקת כרית שומן חלב ולא הזרקה intraductal מוצלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הארנב בעמדה sternal. במידת הצורך, לתת 0.2 מ&quot;ג / ק&quot;ג של yohimbine לווריד אל הווריד האוזן שולית; זה יהיה לבטל את ההשפעה של xylazine ולאפשר החיה להתאושש מהר יותר מן ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג הארנב כל 15 דקות במהלך תקופת ההתאוששות עד שהחיה היא התראה, בעלי תגובה שומרת על מעמדה sternal. הערה: הליך זה לא צריך לגרום נזק לרקמות או נפיחות. אם אדמומיות או נפיחות הם נצפו, לנהל מנה של מ&quot;ג meloxicam 0.1-0.2 / קילו PO פעם החיה ערנית ומסוגליםלקחת תרופות דרך הפה. יצירת קשר עם צוות הווטרינרים של המוסד לקבלת הדרכה נוספת. </li></ol>

<ol>
	<li>Flanagan, M., Love, S., Hwang, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Status+of+Intraductal+Therapy+for+Ductal+Carcinoma+in+Situ.">Status of Intraductal Therapy for Ductal Carcinoma in Situ.</a> Curr Breast Cancer Rep. 2 (2), 75-82 (2010).</li><li>Love, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Feasibility+Study+of+the+Intraductal+Administration+of+Chemotherapy.">A Feasibility Study of the Intraductal Administration of Chemotherapy.</a> Cancer Prevention Research. 6 (1), 51-58 (2013).</li><li>Stearns, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+and+Clinical+Evaluation+of+Intraductally+Administered+Agents+in+Early+Breast+Cancer.">Preclinical and Clinical Evaluation of Intraductally Administered Agents in Early Breast Cancer.</a> Sci Transl Med. 3 (106), 106ra108 (2011).</li><li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Safety+Parameters+of+the+Study+on+Intraductal+Cytotoxic+Agent+Delivery+to+the+Breast+before+Mastectomy.">The Safety Parameters of the Study on Intraductal Cytotoxic Agent Delivery to the Breast before Mastectomy.</a> Chin J Cancer Res. 26 (5), 579-587 (2014).</li><li>Mahoney, M. E., Gordon, E. J., Rao, J. Y., Jin, Y., Hylton, N., Love, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraductal+Therapy+of+Ductal+Carcinoma+In+Situ:+a+Presurgery+Study.">Intraductal Therapy of Ductal Carcinoma In Situ: a Presurgery Study.</a> Clin Breast Cancer. 13 (4), 280-286 (2013).</li><li>Murata, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ductal+Access+for+Prevention+and+Therapy+of+Mammary+Tumors.">Ductal Access for Prevention and Therapy of Mammary Tumors.</a> Cancer Res. 66 (2), 638-645 (2006).</li><li>Chun, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraductally+Administered+Pegylated+Liposomal+Doxorubicin+Reduces+Mammary+Stem+Cell+Function+In+the+Mammary+Gland+but+in+the+Long+Term,+Induces+Malignant+Tumors.">Intraductally Administered Pegylated Liposomal Doxorubicin Reduces Mammary Stem Cell Function In the Mammary Gland but in the Long Term, Induces Malignant Tumors.</a> Breast Cancer Res Treat. 135 (1), 201-208 (2012).</li><li>Brock, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silencing+HoxA1+by+Intraductal+Injection+of+siRNA+Lipidoid+Nanoparticles+Prevents+Mammary+Tumor+Progression+in+Mice.">Silencing HoxA1 by Intraductal Injection of siRNA Lipidoid Nanoparticles Prevents Mammary Tumor Progression in Mice.</a> Sci Trans Med. 6 (217), 2172a2 (2014).</li><li>Krause, S., Brock, A., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraductal+Injection+For+Localized+Drug+Delivery+To+The+Mouse+Mammary+Epithelium.">Intraductal Injection For Localized Drug Delivery To The Mouse Mammary Epithelium.</a> J Vis Exp. (80), e50692 (2013).</li><li>Brock, A., Goh, H. T., Yang, B., Yu, L., Li, H., Loh, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+Reprogramming:+A+New+Technology+Frontier+In+Pharmaceutical+Research.">Cellular Reprogramming: A New Technology Frontier In Pharmaceutical Research.</a> Pharm Res. 29 (1), 35-52 (2012).</li><li>Silverstein, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ductal+Carcinoma+In+Situ+of+the+Breast.">Ductal Carcinoma In Situ of the Breast.</a> Annu. Rev Med. 51, 17-32 (2000).</li><li>Love, S. M., Barsky, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+Nipple+And+Breast+Ducts+Revisited.">Anatomy of the Nipple And Breast Ducts Revisited.