טכניקה זו שימושית באפיון פיזיולוגיה ופתולוגיה ריאתית על ידי מדידת פעילויות מטבוליות ותפקוד הנשימה. מערכת זלוף ריאות מבודדת מאפשרת לעבוד עם איבר פונקציונלי מלא המאפשר את המחקר של פונקציה פיזיולוגית מתמשכת תוך יצירה מחדש של אוורור וזלוף. שיטה זו יכולה לספק תובנה על אפיון היכולות הלא-נשימתיות של רקמות הריאות, כגון פעילות מטבולית ופעילויות של רכיבים שונים כמו מקרופאג ' מכתשי ורקמת אנדותל.
ראשית, להרכיב את מנגנון העבודה, להבטיח כי הוא מכיל את עמוד הפלדה הראשי רכוב על צלחת בסיס מחזיק את בית החזה המלאכותי עם pneumotachometer ומתמר משקל הממוקם מעל העמודה ומאחורי סליל התחממות מראש עם מלכודת בועה. חבר את כל המתמרים ליחידת האלקטרוניקה המרכזית והכן את מערכת האוורור מלבד המנגנון. לאחר גילוח האתר הכירורגי של הארנב המחושם, בצע חתך קו חציוני גחוני של שלושה עד חמישה סנטימטרים מן manubrium קרום המוח עד הצוואר.
השתמש במספריים ההפעלה כדי לחתוך את 2/3 של קנה הנשימה בין טבעות הסחוס. הכנס צינור קנה הנשימה חמישה מילימטר דרך קרום סיבי קנה הנשימה ולתקן את הצינורית בזהירות עם תבר משי 4-0. מניחים את המלקחיים או פינצטה מתחת לקנה הנשימה כדי להבטיח את הצינורית לא להתכופף נגד קנה הנשימה.
חבר את משאבת הנשימה לצלעת קנה הנשימה, הגדר את נפח הגאות והשפל על 10 מיליליטר לקילוגרם ויזום את האוורור במהירות לאחר קנה הנשימה ולפני בית החזה נפתח כדי לשמור על לחץ חיובי בריאות למניעת קריסת ריאות במהלך הניתוח. כדי לגשת לחלל בית החזה, השתמש באזמל או במספריים כדי לפתוח את דופן בית החזה ולבצע סטרנוטומיה בינונית עד לשליש העליון של בית החזה. תחזיק את חצאי בית החזה פתוחים עם שני מפסקים.
לוקליזציה של הוועד העליון והנחית ותייג אותם בחוטים. לפני חיקת החיה, לזהות את החדר הימני ולהזריק 1,000 יחידות בינלאומיות לכל קילוגרם של הפרין. מיד לאחר ההזרקה, ליגט את הוועד העליון והנחית עם החוט טרום לולאה.
חותכים דרך המנובריום סטרני כדי להרחיב את החזה המהודרת לכיוון צינורית קנה הנשימה, ומשחררים את קנה הנשימה משני הצדדים מרקמות חיבור. עכשיו לכרות את קנה הנשימה מעל צינור קנה הנשימה בעדינות למשוך את הצינורית בציר גולגולתי / caudal. לאחר פימום לקציר בלוק הלבו-ריאפוליס, השתמש בחיתוך דיגיטלי ישיר או במספריים קפיציים כדי להפריד את רקמת החיבור ולהסיר את הריאות מבית החזה.
לאחר מכן, לנתח את כלי הרחם ואת הוושט. הרימו את הריאות המבודדות מחוץ לבית החזה והניחו בזהירות את הריאות מעל גזה סטרילית על צלחת פטרי. כדי למנוע atelectasis, לאוורר את הריאות באמצעות אוורור לחץ חיובי עם לחץ תפוגה סוף חיובי להגדיר על שני סנטימטרים של עמוד מים.
חותכים את החדרים מהלב ברמה של החריץ atrioventricular. לאחר פתיחת שני החדרים, להציג את צינורית עורק הריאות דרך עורק הריאות הימני ואת צינורית אטריום שמאל דרך שסתום מיטרלי לתוך האטריום השמאלי. תקן את הצינורית עם תפירת משי 4-0 כולל הרקמות שמסביב בליגטורות של עורק הריאות ואטריום שמאלי כדי למנוע התנערות מבנית.
