Efficacia dei pesticidi contro le zanzare vettore di malattia nel campo di visualizzazione

Riepilogo

L'efficacia dei pesticidi di sanità pubblica targeting insetti fastidiosi e malattia-vector non è uniforme tra diverse zone ecologiche. Qui presentiamo un sistema di tecniche utilizzando insetti vettori in cattività come sentinelle per l'efficacia dei pesticidi per derivare mappe elettroniche sostenendo la valutazione standard di pesticidi in diversi ambienti.

Abstract

Efficacia dei pesticidi di sanità pubblica fastidio e malattia-vector insetti come le zanzare, flebotomi e mosche filth-allevamento di targeting non è uniforme tra zone ecologiche. Per meglio proteggere la sanità pubblica e veterinaria da questi insetti, le limitazioni ambientali dei pesticidi devono essere studiati per informare un uso efficace delle formulazioni dei pesticidi e delle tecniche più appropriate. Abbiamo sviluppato un programma di ricerca per valutare le combinazioni di pesticidi, attrezzature per l'applicazione dei pesticidi e tecniche di applicazione in caldo-arido deserto, caldo-umido tropicale, caldo e fresco temperato, e zone urbane per derivare antiparassitario utilizzano linee guida specifico di insetti bersaglio e l'ambiente. A tal fine abbiamo progettato un sistema di protocolli per supportare la valutazione efficiente, conveniente, portatile e standardizzata di una gamma diversificata di pesticidi e attrezzature in diversi ambienti. Alla base di questi protocolli è l'uso di una matrice di piccole gabbie con sentinel allevati in Colonia zanzare (adulti e immaturi) e flebotomi (adulti), strategicamente disposti in habitat naturali ed esposti a spray antiparassitario. Modelli spaziali e temporali di efficacia dei pesticidi sono derivati dalla mortalità percentuale in gabbie di sentinella, quindi mappati e visualizzati in un sistema informativo geografico. Mappe della sentinella di dati di mortalità possono essere confrontate statisticamente per valutare l'efficacia relativa di un pesticida in diversi ambienti, o per studiare più pesticidi in un unico ambiente. Protocolli possono essere modificati per ospitare una grande varietà di scenari, tra cui, ad esempio, l'orientamento verticale di sentinelle in habitat baldacchino o test simultaneo di terra e metodi di applicazione aerea.

Introduzione

Efficacia dei pesticidi di sanità pubblica fastidio e malattia-vector insetti come le zanzare, flebotomi e mosche filth-allevamento di targeting non è uniforme attraverso il deserto, tropicale, temperato o zone ecologiche urbane¹. Alcune specie chiave in questi tre gruppi di insetti sono importanti vettori di parassiti, virus, worm filarial e batteri che causano malattie significative in esseri umani, animali e bestiame in tutto il mondo. Per meglio proteggere la sanità pubblica e veterinaria, le limitazioni ambientali dei pesticidi devono essere studiate per informare un uso efficace delle formulazioni dei pesticidi e delle tecniche più appropriate. Produttori di pesticidi di sanità pubblica sono dispensati dalla US Environmental Protection Agency per specificare l'efficacia di una formulazione tutta una serie di ambienti o insetti bersaglio, eppure questi pesticidi vengono utilizzati per il controllo della zanzara e vettoriale in più aree ecologiche negli Stati Uniti e nel mondo.

Abbiamo sviluppato un programma di ricerca per valutare numerose combinazioni di pesticidi e attrezzature per l'applicazione dei pesticidi e tecniche a caldo-arido deserto, caldo-umido tropicale, caldo e fresco temperato e aree urbane, al fine di derivare l'uso dei pesticidi linee guida specifiche per la destinazione insetto e ambiente¹. In questo programma, valutiamo pesticidi che stadi adulti destinazione di zanzare e flebotomi (adulticides) e gli stadi immaturi delle zanzare (larvicidi) utilizzando attrezzature di applicazione dei pesticidi che sono mano trasportato, camion o aereo-montato e installato in postazioni fisse. Quindi, vengono valutate quattro tecniche di applicazione dei pesticidi all'aperto principali: (1) ultra basso volume (ULV) o termica nebbia aerosol spazio spruzzi d'adulticides progettato per colpo rapido degli insetti bersaglio, (2) una variante della tecnica prima in quale liquidi larvicidi applicate con ULV o termica nebbia per soppressione a breve o a lungo termine delle fasi acerbe di insetti bersaglio, (3) spray nebbia temporizzato da postazioni fisse, progettate per respingere o uccidere e spray di nebbia fredda basso volume (LV) (4) di residui di pesticidi progettati per applicare lunga durata vernici tossiche o repellenti su una varietà di substrati naturali o artificiali. I metodi dettagliati per lo svolgimento tecniche (1) e (2) di cui sopra sono presentati qui. Metodi per (3) saranno presentati in studi separati, e tecniche (4) sono descritti in breve in precedenti pubblicazioni^2,3,4.

Per realizzare questo programma di ricerca complessi, abbiamo progettato un sistema di protocolli per supportare la valutazione efficiente, conveniente, portatile e ripetibili/standardizzato di aerosol adulticida e larvicidi tecniche con diverse pesticidi/attrezzature combinazioni di più ambienti. Alla base di questi protocolli è l'uso di Colonia-allevati sentinel zanzare (adulti e immaturi) e flebotomi (adulti) per indicare modelli spaziali e temporali di efficacia dei pesticidi. Nel caso di applicazioni adulticida, sentinella adulto zanzare o flebotomi sono contenuti in piccole gabbie USA e gettare monouso distribuite nelle matrici strutturate attraverso l'area di destinazione e una zona di controllo non trattato. Per le applicazioni di larvicidi, coppette monouso USA e gettare sono distribuiti allo stesso modo per raccogliere spruzzato larvicidi goccioline per la successiva introduzione di acqua e sentinel allevati in Colonia immature zanzare. Successivamente, registriamo la mortalità percentuale in gabbie di sentinella, o percentuale sviluppo adulto in sentinella tazze, a intervalli prestabiliti post-nebulizzazione e utilizzare questi dati per produrre mappe elettroniche di efficacia spaziale e temporale in un sistema informativo geografico (GIS) che può essere quantitativamente, rispetto e tra ambienti.

Utilizzando gabbie sentinella di insetti di Colonia allevato per valutare dei pesticidi efficacia nel campo è una prassi consolidata^5,6, e usando tazze di plastica vuota di sentinella per la raccolta di larvicidi spruzzato sta emergendo nella letteratura⁷ . Tuttavia, la nostra mappatura elettronica di efficacia per visualizzare modelli spaziali e temporali della mortalità è un'innovazione che migliora notevolmente l'indagine di mortalità altrimenti presentate in formati di tabella flat. Inoltre, la gabbia di throughput elevato carico di sistema e il sistema di distribuzione di gabbia modulare adattabile a diversi scenari descritti qui sono uniche per il nostro programma. Altri programmi di ricerca affrontare la valutazione delle domande di pesticidi nel campo in modo diverso. Attuali metodi popolari includono acquisizione e analisi goccioline di pesticidi tingere-contrassegnati da spray nel campo sulla filatura vetro diapositive⁸ o acrilico Rohi⁹, che è un processo consolidata produzione di dati che possono essere mappati elettronicamente e visualizzato in quel momento.

Uno svantaggio è che dimensione delle gocce e misure di densità dal supporto di raccolta sono solo stimate da una piccola percentuale della superficie totale di raccolta, con microscopia assistita da software di campi di vista che purtroppo sono altamente soggettivi. Inoltre, mappe di distribuzione delle gocce e densità non illustrano pienamente efficacia dei pesticidi, poiché il presupposto è che la presenza di un numero limite di goccioline di una certa dimensione indica automaticamente la mortalità degli insetti bersaglio. Questo presupposto non tiene conto per la mortalità da evaporativi prodotti dalle goccioline attraverso l'area di destinazione, che può anche indurre la mortalità¹⁰, o che un minor numero di gocce o altre gocciolina dimensioni possono uccidere alcuni proporzione di individui di destinazione. L'originale spiegazione razionale^10,11,12 è che un pesticida di aerosol è progettato ad interferire piccole goccioline attivamente volare insetti bersaglio. Tuttavia, le nostre osservazioni nel campo, tra cui riduzioni nelle popolazioni naturali dopo la spruzzatura quando gli insetti bersaglio non sono attivamente battenti, suggeriscono che le goccioline o evaporativi prodotti dalle goccioline stanno raggiungendo obiettivi che non sono volanti ma piuttosto nascosto in riposo refugia (dati non pubblicati 2011). Inoltre, abbiamo osservato nell'analisi di applicazione a spruzzo di campo (tramite acquisizione simultanea della gocciolina, cattura l'ingrediente attivo dell'antiparassitario e sentinella gabbie) che mappe di distribuzione delle gocce, distribuzione del principio attivo e la mortalità non sono concordanti ( dati non pubblicati 2010).

Un altro approccio popolare per valutare l'efficacia dei pesticidi è distribuzione di gabbie di sentinella in una griglia delineato in un campo omogeneo falciato piatto senza ostacoli per il pennacchio di pesticidi e in condizioni meteorologiche ideali nei pressi (ad es., coerente venti < 10 mph e direzione del vento perpendicolare alla linea di spray). Ancora, gli altri questo approccio misurando l'efficacia con sentinelle collocati in gallerie del vento¹⁴. Questi approcci forniscono una prospettiva sull'efficacia dei pesticidi, ma sono meno propensi a realizzare l'efficacia operativa in condizioni non ideali (habitat eterogenei che includono ostruzioni al flusso dell'antiparassitario e variabile se non sotto sub-ottimale condizioni meteorologiche). Cercare prove a sostegno dell'efficacia assoluta non è realistico. Le condizioni operative sono raramente ideale, e scelta di formulazioni basate su prove in galleria del vento o applicazione diretta nei parchi ingegnerizzati potrebbe essere fuorviante.