</a> Cancer. 101 (9), 1947-1957 (2004).</li><li>Virnig, B. A., Shamliyan, T., Tuttle, T. M., Kane, R. L., Wilt, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+Management+of+Ductal+Carcinoma+In+Situ+(DCIS).">Diagnosis and Management of Ductal Carcinoma In Situ (DCIS).</a> Evidence Report/Technology Assessment. , 185 (2009).</li><li>Mills, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examination+of+Duct+Physiology+in+the+Human+Mammary+Gland.">Examination of Duct Physiology in the Human Mammary Gland.</a> PLoS One. 11 (4), e0150653 (2016).</li><li>King, B. L., Love, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Intraductal+Approach+to+the+Breast:+Raison+d'Etre.">The Intraductal Approach to the Breast: Raison d'Etre.</a> Breast Cancer Res. 8 (2), 206 (2006).</li><li>Bu, W., Xin, L., Toneff, M., Li, L., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus+vectors+for+stably+introducing+genes+into+mammary+epithelial+cells+in+vivo+.">Lentivirus vectors for stably introducing genes into mammary epithelial cells in vivo .</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14, 401-404 (2009).</li><li>Lyons, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Direct+Mammotrophic+Action+of+Lactogenic+Hormone.">The Direct Mammotrophic Action of Lactogenic Hormone.</a> Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 51 (2), 308-311 (1942).</li><li>Fiddler, T. J., Birkinshaw, M., Falconer, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+Of+Intraductal+Prolactin+On+Some+Aspects+of+the+Ultrastructure+and+Biochemistry+of+Mammary+Tissue+in+the+Pseudopregnant+Rabbit.">Effects Of Intraductal Prolactin On Some Aspects of the Ultrastructure and Biochemistry of Mammary Tissue in the Pseudopregnant Rabbit.</a> J Endocrinol. 49 (3), 459-469 (1971).</li><li>Falconer, I. R., Fiddler, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Intraductal+Administration+Of+Prolactin,+Actinomycin+D+and+Cycloheximide+on+Lipoprotein+Lipase+Activity+in+the+Mammary+Glands+of+Pseudopregnant+Rabbits.">Effects of Intraductal Administration Of Prolactin, Actinomycin D and Cycloheximide on Lipoprotein Lipase Activity in the Mammary Glands of Pseudopregnant Rabbits.</a> Biochim Biophys Acta. 218 (3), 508-514 (1970).</li><li>Singh, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+Molecular+Size+on+the+Retention+of+Polymeric+Nanocarrier+Diagnostic+Agents+in+Breast+Ducts.">Influence of Molecular Size on the Retention of Polymeric Nanocarrier Diagnostic Agents in Breast Ducts.</a> Pharm Res. 29 (9), 2377-2388 (2012).</li><li>Jain, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atypical+Ductal+Hyperplasia:+Interobserver+and+Intraobserver+Variability.">Atypical Ductal Hyperplasia: Interobserver and Intraobserver Variability.</a> Mod Pathol. 24 (7), 917-923 (2011).</li><li>Betsill, W. L., Rosen, P. P., Lieberman, P. H., Robbins, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraductal+Carcinoma.+Long-term+Follow-up+After+Treatment+by+Biopsy+Alone.">Intraductal Carcinoma. Long-term Follow-up After Treatment by Biopsy Alone.</a> JAMA. 239 (18), 1863-1867 (1978).</li><li>Eusebi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+Follow-up+of+In+Situ+Carcinoma+of+the+Breast.">Long-term Follow-up of In Situ Carcinoma of the Breast.</a> Semin Diagn Pathol. 11 (3), 223-235 (1994).</li><li>Sanders, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Natural+History+Of+Low-Grade+Ductal+Carcinoma+In+Situ+Of+The+Breast+In+Women+Treated+By+Biopsy+Only+Revealed+Over+30+Years+Of+Long-Term+Follow-Up.">The Natural History Of Low-Grade Ductal Carcinoma In Situ Of The Breast In Women Treated By Biopsy Only Revealed Over 30 Years Of Long-Term Follow-Up.</a> Cancer. 103 (12), 2481-2484 (2005).</li><li>Esserman, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Addressing+Overdiagnosis+and+Overtreatment+in+Cancer:+A+Prescription+For+Change.">Addressing Overdiagnosis and Overtreatment in Cancer: A Prescription For Change.</a> Lancet Oncol. 15 (6), e234-e242 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

