פרוטוקול זה משתמש בהדמיית טרהרץ ובספקטרוסקופיה כדי להעריך את השוליים הכירורגיים של גידולים בשד במטרה להפחית באופן משמעותי את הצורך בניתוח שני. ניתן להשתמש בהדמיית טרה-הרץ כדי להבחין בין רקמות סרטניות ולא סרטניות בהתבסס על תכונותיהן האופטיות, באופן לא מייננת ובטוחה ביולוגית. טכניקה זו פותחה להערכת שולי סרטן השד, אבל זה ישים גידולים מוצקים אחרים הדורשים כריתה כירורגית הערכת שוליים.
שיטה זו מאפשרת הדמיה של החלק הפנימי של בלוקים רקמת FFPE ללא צורך חיתוך פיזי, להקל על זיהוי של שולי הגידול בכל עומק מדויק. פרוטוקול זה דורש ביצוע של צעדים קריטיים כגון טיפול ברקמות ואיזון שלבים שקשה להבין ללא הדגמה חזותית. לפני הטיפול ברקמות לכסות מגש מתכת נירוסטה עם שקית biohazard ולמקום את כל חומרי המעבדה המתאימים בהישג יד של המגש מכוסה.
לאחר מכן, להעביר את דגימת הגידול טרי לתוך צלחת פטרי על המגש ולהשתמש בבדיקה ברוטו כדי לבחור צד של הגידול כי הוא שטוח מספיק ויש לו מעט דם מעט כלי דם. לאחר מכן, למקם את הצד להיות בתמונה על נייר מסנן כיתה אחת כדי להסיר כל מדיום ביקוש עודף כדי לנקות את הרקמה של נוזלים או הפרשות, מיקום מחדש של הגידול לנקודה יבשה כמו הנייר רווי. תוך שמירה על ייבוש הגידול במשך חמש דקות, מניחים צלחת פוליסטירן בעובי 1.2 מילימטר על חלון הסריקה בקוטר של כ-37 מילימטר וממקמים את חלון הסריקה ואת צלחת הפוליסטירן על שלב הדגימה של הדימוי של טרהרץ.
בחלון הראשי לחץ על סמל סריקת נקודה קבועה כדי להפעיל את אנטנות Terahertz ולהתחיל לשלוח ולקבל את האות Terahertz משתקף מנקודה אחת על לוח פוליסטירן. לחץ על סמל תיבת הדו-שיח שלב מוטורי. חלון הבקרה המוטורית ייפתח.
כדי למרכז את הדופק המוחזר מהפוליסטירן בחלון הראשי, לחץ על חצי ציר ההשהיה האופטיים כדי להתאים את ציר ההשהיה האופטי. לחץ על לחצן הגדרות רכישת נתונים כדי לפתוח את חלון תיבת הדו-שיח הגדרות רכישת נתונים ולשנות את ערך ההשהיה האופטי מחמישה לארבעה וולט. כוונן את המיקום האנכי של שלב הסריקה בסולם המיקרומטר, עד שהמינימום של הפעימה המשנית יהיה החזק ביותר והתאם את ההשהיה האופטית של הציר בחלון בקרת המנוע כדי לשים את ההשתקפות הראשית מחוץ לטווח האות המוחזר הנמדד.
כדי ליישר את שלב הדגימה ולהקליט את אות הייחוס, לחץ על לחצן הדיאלוג של בקרת המנוע כדי לפתוח את חלון הבקרה של המנוע ולמקם מחדש את בקרת המנוע וחלונות התוכנה הראשיים כך שאות תחום הזמן יהיה גלוי בעת התאמת עמדות המנוע. כדי ליישר את ציר A באמצעות השלבים הבאים בחלון בקרת המנוע, שנה את הערך של ציר x מאפס ל- 10 שלילי ולחץ על Enter. השלב יעבור למיקום מינוס 10 מילימטר של ציר A ותזוזה במיקום האות תישמר בחלון הראשי.
השתמש בסולם המיקרומטר המתכווין כדי להזיז את השיא המינימלי של האות בחזרה למיקום האנכי הקודם ולשנות את ערך ציר A לציר פלוס 10. לחץ על Enter. הבמה תעבור למיקום פלוס 10 מילימטר על ציר A ותזוזה באות תישמר שוב.
שים לב שהכיוון והמרחק שהאות עבר ממקונו הקודם ושנה את ערך ציר A בחזרה למינוס 10. האות יחזור למיקום האנכי המקורי. סובבו את בורג ההשלמה על ציר A של שלב הסריקה והזיזו את האות כדי להכפיל את המרחק באותו כיוון, הבמה זזה מהמיקום המקורי.