Nella nostra ricerca, utilizziamo siti campo naturale e le condizioni meteorologiche date (ma non in pioggia o venti estremi che sono fuori dai limiti di qualsiasi programma operativo). Questo è probabilmente più informativo per il controllo vettoriale operativa quando si osserva la ragionevole efficacia in una formulazione di pesticidi Nonostante le cattive condizioni ambientali, habitat eterogenei e ostruzioni al flusso dell'antiparassitario. Quando possibile, si raccomanda di integrare dati di mortalità dell'insetto della sentinella con prima - e dopo - sorveglianza delle popolazioni di insetti bersaglio naturale nelle aree di trattamento e di controllo, come un ponte tra esposizione controllata e realizzato l'esposizione alla focale dei pesticidi. Tuttavia, sorveglianza delle popolazioni naturali non è sufficiente per determinare se l'applicazione di antiparassitari produce mortalità in una popolazione di destinazione o se insetti bersaglio effettivamente spostare dall'area di destinazione dopo il rilevamento di aerosol di pesticidi in arrivo.

Indipendentemente dal fatto il caveat per qualsiasi valutazione di Spray antiparassitario nel campo, mappatura elettronica dei dati di mortalità in un GIS (al contrario di piatto presentazione dei dati di mortalità nelle tabelle) mantiene gli attributi quantitativi capaci di confronto rigoroso attraverso prove e fornisce anche un mezzo per la valutazione rapida, visiva. Con i dati acquisiti in GIS, i ricercatori possono impostare soglie per l'efficacia dei pesticidi e visualizzare la relativa capacità di un antiparassitario focale in diversi ambienti, o possono confrontare le funzionalità di più pesticidi all'interno di un unico ambiente attraverso una varietà di tecniche e attrezzature per l'applicazione.

Protocollo

Nota: Questo protocollo è scritto specificamente per prove sul campo le zanzare adulte di targeting. Informazioni sulle modificazioni necessarie per zanzare immature, altre specie di insetti adulti sentinella e scenari unici sono inclusa nella discussione.

1. sentinel allevamento dell'insetto e Sentinel gabbia preparazioni

1. Costruzione di gabbie di sentinella adulto
   1. Determinare il numero totale di sentinella gabbie necessarie per la sperimentazione sul campo di comprese le zone di trattamento e il controllo e il numero delle ripetizioni previste, quindi aggiungere il 5% per compensare le perdite dovute a danni o mortalità insolito (Vedi punto 2.1). Preparare 5 x 5 nelle piazze di tulle maglia (2 a sentinella gabbia) usando un rotolamento disco taglierina, regolo e tagliere con telemetro yardage di tulle di massa. Negozio il tulle maglia piazze in lotti di sacchetti di plastica richiudibili 50 in 1 qt.
   2. Preparare la sentinella gabbie spingendo con cautela i dischi di cartoncino teso fuori le parti inferiori di nuovo pt ½ cartone Coppe di gelato per creare 2 x 3 a tempo indeterminato in cilindri. Per ogni tazza, rimuovere i dischi di cartone fuori 2 coperchi per creare cornici a tempo indeterminato (1 per ogni estremità del cilindro). Fissare un quadrato di maglia tulle a un'estremità del cilindro intrappolando sotto la mascherina, come la lunetta diventa strettamente fissata al cilindro.
   3. Per ogni gabbia di sentinella, fissare una fascetta di velcro e a una banda di gomma e fissare l'elastico intorno alla lunetta che è a posto. Borsa le gabbie di sentinella in lotti di 50, con un sacchetto separato contenente 50 cornici e un sacchetto di 50 piazze di maglia di tulle.
      Nota: Dimensione di maglia Tulle dovrebbe essere la dimensione di spazio minimo per contenere le specie di particolare sentinella ad essere messi in gabbia. Ad esempio, le zanzare Aedes aegypti richiederà una dimensione di maglia inferiore da zanzare Culex quinquefasciatus .

Figura 1: Sentinel preparazione gabbia. (A) mostrato qui sono due personale caricamento sentinel gabbie con le zanzare anestetizzate pubblicizza su un grande foglio di carta bianco. Lo stack di tulle maglia piazze in primo piano pronto per il posizionamento sulla sentinella aperto attesa gabbie dovrebbero essere notate. (B) mostrato sono molte gabbie di sentinella caricato, in attesa di posizionamento dei batuffoli di cotone 10% saccarosio e riallineamento del gruppo di gomma. (C) mostrato sono gabbie di sentinella in un fresco, pronto per la distribuzione nel settore. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

2. Pianificazione e allevamento insetti di Colonia
   1. Per gli insetti di sentinella, selezionare una specie che è più appropriata per l'ambiente, la stagione e la minaccia medica nella posizione dove si svolgerà la prova. Prendere in considerazione le capacità di Colonia e il tempo di sviluppo per adulto per tale specie; si consideri, ad esempio, se la Colonia sarà in grado di fornire il numero di campioni necessari per il numero di gabbie di sentinella richiesto nel lasso di tempo.
   2. Per l'allevamento di tutti, garantire gabbie di allevamento della popolazione sono tenute in un ambiente controllato e sono abbastanza grande per il numero di adulti programmato, e che un regime di alimentazione e pulizia è stabilito e seguito con attenzione per ridurre la mortalità successiva legati allo stress che sarà confondere prove di efficacia sul campo. Per estese prove sul campo, pianificare posteriore sequential batch in gabbie separate popolazione ben identificata.
   3. Utilizzare le zanzare femmina solo in gabbie di sentinella, preferibilmente Eclosion post-della 3-5 p. Pupe di zanzara possono essere sessuati in un ambito di dissezione o fisicamente separati utilizzando un separatore di pupal vetro per ridurre lo sforzo di ordinamento con adulti presso la gabbia di sentinella caricamento passo.
      Nota: Una colonia deve essere in grado di fornire raddoppiare il numero di zanzare progettato per uso in gabbie di sentinella, perché solo le femmine sono utilizzate per le sentinelle. Utilizzare 10 femmine adulte per ogni gabbia di sentinella, come questo numero è veloce da caricare, rapido a contare per la mortalità e facile determinare se qualsiasi sono scappati. È essenziale per il piano di back dalla data proposta spray affinché 3 - a 5-giorno-vecchio adulte zanzare sono disponibili. Tuttavia, la diffusione di 3-5 d fornire qualche margine nel caso in cui una stretta Meteo impedisce di spruzzatura.
3. Caricamento della sentinella gabbie
   1. Preparare un CO₂ camera rivestono la parte inferiore di un nuovo contenitore di stoccaggio di plastica per alimenti ½ gal con batuffoli di cotone. Diretta e un'estremità di un 6-piedi di lunghezza della tubazione del poliuretano (¼ di pollice di diametro) nei batuffoli di cotone attraverso un foro di aderente un pugno basso in un lato del contenitore. Allegare un 20 lb CO₂ bottiglia con un regolatore per l'altra estremità del tubo e posizionare il coperchio senza bloccare sul contenitore per consentire l'evacuazione dopo diffusione attraverso i batuffoli di cotone e che circola attraverso il contenitore di gas. Nastro il tubo al piano del tavolo per evitare la camera leggera da essere tirato o buttato a terra. Impostare una portata adeguata alla specie utilizzata (inizio ore ~ 7 L/min e apportare regolazioni se necessario).
   2. Preparare la soluzione di saccarosio di 10% in un nuovo contenitore di plastica per alimenti ½ gal e immergere 100 batuffoli di cotone in modo essi diventano completamente saturo. Stendere le gabbie di sentinella dal punto 1.1 in lotti di 25 o 50 come lo spazio lo permette, con le piazze di maglia di tulle e sciolto lunette a portata di mano nelle vicinanze.
   3. Rimuovere le zanzare dalla gabbia della popolazione con un aspiratore meccanico capace di canalizzare le zanzare direttamente nei tubi di raccolta ventilato rimovibile. Non più di 10 ~ zanzare dovrebbero essere aspirate in ogni provetta, e non più tubi che possono essere elaborati entro 10 min devono essere riempiti per mitigare lo stress. Inserire la CO₂ camera 2-4 tubi alla volta e impostare un timer per un'esposizione di 4 min per anestetizzare le zanzare per sexing successive e trasferimento a sentinel gabbie.
   4. Una volta che il timer chimes, rimuovere tutti i tubi dalla camera di CO₂ e agitare accuratamente fuori le zanzare anestetizzate dai tubi per li disperderà uniformemente attraverso un foglio pulito bianco 11,5 x 17 - in. Impostare il timer per 4 min, che è il tempo approssimativo prima le zanzare sarà nuovamente attive. Utilizzare una pistola aspiratore^15,16 o soft touch insetto forcipe per scegliere fuori lotti di 20 femmine adulte e metterli immediatamente nelle gabbie aperte sentinella in attesa. Una volta che tutte le femmine sono stati raccolti fuori il batch anestetizzato, utilizzare un aspiratore meccanico separato per raccogliere tutte le zanzare maschile rimanenti che saranno distrutti dal gelo.
   5. Come ogni attesa aperta sentinel gabbia riceve un batch di 20 zanzare femmina adulte, trappola un tulle quadrato con una lunetta di maglia sopra l'estremità superiore aperta del cilindro gabbia e spingere verso il basso per completare l'assemblaggio della gabbia della sentinella. Dopo aver effettuato il tulle, perno della banda di gomma così che esso definisce attraverso entrambe le estremità della maglia della gabbia della sentinella, con la fascetta di velcro e posizionata contro il lato del cilindro. Spremere la maggior parte della soluzione di saccarosio al 10% su un batuffolo di cotone in modo che è ancora umido, poco prima del punto di gocciolamento liberamente e infilare delicatamente il batuffolo di cotone sotto l'elastico contro la rete di tulle su un lato della gabbia della sentinella , facilmente accessibile per le zanzare.
   6. Ripetere i passaggi 1.3.3-1.3.5 fino a quando non vengono caricate tutte le gabbie di sentinella.
      Nota: La procedura di caricamento di gabbia dovrebbe comprendere un minimo di due personale: uno per condurre tutte le zanzare gestione passaggi e un altro a condurre tutte le fasi di movimentazione di gabbia.
4. Dispositivi di raffreddamento di caricamento sentinella gabbia
   1. Preparare un 48-qt isolato picnic cooler per gabbie di sentinella ogni 45-50 (a seconda della marca/dimensione del dispositivo di raffreddamento) inserendo un asciugamano di cotone bagnato 18 x 24 - nella parte inferiore coperto da un sacchetto della spazzatura cucina alto 13-gal. L'asciugamano bagnato dovrebbe essere strizzato fino al punto di saturazione, ma non gocciolante. Piegare e organizzare la borsa 13-gal per coprire completamente la parte inferiore del radiatore e almeno 3 dal basso su tutti i lati.
   2. Caricare il dispositivo di raffreddamento posizionando accuratamente sentinella gabbie in strati sovrapposti con le palline di cotone rivolto verso l'alto. A seconda del sistema di raffreddamento, ci dovrebbe essere di circa 10-12 gabbie per strato e 4-5 strati. Se possibile, leggermente spostata ogni strato affinché una gabbia non copre completamente la gabbia qui sotto per promuovere il flusso di aria. Coprire lo strato superiore con un sacco della spazzatura secondo 13-gal (piegato come il sacco della spazzatura inferiore) e diffondere un secondo asciugamano bagnato sulla cima di questa borsa.
   3. Utilizzare nastro adesivo per fissare un pezzo di cartone in un angolo anteriore del labbro superiore di piegato il dispositivo di raffreddamento, tale che il coperchio è appoggiato aprire circa 3/8 per promuovere lo scambio di aria e prevenire il surriscaldamento. In ogni dispositivo di raffreddamento sono un sacchetto di plastica richiudibile 1-qt con 10 palline di ricambio cotone imbevuti di soluzione di saccarosio al 10% e una borsa separata con 5 bande di gomma ricambio e 5 fascette hook-and-loop (questi componenti sono occasionalmente persi da sentinella gabbie durante la distribuzione in il campo). Per tutto il tempo in dispositivi di raffreddamento nel laboratorio e campo, completano la soluzione di saccarosio in tutti i batuffoli di cotone sulle gabbie, se necessario, utilizzando una soluzione di saccarosio contagocce e 10% immagazzinata in un contenitore robusto.
      Nota: Con questo metodo, tipico Colonia zanzare possono essere caricate in gabbie di sentinella e memorizzate in dispositivi di raffreddamento 28 24 h prima dell'uso nelle prove sul campo.
5. Trasporto di raffreddatori di gabbia di sentinella al campo
   1. Durante il trasporto al campo sito tenere sentinella gabbia Raffreddatori in un veicolo con aria condizionata ma al riparo dalla luce solare diretta. Siti di campo in delicato per ambienti temperati caldi, i refrigeratori possono essere accatastati all'aperto per acclimatare o mantenuti in veicoli con aria condizionata in esecuzione; ma in entrambi i casi, mantenere raffreddatori dalla luce solare diretta. Orologio per qualsiasi tempo libero condizioni ambientali che poteva influenzare le sentinelle nei refrigeratori (ad es., scarico del veicolo, gli incendi nel Cestino, ecc.)
   2. In ambienti estremi di caldi, tenere Raffreddatori in veicoli con aria condizionata in esecuzione dalla luce solare diretta, ma acclimatare le sentinelle gradualmente alle condizioni esterne prima della distribuzione nell'area di trattamento per evitare la morte da shock. In tutti gli ambienti, considera l'analisi di uno o due dispositivi di raffreddamento di sentinella gabbie per determinare quanto tempo possono essere lasciati o quanto velocemente può essere acclimatati alle condizioni locali all'aperto.