שיטה זו של מסירת intraductal אל בלוטת חלב הארנב עשויה לשמש ריאגנטים בניגוד אולטרסאונד ותמיסות מימיות רבות אחרות, כוללים הצבעים ותרופות חיוניים. מחקרים קודמים הדגימו את משלוח intraductal של הורמונים 17, 18, 19. במודלים של מכרסמים, ?...

<html> משלוח intraductal ממוקד של תרופות נחקר במודלים של מכרסמים ו בניסויים בבני אדם בשלב מוקדם 3, 4, 5, 6, 11, 12. שלב א אחרון אני לומד הדגים את הבטיחות והיתכנות של קרבופלטין intraductal או דוקסורוביצין liposomal pegylated intraductal בנשים ממתינות כריתת שד לטיפול סרטן פולשני 2. פרוטוקולים קודמים למסירה intraductal פותחו עבור בלוטות עכבר וחולדה החלב 6, 7, 8, 9. למטרות מחקר, זריקות תאים סרטניים intraductal ואת משלוח וקטור lentiviral של אונקוגנים גם בוצעו במודלים של מכרסמיםנ&quot;צ &quot;&gt; 13, 14, 15, 16. עם זאת, אידאל במודל vivo של תהליך מסירת intraductal צריך לאפשר הפיתוח של כיתות רומן של תרכובות טיפוליות ולהקל הערכה פרה-קלינית. הבדלים אנטומיים בין מכרסמים ובני האדם יש מסובך התרגום של אלה לימודים. בניגוד עכברים, שבו כל צינור מסתיים פטמה נפרדת, השד האנושי מורכב 5 עד 9 מערכות ductal עצמאיות, כל אחד עם פתיחה נפרדת ומסתיימת הפטמה. בלוטות חלב ארנב נמל ארבע מערכות ductal עצמאיות, כל אחד בנפרד, נגישה באמצעות אחד מארבעה פתחים בבית פטמה אחת. דגם ארנב יותר תואם במידה רבה את האנטומיה של גוף האדם, ומרשה המחקר של אספקת סמים intraductal בהקשר רלוונטי יותר. כאן, אנו משתמשים בשתי טכניקות כדי להעריך משלוח intraductal. שיתוף הממשל שלחיוני לצבוע היתרים להדמיה דרך העור ומספק אישור פשוט ומהיר של השיטה. עבור יישומים מסוימים, מיפוי ברזולוציה גבוהה של צינוריות עשוי להיות מועדף. אנו מציגים כאן פרוטוקול הדמיה אולטרסאונד של צינוריות דרך משלוח intraductal של ריאגנט בניגוד הלא ממוקד.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>MicroMarker non-targeted contrast reagent</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>VS-11694</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock 1mL Syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycopyrrolate 0.2mg/mL</td>
			<td>Wedgewood Compounding Pharmacy</td>
			<td>GLYCOP-INJ013VC</td>
			<td>6 month shelf life, supply may be limited.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulfate 0.5 mg/mL</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>15320764</td>
			<td>If glycopyrrolate is unavailable. Not to be combined with glycopyrrolate.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine HCL 100mg/mL</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>21250699</td>
			<td><a href="http://www.animalhealthinternational.com/">http://www.animalhealthinternational.com/</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine 10mg/mL</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>17640541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine 20mg/mL</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>20101547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yohimbine 0.2mg/mL</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>14588965</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Removing Cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td>Sensitive skin solution. Available through local retailers.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt tip infusion needles</td>
			<td>Sai Infusion Technology</td>
			<td>B14-50</td>
			<td><a href="http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles">http://www.sai-infusion.com/collections/blunt-needles</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary Pulse Oximeter</td>
			<td>EdanUSA</td>
			<td>VE-H100B</td>
			<td><a href="http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html">http://www.edanusa.com/Product/VE-H100B-Veterinary-Pulse-Oximeter.html</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warm Water Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td>TP700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warm Water Blanket</td>
			<td>Animal Health International</td>
			<td>21232696</td>
			<td>Maxi-Therm Lite Warming Pads</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound system</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intraductal delivery to the rabbit mammary gland

