ד"ר דארן פריד יצר את מכשיר ה- ESLP הזה, והוא משתמש בטכנולוגיה ותוכנה פטנטיות לאוורור לחץ שלילי, שלא ניתן לראות בשום מקום אחר בתחום מחקר ESLP. המעבדה שלנו הראתה בעבר כי אוורור בלחץ שלילי גורם לפחות פגיעה ריאתית במהלך ESLP בהשוואה לאוורור בלחץ חיובי. זה כנראה בגלל המנגנון הפיזיולוגי יותר של אוורור בלחץ שלילי.
מכשיר ופרוטוקול זה נועדו להאריך את זמן השימור הבטוח של ריאות התורם ולהחזיר את הריאות השוליות לתקני השתלה מקובלים. המכשיר עצמו פשוט מאוד לתפעול. האתגר הגדול ביותר הוא הסרה כירורגית של ריאות החזיר הצעיר מבלי לגרום לפציעה.
הם שבריריים מאוד בהשוואה לריאות אנושיות בוגרות. התחל על ידי שמירה על נפח הגאות והשפל של 10 מיליליטר לקילוגרם על ידי הגדלת לחצי השיא לגיוס נאדיות מקסימלי. בצע סטרנוטומיה בקו האמצע.
השתמש electrocautery כדי לחתוך את העור ואת הרקמה תת עורית. נתחו בבוטות את חיבורי הרקמות הרכות מהטבלה האחורית של עצם החזה התחתונה. השתמש במסור עצם החזה כדי לחלק את עצם החזה.
הכנס נשלף עצם החזה ופתח לרווחה. לאחר ביצוע cardiectomy, לפתוח ולהסיר את הצדר mediastinal דו צדדית לחשוף את הריאות. לאחר מכן מחלקים את החיבורים הפלאורליים מהסרעפת לכיוון אונת הריאה התחתונה השמאלית, באמצעות מסיר Deaver כדי להחזיק את הסרעפת כלפי מעלה.
כעת, מחלקים את הרצועה הריאה התחתונה משמאל וממשיכים למעלה לכיוון הילום. לאחר מכן, לחלק את הווריד נבוב התחתון ואת חיבורים pleural מן הסרעפת, ולאחר מכן למשוך את הסרעפת כלפי מעלה באמצעות Deaver retractor. מחלקים את הרצועה הריאה התחתונה בצד ימין וממשיכים למעלה לכיוון הילום.
לאחר מכן מחלקים את הווריד ואת כלי הקשת כדי לחשוף את קנה הנשימה. לאחר ניתוח בוטה של הרקמה המקיפה את קנה הנשימה, מהדקים את קנה הנשימה באמצעות מהדק צינורות בשאיפה מקסימלית, ומבטיחים שנפח הגאות והשפל הוא 10 מיליליטר לקילוגרם. חצו את קנה הנשימה והרימו את חלק המהדק כלפי מעלה כדי לספק מתיחה כירורגית.
לאחר מכן מנתחים את קנה הנשימה האחורי מהוושט באמצעות דיסקציה קהה בעזרת מספריים כבדים של מצנבאום ויד חופשית. חלק את כל החיבורים הפלאורליים הנותרים. להעביר את אבי העורקים מעל ומתחת סימפונות שמאל ולהסיר את הריאות מן החזה עם קטע של אבי העורקים יורד.
לאחר שקילת הריאות עם מהדק, לאחסן אותם במהירות צידנית מלאה קרח. התחל על ידי הוספת 500 מיליליטר של תאי דם אדומים ארוזים למעגל הזלוף כדי להגיע נפח סופי של 1.5 ליטר של perfusate. צלם תמונות של הריאות עבור רשומות נתונים.
לביופסיה של הריאה, הקיפו חלק של סנטימטר מעוקב אחד בתפר משי אפס וקשרו אותו. לאחר מכן מסירים את החלק הקשור הזה, באמצעות מספריים לניתוח רקמות כמתואר בכתב היד של הטקסט, ומחלקים את קטע הביופסיה. לאחר מכן, כדי לאבטח את מתאם צינורות 3/8 חצי אינץ 'לעורק הריאה הראשי, לתפוס את הצדדים המנוגדים של עורק הריאה הראשי באמצעות מלקחיים או snaps.
לאחר מכן, הכנס את המתאם עם החלק בגודל חצי אינץ 'לעורק הריאה הראשי והחזק אותו במקומו תוך אבטחת המתאם במקומו באמצעות משי אפס או קשרי אתיבונד. כעת הניחו את הריאות במצב שכיבה על קרום התמיכה בסיליקון וחברו אותן למכשיר ESLP. מניחים מהדק צינור שני על קנה הנשימה ליד המיקום של סימפונות קנה הנשימה.
לאחר הסרת המהדק הדיסטלי יותר, הכנס את קנה הנשימה עם הצינור האנדוטרכאלי וחבר אותו למקומו באמצעות שני אזיקונים. לאחר מכן מהדקים את קו האוורור באמצעות מהדק צינורות לפני שחרור המהדק הפרוקסימלי מקנה הנשימה. חבר את מתאם עורק הריאה לקו עורק הריאה.