2. preparazione del sito campo

1. Che istituisce l'area di griglia e controllo di sentinella
   1. Selezionare un'area di studio che fornisce lo spazio sufficiente per la dispersione della modalità prevista di applicazione dei pesticidi (aerei, camion, o portatile) con un percorso chiaro per il movimento del dispositivo spray e chiaro di insediamento umano o di attività. Se possibile, di includere una varietà di densità di vegetazione e generale eterogeneità dell'habitat per sfidare spruzzo penetrazione.
   2. Progettare una griglia delle posizioni per le gabbie di sentinella che cattura le variazioni di distanza dal spruzzatore, distanza lungo la linea di spray, vegetazione/ostacoli alla penetrazione di spray ed altezza dal suolo. Utilizzare un 300 ft bobina di nastro di misurazione per contrassegnare comodi intervalli dallo spruzzatore e lungo la linea di spray; ad esempio, utilizzare multipli di intervalli di 25 ft.
   3. Produrre una mappa della griglia di marcatura su una stampa di un'immagine satellitare con una chiara numerazione codice per sentinel posizioni gabbia e distribuirlo al team di campo. Se possibile, ottenere le coordinate GPS per ogni posizione di gabbia, o almeno le coordinate delle caratteristiche prominenti che successivamente possono essere utilizzate per i punti di registrazione per costruire una mappa spazialmente coerente nel sig.
   4. Contrassegnare le posizioni di griglia gabbia sentinella sul terreno con nastro diminuente, bastoni di incandescenza, e/o di pin bandiere. Spray antiparassitario sono spesso condotti al tramonto o di notte: tentare di cancellare distinti percorsi a piedi a tutte le località di sentinella, compreso nastro diminuente extra e/o bagliore bastoni per contrassegnare i pericoli di viaggio o altri ostacoli significativi.
   5. Installare sentinel gabbia montaggio pali nel terreno secondo il disegno di griglia e chiaramente sull'etichetta di ciascun polo con un codice per la sua posizione unica con un pennarello indelebile. Almeno 48 pollici del palo dovrebbe essere sopra terra. Se l'habitat non fornisce naturalmente sfide di vegetazione/ostacolo alla dispersione spray antiparassitario, è consigliabile inserire una scatola di cartone 1 ft³ su un lato con l'open top accanto a ciascun polo di gabbia di sentinella, per fornire una posizione di sentinella ulteriori all'interno simulato refugia. Flusso d'aria attraverso la casella può essere regolata da forare il ½-in uno o più lati e scatole devono essere etichettati con un codice di posizione unica con un pennarello indelebile.
   6. Se c'è un rischio di formiche attaccando sentinella zanzare, installare sentinel gabbia poli attraverso un aderente foro praticato al centro di 18 x 18 componente di montaggio adesivo pavimento, con il lato adesivo rivolto verso l'alto per intercettare le formiche prima che possano raggiungere le sentinelle. Le caselle³ 1 ft dal punto 2.1.5 è posizionabile anche sul lato appiccicoso di queste piastrelle per ostacolare le formiche e anche di tenere le scatole in luogo in condizioni di vento.
   7. Stabilire un'area di controllo bolina (costituito da un simile habitat e meteorologia come zona di trattamento) per la distribuzione delle gabbie di sentinella di controllo non trattato esposto all'ambiente su pali e/o in scatole di 1 ft³ per la stessa quantità di tempo come sentinelle nell'area del trattamento. Un team specifico di personale con refrigeratori separati di sentinella gabbie dovrebbe essere dedicato alla gestione di tutte le sentinelle di controllo.
   8. Risorse permettendo, progettare una distribuzione di trappole appropriati in tutta la zona da trattare, aree adiacenti alla zona di trattamento e aree di controllo per condurre la sorveglianza delle popolazioni locali naturali delle zanzare che sono più vicini alla specie selezionata al punto 1.2.1. Iniziare il giorno o durante la notte sorveglianza, a seconda della specie, durante uno o più dei 12-24h periodi prima che le prove di spruzzo sono di avvenire. Continuare la sorveglianza durante le prove di spruzzo, seguita da sorveglianza per uno o più periodi dopo le prove di spruzzo.