טיפולי intraductal המרוכזות לסרטן השד להציע יתרונות פוטנציאליים, כולל אספקה יעילה אל הגידול רעיל סיסטמית מופחתים ותופעות לוואי 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7. עם זאת, מספר אתגרים להישאר לפני טיפולים אלו יכולים להיות מיושמים באופן נרחב יותר. פיתוח ואימות של הרפוי intraductal במודל חיה מתאים להקל על פיתוח של אסטרטגיות טיפוליות intraductal לחולים. בעוד בלוטת חלב עכבר כבר בשימוש נרחב כמערכת מודל של פיתוח חלב tumorigenesis, האנטומיה היא נבדל בלוטת האדם. במודל חי גדול יותר, כמו הארנב, עשוי לשמש מודל טוב יותר עבור מבנה בלוטת חלב ופיתוח טיפולי intraductal. ב- Contrast לעכברים, שבה עשרה עצים ductal מופצים מרחבית לאורך ציר הגוף, כל שמסתיים בבית פטמה נפרדת, בלוטת חלב ארנב יותר דומה בלוטת האדם, עם מערכות ductal חופף מרובות כי יציאה דרך פתחים נפרדים פטמה אחת. כאן, אנו מציגים שיטות זעירות-פולשנית המסירה של ריאגנטים ישירות לתוך צינור חלב הארנב להדמיה של המשלוח עצם עם הדמיה אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה.

<html> כאן, אנו מראים כי משלוח intraductal של ריאגנטים בניגוד צינוריות החלב של ארנב יכול להיות מושגת ללא טראומה לרקמה (איור 2). בארנבות, ארבע מערכות ductal נפרדות להתכנס פטמה אחת ולכן ניתן לגשת צלמו בנפרד באמצעות שיטה זו. פתחי ductal פרט הם דמיינו בקלות; לצי?...

Watch this Scientific Journal Video about Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland at JoVE.com

Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland

Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents.

משלוח Intraductal אל ארנב חלב בלוט

Localized intraductal treatments for breast cancer offer potential advantages, including efficient delivery to the tumor and reduced systemic toxicity and ...

intraductal-delivery-to-the-rabbit-mammary-gland

Research

JoVE Journal

Bioengineering

9.2K Views.  The University of Texas at Austin. Here, we describe a technique for the localized delivery of reagents to the rabbit mammary gland via an intraductal injection. In addition, we describe a protocol for visualization and the confirmation of delivery by high-resolution ultrasound imaging of contrast agents. 