הזריק 250 מיליליטר של תמיסת איזוטונית מלוחה דרך הצינורית העורקים כדי לשטוף את הדם הנותר ממיטת כלי הדם. עבור הגדרת זלוף, למקם את הריאות המבודדות בזהירות לתוך תא הריאות. חברו את קנה הנשימה למעביר על מכסה התא וחברו את כלי השיט המנוטרלים למערכת ההזדווגות, ואז סגרו ואבטחו את התא עם המנעול הסיבובי.
לאחר מכן, חבר את מכסה התא ועבור מעל stopcock לעבור חיובי אוורור לחץ שלילי. לטפטף את הריאות עם 200 מיליליטר של זלוף ללא דם מלאכותי החל בזרימה של שלושה מיליליטר לדקה לקילוגרם, ואז לאט לאט להגביר את הזרימה מעל חמש דקות עד חמש מיליליטר לדקה לכל קילוגרם. ובמשך חמש הדקות הבאות, אפשרו לזרימה להגיע לשמונה מיליליטר לדקה לק"ג, ואחריהן שטף מרבי של 10 מיליליטר לדקה לק"ג למשך חמש דקות.
לאוורר את הריאות עם אוויר לח בתדר של 30 פעימות לדקה, נפח גאות ושפל של 10 מיליליטר לקילוגרם ולחץ תפוגה הסופי של שני סנטימטרים של עמוד מים. כדי להשיג אזור שלושה תנאים, לחכות 10 עד 15 דקות כדי להשיג שיווי משקל המאופיין במצב כבידתי ISO, להבטיח כי הלחץ ורידים יציב לאורך הרישום. ודא כי משקל הריאה נשאר קבוע ואת לחצים עורקיים ושמאל עזים יציבים כדי להשיג אזור שלושה תנאים כדי לפתוח מספר מרבי של כלי ריאתי ולשמור על תוכן המיטה microvascular במהלך הניסוי.
עבור הבקרה האלקטרונית ועיבוד האות, ודא כי זרימת הנשימה, שינויי משקל, לחץ מיקרווסקולרי, נפח גאות ושפל, התנגדות כלי דם, בין היתר, רשומים ביחידת אלקטרוניקה מרכזית מרובה המשלבת אותות המגיעים מהמתמרים ומציגה אותם במערכת ההערכה. הריכוז של 5-HT ומונואמין אוקסידאז מעורב חילוף החומרים של הריאות וחמידות כלי הדם הוערך. הריכוז של 5-HT ומונואמין אוקסידאז הגיע לשיא לאחר 15 דקות של שימור ולאחר מכן ירד במהלך שש השעות הבאות.
לאחר מכן, רמות זלוף הראו עלייה לא משמעותית סטטיסטית עד 24 שעות. שיעורי השחרור של 5-HT ומונואמין אוקסידאז ציינו כי במהלך השעה הראשונה של השימור, רמות 5-HT עלו גבוה יותר מונואמין אוקסידאז וירד בתוך שש שעות לאחר שנלכד מחדש על ידי תאים אנדותל וטסיות דם, כמו גם קטבוליזם מונואמין אוקסידאז. פעילות אנדופטידאאז נייטרלית גדלה בתשע שעות ולאחר מכן ירדה ונשארה יציבה במשך 12 עד 24 שעות.
פעילות האנזים הממיר אנגיוטנסין ירדה לאחר ארבע שעות, ואז גדלה ונשארה יציבה לאורך זמן עד 24 שעות. ההשפעה של שימור ריאות חמיצה נימי הוערך במשך 24 שעות, המציין כי הריאה המנוזלת סבלה מעלייה הדרגתית במקדם סינון נימים. ההשפעה של תוספים שונים בחמיצה נימית של מערכת זלוף הריאות המבודדת בתנאים מגוונים נבדקה ועלייה מקסימלית בחמילות נצפתה עם אטרופין.
התמרון החשוב ביותר הוא למקם נכון את הריאות לתוך תא ריאות ולחבר את כלי cannulated למערכת זלוף. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על אינטראקציות בין חומרים במחזור הדם לבין ההשפעות של חומרים בשאיפה או חדורים כמו בבדיקות סמים ופתולוגיות ריאות שונות.