Figura 2: preparare il campo sito con sentinel pali gabbia. Due scenari di sentinella gabbia poli distribuiti in (A) irrigate microhabitat tropicale in una regione di caldo-arido e (B) caldo-arido deserto. In (A), vengono visualizzati tre tipi di apparecchi di sentinella: la "scala" sulla sinistra è una serie di nastri di cotone sospesa tra tubo in PVC per catturare dei pesticidi a varie altezze dal suolo; il palo in mezzo è per gabbie di zanzara di sentinella; e il palo sulla destra sostiene un filatore di diapositiva per catturare le goccioline di pesticidi. (B) c'è un nastro di cotone simile per catturare dei pesticidi, ma va notato che il supporto destro dell'apparato in primo piano all'aperto funge anche da un palo di gabbia di sentinella (la gabbia di sentinella attaccato circa un terzo del cammino verso il basso); al contrario, l'apparato in background viene posizionato in modo che la barra multifunzione e la gabbia di sentinella (indicato con la freccia gialla) sono al riparati nella vegetazione. Il velivolo in background sta conducendo uno spray antiparassitario ULV. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

2. Sicurezza pratica
   1. Stabilire un sistema di comunicazione tra spray squadra, team di gestione di trattamento zona sentinella, sentinella di zona di controllo gestione squadra, ecc., tramite i telefoni cellulari (voce/testo) o radio portatili.
   2. Fornire dispositivi di protezione individuale (PPE) a tutto il personale che sono appropriati per i loro ruoli e appropriato per l'apparecchiatura di formulazione e l'applicazione di pesticidi.
   3. Istituire un deposito di pesticidi e la zona di miscelazione/carico protetto con contenimento secondario e fornito di attrezzature di emergenza, quali pale e/o estintori per le applicazioni termiche nebbia, asciugamani per contenere sversamenti o gocciola, contenitori per rifiuti, pulito acqua, beni di prima necessità e stazioni di lavaggio oculare portatile. Cosa importante, stabilire protocolli nei casi di fuoriuscite o l'esposizione del personale agli agenti chimici.
3. Marcatura della linea di spray e registrazione di meteorologia
   1. Per applicazioni di guida o portare a mano, assicurarsi che la linea di spruzzo è chiaro e che gli ostacoli sono identificati e chiaramente contrassegnati con nastro, diminuente pin bandiere, e/o bastoni di incandescenza. Per applicazioni aeree, le tutte le opportune disposizioni con controllo del traffico aereo.
   2. La lunghezza della linea spray base deve corrispondere le dimensioni della griglia; Tuttavia, impostare l'inizio e interrompere i punti bene-prima e dopo il pozzo della griglia. Aggiungere circa il 10% della lunghezza della linea spray base all'inizio e alla fine per aumentare l'opportunità per l'intera griglia di essere esposti, dato inevitabili turni e imperfezioni nei modelli di vento (Vedi risultati rappresentativi).
   3. Quando possibile, anticipare i salti di vento principali, impostare righe alternate spray e progettare la griglia di sentinella per essere informato da entrambe le direzioni di spruzzo. L'operatore di spruzzo dovrebbe essere pronto a smettere di spruzzare brevemente se il vento comincia a raffica male o si sposta improvvisamente, che possono creare un rischio di sicurezza. L'operatore può riprendere la spruzzatura quando appropriato, e la versione di prova può ancora produrre dati di efficacia utilizzabile come comandi sono mantenuti nell'ambiente per un periodo prolungato simile.
   4. Inserire almeno una stazione meteo con un registratore di dati in grado di misurare la temperatura, umidità relativa, velocità del vento e direzione del vento in zona spray e un altro nell'area di controllo. Inoltre, impostare un nastro indicatore di vento semplice (circa 2-3 ft di nastro luminoso colorato diminuente) su un palo di gabbia di ricambio sentinella in considerazione l'operatore spray e il team di campo per aumentare la consapevolezza generale delle condizioni. Per applicazioni aeree, l'aereo dovrebbe idealmente essere capace di reporting meteorologia ad altezza di rilascio.
      Nota: Collaborazione con un'università, organizzazione di sanità pubblica, zanzara e distretto di controllo vettoriale o altra agenzia con conoscenza della zona propone di condurre prove di campo, tale che esistenti partnership e accordi con i proprietari terrieri o terra steward possono essere edificati e contribuire a sviluppare il programma di ricerca. I partenariati esistenti traducono alla sicurezza del sito, uso a lungo termine e in alcuni casi, il buy-in critico e accettazione da parte del pubblico. Con griglie strutturate, è semplice per collaboratori locali sviluppare i propri schemi di numerazione di etichettatura per i controlli di distribuzione, raccolta e mortalità rapidi e ripetibili di gabbie di sentinella. Una volta che la griglia, linea spray e meteorologia sono impostati, i materiali possono essere lasciati in posto (ad esempio, pernottamento fino a un momento di spray conveniente o se c'è una stretta di tempo).
      Attenzione: Scatole di cartone possono deformarsi quando bagnato in caso di pioggia e vento forte può spostare le piastrelle del pavimento adesivo pesante.

3. distribuzione delle gabbie di Sentinel

1. Determinare in anticipo il posizionamento delle gabbie di sentinella in ogni punto della sentinella nella griglia, come l'altezza della gabbia sul palo di montaggio (compreso multi-altezze, dove uno potrebbe essere collocato nella parte inferiore del palo e l'altro nella parte superiore), o se sarà gabbie ho messo n 1 ft³ cartoni.
2. Assegnare 2-persona sentinella gabbia team di distribuzione: una per tenere il dispositivo di raffreddamento e un altro per tirare fuori sentinella gabbie come necessario. In alternativa, assegnare gli individui per trasportare e posizionare le gabbie multiple a seconda dell'ambiente e la dimensione della griglia. Includere sempre gabbie sentinella supplementare nel caso in cui uno è caduto o calpestato, tulle è strappata o uno è perso mentre si muove attraverso la griglia.
3. Per il regime di posizionamento come descritto al punto 3.1, utilizzare la fascetta di velcro e per apporre sentinella gabbie per pali e assicurarsi di batuffoli di cotone con soluzione di saccarosio al 10% sono ancora al loro posto sotto l'elastico. Posizionare gabbie sui loro lati nelle caselle 1 ft³ in modo che entrambe le estremità della maglia tulle sono perpendicolari al suolo. Orientamento delle gabbie su pali può essere specificata in anticipo; per esempio, tale che i lati di maglia tulle sono in linea con la direzione di spruzzo pianificato e previsto direzione del vento. In ambienti caldi del deserto, angolo le gabbie sui pali, tale che gli insetti non sono in luce diretta del sole e possono propagarsi all'ombra del lato del cilindro gabbia.
4. Nelle aree di trattamento e di controllo, chiaramente sull'etichetta ogni gabbia di sentinella con un pennarello indelebile come è messo in posto con due tipi di informazioni: codice per il mapping di più tardi nel GIS e mortalità (2) pre-spray per la successiva correzione di posizione (1) il palo e/o la casella unica per mortalità indotta da spruzzo o mortalità dall'esposizione all'ambiente indipendentemente da spruzzo. Ad esempio, se la mortalità pre-spray è zero, scrivere "pre-0"; Se 2 esemplari sono morti, scrivere "pre-2", ecc.

Figura 3: posizionamento di sentinel gabbie interni ed esterni. Esempi di posizionamenti di palo e³ scatole di 1 ft (A) all'interno di una residenza rurale simulata, (B) all'aperto in un quartiere simulato e (C) in un boschetto di palme data in una zona caldo-arido. Anche mostrato sono le mattonelle appiccicose sotto la casella e sotto la gabbia di sentinella disposte all'aperto in (A), e il perno di palo gabbia sentinella spinto attraverso la piastrella appiccicosa accanto alla casella in (B) di ridurre incursione di formiche in gabbie di sentinella. Il compensato quadrato con supporto di PVC verticale a sinistra della casella in (A) è un supporto per un filatore di diapositiva. Un apparato simile può essere utilizzato per sostenere un palo di gabbia di sentinella per consentire il posizionamento di sentinelle a varie altezze. Viene inoltre illustrata la filatrice diapositiva con diapositive su un Monte a sinistra della sentinella gabbia palo e casella (B). In (C) è indicato un posizionamento alto-basso di due gabbie di sentinella per studiare il movimento del pesticida a diversi livelli. La parte superiore della gabbia aperta sentinella più fresca è appena visibile in primo piano. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Nota: A seconda delle dimensioni della griglia, assicurarsi che ci sono personale sufficiente per distribuire tutte le gabbie in un lasso di tempo appropriato per minimizzare gli effetti ambientali sulla mortalità di sentinella. Può essere necessario effettuare esecuzioni di pratica con gabbie vuote per determinare se abbastanza personale sono presenti. Resta inteso che ci sarà inevitabilmente una certa diffusione nel tempo di esposizione di gabbie di sentinella per l'ambiente, a causa del tempo di set-up con il dato numero di gabbie per persona. Nelle griglie di sentinella molto grandi (ad esempio, per alcune applicazioni aeree), intenzione di coordinare squadre multiple in diversi veicoli per posizionare le gabbie di sentinella entro un ragionevole lasso di tempo. È inevitabile che alcuni mortalità si verifica in tutta la popolazione delle zanzare gabbia sentinella, pertanto deve essere contabilizzata con gabbia accurata etichettatura prima esposizione ambientale all'esterno i refrigeratori e prima l'applicazione di antiparassitari.