Video: Intraductal Delivery to the Rabbit Mammary Gland

Multiparametric Optical Mapping of the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not have been accomplished by other approaches1. With the use of the calcium- and voltage-sensitive dyes, optical mapping allows measurement of transmembrane action potentials and calcium transients with high spatial resolution without the physical contact with the tissue. This makes measurements of the cardiac electrical activity possible under many conditions where the use of electrodes is inconvenient or impossible1. For example, optical recordings provide accurate morphological changes of membrane potential during and immediately after stimulation and defibrillation, while conventional electrode techniques suffer from stimulus-induced artifacts during and after stimuli due to electrode polarization1. 
The Langendorff-perfused rabbit heart is one of the most studied models of human heart physiology and pathophysiology. Many types of arrhythmias observed clinically could be recapitulated in the rabbit heart model. It was shown that wave patterns in the rabbit heart during ventricular arrhythmias, determined by effective size of the heart and the wavelength of reentry, are very similar to that in the human heart2. It was also shown that critical aspects of excitation-contraction (EC) coupling in rabbit myocardium, such as the relative contribution of sarcoplasmic reticulum (SR), is very similar to human EC coupling3. Here we present the basic procedures of optical mapping experiments in Langendorff-perfused rabbit hearts, including the Langendorff perfusion system setup, the optical mapping systems setup, the isolation and cannulation of the heart, perfusion and dye-staining of the heart, excitation-contraction uncoupling, and collection of optical signals. These methods could be also applied to the heart from species other than rabbit with adjustments to flow rates, optics, solutions, etc.
Two optical mapping systems are described. The panoramic mapping system is used to map the entire epicardium of the rabbit heart4-7. This system provides a global view of the evolution of reentrant circuits during arrhythmogenesis and defibrillation, and has been used to study the mechanisms of arrhythmias and antiarrhythmia therapy8,9. The dual mapping system is used to map the action potential (AP) and calcium transient (CaT) simultaneously from the same field of view10-13. This approach has enhanced our understanding of the important role of calcium in the electrical alternans and the induction of arrhythmia14-16.

This article describes the basic procedures for conducting optical mapping experiments in the Langendorff-perfused rabbit heart using the panoramic imaging system, and the dual (voltage and calcium) imaging modality.

Multiparametric מיפוי אופטי של הלב Langendorff-perfused הארנב

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic valve leaflets are composed of interstitial cells suspended within an extracellular matrix (ECM) and are lined with an endothelial cell monolayer. The valve withstands a harsh, dynamic environment and is constantly exposed to shear, flexion, tension, and compression. Research has shown calcific lesions in diseased valves occur in areas of high mechanical stress as a result of endothelial disruption or interstitial matrix damage1-3. Hence, it is not surprising that epidemiological studies have shown high blood pressure to be a leading risk factor in the onset of aortic valve disease4. 
The only treatment option currently available for valve disease is surgical replacement of the diseased valve with a bioprosthetic or mechanical valve5. Improved understanding of valve biology in response to physical stresses would help elucidate the mechanisms of valve pathogenesis. In turn, this could help in the development of non-invasive therapies such as pharmaceutical intervention or prevention. Several bioreactors have been previously developed to study the mechanobiology of native or engineered heart valves6-9. Pulsatile bioreactors have also been developed to study a range of tissues including cartilage10, bone11 and bladder12. The aim of this work was to develop a cyclic pressure system that could be used to elucidate the biological response of aortic valve leaflets to increased pressure loads. 
The system consisted of an acrylic chamber in which to place samples and produce cyclic pressure, viton diaphragm solenoid valves to control the timing of the pressure cycle, and a computer to control electrical devices. The pressure was monitored using a pressure transducer, and the signal was conditioned using a load cell conditioner. A LabVIEW program regulated the pressure using an analog device to pump compressed air into the system at the appropriate rate. The system mimicked the dynamic transvalvular pressure levels associated with the aortic valve; a saw tooth wave produced a gradual increase in pressure, typical of the transvalvular pressure gradient that is present across the valve during diastole, followed by a sharp pressure drop depicting valve opening in systole. The LabVIEW program allowed users to control the magnitude and frequency of cyclic pressure. The system was able to subject tissue samples to physiological and pathological pressure conditions. This device can be used to increase our understanding of how heart valves respond to changes in the local mechanical environment.

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

A cyclic pressure bioreactor capable of subjecting heart valve tissue to physiological and pathological pressure conditions has been designed. A LabVIEW program allows users to control pressure magnitude, amplitude and frequency. This device can be used to study the mechanobiology of heart valve tissue or isolated cells.

