פרוטוקול חדש זה מאפשר לחוקר לפקח על פרמטרים מטבוליים מרובים כולל חמצון ציטוסולי ומיטוכונדריאלי, כמו גם מצב חמצון מחדש ציטוסולי. בעת ובעונה אחת מדידות המדידות המסורתיות של תפקוד שריר הלב. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא ניטור דינמי פשוט ולא הרסני של אלמנטים חשובים של חילוף החומרים המיטוכונדריאלי בלב מחורפר שנמנע הממצאים הקשורים ספקטרוסקופיה השתקפות.
אלה חדשים בטכניקה זו עשויים להיאבק עם החדרת קטטר מבלי לפגוע בשסתום ולהימנע זיהום אור החדר. יש להכניס את הקטטר ולתאים אותו בזהירות. סיבי האיסוף חייבים גם להיות ממוקמים כראוי כדי למקסם את האור המועבר על פני הקיר השמאלי ללא חדרית אשר יכול להיות קשה.
כדי להתחיל לחתוך חתיכה קטנה של התוספת פרוזדור השמאלי ולהכניס קטטר סיבים אופטיים לתוך החדר השמאלי דרך שסתום מיטרלי. לאחר מכן סובב אותו כדי להשיג קיר שמאלי מואר ללא החדר. חבר את הקצה השני של סיב האיסוף לספקטרומטר סריקה מהיר.
מקם את סיבים אופטיים להרים ישירות מול האזור של תאורה מקסימלית של החדר השמאלי על סנטימטר אחד מהלב. מקורות אור החדר צריכים להיות אפס. הסיבוב של הקטטר ומיקום הסיב האופטי להרים חייב להיות מותאם כדי לקבל אור הולם ללא רוויה של הגלאי.
כבה את האורות באזור הניסוי כדי להשיג חושך מוחלט. התחל את התוכנית המותאמת אישית המשלבת מנהלי התקני ספקטרומטר כדי לבצע רכישת נתונים וניתוח בזמן אמת של האור המשודר. נווט בכל ההנחיות לבחירת אפשרויות עבור מצב רכישת ספקטרוסקופיית לב מנוון.
בדף הבא ציינו אם איסוף נתוני עזר מתרחש. לבסוף הזן פרמטרי רכישה כולל מיקום הספקטרום של חומר הייחוס הכרומופור והנתונים שיש לשמור. עכשיו הזן רוחב פס של 490 עד 630 ננומטר.
הזן קצב דגימה של שני הרץ. אסוף זרם כהה או ספקטרום אור אפס כדי לתקן את רמות האות ברקע על-ידי כיבוי מקור האור. לחץ כדי לבחור את הפניות הכרומופור הרצויות לשימוש בשגרה המתאימה.
בדף הנתונים הרכישה להתאים את המיקום של הקטטר ואת סיבי להרים כדי למקסם את האור המועבר המוצג על התוכנה עם תשומת לב ספציפית משרעת האות באזור 500 ננומטר שבו ספיגת מיוגלובין מחומצן יש לראות. ודא שהאור המועבר אינו מרווה את הגלאי באזור 600 ננומטר. ודא כי מקורות אור חיצוניים אינם תורמים לספקטרום שנאסף על-ידי כיבוי תאורת הקטטרים ואשר שלא זוהה כעת אור.
ליזום את איסוף הנתונים על ידי לחיצה על כפתור שמור ספקטרה. לחץ על קבע כבקרה כדי להציג את ספקטרום ספיגת ההפרשים מהספקטרום העתידי ביחס לספקטרום הבקרה הנוכחי. בשלב זה לבצע כל הפרעה פיזיולוגית כרצונו.
לדוגמה, כדי לקבוע את ההשפעות של cyanidine על ביצועי לב וספיגת כרומופור, להפסיק את ההיתוך של perfusate כדי למנוע מיחזור ציאניד. השתמש במשאבת מזרק כדי להזריק ציאניד בשיעורים שונים לתוך perfusate ממש לפני canula האאורטיק כדי להשיג את הריכוזים הרצויים של ציאניד ב perfusate זורם לתוך הלב. בו זמנית לפקח על תפקוד הלב ומאפיינים אופטיים.