4. condurre l'applicazione di pesticidi

1. Assegnare un cronometrista per tenere traccia di durata di applicazione spray (avvio/arresto volte) premuto volte utilizzando un cronometro, un orologio o un video digitale con timbri data/ora. Il cronometrista può anche essere assegnato uno scriba per catturare più variabili chiave, compreso il tempo al quale sentinel gabbia distribuzione completata, volo, guida, poca velocità, portata di applicazione dispositivo, concentrazione di pesticidi e diluente, spray tempo, tenere premuto tempo, tempo al quale gabbia collezione è completata e le osservazioni generali habitat.
2. Preparare l'apparecchiatura di applicazione di pesticidi secondo le linee guida del produttore e caricare il pesticida (e diluente se necessario), utilizzando l'importo minimo per coprire l'area di destinazione e un importo predeterminato per contabilizzare spray linea volumi e serbatoio di antiparassitari pozzetto per evitare la cavitazione durante spray. Non superare i tassi di applicazione specificati sull'etichetta dei pesticidi e non usare pesticidi non approvati dalla US Environmental Protection Agency, a meno che non sia stato fissato un permesso d'uso sperimentale specifica il percorso del campo prova.
3. Stabilire un sufficiente tempo di post-nebulizzazione tenuta che vi permetterà di pennacchio spray antiparassitario disperdere in tutta la griglia di gabbia di sentinella prima le gabbie di sentinel sono raccolti. Tempo di mantenimento si basa su una considerazione equilibrata di densità di habitat/vegetazione, condizioni meteorologiche (in particolare calore o vento), dispositivo di applicazione, modalità di applicazione (aerea, veicolo a terra, portatile), insetto di destinazione e formulazione dei pesticidi, e può richiedere prove preliminari per sviluppare in modo efficace.
4. Una volta sentinella gabbie sono etichettate e distribuite nelle aree di trattamento e di controllo e tutto il personale chiave hanno comunicato prontezza, hanno l'operatore spray condurre una verifica finale sulla direzione e velocità del vento e avviare lo spruzzatore aereo, macinato o portatile applicazione di antiparassitari dalla linea designato spray o spray alternativo come necessario. Impostare il volante, guidare o camminare velocità a seconda della applicazione dispositivo portata e pesticidi etichetta.
5. Una volta completata l'applicazione a spruzzo, hanno il cronometrista segnano l'inizio il tempo di mantenimento e informare tutto il personale di 1-2 min prima deve trascorrere il tempo di attesa, affinché tutto il personale possono spostare in posizione e preparare per la raccolta delle gabbie di sentinella.
   Attenzione: Osservare tutte le precauzioni di sicurezza specificate sull'etichetta dei pesticidi oltre alle procedure consigliate di applicatore dell'antiparassitario standard. Applicazioni di pesticidi dovrebbero essere condotta da un applicatore di pesticidi certificata con, se possibile, certificazione aggiuntiva della categoria dei pesticidi di sanità pubblica. Prima che l'applicazione a spruzzo in modo tutto il personale sono controvento dell'area di applicazione, o in veicoli con aria condizionata il ricircolo se essi devono essere nella zona di destinazione e/o indossano PPE appropriato. Garantire tutti i refrigeratori di gabbia di sentinel sono chiusi e che all'interno di veicoli chiusi parcheggiati controvento dell'applicazione spray hanno l'aria condizionata ricircolo.

Figura 4: montati su un veicolo termico nebbia spruzzando una griglia in posizione equatoriale caldo-arido. Un camion montato ULV spruzzatore guidando lungo una linea di spray dirigere spray antiparassitario attraverso una griglia di gabbie di sentinella in campo aperto (A). Simile alla Figura 2, ogni posizione di sentinella è dotato di un secondo polo per sostenere un nastro di cotone per raccogliere gocce di antiparassitario per un'analisi successiva con gas cromatografia/spettrometria di massa. Primi piani di sentinel gabbie (B) in un ambiente temperato caldo prima di spray e (C) in un ambiente caldo-arido spray. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

5. le gabbie di Sentinel di raccolta e registrazione dei dati di mortalità

1. Utilizzare le stesse squadre di gabbia di sentinella per raccogliere gabbie in tutta la griglia, una volta trascorso il tempo di attesa. Gestione post-nebulizzazione gabbie tutto il personale devono indossare guanti in nitrile monouso per minimizzare il contatto umano con pesticidi. Ritorno post-nebulizzazione gabbie all'ambiente protettivo dei raffreddatori gabbia sentinella più presto, archiviati in un veicolo di fresco dalla luce solare diretta e restituito al laboratorio per l'elaborazione più presto possibile.
2. Nelle aree di trattamento e di controllo, è fondamentale registrare mortalità post-nebulizzazione per ogni gabbia di sentinella con un pennarello indelebile come sono stati raccolti. Conteggio di mortalità post-nebulizzazione deve includere tutte le zanzare morti nella gabbia, e questo numero dovrebbe essere scritto direttamente adiacente al conteggio "pre-", ma un cerchio abbastanza chiaramente per distinguerlo dal conteggio mortalità pre-esposizione. Più tardi, il pre-conteggio verrà sottratto il post-conteggio per ottenere la mortalità effettiva dall'esposizione a pesticidi (area di verniciatura) o ambiente (area di controllo). Non tentare di condurre questa matematica nel campo mentre si affretta per raccogliere sentinel gabbie.
3. Tenta di restituire sentinella gabbie all'area di lavoro di laboratorio all'interno di post-nebulizzazione 6 h in modo che il conteggio di mortalità di 6 h possa essere registrato. In laboratorio, è possibile trasferire tutte le gabbie in vassoi di plastica, scartando tutte le bande di gomma, fascette di velcro e cavi e batuffoli di cotone. Ogni vassoio dovrebbe contenere circa 20 gabbie sentinella memorizzate con il tulle di maglia parallelo al terreno. Posto un batuffolo di cotone soluzione di saccarosio nuovo 10% su tutte le gabbie e coprire ogni vassoio con un nuovo asciugamano di cotone umido, simile a quelli utilizzati in dispositivi di raffreddamento di gabbia la sentinella. Impilare i vassoi su un banco di laboratorio o in un incubatore con ½-in PVC tubo distanziatori. Memorizzare i vassoi con gabbie da aree di trattamento ben separati o in diversi incubatori che controllano i vassoi di gabbia.
4. Questo punto viene trasferire dati di mortalità pre- e post-nebulizzazione da ogni gabbia a forme di dati come il conteggio di mortalità di 6 h è condotta: una persona che indossa guanti in nitrile monouso dovrebbe prendere gabbie sentinella fuori vassoi uno-ad-uno per ogni gabbia, chiamando fuori 1) unico codice ubicazione, poi la 2) pre-conteggio e il post-conteggio immediato leggere dalla gabbia stessa, seguita da 3) conteggio corrente 6 h osservato direttamente. Una seconda persona dovrebbe registrare questi dati sulle forme pre-preparati che hanno una riga per ogni codice di posizione unica dalla prova (tabella 1). Ripetere questo processo alle 12h e 24h post-spray, di memorizzare i vassoi in condizioni stabili tra mortalità conteggi.
5. Una volta completato il conteggio di mortalità 24h, congelare tutti i vassoi delle gabbie sentinella per uccidere tutti i campioni e poi condurre i conteggi finali per ogni gabbia ottenere un preciso denominatore per il calcolo delle percentuali mortalità. Se un esemplare manca da una gabbia, cercare direttamente sotto di esso nel cassetto, dove può aver asciugato e caduto attraverso. Smaltire tutte le gabbie di sentinella, asciugamani in cotone e fodere di sacchetto di spazzatura di plastica in sacchetti di immondizia sigillato nella normale spazzatura e pulire tutti i refrigeratori e vassoi con acqua e sapone e asciugare li alla luce solare diretta.
   Nota: Vassoio larvale distanziali sono facilmente realizzati da stock tubo in PVC, con una tacca tagliata a ciascuna estremità in modo che non può rotolare fuori i vassoi. Distanziali permettono di impilamento dei vassoi larvale per risparmiare spazio in veicoli, incubatori o banchi di laboratorio. Per alcuni siti di settore, potrebbe non essere possibile restituire al laboratorio entro 6 ore; nel qual caso, trasferimento gabbie da raffreddatori a vassoi nel campo utilizzando il protocollo di cui sopra e materiali e li stack con cura nel veicolo con aria condizionato. Mortalità di registrazione in ogni gabbia immediatamente dopo il post-nebulizzazione tenere il tempo e a circa 6h, 12h e 24h post-spray fornirà informazioni su atterramento (a breve termine) vs effetti a lungo termine dell'antiparassitario.

Figura 5: elaborazione sentinella gabbie post-nebulizzazione. Due scenari di trasferimento post-nebulizzazione gabbie in impilati vassoi durante il controllo di mortalità di 6 h: (A) in una camera d'albergo vicino a un sito remoto campo e (B) in un comodo parcheggio, ritorno al laboratorio da un sito di campo lontano. Nota i distanziali in PVC nella foto inserto in (A), asciugamani umidi che coprono gabbie disposte in vassoi nella foto principale di (A) e un esempio di un codice di posizione unica e pre- e mortalità post-nebulizzazione cerchiata annotato direttamente su una gabbia di sentinella nella foto inserto in (B). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

