שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח הקשורות להתפתחות, טיפול ואבחון של מזותליומה pleural אנושי. היתרון העיקרי של מודל אורתוטופי פרה-קליני אמין זה הוא שהוא משכפל את התקדמות המחלה האנושית ואת הפתולוגיה במיקרו-וירוס קרוב לזה שנמצא בחולים עם מזותליומה pleural. לכן, מודל זה לא יסולא בפז הוא בעל משמעות גבוהה והשימוש בהדמיה מולקולרית לא פולשנית מאפשר ניטור אורך בקנה אחד עם מושג R שלוש.
לפני תחילת להכין את מערכת ההרדמה ואת האזור הכירורגי במכסה המנוע לזרימה למינארית על ידי ריסוס כל המשטחים עם חיטוי. מניחים את כלובי ה-SPF המבודדים במכסה המנוע של הזרימה המחטאת. מניחים כרית חימום, פתרון povidone-יוד 30 מד המילטון מזרק, גזה כותנה ספוגיות כלי ניתוח micropipettes וטיפים מכסה המנוע לזרימת למינאר.
לאחר העכבר הוא הרדמה כראוי תת עורית להזריק 0.05 מיליגרם לקילוגרם Buprinorphine להקלה על המחבת שלאחר הניתוח. לאחר מכן מניחים את העכבר על צד ימין שלה על גבי כרית החימום ולנקות את האזור הכירורגי עם פתרון povidone-יוד ולעשות חתך 5 מילימטר של העור. לנקות את השומן והשרירים שמסביב עם מספריים קהה לחשוף את הצלעות.
הומוגניזציה של ההשעיה התא לטעון 50 microliters לתוך מזרק המילטון הקפדה להימנע בועות אוויר. יש לנגב את המחט ב-70% אלכוהול לפני כל זריקה. לאט להזריק את התאים לתוך חלל pleural בין הצלעות השישית והשביעית מחזיק את המחט בזווית של 30 מעלות ושניים עד שלושה מילימטרים מתחת לשרירים הבין צלעיים.
שמור את המחט ממש מתחת לצלעות, כדי למנוע הזרקה לתוך הריאות. זה צריך להיות גלוי דרך השרירים. בסיום, סגרו את הפצע עם שלושה עד ארבעה תפרים נספגים ואחסנו את העכבר בסביבה מחוממת עד שהוא מתעורר.
בעת ביצוע ההשתלה חשוב מאוד למקם כראוי את המחט כדי להגביל את עומק חדירת המחט. השתמש כרית חימום תא חימום, או מנורת אינפרא אדום כדי לחמם את העכברים ב 30 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות לפני הזרקת פלואור-18(FDG)באמצעות מחשבון מינון להכין שלוש עד ארבע מנות מגה-בקרל של פלואור-18(FDG)ב 150 כדי 200 microliters של מלוחים ב 1 מזרקי אינסולין מיליליטר. הקפד להקליט את כל הזמנים של זריקות מדידות מינון רדיואקטיביות, וסריקות PET על מנת לחשב ערכי ספיגה סטנדרטיים או רכבי שטח.
לשקול את העכברים ואז להזריק דרך הווריד את הפלואור-18(FDG)לאחר ההזרקה להשאיר את העכברים ערים בתנאים חמים במשך 45 דקות. ואז לטעון את העכברים על מיטת הסורק להעביר את המיטה לסורק ולחשוף את בעלי החיים לסריקת CT מרוכז על הריאות. מעבירים את המיטה לתת-מערכת PET מכניסים את הרכישה שעה לאחר הזרקת הפלואור-18 (FDG) למשך 15 דקות.
לאחר מכן הסירו את העכברים מתא ההדמיה ואפשרו להם להתאושש בכלוב שלהם תוך שמירה עליהם באזור המוקדש לריקבון רדיואקטיבי. לפני ניתוח תמונה לשחזר CT וסריקות PET כמתואר בכתב היד. כייל את התמונות על ידי סריקת גליל פנטום ורישום אוטומטי של הסריקות בהתאם לפתרון התוכנה המובנה.
כדי לנתח את התמונות לטעון את נתוני CT כהפניה על ידי לחיצה על סמל הנתונים הפתוחים. לאחר מכן טען את נתוני PET כקלט על-ידי לחיצה על סמל הוספת הנתונים. התאימו את סרגל הצבעים כך ש- CT ו- PET יכוונו תמונות לבדיקה חזותית.
בחרו בכלי 3D ROI מהתפריט הנפתח ולחצו על הוספת ROI, ותנו שם לריאות הקובץ. לחץ על אלגוריתמי פילוח סף שכונתי ולאחר מכן להגדיר קלט כמו רקע ותמונה כמו ref. הזן מינימום ומקסימום בהתאם לערכי צפיפות הריאות של העכבר.
בדוק את הריאות המעובדות תלת-ממדיות על-ידי לחיצה על סמל VTK. לאחר מכן לחץ על הצג סמל טבלה ואחזר את אמצעי האחסון בטבלה שנוצרה. כדי לנתח את הפלואור-18(FDG) בגידולים להמיר תמונות PET ל- SUV על ידי בחירת אריתמטיקה מהתפריט הנפתח.
בחר ריבוי סקלרי ולאחר מכן השתמש NP אחד כפי שנבחר ולהגדיר את becquerel למיליליטר גורם SUV כמו סקלרי. לבסוף בחר בכלי 3D ROI מהתפריט הנפתח ולחץ על הוסף ROI ותן שם לגידולים בקובץ. לחץ על מצב צבע 3D ו כדור לבטל את הסימון 2D בלבד ולהתאים את גודל הצורה כדי להקיף את הגידולים.
לחץ על סמל הצג טבלה ולאחזר את הערך המרבי SUV מהטבלה שנוצרה. עיבודים תלת-ממדיים של סריקות CT לתת סקירה של לוקליזציה גידול MPM ולאפשר חישוב של נפחי ריאות. מדידות נפח הריאות ירידה משמעותית לאורך זמן לאחר הזרקת גידולים תוך פלורליים.
סריקת PET מספקת מידע רב ערך על המצב המטבולי של גידולי MPM. הגידולים היו להבחין שבועיים לאחר השתלת פלואור-18 (FDG) ספיגה היה לכמת על ידי חילוץ רכבי שטח אשר היו בקורלציה חיובית עם מספר הימים לאחר הזרקת. יתר על כן, נפחי ריאות ופלאור-18(FDG) avidity לתאם אחד עם השני עם R בריבוע של 0.6 התומך בחוזק של מדידות אלה לניטור התפתחות גידול אורתוטופי MPM.
בעקבות הליך זה ניתן לבצע שיטות אחרות כגון היסטולוגיה, אימונוהיסטוכימיה וציטומטריית זרימה על מנת להגיב לשאלות אורתוביולוגיות כגון מצב ההתפשטות והמאפיין הפנוטיפי של גידולים והמיקרו-וירוס. לסיכום, טכניקות פרה-קליניות אלה סוללות את הדרך לחוקרים לחקור אסטרטגיית אבחון וטיפול חדשה של מזותליומה pleural. יתר על כן, השימוש בהדמיה מולקולרית מצדיק תרגום מהיר של ממצאים חדשים למרפאה.
