מודל מסרטן העור המושרה כימי באמצעות דימתילבנץ [a] פחם ו-12-O-טטרדאנואיל פורבול-13-אצטט (DMBA-הסברתי)

מודל זה של סרטן עור דו-שלבי מאפשר לחקור את תפקיד הדלקת בסרטן העור ומאפשר למחקר את התחלת הגידול כתהליך נפרד מהתקדמות הגידול. היווצרות הגידול במודל זה היא המושרה כימית ומאפשרת את השימוש זנים נוקאאוט ללמוד את ההשפעות של גורמים סביבתיים או מועמדים טיפוליים. המודל מתאים היטב לחקר תפקידה של המערכת החיסונית ואנגיוגנזה בסרטן.

זה מדגים פתולוגיה מחלה דומה קרצינומה של תאים קשקשיים בחולים אנושיים. למרות שיטה זו היא יחסית קלה לנהל, תזמון מדויק הוא חיוני. חשוב גם לנקוט אמצעי בטיחות מתאימים בעת טיפול DMBA, שהוא מסרטן.

לפני תחילת הניסוי, בית כל עכברים אגרסיביים בני שבעה עד תשעה שבועות בכלובים נפרדים כדי למנוע לחימה ונגעים בעור. עבור אינדוקציה פפילומה העור, הראשון לגלח את העורות האחוריים של בעלי החיים הניסיוניים ולשקול את העכברים בנפרד. 48 שעות לאחר הגילוח, להשתמש פיפטה להחיל 50 מיקרוגרם של DMBA ב 200 microliters של אצטון על האזור המגולח של כל עכבר הרדמה.

לקידום פפילומה בעור, שבעה ימים לאחר יישום DMBA לטפל בעור עם חמישה מיקרוגרם של TPA ב 200 microliters של אצטון פעמיים בשבוע עד סוף הניסוי. בחן את בעלי החיים עבור papillomas ולצלם ולתזמן את הגודל של כל פפילומה בודדת על המפה בכל שבוע. מסה מוחשית בקוטר של יותר ממילימטר אחד נחשבת לפפילומה אם היא נשארת ארוכה משבוע.

כאשר תגובת הגידול מגיעה לרמה, לקצור את חומר המדגם המתאים מן החיות 24 שעות לאחר יישום TPA האחרון ולאסוף חתיכות עובי מלא של העור לניתוח אימונוהיסטוכימי. השתמש אגרוף ביופסיה כדי לאסוף חתיכות עור מ papilloma ודגימות עור שאינן papilloma עבור ביטוי גנים או אנאילים חלבון ולהשתמש אזמל כדי לאסוף חתיכות מעור papilloma ולא papilloma לניתוח אימונוהיסטוכימי. לאחר מכן לאסוף את העור ניקוז בלוטות הלימפה חתיכת הטחול לניתוח ציטומטרי זרימה כרצונו.

הבדל מובהק סטטיסטית בזמן הפנוי של הפפילומה ובמספר הפפילומות בין קבוצות הניסוי נצפה בדרך כלל במודל הגידול DMBA TPA. ניתוחים היסטולוגיים מתאימים לחקר מבנה הפפילומות, המורפולוגיה של העור או חדירת תאי החיסון המעניינים. זה חיוני כדי להחיל את DMBA ו TPA באופן שווה על העור כדי להחיל TPA במרווחי זמן עקביים.

חשוב גם לספור את הפפילומות באופן קבוע. ניתן ללמוד את המנגנונים המשפיעים על מספר ושעה היווצרות הגידול בשיטות שונות, כולל אימונוהיסטוכימיה, ציטומטריית זרימה, PCR כמותי וניתוח חלבונים. טכניקה קונבנציונלית זו יכולה להיות מותאמת בקלות ליישם כדי ללמוד את ההשפעות של גנים שונים, גורמים סביבתיים, או טיפולי עניין על חניכת הגידול והתקדמות.

זהירות נדרשת בעת ביצוע הטכניקה מאז DMBA הוא מסרטנים אצטון מתאדה במהירות. מומלץ להשתמש במסכת נשימה מתאימה ובשימוש בארונות זרימה.