6. l'elaborazione, l'analisi e la mappatura dei dati di mortalità

1. Trasferire tutti i dati di mortalità registrata a mano dalle forme in un foglio di calcolo elettronico e calcolare 4 nuove colonne per la mortalità post-nebulizzazione, 6h, 12h e 24h (tutto corretto per mortalità pre-spray).
2. Correggere tutti i dati di mortalità di zona di trattamento per la mortalità di controllo in 4 ulteriori nuove colonne utilizzando la correzione di Abbott¹⁷: calcolare un tasso di mortalità di controllo medio tra tutte le sentinelle di controllo per ogni periodo di tempo che la mortalità era registrato (cioè, post-nebulizzazione, 6h, 12h e 24h; tutto corretto per mortalità pre-spray) e utilizzare questo mezzo per Abbott-correggere la mortalità in ogni gabbia di sentinella zona di trattamento per ogni periodo di tempo corrispondente. La soglia per la mortalità di controllo accettabile può essere arbitrariamente determinata basato sulle specie di zanzara sentinel utilizzata ma non deve superare il 25%¹⁸.
3. In una mappa del sistema di informazione geografica: tutte le destinazioni a gabbia di sentinella unico utilizzando i dati GPS raccolte nel passaggio 2.1.3 e creano 4 colonne per mortalità Abbott-rettificato per la mortalità 4 periodi di tempo della tabella degli attributi per queste posizioni. Creare una copertura interpolata per la mortalità per ciascuna della mortalità 4 periodi di tempo attraverso sentinella tutti unica percorsi nell'area del trattamento. Aggiungere queste coperture interpolate alla mappa e utilizzare una rampa colore allungato su un azzurro a spettro rosso orientato basso (blu) a alta (rosso).
4. Che permettono di migliorare la mappa della zona di trattamento con un'immagine satellitare sottostante e aggiungere posizioni di gabbia di sentinella (distinguendo trattamento e controllo sentinelle), spray linea, guida la direzione, barra della scala, freccia nord, chiave di rampa colore interpolati mortalità, chiave per simboli e un titolo dettagliato con data, tipo di habitat, pesticidi e diluente utilizzato, attrezzature per l'applicazione utilizzata e specie bersaglio. Esportare un'immagine di mappa per ogni superficie di periodo di mortalità.
5. Aggiungere informazioni meteorologiche come un grafico di inserto e includere una rosa dei venti separata (diagramma polare) per mostrare prevalente del vento, velocità del vento e variabilità durante tutto il periodo dello spruzzo. Inoltre, è possibile fornire dati meteorologici separati per rilascio altezza nel caso di applicazioni aeree.
6. Grafico dati di sorveglianza di popolazione naturale locale come un indice del numero di femmine di ogni specie raccolti per trappola per notte. Una serie di grafici partizionati di posizione (adiacente alla zona da trattare, all'interno dell'area di trattamento e all'interno dell'area di controllo) e periodo (campionato prima, durante o dopo le prove di spruzzo) di uscita e metterli separatamente come inserti in GIS principale mappa per mostrare gli effetti su popolazioni naturali nel tempo all'interno, adiacente e lontano dall'applicazione di pesticidi.

Risultati

Qui sono risultati rappresentativi presentati da due studi sul campo inedito che comprendeva il nucleo dei metodi descritti sopra. In questi studi, due aspetti dell'efficacia adulticida contro sentinel vettore di malattia insetti sono stati studiati.

Il primo studio (dati non pubblicati 2010-2012) studiato se diluente potrebbe influenzare l'efficacia dell'antiparassitario contro le zanzare in un ambiente caldo-arido desertico applicato con un dispositivo termico di nebbia. Abbiamo condotto tre applicazioni separate con un adulticida sinergizzati permetrina in grado di essere diluito in olio o acqua. Ciascuna delle applicazioni è stata condotta utilizzando un generatore di nebbia termica autocarrate con un diluente diverso: acqua, olio minerale BVA13 o diesel. Quindi, è stata utilizzata una griglia di almeno 20 gabbie di zanzara sentinella collocati su pali in un'area aperta di terra arida (Figura 6) e meteorologia è stata registrata utilizzando un registratore portatile Meteo.

Il secondo studio (dati non pubblicati 2011) ha studiato l'efficacia relativa di una formulazione di singoli antiparassitari applicata simultaneamente con due tipi di spruzzatori (ULV e nebbia termica) in un ambiente caldo equatoriale contro mosche della sabbia. Abbiamo usato due griglie adiacenti di 25 sentinella della Mosca di sabbia gabbie collocata su pali in habitat di erba-forb basso di densità variabile in un grande campo in una conca caldo equatoriale (Figura 7). Meteorologia è stata registrata utilizzando un registratore portatile Meteo posizionato tra le due griglie. Un camion ha trasportato il dispositivo ULV e un altro ha trasportato il nebbiogeno termica ed entrambi iniziati spray sulla falsariga dello spruzzo allo stesso tempo, ogni spostamento da est a sud-ovest ad una velocità del caso al tasso di applicazione etichetta specificata e dato il tasso di flusso dei spruzzatore.

In entrambi gli studi di campo, dopo un 10 min tenere tempo post-spray, abbiamo raccolto tutte le gabbie sentinel da aree di trattamento e di controllo, avviando contemporaneamente il processo di registrazione di mortalità post-nebulizzazione. Dati di mortalità percentuale era poi codificato, corretta per la mortalità del sentinella sfondo osservati per controllo e inseriti in una copertura di GIS costituito da punti di georeferenziazione corrispondenti alle posizioni delle gabbie sentinella nella griglia della zona di trattamento (Figura 6 e Figura 7). Nonostante la situazione ideale in cui uno spray antiparassitario produce un'uccisione di 100% in tutta l'area di destinazione, la soglia realistica per un'efficacia accettabile di un antiparassitario è arbitraria. Aspettative di efficacia potrebbero variare con la distanza dallo spruzzatore (ad esempio, impostare una soglia di 95% mortalità 50ft dalla linea spray, con 80% di mortalità a 250 ft).

I risultati di entrambi gli studi rappresentativi naturalmente mostrano lo spettro del positivo di esiti negativi, perché la rampa colore rappresenta aree di mortalità da 0 a 100% (Vedi Rampe di colore nella Figura 6 e Figura 7). Tutti i dati di mortalità nell'area del trattamento sono normalizzati dalla mortalità di sfondo nell'area di controllo non trattato per una soglia di mortalità 25% controllo¹⁸, sopra cui avrebbe scartato a causa di eccessivo ambientale o Colonia effetti sulla mortalità. L'utilità dell'approccio mappatura elettronica per la visualizzazione dei dati di mortalità è evidente qui: il ricercatore e (più tardi) il lettore può immediatamente capire l'efficacia relativa di antiparassitari focali e diluenti (Figura 6) o il pesticida focale Spruzzatori (Figura 7) contro le zanzare o sabbia mosche, rispettivamente. Vale la pena di confrontare i dati di mortalità sottostanti che tradizionalmente sarebbero essere presentati in forma tabulare (tabella 2) e richiedono molto più concettualizzazione interna, con adeguato potenziale aumentato per errore, da Figura 6 ricercatore e lettore allo stesso modo. La mappa elettronica, se completate con dati meteorologici e una copertura di base foto satellitare, facilita anche la rapida valutazione dei potenziali effetti dell'habitat delle applicazioni di pesticidi. Si noti che il diagramma di rosa dei venti di inserto nella Figura 7 ha un angolo di vento che si abbina perfettamente l'angolo della mortalità spaziale nella griglia ad ovest, per indicare che il camion di spruzzo dovrebbe avere iniziato più ad est affinché pesticidi avrebbe un possibilità di raggiungere tutte le gabbie di sentinella. Se i dati di mortalità sono stati considerati solo in forma tabellare, può essere facile perdere questa debolezza nel disegno sperimentale e assegnare un'efficacia complessiva inferiore a quella attrezzature per l'applicazione dei pesticidi, distorto da zero valori di mortalità da aree non contattati dalla dei pesticidi.

Nella nostra esperienza, la maggior parte delle applicazioni di pesticidi nel campo produce un gradiente di mortalità attraverso le gabbie di sentinella zona di destinazione, che automaticamente dimostra che l'applicazione era valida. Tuttavia, se zero mortalità è osservata in tutta l'area di trattamento e l'evento di spray è valido (cioè, la nube di spruzzo si muove attraverso l'area di destinazione della sentinella è osservata), si può dedurre che l'antiparassitario non è efficace con quella specie al tasso applicate, in quell'ambiente e con quella attrezzatura di applicazione. Naturalmente, questo è il dato che il batch di pesticidi non è scaduto, né è stato immagazzinato in modo inappropriato. D'altra parte, alcune applicazioni di aerea dei pesticidi in particolare non possono produrre nessuna nuvola visibile o rilevabile spray che incidono l'area di destinazione, e zero mortalità in tutta sentinelle potrebbe significare che lo spray perso l'area di destinazione. Si consiglia di anticipare questo scenario impostando una serie di gabbie supplementari sentinella che staffe nell'area di impatto di destinazione a certa distanza sopravento e sottovento (ad es., a intervalli di 50 ft per larghezza dell'andana almeno uno in ogni direzione) così che qualche indicazione di touchdown dell'antiparassitario possono essere raccolte se è mancato il bersaglio.

Figura 6: rappresentante della sentinella gabbia mortalità dati da una prova sul campo in condizioni caldo-arido del deserto targeting per le zanzare interpolati. In questa serie di spray, lo spruzzatore di termica nebbia dell'antiparassitario, pesticidi e ambiente erano tenute costante, variando tra pesticidi diluente all'olio minerale (A) acqua, diesel (B) e (C) BVA 13 attraverso le tre prove. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figura 7: rappresentante della sentinella gabbia mortalità dati da una prova sul campo in condizioni di caldo-equatoriale targeting flebotomi interpolati. In questo set di due applicazioni a spruzzo simultaneo l'antiparassitario e l'ambiente sono stati mantenuti costante, ma lo spruzzatore di antiparassitari era diverso tra le due griglie: nebbia termica (griglia ovest) e ultra basso volume (ULV, griglia est). Si noti che la direzione del vento indicata nello schema rosa dei venti perfettamente corrisponde l'angolo della mortalità spaziale nella griglia ad ovest, per indicare che il camion di spruzzo dovrebbe avere iniziato più ad est affinché pesticidi avrebbe la possibilità di raggiungere tutti i sentinel gabbie. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

