Bu protokol, ikinci bir ameliyat ihtiyacını önemli ölçüde azaltmak amacıyla meme tümörlerinin cerrahi marjlarını değerlendirmek için Terahertz görüntüleme ve spektroskopi yi kullanmaktadır. Terahertz görüntüleme, iyonlaştırıcı olmayan ve biyolojik olarak güvenli bir şekilde, optik özelliklerine göre kanserli ve kanser olmayan dokuları ayırt etmek için kullanılabilir. Bu teknik meme kanseri marjı değerlendirmesi için geliştirilmiştir, ancak cerrahi eksizyon ve marj değerlendirmesi gerektiren diğer solid tümörler için geçerlidir.
Bu yöntem ffpe doku bloklarının iç fiziksel dilimleme gerek kalmadan görüntüleme sağlar, herhangi bir derinlik hassas tümör marjları belirlenmesini kolaylaştıran. Bu protokol, görsel gösterim olmadan anlaşılması zor olabilir doku işleme ve sahne dengeleme gibi kritik adımların performansını gerektirir. Bir biyolojik tehlike torbası ile doku kapağı paslanmaz çelik metal tepsi işleme önce ve kapalı tepsi kolay ulaşılabilecek tüm uygun laboratuvar malzemeleri yerleştirin.
Daha sonra, tepside bir petri çanak içine taze tümör örneği transfer ve yeterince düz ve az kan ve az kan damarları olan tümörün bir tarafı seçmek için brüt muayene kullanın. Daha sonra, herhangi bir aşırı talep orta kaldırmak ve sıvı veya salgı doku temizlemek için sınıf bir filtre kağıt üzerinde görüntülenecek tarafı yerleştirin, kağıt doymuş olarak kuru bir noktaya tümör yeniden konumlandırma. Tümörün beş dakika kurumasını sağlarken, yaklaşık 37 milimetre çapındaki tarama penceresine 1,2 milimetre kalınlığında polistiren plaka yerleştirin ve tarama penceresini ve polistiren plakayı Terahertz görüntüleyicinin örnek aşamasına yerleştirin.
Ana pencerede Terahertz antenlerini etkinleştirmek ve polistiren plakaüzerindeki tek bir noktadan yansıyan Terahertz sinyalini göndermeye ve almaya başlamak için Sabit Nokta Tonu simgesine tıklayın. Motor Aşaması iletişim simgesini tıklatın. Motor Kontrol penceresi açılacak.
Ana penceredeki polistirenin yansıyan darbesini ortalamak için optik gecikme eksenini ayarlamak için optik gecikme eksenini tıklatın. Veri Toplama Ayarları Diyaloğu penceresini açmak ve optik gecikme değerini beş volttan dört volta değiştirmek için Veri Toplama Ayarları düğmesini tıklatın. Tarama aşamasının dikey konumunu mikrometre ölçeğiyle ayarlayın, ta ki ikincil darbe nin minimumu en güçlü olana kadar ve motor kontrol penceresindeki optik gecikmeyi ayarlayarak, birincil yansımayı ölçülen sinyal aralığının dışına yerleştirin.
Örnek aşamayı seviyelemek ve referans sinyalini kaydetmek için, motor kontrol penceresini açmak ve motor kontrol penceresini ve ana yazılım pencerelerini motor konumlarını ayarlarken zaman etki alanı sinyalinin görünür olması için yeniden konumlandırmak için motor kontrol diyalog düğmesini tıklatın. Motor kontrol penceresinde aşağıdaki adımları kullanarak A eksenini eşitlemek için x ekseninin değerini sıfırdan negatif 10'a değiştirin ve Enter tuşuna basın. Sahne A ekseninin eksi 10 milimetre lik konumuna hareket edecek ve ana pencerede sinyal pozisyonunda bir kayma gözlemlenecektir.
Sinyalin minimum tepe noktasını önceki dikey konuma taşımak ve A ekseni değerini artı 10 olarak değiştirmek için ayarlanabilir mikrometre ölçeğini kullanın. Enter'u tıklatın. Sahne A ekseninde artı 10 milimetre konumuna hareket edecek ve sinyaldeki kayma tekrar gözlemlenecektir.
Sinyalin önceki konumundan kaydığı yön ve uzaklık ve A ekseni değerini eksi 10'a geri değiştirin. Sinyal orijinal dikey konuma geri dönecektir. Tarama aşamasının A eksenindeki tesviye vidasını döndürün ve sinyali aynı yöndeki mesafeyi iki katına çıkaracak şekilde kaydırın, sahne orijinal konumdan hareket etti.
