שיטה זו מאפשרת לנו לנתח, לדמיין ולכומת ארכיטקטורת מערכות כלי דם ומרה בכבד בתלת-ממד. עכשיו אנחנו יכולים להבין טוב יותר את ההיבטים המרחביים של מחלת כבד והתחדשות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא אינה מסתמכת על קיומם של נוגדנים או הדמיית פלואורסצנטיות.
זה גם מאפשר הדמיה ישירה של אילו רשתות הם לומן כראוי. שיטה זו מתאימה לניתוח של מערכות צינוריות, ומכאן מחקר של כלי דם, צינורות מרה ודרכי הנשימה הם אזורים אידיאליים. השתמשנו ב- DUCT כדי להבין את השינויים המבניים הקשורים להתחדשות מרה.
לפני הזרקת שרף לתוך מערכת המרה של העכבר, להתחיל להזיז את המעי והלבלב לצד שמאל של העכבר, באמצעות צמר גפן רטוב עם PBS לחשוף את צינור המרה המשותף וריד הפורטל. ואז לעשות חתירה רוחבית קטנה בצמח הוועד הנחות. הפוך את הצד הגחוני של הכבד לכיוון הלב כדי לחשוף את פני השטח הקרביים ואת אזור הילאר, ולאתר את צינור המרה המשותף העובר מאזור הילאר על פני הלבלב, לתוך המעי הסוגר של אודי.
השתמש במלקחיים ישרים כדי לנקות את אזור הרקמה שמסביב של כחמישה מילימטרים מצינור המרה המשותף. לאחר מכן, על ידי הצבת חוט תיל משי מתחת לצינור המרה המשותף, לקשור קשר רופף overhand סביב צינור המרה המשותף. החזק את מספריים האביב שטוח נגד צינור המרה המשותף כדי להפוך חתך אלחפוס לצינור המרה המשותף במקום שבו צינור המרה המשותף נכנס הלבלב והמעי ליד הסוגר של אודי.
לאחר מכן, מערבבים מיליליטר אחד של השרף הצהוב עם 50 מיקרוליטרים של חומר הריפוי MV, ולמלא מזרק luer מיליליטר אחד עם תערובת סוכן ריפוי שרף. חברו את המזרק המלא עם סט הצינורות, ולחצו על הבוכנה כדי למלא את הצינורות עד תערובת סוכן ריפוי השרף מטפטפת מקצה הצינורות. השתמש במלקחיים כדי ליישר את האזור סביב תרסיס צינור המרה המשותף.
לפני החדרת הצינורות לתוך הפתח בצינור המרה המשותף עם הקצה הארוך ביותר של הקצה משופע כלפי מטה לכיוון הצד החוטי של צינור המרה. לאחר מכן הדק את קשר חוט המשי כדי לאבטח את הצינורות בתוך צינור המרה המשותף. לאחר הזרקת השרף לתוך צינור המרה המשותף, להתבונן בכיס המרה ואת אונות הכבד בודדים.
יש לעסות את הכבד עם צמר גפן רטוב PBS כדי לעזור להפיץ את השרף באופן שווה. ענפי מסוף צינורות מרה מלאים שרף יהיו גלויים קלושים על פני הכבד. להפסיק להזריק את השרף כאשר נקודות של שרף מופיעים על פני השטח של הכבד או כאשר ההתנגדות מתקיימת.
לאחר מכן להסיר את הצינורות על ידי משיכה של צינור המרה המשותף במהירות להדק את קשר המשי באמצעות מלקחיים כדי למנוע את השרף מדלוף החוצה. חותכים את הקצוות הרופפים של תפר המשי, כך שהם לא מפריעים להזרקת וריד הפורטל. לפני הזרקת השרף בווריד הפורטל, לנקות את וריד הפורטל מן הרקמה הסובבת אותו כשני סנטימטרים מכניסתו לכבד, באמצעות מלקחיים ישרים.
לאחר מכן מניחים את חוט תפר המשי מתחת לאזור המנוקה של וריד הפורטל כדי לקשור קשר אוברה-יד רופף. בווריד השער דיסטל לכבד, לעשות פירוק אורך לפני קשירת הקשר. לאחר מכן, להכין את תערובת סוכן ריפוי שרף ירוק במזרק ולמלא את הצינורות עם התערובת כפי שהודגם בעבר.
השתמש במלקחיים כדי ליישר את וריד הפורטל על ידי משיכת הרקמה שמסביב לכיוון צד הזנב לפני החדרת הצינורות עם הקצה הארוך ביותר של הקצה משופע לכיוון הצד האחורי של הכלי. הדק את חוט המשי כדי לאבטח את הצינורות בווריד השער. לאחר הזרקת השרף לווריד הפורטל, התבונן בכלי הדם המתמלאים שרף, ולעסות את הכבד עם ספוגית כותנה רטובה PBS כדי לעזור להפיץ את השרף.
כאשר כל כלי הדם מלאים, לשלוף את הצינורות מן הווריד הפורטל, במהירות להדק את קשר המשי באמצעות מלקחיים כדי למנוע את השרף מדלוף החוצה. לטומוגרפיה ממוחשבת מיקרו או סריקת MicroCT של הכבד הניתח מהעכבר, הניחו את אונת הכבד המדיאלית הימנית בצינור חרוט של 15 מיליליטר, ומלאו את הצינור בג'ל 1%אגרוז לכשני שלישים מהנפח הכולל של הצינור כדי למזער את תנועת המדגם הלא רצויה במהלך מדידת MicroCT. הר את הצינור החרוט 15 מיליליטר עם המדגם על השלב הסיבובי של מכשיר CT.
