אנו מחויבים לבסס מודל אמין של תסמונת העין היבשה. שחזרנו בהצלחה את המצב הפתולוגי של עיניים יבשות במחסור מימי על ידי הסרת ELG ו-ILG מהעיניים. בשל המיקום האנטומי העמוק של ILG, הכריתה המשולבת של ELG ו-ILG מאתגרת ופולשנית יותר.
הוא גם מסוגל לגרום לדימום במהלך הניתוח, מה שמציב דרישה גבוהה ליכולת התפעולית שלנו. המודל שלנו גרם בהצלחה ליובש משמעותי בהומור מימי, חסר הומור עם נזק מינימלי לבעל החיים, ופישוט משמעותי של ההליך הכירורגי. מודל העכבר שנבנה דומה מאוד לתסמונת העין היבשה החמורה, כגון תסמונת סיוגרן ותסמונת סטיבנס-ג'ונסון, המספקת תמיכה חזקה למחקרים קשורים.
השיטה נמנעת מהשפעות הזרקה שיטתיות, מטפלת בעמידות הירודה של אפקט ההזרקה המקומית, מתגברת על חסרונות של מודל העין היבשה ומפשטת את תהליך הניסוי על ידי ביטול הצורך בסביבת בעלי חיים ייעודית. כדי להתחיל, הנח את העכבר המורדם בתנוחת דקוביטוס לרוחב, וחשוף את אזור הניתוח תחת מיקרוסקופ ניתוח. בעזרת מלקחיים עם שיניים, מהדקים את העור בצד ימין של פני העכבר.
בצע חתך בנקודת האמצע של הקו, חוצה את האורקל החיצוני ואת קו הלסת התחתונה לזווית הפנימית של העין. לאחר מכן חשוף את רקמת השריר והסר בזהירות את ה-ELG הממוקם על השריר. כעת הרחב את חתך העור לפינה הפנימית של העין.
הפרד את השריר בצורה בוטה ואתר את הבלוטה האדומה הבהירה מתחת לשריר. לאחר מכן מקלפים ומסירים את ה- ILG. לתפור את החתך באמצעות תפרים 5-0 עם מחזיק מחט, מספריים כירורגיים לעיניים ומלקחיים.
יש למרוח משחת פלוקסצין בתום הניתוח למניעת זיהום. לאחר הסרת ה-ELG וה-ILG החד-צדדיים, הניחו את העכברים בסביבה עם מחזור אור-חושך קצבי של 12 שעות וגישה חופשית למזון ומים. קח חוט אדום פנול ארוז היטב למדידת קרעים.
לאחר הרדמת עכבר העין היבש עם מחסור במים, יש למשוך בעדינות כלפי מטה את העפעף התחתון של העין למדידה. מקם את החלק העליון של החוט האדום של הפנול בשליש הפנימי והחיצוני של העפעף התחתון והתחל את הטיימר מיד. לאחר הזמן המוקצב, יש למשוך בזהירות את העפעף התחתון ולהסיר את החוט האדום של הפנול כלפי מטה בזהירות.
השתמש בקנה המידה המסופק על השקית החיצונית של החוט האדום פנול כדי למדוד מהחלק העליון של החוט ועד לכל החלק האדום. השתמש בשעון עצר אלקטרוני כדי לתעד במדויק את משך הבדיקה. להכנת פרוסות רקמה לצביעה, קחו את גלגלי העיניים שחולצו מהעכבר המורדם.
לאחר מכן הטמיעו את גלגלי העיניים בתרכובת טמפרטורת חיתוך אופטימלית והשתמשו במיקרוטום קפוא כדי לקבל פרוסות רקמה קפואות בעובי של חמישה עד שבעה מיקרומטרים. למיצוי mRNA בקרנית, השתמש במספריים ובמלקחיים כדי לחתוך את גלגל העין מהקוטב האחורי מתחת למיקרוסקופ. הפרד את העדשה ונקה את עודפי הסקלרה והקשתית, אך השאר את הסקלרה הלבנה 0.5 מילימטר ואת כל הקרנית.
לאחר תקופה של שבועיים לאחר כריתת בלוטות הדמעות, הפרשת הדמעות בעכברי העין היבשה פחתה באופן משמעותי בהשוואה לקבוצה הרגילה. מטפלזיה קשקשית והצטברות של תאים דלקתיים נצפו באפיתל הקרנית ובשכבת הסטרומה של קבוצת העין היבשה. הביטוי של קרטין 12 היה נמוך משמעותית בתאי האפיתל של הקרנית בקבוצת העין היבשה בהשוואה לקבוצה הרגילה.
ביטוי Pax6 הופחת באופן משמעותי בתאי האפיתל של הקרנית בקבוצת העין היבשה בהשוואה לקבוצה הרגילה. הביטוי של Sprr1b, סמן של תאי אפיתל בקרנית מובחנים באופן חריג, היה גבוה משמעותית בקבוצת העין היבשה מאשר בקבוצה הרגילה.