לעצור את משאבת מזרק ציאניד כאשר ההשפעות של זרימה כליילית וקצב הלב, יחד עם שידור אופטי דרך קיר הלב נמצאים במצב יציב. חמש דקות לאחר עצירת עירוי ציאניד לעבור את הגז המבעבע מ 100% חמצן ל 100% חנקן כדי להסיר חמצן מהמערכת. לאחר כ -10 דקות לעצור את הזרימה כדי לדמות מצב איסכמי והיפוקסי הכולל.
לניתוח נתונים ספקטרליים הפעל את התוכנית במצב ניתוח לב מנוון. בחר את תוכנית הניתוח המתאימה. הזן את נתיב קובץ הנתונים ואת קובץ ספקטרום ההפניה.
בחר מקור אור קטטר אשר טוען את הספקטרום שנשמר מראש של מקור האור קטטר. בחר נתוני סל קריאה. לאחר מכן, בחר הגדר אורך גל מינימלי ומקסימום.
הזן את רוחב הפס עבור ניתוח הנתונים כ- 490 עד 630 ננומטר. בחר חזור לתפריט הראשי ולאחר מכן בחר קרא הפניות. אשר את ספקטרום ההפניה לשימוש בניתוח.
בחר חזור לתפריט הראשי ולאחר מכן בחר נקודות זמן בתפריט הראשי. כעת בחר נקודת זמן של אפס זמן כפקד והגדר את הטווח ל- 100 נקודות. בחר גם נקודת זמן חד-זמנית כתקופה הניסיונית בטווח של 100 נקודות.
שים לב לספקטרום ההבדלים הגולמיים בכרטיסיה ספקטרום ספיגה ממוצעת. חזור לתפריט הראשי ובחר חשב ספיגת הפרשים.
בחר זמן אפס והפרש בין זמן אפס לשעה אחד בכל המיקומים. שימו לב לספקטרום המותאם בחלון הספקטרום השונה ובאלמנטים המתאימים בחלון משקל הייחוס. חזור על הליך זה כדי להשוות נקודות זמן אחרות בניסוי.
חזור לתפריט הראשי. שמור נתונים וניתוח בדוח גיליון אלקטרוני על-ידי הקלדת שם רצוי ובחירה באפשרות שמור נתונים לניתוח נוסף עם תוכניות אחרות. מוצג כאן הספקטרום של הקטטר ואת הספקטרום הגולמי של האור המועבר מהקיר נטול הלב ארנב.
נתונים אלה חושפים התעצמות גדולה מאוד של אור באזור הכחול של הספקטרום. עם זאת, רצועות הספיגה ממיוגלובין ומהציטוכרומים המיטוכונדריאליים ניתן לצפות ישירות בין 490 ל -580 ננומטרים בתוסף. ספקטרום ההבדלים של הבקרה והלב שטופל בציאניד מוצג כאן.
ספקטרום מתאים מחושב מתוך ספקטרום הייחוס. הספקטרום שיורית הוא חיסור של התאמה מן הנתונים הגולמיים. מוצגים כאן משרעת ספקטרום של ספקטרום הייחוס.
עליות חזקות בספיגה של רוב הציטוכרומים נצפו כאשר זרימת האלקטרונים במורד שרשרת הציטוכרום נחסמה על ידי ציאניד במצב יציב. בנוסף, הספיגה של מיוגלובין מחומצן גדל כמו צריכת החמצן בוטלה על ידי ציאניד. ספקטרום ההבדלים משטיפת ציאניד לעומת הזרקת ציאניד חושף היפוך חלקי של אפקט הציאניד.
מוצג כאן ספקטרום ההבדלים של מצב קשהמיה ללא זרימה לעומת שליטה. ספקטרום זה מייצג את המצב מנוון לחלוטין מופחת של המיטוכונדריה cytosolent verus מצב הבקרה. אנו חוקרים כעת את ההשפעות של תחמוצת החנקן על חילוף החומרים של הלב.
בנוסף הכרומופורים הנ"ל אנו יכולים גם לעקוב אחר מינים אחרים הניתנים לגילוי אופטי כללו מטמיוגלובין שנוצר על ידי תחמוצת החנקן. בנוסף, קטטר יכול להיות מחובר לייזר ללמוד חילוף החומרים של השומנים באמצעות ספקטרוסקופיה אמן. חילוף החומרים של לב סידן יכול להיחקר גם על ידי ספיגת בדיקות סידן משולב אקסוגניים או גנטית.