השתמש במיקרומטר בשלב הסריקה כדי להעביר את האות בחזרה למיקום המקורי ולחזור על ההתאמה עד שהאות ב פלוס 10 ומינוס 10 שווים בשיא עבור שני המיקומים ממוקד במיקום המקורי. לאחר שהושגה החלקת הציר A, שנה את ערך ציר A לאפס וחזור על אותו הליך עבור ציר B. לאחר ששני הצירים עברו החלקה, החזירו את צירי A ו- B לאפס מילימטרים, הקיפו את חלון הבקרה של המנוע, ואז ודאו שהאות נמצא במיקום המקורי שלו למקרה שהוא זז מעט.
כדי לרשום אות זה כהפניה בחלון מאפייני רכישת נתונים, שנה את הערך הממוצע לחמישה וה השאר את כל הפרמטרים האחרים בהגדרות ברירת המחדל שלהם. לאחר מכן לחץ על הפניה חדשה. המונה הממוצע ייחשב מאפס ל-20.
לאחר שה מונה מגיע ל- 20, שנה את הערך הממוצע לערך אחד ולחץ על אישור. האות המוחזר מהפוליסטירן יישמר כהפניה לסריקות הבאות. כאשר כל הפרמטרים נקבעו, להעביר את חלון ההדמיה מהשלב סריקה לאזור הטיפול ברקמות ולהרים את הגידול על צלחת פוליסטירן. הסר את כל בועות האוויר בתוך הגידול עם פינצטה או בעדינות לגלגל את המדגם על פוליסטירן עד פערי האוויר ממוזערים.
מניחים מרווחים ספיגפטיביים במרווחים קבועים סביב מדגם הבדיקה וממקמים צלחת פוליסטירן נוספת מעל הגידול. בעדינות ללחוץ על פני השטח הגידול שטוח ככל האפשר קלטת במורד הגידול ואת סידור צלחת פוליסטירן בחלון המדגם. משטח רקמות שטוח ומגע טוב עם צלחת הפוליסטירן חיוניים כמו בועות אוויר, נוזל עודף משטח אחיד יכול להרוס את הדמיה רקמת הגידול.
הפוך את חלון הדגימה וצלם את הגידול כדי לתעד את הכיוון שלו. החזירו את חלון הדגימה לשלב הסריקה ולחצו על לחצן הדו-שיח של פרמטר התמונה כדי לפתוח את חלון הפרמטרים של רכישת התמונה. הגדר את הערכים של ציר מינימום אחד, ציר אחד מקסימום, ציר שני מינימום וציר שני מקסימום כדי להקיף באופן מלא את מיקום הגידול בחלון ההדמיה.
הגדר ציר צעד אחד וציר שני שלבים ל- 0.2 מילימטרים עבור סריקת ההדמיה. לאחר מכן, תחת התפריט מדידה, בחר סריקה דו-מימדית של Flyback וצור שם תיקיה וקובץ שתחתיו יש לשמור את נתוני הסריקה בחלון המוקפץ. בניתוח זה, כיתה אחת עד שתיים חדירה קרצינומה צינורית המתקבלת מאישה בת 49 באמצעות הליך ניתוח כריתת שד שמאל הוערך.
לאחר מתאם התמונה Terahertz עם הדימוי הפתולוגי, היה ברור כי אזור הסרטן הפגין השתקפות גבוהה יותר מאשר באזור השומן. הדמיה טומוגרפית גילתה כי ככל שהתדירות הגדילה את ערכי מקדם הספיגה המחושבים לסרטן בפיקסלים שמנים גדל עם פיקסלים סרטן מראה ערכים גבוהים יותר מאשר השומן בשני התדרים. לעומת זאת, מדד השוד של שתי הרקמות ירד ככל שהתדירות עלתה.
ניתוח ספקטרוסקופיה של אותו גידול חושף הסכמה טובה לטווח התדרים של מקדם הספיגה המופק ואינדקס השבר לשני החלקים המופקים מהגידול. שים לב כי טיפול לא מספיק של הרקמה יכול להוביל לתוצאות הדמיה מטעה, וכתוצאה מכך למשל להציע נוכחות גדולה יותר של סרטן בגידול בשל נוכחות של נוזל עודף בתוך מדגם הגידול מיובש. אפיון נוסף יכול להתבצע על נתוני התמונה Terahertz כדי לקבל מידע על המאפיינים תלויי התדירות של הרקמה וניתוח סטטיסטי יכול להתבצע עבור פילוח תמונה אוטומטית.
טכניקה זו הובילה לפיתוח אלגוריתמים של הדמיה וספקטרוסקופיה לחקירת החתימות של קרצינומה צינורית במקום, כדי להבדיל גידולים בדרגה נמוכה מגידולים קטלניים בדרגה גבוהה. זכור, כדי להתמודד עם רקמות סרטניות ואת הפתרון פורמלין בזהירות, כי כל אלמנטים מערכת או כלים המגע עם רקמת הגידול יש לנקות או להשליך כראוי.