Una tecnica modificata per indurre la sindrome dell'ovaio policistico nei topi

Riepilogo

Questo protocollo introduce una tecnica per indurre modelli di sindrome dell'ovaio policistico (PCOS) nei topi attraverso il rilascio controllato di letrozolo utilizzando mini-pompe. In anestesia adeguata, la mini-pompa è stata impiantata per via sottocutanea e la PCOS è stata indotta con successo nei topi dopo un certo periodo di rilascio della mini-pompa.

Abstract

La sindrome dell'ovaio policistico (PCOS) è una delle principali cause di infertilità nelle donne. I modelli animali sono ampiamente utilizzati per studiare i meccanismi eziologici della PCOS e per lo sviluppo di farmaci correlati. I modelli murini indotti dal letrozolo replicano i fenotipi metabolici e riproduttivi dei pazienti con PCOS. Il metodo tradizionale di trattamento con letrozolo nei topi PCOS richiede un dosaggio giornaliero per un certo periodo, che può essere laborioso e causare uno stress significativo ai topi. Questo studio descrive un metodo semplice ed efficace per indurre la PCOS nei topi impiantando una mini-pompa controllata a rilascio di letrozolo. Una mini-pompa in grado di rilasciare in modo stabile e continuo una quantità quantitativa di letrozolo è stata fabbricata e impiantata per via sottocutanea in topi sotto anestesia. Questo studio ha dimostrato che il modello murino ha imitato con successo le caratteristiche della PCOS dopo l'impianto della mini-pompa di letrozolo. I materiali e le attrezzature utilizzate in questo studio sono prontamente disponibili per la maggior parte dei laboratori e non richiedono particolari personalizzazioni. Nel complesso, questo articolo fornisce un metodo unico e facile da eseguire per indurre la PCOS nei topi.

Introduzione

La sindrome dell'ovaio policistico (PCOS) è una delle condizioni più comuni tra le donne in età riproduttiva¹. Colpisce fino al 18% delle donne a livello globale ed è la principale causa di infertilità femminile in tutto il mondo ^2,3. La PCOS è caratterizzata da una serie di anomalie riproduttive correlate, tra cui la secrezione disturbata di gonadotropine, l'anovulazione cronica, l'aumento della produzione di androgeni e la morfologia dell'ovaio policistico⁴. Oltre ai disturbi ginecologici, la PCOS aumenta anche il rischio di ma....

Protocollo

Tutti i protocolli sperimentali sugli animali in questo studio sono stati approvati dal Comitato Etico Animale dell'Università di Fudan. Qui sono stati utilizzati topi femmina C57BL/6J, di 4 settimane. I dettagli degli animali, dei reagenti e delle attrezzature utilizzate in questo studio sono elencati nella Tabella dei materiali.

1. Preparazione della mini-pompa

1. Prendere la polvere di letrozolo (50 mg) conservata nel flacone originale, centrifugare la polvere di letrozolo nel flacone a 300 x g per 5 s (a temperatura ambiente), quindi aprire il tappo.

Discussione

Questo rapporto dimostra un semplice protocollo per indurre la PCOS nei topi utilizzando materiali facilmente accessibili. Il modello di PCOS murino è essenziale per esplorare i meccanismi della PCOS e lo screening dei farmaci²⁶. Tra i metodi disponibili per indurre i modelli di PCOS nei topi, l'induzione del letrozolo è uno dei più comunemente usati. L'uso del letrozolo può sviluppare e mantenere una condizione iperandrogena inibendo la conversione del testos.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Syringe	Bofeng Biotech	BD300841	1ML (sterile)
Centrifugation tube	Biological Hope	1850-K	15ML (sterile)
Pipette	Eppendorf	3123000268-A	100μL-1000μL (sterile)
Pipette	TopPette	7010101008	10μL-100μL (sterile)
Letrozole powder	Sigma	L6545-50MG	Primary acting drugs (sterile)
PEG(Poly(ethylene glycol))	Solarbio	P8250	Used for dissolution (sterile)
Sterile Physiological Saline Solution	Biosharp	BL158A	Mini-pump storage
Osmotic Pumps	ALZET	1004	Letrozole storage and sustained release (sterile)
Dimethyl sulfoxide	Biosharp	BS087	Used for dissolution (sterile)
Small Animal Anesthesia Machine	RWD	R500IP	Used for anesthesia
Isoflurane	RWD	20071302	Used for anesthesia
Hemostats	Biosharp	BS-HF-S-125	Surgical instrument
Scissors	Biosharp	BS-SOR-S-100P	Surgical instrument
Needle holder	ShangHaiJZ	J32010	Surgical instrument
Forceps	RWD	F12028	Surgical instrument
Needle and the 4-0 absorbable suture	JINGHUAN	CR413	Surgical instrument
Povidone-iodine swabs	SingleLady	GB26368-2010	Skin disinfection
Depilatory cream	ZIKER BIOTECHNOLOGY	ZK-L2701	Depilation agent for laboratory animals
Nitrile Gloves	Biosharp	BC040-L	Used for aseptic operation
Sterile gauze	ZHENDE	BA69087	Used for wiping liquids
C57BL/6J Mice	Shanghai Model Organisms Center	N/A	Age: 4 weeks
Pet Eye Lubricant	BAITE	SHF021153	Used for mouse eye lubricant
Meloxicam Injection	MEIDAJIA	R21064-21	Used for mouse analgesia (sterile)