ברגע שעורק הריאה הראשי מנותק, התחל את הזמן לזילוח. בדף ההגדרות, לחץ על הפעל תנור חימום והגדר את הטמפרטורה ל- 38 מעלות צלזיוס. הזן את משקל החזיר כדי לחשב את זרימת פלט הלב.
בעמוד הראשי, הגדר את לחץ האוויר החיובי הרציף ל- 20 סנטימטרים של מים ולחץ על התחל לחץ חיובי רציף בדרכי הנשימה. כאשר האוורור מתחיל, שחררו את קו האוורור. לאחר איפוס חיישן הלחץ העורקי, הדקו את קו עורק הריאה מעל חיישן הלחץ באמצעות מהדק הצינור.
פתח את החיישן, לחץ על אפס לחץ עורק ריאתי ואפס זרימת דם בדף ההגדרות ואשר שהקריאות מאופסות בדף הראשי. סגור את הסטופק של חיישן הלחץ כדי לקרוא את לחץ הקו. פתח את הקו לצינורית עורק הריאה.
בחר תפוקת לב של 10% בעמוד הראשי. לחץ על חזור למדריך הרש"פ ושחרר את קו הריאות. החלף את תמיסת הפרבוסט במכסה העליון לפני הצמדתה למכונה כדי למנוע היווצרות עיבוי במהלך ESLP.
צייר 10 מיליליטר של perfusate עבור ניתוח צנטריפוגלי ולצייר זמן אפס גז דם עורקי. הניחו את הדגימה על קרח לפני הצנטריפוגה. לאחר שהריאות מחוררות במשך 10 דקות, הגדילו את הזרימה ל -20% מתפוקת הלב.
כאשר טמפרטורת הפרבוסט מגיעה ל-32 מעלות צלזיוס, הדקו את מכסה התא למקומו בעזרת מלחציים ליצירת אטם אטום. ודא כי הריאות ממוקמות בצורה אופטימלית ואת דליפות האוויר מתוקנות. כשהמכסה מאובטח, הדקו את צינור האוורור לפני כיבוי לחץ חיובי מתמשך בדרכי הנשימה.
בדף ההגדרות, בחר אפס לחץ תוך חזי, לחץ בדרכי הנשימה וזרימת אוויר. לאחר מכן לאשר קריאות הם אפס בדף הראשי. לחץ על התחל CPAP לפני ביטול הידוק צינורות האוורור.
הגדר את פרמטרי האוורור המוזכרים בכתב היד של הטקסט ולחץ על הקש כדי להפעיל אוורור בלחץ שלילי. חברו את צינור האוורור הצדדי לתא. במהלך הנשימות הבאות, שמרו על פרמטרי האוורור כפי שהוזכרו בכתב היד של הטקסט.
לאחר 10 דקות של זילוח, להגדיל את הזרימה ל 20% ולאחר 20 דקות של זילוח, להגדיל את הזרימה ל 30% תפוקת הלב. הוסף דקסטרוז ואינסולין למערכת. להעריך את תפקוד הריאות, באמצעות תפוקת לב של 50% וגז טאטוא מעורב מחמצן במשך חמש דקות, בהתאם להוראות כתב היד.
בכל שעה אי-זוגית במהלך מצב שימור, ציירו דגימה של 10 מיליליטר של פרפוסט, לצורך ניתוח עתידי. יש לשאוב מיליליטר אחד של דגימת גז דם עורקי טרום-דה-אוקסיגנטור בכל שעה ומיציאות לפני ואחרי החמצן לאחר חמש דקות של מצב הערכה. המגמות בלחץ עורק ריאתי ממוצע, ציות דינמי ותנגודת כלי דם ריאתיים במשך 12 שעות של זילוח ואוורור יכולות להיות מושפעות מפרוטוקול הניסוי הספציפי ESLP המופעל.
כאן מודגמת מגמה אופיינית ליחס בין לחץ חלקי של חמצן עורקי לשבריר של חמצן מעורר השראה בנקודות זמן הערכה של חמש ו-11 שעות לאורך זילוח ריאות בלחץ שלילי ex-situ lung perfusion. היווצרות בצקת היא מדד חשוב נוסף של דלקת הקשורה לחדירות אנדותל, המדגימה עלייה אופיינית במשקל של 30% בתום 12 שעות של אוורור בלחץ שלילי ex-situ ריאות. הפרבוסט משמש כאינדיקטור חלופי למצב הריאות הכללי.
לכן, ניתוח גז הדם של perfusate מספק מידע נרחב על המצב המטבולי של הריאות. במהלך מודל ההערכה של ESLP, המתרחש בשלוש, חמש, שבע, תשע ו -11 שעות במהלך ריצה של 12 שעות, נצפתה מגמת עלייה בלחץ חלקי של חמצן בעורק השמאלי. חשוב מאוד להיות עדינים ככל האפשר בעת הסרת הריאות בניתוח וגם לנוע במהירות וביעילות.
הקמת המכשיר, הפרוטוקול והמעבדה הובילו לניסוי קליני מוצלח ולמספר תגליות המאריכות את השימור והחידוש של ריאות תורמות.