עיצוב של bioreactor לחץ על מחזורי Ex Vivo מחקר של מסתמי הלב אבי העורקים

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Constructing a Collagen Hydrogel for the Delivery of Stem Cell-loaded Chitosan Microspheres

Multipotent stem cells have been shown to be extremely useful in the field of regenerative medicine1-3. However, in order to use these cells effectively for tissue regeneration, a number of variables must be taken into account. These variables include: the total volume and surface area of the implantation site, the mechanical properties of the tissue and the tissue microenvironment, which includes the amount of vascularization and the components of the extracellular matrix. Therefore, the materials being used to deliver these cells must be biocompatible with a defined chemical composition while maintaining a mechanical strength that mimics the host tissue. These materials must also be permeable to oxygen and nutrients to provide a favorable microenvironment for cells to attach and proliferate. Chitosan, a cationic polysaccharide with excellent biocompatibility, can be easily chemically modified and has a high affinity to bind with in vivo macromolecules4-5. Chitosan mimics the glycosaminoglycan portion of the extracellular matrix, enabling it to function as a substrate for cell adhesion, migration and proliferation. In this study we utilize chitosan in the form of microspheres to deliver adipose-derived stem cells (ASC) into a collagen based three-dimensional scaffold6. An ideal cell-to-microsphere ratio was determined with respect to incubation time and cell density to achieve maximum number of cells that could be loaded. Once ASC are seeded onto the chitosan microspheres (CSM), they are embedded in a collagen scaffold and can be maintained in culture for extended periods. In summary, this study provides a method to precisely deliver stem cells within a three dimensional biomaterial scaffold.

A major hurdle in current stem cell therapies is determining the most effective method to deliver these cells to host tissues. Here, we describe a chitosan-based delivery method that is efficient and simple in approach, while allowing adipose-derived stem cells to maintain their multipotency.

בניית Hydrogel קולגן עבור משלוח של התא טעון גזע Chitosan microspheres

Multipotent stem cells have been shown to be extremely useful in the field of regenerative medicine1-3. However, in order to use these cells effectively ...

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant exogenous molecular probes into cells. This work reports a microfluidic electroporation platform capable of performing multiple molecule delivery to mammalian cells with precise and molecular-dependent parameter control. The system&#8217;s ability to isolate cells with uniform size distribution allows for less variation in electroporation efficiency per given electric field strength; hence enhanced sample viability. Moreover, its process visualization feature allows for observation of the fluorescent molecular uptake process in real-time, which permits prompt molecular delivery parameter adjustments in situ for efficiency enhancement. To show the vast capabilities of the reported platform, macromolecules with different sizes and electrical charges (e.g., Dextran with MW of 3,000 and 70,000 Da) were delivered to metastatic breast cancer cells with high delivery efficiencies (&#62;70%) for all tested molecules. The developed platform has proven its potential for use in the expansion of research fields where on-chip electroporation techniques can be beneficial.

A microfluidic vortex assisted electroporation platform was developed for sequential delivery of multiple molecules into identical cell populations with precise and independent dosage control. The system&#8217;s size based target cell purification step preceding electroporation aided to enhance molecular delivery efficiency and processed cell viability.

Electroporator למשלוח סדרתית מולקולרי בסיוע וורטקס microscale

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to intrinsic parameters within the process allow a high degree of control over scaffold characteristics including fiber diameter, alignment and porosity. By developing scaffolds with similar dimensions and topographies to organ- or tissue-specific extracellular matrices (ECM), micro-environments representative to those that cells are exposed to in situ can be created. 
The airway bronchiole wall, comprised of three main micro-environments, was selected as a model tissue. Using decellularized airway ECM as a guide, we electrospun the non-degradable polymer, polyethylene terephthalate (PET), by three different protocols to produce three individual electrospun scaffolds optimized for epithelial, fibroblast or smooth muscle cell-culture. Using a commercially available bioreactor system, we stably co-cultured the three cell-types to provide an in vitro model of the airway wall over an extended time period.
This model highlights the potential for such methods being employed in in vitro diagnostic studies investigating important inter-cellular cross-talk mechanisms or assessing novel pharmaceutical targets, by providing a relevant platform to allow the culture of fully differentiated adult cells within 3D, tissue-specific environments.

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Advancements in biomaterial technologies enable the development of three-dimensional multi-cell-type constructs. We have developed electrospinning protocols to produce three individual scaffolds to culture the main structural cells of the airway to provide a 3D in vitro model of the airway bronchiole wall.