	PROGETTO:
	ZONA ECOLOGICA:
	UBICAZIONE:
	SITO DI CAMPO:
	DATA DI APPLICAZIONE:
	APPARECCHIATURA DELLO SPRUZZO:
	FORMULAZIONE DELL'ANTIPARASSITARIO:
	DILUENTE:
	SPECIE DI INSETTI DELLA SENTINELLA:
	FASE DELLA VITA DI SENTINELLE:
		CONTROLLI DI MORTALITÀ
		[copiato direttamente da sentinella gabbie; dati osservati in campo]		[osservata da sentinella gabbie memorizzate in vassoi]
	Codice Cage sentinella	Lol PRE-MORTI	Lol TEMPO MORTO POST-SPRAY/HOLD	Lol MORTA 6 ore post-nebulizzazione	Lol MORTA 12 ore post-nebulizzazione	Lol MORTA 24 ore post-nebulizzazione
Area di trattamento	A1
	A2
	A3
	A4
	A5
	B1
	B2
	B3
	B4
	B5
	C1
	C2
	C3
	C4
	C5
	D1
	D2
	D3
	D4
	D5
	E1
	E2
	E3
	E4
	E5
Area di controllo	Controllo 1
	Controllo 2
	Controllo 3
	Controllo 4
	Controllo 5
	Controllo 6
	Controllo 7
	Controllo 8
	Controllo 9
	Controllo 10

Tabella 1: modulo di dati di mortalità di esempio. Il modulo dispone di spazi per informazioni di carattere generale circa la prova sul campo in alto a sinistra, che è fondamentale per gestire i dati da più progetti sul campo. La sezione principale del modulo dispone di spazi per la mortalità pre- e post-nebulizzazione (entrambi copiati direttamente dalle gabbie della sentinella), attraverso i successivi controlli di 6h, 12h e 24h. Dati scritti a mano su questo modulo sono inseriti in un foglio di calcolo elettronico simile, con colonne aggiunte per correggere i dati di mortalità per pre-spray morti e correggere spray zona mortalità per qualsiasi mortalità indotta da condizioni ambientali nell'area di controllo.

	PERCENTUALE MORTALITÀ (ABBOTT-RETTIFICATO)
Codice Cage sentinella	(A) Aqualuer + acqua	(B) Aqualuer + Diesel	(C) Aqualuer + BVA13
A1	1	0.78	0.54
A2	1	1	0.05
A3	1	0,29	0
A4	1	0,04	0,03
A5	1	0,04	0
B1	1	0.79	0
B2	1	0,82	0
B3	1	0.15	0
B4	1	0.21	0.15
B5	1	0	0
C1	1	0.93	0
C2	1	0,71	0,01
C3	1	0,32	0
C4	1	0,26	0
C5	1	0.46	0
D1	1	0,67	0
D2	0.78	0,24	0,01
D3	0,97	0,5	0
D4	1	0,27	0,03
D5	1	0,33	0
E1	1	0,82	-
E2	1	0.88	-
E3	1	1	-
E4	1	0.79	-
E5	1	0.78	-

Tabella 2: alla base di dati di mortalità utilizzati per creare la mappa di efficacia interpolati in Figura 6 . Dovrebbe essere notato che alcune informazioni spaziali possono essere catturati in questa tabella; per esempio, questo può essere fatto separando righe e colonne di distanza dai spruzzatore e distanza lungo linea spray, rispettivamente. Tuttavia, cambiamenti temporali nella mortalità corrispondente immediato post-nebulizzazione, post-nebulizzazione 4 h e 12 h post-spray, ad esempio, richiederebbe una tabella più complessa o tabelle aggiuntive. Analogamente, tabelle separate per ogni diluente utilizzato nelle prove sono necessarie per chiarezza se le tabelle vengono partizionate da spazio e tempo.

Discussione

Combinando l'approccio di gabbia di sentinella classico con mappatura elettronica della mortalità interpolati dati sono un metodo unico e potente per valutare pesticidi nel campo, e supporta gli studi di efficacia comparativa dei pesticidi in diversi ambienti e diverse configurazioni di pesticidi e tecniche di applicazione. Anche se il metodo di gabbia base sentinella non è nuovo, la visualizzazione dei modelli di mortalità gabbia sentinella in un GIS è un avanzamento favorevole per un'analisi più approfondita dei modelli di flusso di bombolette spray antiparassitario. L'interpolazione di misure puntuali di efficacia dei pesticidi in una copertura cartografica con codifica a colori è simile all'aggiunta di fumo effusioni di una galleria del vento per visualizzare il flusso di aria intorno un'automobile, ed è un miglioramento importante per la segnalazione di mortalità spaziale e temporale dati in una serie di tabelle.

Alcune parti dell'antiparassitario spray può essere visto ad occhio nudo e antiparassitari goccioline da invisibile porzioni di spray possono essere catturate sulle lastre di vetro o di altri media che, come sentinella gabbie, sono protocolli di lunga tradizione. Evaporativi prodotti da gocce e goccioline se stessi possono essere catturati con nastri di cotone e analizzati con uno spettrometro di massa/gas cromatografo, che fornisce anche ulteriori informazioni circa il destino di uno spray antiparassitario. Tuttavia, l'efficacia realizzato dello spray e modelli spaziali di mortalità indotta da pesticidi effettiva nella zona dell'obiettivo (che può includere sia gocciolina e componenti del prodotto per evaporazione) possono essere definitivamente misurati solo dagli insetti di sentinella.

Inoltre, la componente temporale di efficacia può essere definitivamente misurata solo da una serie di osservazioni di mortalità negli insetti di sentinella che catturano quantificati indici di rapido colpo contro a lungo termine morbilità e mortalità sul bersaglio specie. Ancora una volta, una serie di mappe con codifica a colori interpolate può essere utilizzata per visualizzare chiaramente l'evoluzione della mortalità post-nebulizzazione nel corso del tempo, con una componente spaziale esplicita, in modo che una serie di tabelle non è in grado di comunicare a un lettore. La serie di mappe possono essere animata in un ciclo per riprodurre lo stato di avanzamento dello spray e i suoi effetti sugli insetti di sentinella, migliorando ulteriormente la comprensione dell'efficacia non solo per una singola prova, ma nei confronti tra pesticidi, tecniche, applicazione attrezzature, insetti bersaglio e zone ecologiche.

Per i dati di mortalità qualità più alta in questo metodo, si deve prestare molta attenzione durante la manipolazione di inizio-fine e le osservazioni degli insetti della sentinella. Tempo di esposizione e le condizioni degli insetti di sentinella all'ambiente attraverso il trattamento e il controllo di aree prima lo spray antiparassitario dovrebbero essere come uguali, come pratico. Questa esposizione dovrebbe includere un periodo di acclimatazione per le condizioni ambientali e un'uniforme tenere tempo post-spray per trattamento e controllo insetti. Osservazioni di mortalità prima lo spray, dopo il tempo di attesa (cioè, durante il recupero delle gabbie) e per i periodi di area post-nebulizzazione deve essere rilevate con cura il form dati. Dovrebbe anche prestare attenzione a recuperare tutte le sentinelle dal campo prima della partenza per il laboratorio. Controllo e trattamento della sentinella gabbie devono essere fisicamente separate in tutto il protocollo. Osservazioni affidabile di sfondo basale mortalità per le gabbie di controllo designato a tutti i periodi di tempo sono fondamentali per la correzione appropriata di mortalità osservati nella zona di trattamento. Accurati, precisi, comparabili e significativa efficacia mappe possono essere acquisite solo da input di dati di mortalità di alta qualità per il sistema di informazione geografica.

Il metodo dell'insetto della sentinella è naturalmente flessibile per essere rilevante in una varietà di scenari - ovunque può essere posizionato una piccola gabbia, mortalità, i dati possono essere raccolti. Ad esempio, abbiamo condotto studi di pesticidi con gabbie di sentinella collocate nei pressi di edifici urbani e rurali simulato¹⁰ e tende militari US (dati non pubblicati 2017-2018), oltre a molteplici scenari del deserto, temperata e tropicale vegetazione^19,20,21,22 [tra cui gabbie di sollevamento fino a 60 ft nel baldacchino di pino per misurare la mortalità verticale che segue una grande applicazione aerea (dati non pubblicati 2011-2017)]. Se il terreno è troppo duro per posizionare pali gabbia sentinella o è preferibile metterli sui basamenti di cemento o asfalto aree, semplice o blocchi in calcestruzzo possono essere costruite per i pali di sostegno. Per scenari di indagare larvicidi liquidi spruzzati, il protocollo può essere modificato per posizionare le tazze di vuoto in plastica usa e getta 1 qt per catturare larvicidi in sedi di sentinella. Queste tazze possono essere successivamente riempite con acqua e zanzara larve per misurare l'efficacia dell'applicazione^7,23,24,25. Utilizzare piastrelle con la parte adesiva fino a tazze di tenere in luogo nel vento e mantenere coperchi nelle vicinanze rapidamente Cap e raccogliere segue lo post-spray tempo di attesa. In alternativa, tazze possono essere lasciati in sede per Meteo naturalmente o lasciate aperte in un ambiente controllato per indagare la longevità di un trattamento residuo larvicidi.

Per studiare la densità di goccia e goccia spettri in tutta l'area di applicazione, filatori diapositiva possono essere posizionati vicino sentinella insetto posizioni - però prestare attenzione che il vortice dalle diapositive filatura non influisce sul flusso dello spray antiparassitario per la Sentinel insetti. Simile alla mortalità di mappatura, colonne aggiuntive della tabella degli attributi per la sentinella posizioni possono essere aggiunti per goccia e tingono i parametri per derivare i riempimenti interpolati. Si noti che aggiungendo aspetti collezione goccia richiederà un aumento del numero di personale nel campo, con team dedicati ad esempio accuratamente raccogliere le diapositive e aiutare l'operatore a spruzzo con additivi di tintura. Con materiali aggiuntivi e squadre di personale, questi metodi possono essere Uniti per condurre prove simultanee utilizzando sentinelle larvale e adulti, molteplici modalità di applicazione (antenna, terra, portatile), o side-by-side di pesticidi (Vedi risultati rappresentativi).