אפשר לצינור להסתגל תרמית לתא המדידה למשך שעה לפחות. כאשר המדגם מותאם תרמית, מרכז אותו בשדה הראייה או FOV, ולאחר מכן למטב את מדגם המקור ואת מרחקי גלאי מדגם, או SSD ו- SDD כדי להגיע לרזולוציה voxel מספיק. לאחר הגדרת הפרמטרים, התחל מדידת CT.
השתמש בתוכנת שחזור טומוגרפית ייעודית כדי לשחזר את נתוני ה- CT. כדי לנתח את נתוני ה- CT, טען את הקבצים על-ידי בחירת קובץ, ייבוא ופקודה. השתמש בפונקציית קביעת פני השטח בחלונית העליונה כדי לפלח את השרף בנתונים באמצעות סף כללי.
בחלון הדו-שיח, קבע את ערך הסף עם הערכת היסטוגרמה על-ידי הגדרת המיקום של קו isovalue האדום לפלח רק את כלי השיט המלאים בשרף. בחלונית הימנית, בחר במודול צור החזר על הוצאות על הוצאות מנפח או CAD או רשת מחדש כדי ליצור אזור עניין או החזר על הוצאות על הוצאות על כלי הדם המלאים שרף. בחלון הדו-שיח, השתמש באפשרות ליצור ROIs ממוצק כדי לבחור ולאשר את שם אמצעי האחסון המעובד.
בטל פילוח שגוי של אשכולות רעש באזור הרקע של ROI זה. סמן את ההקלה על ההפרש בחלונית הימנית על-ידי לחיצה באמצעות לחצן העכבר הימני ובחירת המודול לפצל את ההבגיה. בחלון הדו-שיח, הגדר את הפרמטר voxel אמצעי האחסון המינימלי כדי לא לכלול את כל חלקיקי הרעש.
ערך הפרמטר הוא ניסוי ותלוי נתונים, וממוטב לניתוח כל דגימה. בלוח השמאלי השתמש במודול ההחלקה כדי ליצור מסכות תעלה חלקות, רציפה ומוצקות ללא חפצים, כמו נוכחות של בועות אוויר או דליפת שרף ב- ROI עלות השרף. צור החזר על הוצאות עלמה נפרד כפי שתואר קודם עבור המערכת מלא שרף ספיגה יותר כמו שרף צהוב המשמש להזרקת צינור המרה הנפוצה עם ערכים בעוצמה גבוהה יותר בנתוני CT.
סמן ושרף להסוות את החזרה החדשה על ידי לחיצה באמצעות לחצן העכבר הימני לפני בחירת הפחת החזר החזר על עסקה ולאחר מכן הפחתה של החזר ההחזרה החדש ממסכת השרף ROI כדי ליצור החזר על ROI חדש עבור המערכת הצינורית הנותרת. יצא את ה- ROIs המתקבל עבור שתי המערכות הצינוריות בפורמטים שונים בהתבסס על הפניות מפעיל לעיבוד עוקב בתוכנות שונות. תהליך נוסף של ההמחאות המתקבלות בתוכנת גרפיקה של אמצעי אחסון כדי לייצא את הפריט החזותי הסופי בצורה של תמונה או וידאו.
במחקר זה, הזרקת שרף כפול מוצלח הושגה עם צינורות מרה intrahepatic מלא היטב, vasculature וריד הפורטל. הניתוח הייצוגי ממחיש את התוצאה של הנתונים המפולחים בכבד מוזרק היטב לעכבר P15, ועכבר בוגר שבו שרף נראה בענפים הצדדיים. בדוגמה האופיינית של הזרקה לא מוצלחת, נזק פיזי לכבד במהלך ההליך הכירורגי הביא לדליפת השרף.
גם התקשות מוקדמת של השרף במחט או קצה הצינורות לפני ההזרקה, ואת זלוף עירוי לא מספיק גרם למערכת תת מילוי. ניתן לתקן באופן ידני את דליפת השרף המשנית במהלך פילוח נתוני MicroCT. לחץ הזרקה גבוה עלול לקרוע כלי דם או תעלות, ולפגוע באופן בלתי הפיך בארכיטקטורת כלי הדם או הצינור.
בנוסף, הבועות היו עוד חפץ הזרקה נפוץ מאוד שהוביל למילוי דליל של הרשתות הצינוריות. כאשר נעשה שימוש בשרף שנפתח זה עתה, נצפה הבדל ברור בניגוד בין צינורות המרה הצהובים שהוזרקו שרף לוורידים ירוקים שהוזרקו שרף. לאחר שלושה חודשים של אחסון, הניגודיות הספיקה כדי להבחין בין וריד הפורטל לבין צינור המרה.
עם זאת, המשקעים השפיעו על ערבוב שני השרף, אשר נראה כמו אטימות הטרוגנית בווריד הפורטל מלא. כאשר השרף היה מבוגר משישה חודשים, הניגוד הושפל לנקודה שבה לא היה ניתן להבחין בין צינור המרה שהוזרק בצהוב לווריד הפורטל שהוזרק בירוק, בהתבסס על הניגודיות שלהם בלבד. זה חיוני כדי להפוך התנגשות עקיפה לתוך צינור המרה המשותף.
אחרת יהיה קשה מאוד להכניס את הצינורות. טכניקת DUCT מאירה מנגנונים ארכיטקטוניים חדשים של התחדשות מרה במודל רלוונטי קלינית עם מאפיינים ברורים באזורי האונה ההילרית והיקפית.