התאמת תהליך Electrospinning לספק שלוש סביבות ייחודיות לTri-שכבתי<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של חומת Airway

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

A Hormone-responsive 3D Culture Model of the Human Mammary Gland Epithelium

The process of mammary epithelial morphogenesis is influenced by hormones. The study of hormone action on the breast epithelium using 2D cultures is limited to cell proliferation and gene expression endpoints. However, in the organism, mammary morphogenesis occurs in a 3D environment. 3D culture systems help bridge the gap between monolayer cell culture (2D) and the complexity of the organism. Herein, we describe a 3D culture model of the human breast epithelium that is suitable to study hormone action. It uses the commercially available hormone-responsive human breast epithelial cell line, T47D, and rat tail collagen type 1 as a matrix. This 3D culture model responds to the main mammotropic hormones: estradiol, progestins and prolactin. The influence of these hormones on epithelial morphogenesis can be observed after 1- or 2-week treatment according to the endpoint. The 3D cultures can be harvested for analysis of epithelial morphogenesis, cell proliferation and gene expression.

We describe a 3D culture model of the human breast epithelium that is suitable to study hormone action.

מודל התרבות 3D-תגובת הורמון של האפיתל בלוטת חלב האדם

The process of mammary epithelial morphogenesis is influenced by hormones. The study of hormone action on the breast epithelium using 2D cultures is ...

Delivery of Therapeutic siRNA to the CNS Using Cationic and Anionic Liposomes

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes. The emergence of prion diseases in wildlife populations and their increasing threat to human health has led to increased efforts to find a treatment for these diseases. Recent studies have found numerous anti-prion compounds that can either inhibit the infectious PrPRes isomer or down regulate the normal cellular prion protein. However, most of these compounds do not cross the blood brain barrier to effectively inhibit PrPRes formation in brain tissue, do not specifically target neuronal PrPC, and are often too toxic to use in animal or human subjects. 
We investigated whether siRNA delivered intravascularly and targeted towards neuronal PrPC is a safer and more effective anti-prion compound. This report outlines a protocol to produce two siRNA liposomal delivery vehicles, and to package and deliver PrP siRNA to neuronal cells. The two liposomal delivery vehicles are 1) complexed-siRNA liposome formulation using cationic liposomes (LSPCs), and 2) encapsulated-siRNA liposome formulation using cationic or anionic liposomes (PALETS). For the LSPCs, negatively charged siRNA is electrostatically bound to the cationic liposome. A positively charged peptide (RVG-9r [rabies virus glycoprotein]) is added to the complex, which specifically targets the liposome-siRNA-peptide complexes (LSPCs) across the blood brain barrier (BBB) to acetylcholine expressing neurons in the central nervous system (CNS). For the PALETS (peptide addressed liposome encapsulated therapeutic siRNA), the cationic and anionic lipids were rehydrated by the PrP siRNA. This procedure results in encapsulation of the siRNA within the cationic or anionic liposomes. Again, the RVG-9r neuropeptide was bound to the liposomes to target the siRNA/liposome complexes to the CNS. Using these formulations, we have successfully delivered PrP siRNA to AchR-expressing neurons, and decreased the PrPC expression of neurons in the CNS.

The goal of this protocol is to use cationic/anionic liposomes with a neuro-targeting peptide as a CNS delivery system to enable siRNA to cross the BBB. The optimization of a delivery system for treatments, like siRNA, would allow for more treatment options for prion and other neurodegenerative diseases.

משלוח siRNA טיפולית על מערכת העצבים המרכזית באמצעות קטיוני anionic ליפוזומים

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes.  The ...

Fabrication of Extracellular Matrix-derived Foams and Microcarriers as Tissue-specific Cell Culture and Delivery Platforms