Sebbene il protocollo principale è stato scritto per le zanzare, abbiamo condotto con successo prove sul campo con mosche della sabbia e sporcizia-allevamento mosche come sentinelle con solo lievi modifiche alla sentinella gabbie e protocollo generale. Ad esempio, non è pratico di sesso adulti flebotomi o allevamento di sporcizia mosche affinché lotti misti sono utilizzati in gabbie di sentinella, come questo ridurrà il carico sulla Colonia perché meno esemplari sono necessari rispetto a quando si lavora con le zanzare. Per le mosche della sabbia, una maglia molto fine deve essere utilizzata per le gabbie di sentinella; Inoltre, flebotomi non sono anestetizzati ma invece aggiunto con aspiratori direttamente in gabbie completamente assemblate attraverso una fessura di gomma incollati sopra un foro nel lato del cilindro.

Figura 8: scenari aggiuntivi che dimostra la flessibilità del sistema sentinel. Il protocollo di sentinella per indagare l'efficacia dei pesticidi nel campo è molto flessibile, come mostrato in gabbie di sentinella issate a intervalli fino a 60 ft attraverso pino baldacchino (A) e una zona aperta nelle vicinanze (B) per indagare la capacità di irrorazione di pesticidi ULV aerea di penetrare baldacchino. Del sistema sentinel può essere facilmente regolato per esaminare larvicidi spray stadi immaturi zanzara usando i bicchieri di plastica usa e gettare per catturare goccioline (C) all'interno di targeting e (D) all'aperto in zona urbana simulata. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Il metodo di mappatura di efficacia è naturalmente flessibile perché si basa sull'interpolazione che è un processo standard nella maggior parte dei programmi di GIS²⁶. Generalmente, l'interpolazione utilizza dati noti in punti fissi per stimare i dati alle vicinanze non campionate. Esistono diversi tipi di interpolazione tecniche²⁷ che può essere selezionato basato sulla diffusione spaziale e la densità dei dati della mortalità. Abbiamo usato ponderazione inverso della distanza (IDW), che assegna maggiore peso statistico di dati conosciuti da punti più vicini ai punti sconosciuti essere stimati. Risoluzione dei problemi per la porzione di campo del metodo è centrato sulla mortalità (cioè, se la mortalità è > 25% nei controlli, e non c'è certezza che l'applicazione non ha impatto l'area di controllo, qualcosa nell'ambiente diverso da quello di controllo della sentinella il pesticida è causa di mortalità, che sarà confondere analisi; quindi, il processo dovrà essere ripetuto o spostati in un'altra posizione). Le vulnerabilità più comuni nella parte di mappatura del metodo sono produzione di tabelle di dati di qualità in GIS, quindi è fondamentale per attentamente incollare dati in modo che i dati giusti siano allineati con i punti a destra (frame di lettura) ed etichettare correttamente colonne per ciascuna mortalità del tempo periodo, antiparassitari, attrezzature per l'applicazione, ecc.

Il metodo dell'insetto di sentinella non è progettato per essere una misura assoluta di efficacia. Piuttosto, il metodo fornisce la possibilità di confrontare l'efficacia relativa di un antiparassitario (sotto un determinato ambiente, attrezzature per l'applicazione, diluente, insetti bersaglio e tecnica) per il pesticida stesso in condizioni diverse, o per confrontare diversi pesticidi alle stesse condizioni. Il metodo non include gocciolina di pesticidi o di acquisizione di principio attivo, se apparecchi per lo studio di questi aspetti possono essere facilmente collocati nella griglia adiacenti a sentinel gabbie. Il metodo di gabbia di sentinella non misura l'efficacia di Spray antiparassitario contro insetti vettori in volo, che è possibile ma non pratico²⁸. Una vivace polemica esiste se il tipo di mesh sentinella gabbie effetti misurazioni dell'antiparassitario spray efficacia^14,29,30,31. Tuttavia, questo non è estremamente rilevante per il nostro obiettivo di indagare l'efficacia relativa di una formulazione attraverso ambienti o formulazioni diverse all'interno di un ambiente (che possono essere condotti utilizzando una gabbia standard con un tipo di rete standard).

Ad esempio, un recente studio ha confrontato mortalità di gabbia in sentinella risultati attraverso tre simili esperimenti di applicazione di pesticidi aerea separati da decenni, ciascuno utilizzando metodi di gabbia di sentinella diversi, tutti con risultati comparabili¹⁰. Allo stesso modo, la polemica esiste sopra se trasferire sentinella insetti alle gabbie "pulite" (cioè, gabbie che non sono state spruzzate). Ancora una volta, i dati di mortalità dell'insetto sentinella dovrebbero essere considerati relativa e non assoluta e non si occupano di ulteriori mortalità derivante da sentinella insetti contattando pesticidi aderendo alla gabbia o rete. Infatti, in ambienti naturali, Spray antiparassitario aderirà anche alle superfici naturali che possono contattare insetti bersaglio. Precedentemente abbiamo trovato che la mortalità indotta dalla manipolazione zanzare, includere CO₂- o basati sul freddo anestetizzazione, può superare mortalità dal contatto con un pesticida che avrebbe potuto essere presente sulle gabbie (dati non pubblicati 2008). Un'altra limitazione è che la pertinenza e l'applicabilità di sentinel risultati di mortalità gabbia nelle popolazioni naturali locali dell'insetto bersaglio ancora non completamente essere conosciuto; Tuttavia, gli insetti di sentinella più vicino genealogicamente la Colonia-allevati sono per le specie locali, il più forte che è l'applicabilità delle mappe efficacia alle popolazioni locali.

In futuro varianti di questo metodo, sarebbe utile includere modifiche per ospitare applicazioni di pesticidi con sistemi aerei senza pilota (UAS). Gli sviluppi attuali con UAS uso nel controllo vettoriale operativa riguardano applicazioni di pesticidi (in particolare, formulazioni di larvicidi mirate a habitat di zanzara immaturi) sopra e attraverso luoghi altamente inaccessibili. Per ottenere informazioni pertinenti dalle prove di sentinella, sentinella stazioni insetto avrebbero bisogno di essere collocato in luoghi inaccessibili nella massima misura possibile. Un esempio di informazioni pertinenti sta testando la capacità di UAS efficacemente raggiungendo una certa area con larvicidi, con il pilotaggio di line-of-sight solo da un operatore che non è possibile osservare direttamente l'area di destinazione. Questo scenario può richiedere lo sviluppo di altri UAS per distribuire e recuperare sentinel gabbie o larvicidi collezione tazze e altri alla meteorologia record in queste zone inaccessibili. Dati di mortalità da tale scenario possono essere analizzati in GIS come scenari di stabilita, con aggiunto cartografici quali effetti di ostacoli naturali, microhabitat e micrometeorologia che può differire da tali effetti durante le applicazioni più standard con camion, aereo o spruzzatori portatili. Funzionalità avanzate di GIS ad esempio visualizzazione di interpolazioni 3-dimensionale della mortalità dal posizionamento di sentinella avanzata nelle griglie verticali e orizzontali sono anche possibilità per standard e applicazione di tecnologie emergenti.

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bioassay racks:
plastic tube lid	Visipak	192224
1.25-in PVC coupler SCH-40	Lowes	PVC 00100 0800
1/4-in OD brass rod	K&S Engineering	1165
Name	Company	Catalog Number	Comments
Bioassays:
FDA silicone o-rings S-500-70	Alltek seal and packing	PA-2127-12
fine screening	Walmart	40310-0000-063 white	T-310
cotton balls	Fisher Brand		Large cotton balls (non-sterile)
plastic tubes	Visipak	775674
regulator	Norgren	R83-200-RNEA
reguilator gauge	Wika Instrument Corp	4315031
CO2 canister			20 lb capacity
CO2 chamber	Mainstays		Modified tupperware container (16 cup)
1/4-in tygon tubing
maglite aspirator and tubes	Bioquip	2809D	D-cell maglite aspirator
modified PVC pipe for o-rings	Lowes	PVC 07112 0600	SCH-40 pipe modified by cutting tool on inner surface to accommodate bioassay tube
Pupal separator	John W. Hock Co.	5412
Name	Company	Catalog Number	Comments
Field sentinel cages:
1/2 pt cardboard can body	Neptune	295
1/2 pt cardboard cup lid	Neptune	295A
coarse screening	Walmart	41721-0540-063 white	T-1721
Velcro cable ties 8-in x 1/2-in	Velcro Brand	VEL91140
rubber band	National Institutes for the Blind	7510-01-058-9974
cotton balls	Fisher Brand		Large cotton balls (non-sterile)
PVC spacers	Lowes	PVC 04010 0600	Modified by cutting into 18-in length pieces and cutting half off of the end (lengthwise)
Tray totes	Blue Ridge Thermalforming	400-3N-WHT-ABS
Name	Company	Catalog Number	Comments
Field bioassay set-up equipment:
60-in tread-in post	Jeffers.com	T8T4
1 ft3 cardboard boxes	USP	S-18344
Deli cups	WNA Inc.	APCOMBO16
18-in x 18-in linolium tiles	Lowes	LSS4307BPS
Name	Company	Catalog Number	Comments
Sentinel cage transport:
48 qt Island Breeze cooler	Igloo
16-in x 19-in. terry towels	Ability One	7920-01-454-1150
garbage bags			13 gal (kitchen size)