Separazione elettroforetica delle proteine

Riepilogo

In questo video, si dimostra un metodo per la separazione elettroforetica di proteine ​​mediante poli-acrylimide elettroforesi su gel (PAG).

Abstract

Elettroforesi viene utilizzata per separare miscele complesse di proteine ​​(per esempio, dalle cellule, frazioni subcellulari, frazioni colonna o immunoprecipitati), per indagare composizioni subunità, e per verificare l'omogeneità dei campioni di proteine. Può anche servire a purificare le proteine ​​per l'uso in altre applicazioni. Elettroforesi in gel di poliacrilamide, proteine ​​migrano in risposta ad un campo elettrico attraverso i pori in una matrice di gel di poliacrilammide; dimensione dei pori diminuisce con l'aumentare la concentrazione di acrilamide. La combinazione di dimensione dei pori e la carica di proteine, le dimensioni e la forma determina il tasso di migrazione della proteina. In questa unità, il metodo standard Laemmli è descritto per elettroforesi su gel discontinuo in condizioni di denaturazione, cioè, in presenza di sodio dodecil solfato (SDS).

Protocollo

Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in protocolli di corrente in Biologia Molecolare .

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.