Cell function is mediated by interactions with the extracellular matrix (ECM), which has complex tissue-specific composition and architecture. The focus of this article is on the methods for fabricating ECM-derived porous foams and microcarriers for use as biologically-relevant substrates in advanced 3D in vitro cell culture models or as pro-regenerative scaffolds and cell delivery systems for tissue engineering and regenerative medicine. Using decellularized tissues or purified insoluble collagen as a starting material, the techniques can be applied to synthesize a broad array of tissue-specific bioscaffolds with customizable geometries. The approach involves mechanical processing and mild enzymatic digestion to yield an ECM suspension that is used to fabricate the three-dimensional foams or microcarriers through controlled freezing and lyophilization procedures. These pure ECM-derived scaffolds are highly porous, yet stable without the need for chemical crosslinking agents or other additives that may negatively impact cell function. The scaffold properties can be tuned to some extent by varying factors such as the ECM suspension concentration, mechanical processing methods, or synthesis conditions. In general, the scaffolds are robust and easy to handle, and can be processed as tissues for most standard biological assays, providing a versatile and user-friendly 3D cell culture platform that mimics the native ECM composition. Overall, these straightforward methods for fabricating customized ECM-derived foams and microcarriers may be of interest to both biologists and biomedical engineers as tissue-specific cell-instructive platforms for in vitro and in vivo applications.

The tissue-specific extracellular matrix (ECM) is a key mediator of cell function. This article describes methods for synthesizing pure ECM-derived foams and microcarriers that are stable in culture without the need for chemical crosslinking for applications in advanced 3D in vitro cell culture models or as pro-regenerative bioscaffolds.

ייצור של תאי מטריקס הנגזרות קצפים Microcarriers כמו תרבית תאי רקמות ספציפיות פלטפורמות משלוח

Cell function is mediated by interactions with the extracellular matrix (ECM), which has complex tissue-specific composition and architecture. The focus ...

Retroductal Nanoparticle Injection to the Murine Submandibular Gland

Two common goals of salivary gland therapeutics are prevention and cure of tissue dysfunction following either autoimmune or radiation injury. By locally delivering bioactive compounds to the salivary glands, greater tissue concentrations can be safely achieved versus systemic administration. Furthermore, off target tissue effects from extra-glandular accumulation of material can be dramatically reduced. In this regard, retroductal injection is a widely used method for investigating both salivary gland biology and pathophysiology. Retroductal administration of growth factors, primary cells, adenoviral vectors, and small molecule drugs has been shown to support gland function in the setting of injury. We have previously shown the efficacy of a retroductally injected nanoparticle-siRNA strategy to maintain gland function following irradiation. Here, a highly effective and reproducible method to administer nanomaterials to the murine submandibular gland through Wharton's duct is detailed (Figure 1). We describe accessing the oral cavity and outline the steps necessary to cannulate Wharton's duct, with further observations serving as quality checks throughout the procedure.

Local drug delivery to the submandibular glands is of interest in understanding salivary gland biology and for the development of novel therapeutics. We present an updated and detailed retroductal injection protocol, designed to improve delivery accuracy and experimental reproducibility. The application presented herein is the delivery of polymeric nanoparticles.

ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר

Two common goals of salivary gland therapeutics are prevention and cure of tissue dysfunction following either autoimmune or radiation injury. By locally ...

Growth and Characterization of Irradiated Organoids from Mammary Glands

Organoids derived from the digested tissue are multicellular three-dimensional (3D) constructs that better recapitulate in vivo conditions than cell monolayers. Although they cannot completely model in vivo complexity, they retain some functionality of the original organ. In cancer models, organoids are commonly used to study tumor cell invasion. This protocol aims to develop and characterize organoids from the normal and irradiated mouse mammary gland tissue to evaluate the radiation response in normal tissues. These organoids can be applied to future in vitro cancer studies to evaluate tumor cell interactions with irradiated organoids. Mammary glands were resected, irradiated to 20 Gy and digested in a collagenase VIII solution. Epithelial organoids were separated via centrifugal differentiation, and 3D organoids were developed in 96-well low-adhesion microplates. Organoids expressed the characteristic epithelial marker cytokeratin 14. Macrophage interaction with the organoids was observed in co-culture experiments. This model may be useful for studying tumor-stromal interactions, infiltration of immune cells, and macrophage polarization within an irradiated microenvironment.

Organoids developed from mouse mammary glands were irradiated and characterized to assess epithelial traits and interactions with immune cells. Irradiated organoids can be used to better evaluate cell-cell interactions that may lead to tumor cell recruitment in irradiated normal tissue.

צמיחה ואפיון של אורגנואידים לקרינה מבלוטות החלב

Organoids derived from the digested tissue are multicellular three-dimensional (3D) constructs that better recapitulate in vivo conditions than cell ...