Sinyali orijinal konuma geri kaydırmak için tarama aşamasındaki mikrometreyi kullanın ve artı 10 ve eksi 10'daki sinyal her iki pozisyon da orijinal konuma odaklanınceye kadar ayarlamayı tekrarlayın. A ekseninin tesviyesi sağlandıktan sonra, A ekseni değerini sıfıra değiştirin ve B ekseni için aynı yordamı tekrarlayın. Her iki eksen de tesviye edildikten sonra, hem A hem de B eksenlerini sıfır milimetreye geri döndürün, motor kontrol penceresini içine kapatın ve sinyalin biraz kayması durumunda orijinal konumunda olduğunu doğrulayın.
Bu sinyali Veri Edinme Özellikleri penceresinde başvuru olarak kaydetmek için, ortalama değeri beşe değiştirin ve diğer parametrelerin tümünü varsayılan ayarlarında bırakın. Ardından yeni başvuru'ya tıklayın. Ortalama sayaç sıfırdan 20'ye kadar sayılacaktır.
Sayaç 20'ye ulaştığında, ortalama değeri bire değiştirin ve Tamam'ı tıklatın. Polistiren den yansıyan sinyal sonraki taramalar için referans olarak kaydedilir. Tüm parametreler ayarlandığında, görüntüleme penceresini tarama aşamasından doku işleme alanına aktarın ve tümörü polistiren plakaya monte edin. Cımbızla tümörün içindeki hava kabarcıklarını çıkarın veya hava boşlukları en aza indirilene kadar numuneyi nazikçe polistirenin üzerine yuvarlayın.
Ezit boşluklarını test numunesinin etrafına düzenli aralıklarla yerleştirin ve tümörün üzerine başka bir polistiren plaka yerleştirin. Tümör yüzeyine mümkün olduğunca düz bir şekilde basın ve örnek penceredeki tümör ve polistiren plaka düzenini bantlayın. Düz doku yüzeyi ve polistiren plaka ile iyi bir temas hava kabarcıkları, aşırı sıvı ve düzensiz bir yüzey tümör doku görüntüleme berbat gibi hayati önem taşımaktadır.
Örnek pencereyi çevirin ve oryantasyon kaydını tutmak için tümörün fotoğraflarını çekin. Örnek pencereyi tarama aşamasına döndürün ve görüntü edinme parametreleri penceresini açmak için görüntü parametre diyaloğu düğmesini tıklatın. Eksen in değerlerini en az, eksen bir maksimum, eksen i minimum ve eksen iki maksimum olarak görüntüleme penceresinde tümörün konumunu tam olarak içine almak için ayarlayın.
Görüntüleme taraması için ekseni bir adım ve eksen ivedi miyon 0,2 milimetreye ayarlayın. Ardından, Ölçüle menüsünün altında Flyback 2D taramayı seçin ve açılan penceredeki tarayın verilerini kaydetmek için altında bir klasör ve dosya adı oluşturun. Bu analizde sol meme lumpektomi cerrahisi ile 49 yaşındaki bir kadından elde edilen birinci ila 2 no'lu infiltrasyon duktal karsinom değerlendirildi.
Terahertz görüntüsünüpatoloji görüntüsüile ilişkilendiren kanser bölgesinin yağ bölgesinden daha yüksek bir yansıma sergilediği açıktı. Tomografik görüntüleme, sıklığı arttıkça yağ piksellerinde kanser için hesaplanan emilim katsayısı değerlerinin, her iki frekanstaki yağdan daha yüksek değerler gösteren kanser piksellerinin arttığını ortaya koymuştur. Buna karşılık, frekans arttıkça her iki dokuda kırılma indisi azalmıştır.
Aynı tümörün iletim spektroskopisi analizi, tümörden çıkarılan her iki bölüm için hem ekstrakte edilen soğurma katsayısının hem de refraktif indeksin frekans aralığı için iyi bir anlaşma ortaya koymaktadır. Doku yetersiz kullanımı yanıltıcı görüntüleme sonuçlarına yol açabilir unutmayın, örneğin kurutulmamış tümör örnek içinde aşırı sıvı varlığı nedeniyle tümör kanser daha büyük bir varlığı düşündüren sonuçlanan. Doku frekansa bağlı özellikleri hakkında bilgi edinmek için Terahertz görüntü verilerine ek karakterizasyon yapılabilir ve otomatik görüntü segmentasyonu için istatistiksel analiz yapılabilir.
Bu teknik, düşük dereceli tümörleri ölümcül yüksek dereceli tümörlerden ayırmak için duktal karsinom in in situ imzalarını araştırmak için görüntüleme ve spektroskopi algoritmalarının geliştirilmesine yol açmıştır. Unutmayın, kanserli dokular ve formalin çözeltisi dikkatli ve herhangi bir sistem elemanları veya tümör dokusu temas araçları uygun temizlenmiş veya atılması gerektiğini işlemek için.
