11.10 : Cromatografia su strato sottile (TLC)

La cromatografia su strato sottile (TLC) è una tecnica cromatografica che separa i composti in base alla loro polarità. La TLC tipicamente utilizza gel di silice polare, una forma del biossido di silicio, come fase stazionaria. Il gel di silice contiene gruppi idrossilici (OH) sulla sua superficie, che formano legami idrogeno con i composti polari, influenzando la loro adesione alla fase stazionaria.

Per iniziare l'analisi, una miscela di composti viene depositata sulla linea di partenza sulla lastra TLC utilizzando un sottile tubo capillare. Il fondo della lastra è immerso nella fase mobile, che di solito è un solvente organico meno polare della fase stazionaria. Il solvente risale la lastra per capillarità, trasportando il deposito di soluto. Mentre il solvente risale la lastra, i componenti della miscela si ripartiscono tra la fase mobile o la fase stazionaria. I componenti polari interagiscono più fortemente con la fase stazionaria polare, il che si traduce in un loro lento spostamento e solo per una breve distanza sulla lastra TLC. I componenti meno polari del campione sono più solubili nella fase mobile e tendono a interagire di più con la fase mobile, il che consente loro di viaggiare più in alto lungo la lastra TLC.

Comprendere la polarità dei componenti e della fase mobile è essenziale per prevedere i risultati della separazione. La fase mobile (solvente) dovrebbe essere sufficientemente polare da spostare efficacemente il soluto più polare, garantendo al contempo una buona separazione del composto. Il fattore di ritenzione, R_f, è definito come il rapporto tra la distanza percorsa da un componente e la distanza percorsa dalla fase mobile. Comprendere questo concetto è fondamentale nell'analisi TLC. L’R_f di un composto dipende dalla fase mobile utilizzata. L’R_f è grande per i composti non polari con una fase mobile non polare. Si osservano valori bassi di R_f per i componenti polari con una fase mobile non polare.